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Determination of scandoside methyl ester in Hedyotis chrysotricha by HPLC

黄毛耳草药材质量标准研究



全 文 :黄毛耳草药材质量标准研究
李晶1,周国平2,李才堂1,文萍1,应萍3,虞金宝1,巫火娣1
(1.江西省中医药研究院,江西 南昌 330077;
2.江西省食品药品检验所,江西 南昌 330046;3.江西省人民医院 药剂科,江西 南昌330006)
[摘要] 目的:建立黄毛耳草药材的质量标准。方法:以乙腈水(7∶93)为流动相,测定波长为238nm,采用 HPLC测定
黄毛耳草药材中鸡矢藤苷甲酯的含量。结果:鸡矢藤苷甲酯在2208~552mg·L-1与峰面积呈良好线性关系,加样回收率为
997%(n=6),RSD072%。结论:方法简便、快速,可作为黄毛耳草药材的质量标准。
[关键词] 黄毛耳草;鸡矢藤苷甲酯;HPLC
[收稿日期] 20090426
[基金项目] 国家科技支撑计划项目(2006BAI06A0101);江西省
中医药科研计划(2008A094)
[通信作者] 虞金宝,Tel/Fax:(0791)8501404,Email:yjb2217@
163.com
  黄毛耳草来源于茜草科植物金毛耳草 Hedyotis
chrysotricha的干燥全草。具有清热除湿、解毒消肿、
活血舒筋之功效,用于湿热黄疸、水肿、乳糜尿、痢
疾、腹泻,跌打损伤,无名肿毒,乳腺炎;为江西特色
中成药品种肠炎宁片的主要组成之一。该药材收载
于《江西省中药材标准》(1996年版),该药材标准
中仅有一个显微鉴别和一个理化鉴别,质量标准非
常落后。现有文献中除一篇有关黄毛耳草中槲皮素
含量研究报道[1]外,未见有关黄毛耳草药材质量标
准的研究报道。作者在进行肠炎宁片的质量控制技
术研究时,对黄毛耳草药材的标准也进行了研究,并
建立了其质量标准。
1 仪器与试药
HP1100高效液相色谱仪(美国:包括1322A在
线脱气机、G1311A四元梯度泵、G1315B二极管阵
列检测器、HP化学工作站),SPUⅠ自动喷雾显色
器(日本);SimplicityTM个人型超纯水系统(Mili
pore公司),CQ250超声波清洗仪(上海船舶电子设
备研究所),AG135电子分析天平(梅特勒托利多
公司)。
鸡矢藤苷甲酯对照品(自制,经HPLC归一化法
测定,纯度达986%),乙腈(色谱纯),其他试剂均
为分析纯。
黄毛耳草分别采于江西、福建、浙江和广西等不
同产地,经江西省食品药品检验所周国平主任药师
鉴定均为茜草科植物金毛耳草 H.chrysotricha的干
燥全草。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 AgilentHCC18色谱柱(46mm×
250mm,5μm),流动相乙腈水(7∶93),流速1mL
·min-1;经光谱扫描结果显示,鸡矢藤苷甲酯在
238nm处有最大吸收,故检测波长定为238nm,柱
温为室温。在此条件下,对照品、供试品在约9min
的相同时间有一色谱峰,理论塔板数在3000以上,
鸡矢藤苷甲酯的分离度达5以上,见图1。
A.鸡矢藤苷甲酯对照品;B.黄毛耳草样品;1.鸡矢藤苷甲酯。
图1 对照品及黄毛耳草样品HPLC图
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2.2 线性关系的考察 精密称取鸡矢藤苷甲酯对
照品138mg,置25mL量瓶中,用甲醇溶解并稀
释至刻度,摇匀,即得(每 1mL含鸡矢藤苷甲酯
0552mg)。精密吸取适量,加甲醇稀释成00221,
00442,01104,02208,03312,04416,0552g
·L-1的溶液。分别吸取 10μL,注入液相色谱仪
中,按上述色谱条件测定对照品峰面积,以进样浓度
与峰面积进行回归处理,回归方程 A=760346C-
3588,r=09997,鸡 矢 藤 苷 甲 酯 对 照 品 在
2208~552μg进样量与峰面积呈良好的线性关
系。
2.3 精密度试验 精密吸取对照品溶液20μL连
续进样6次,测定鸡矢藤苷甲酯的峰面积值,计算
RSD18%。
2.4 稳定性试验 按上述测定条件,分别于 0,
10,20,40,80,100h精密吸取供试品溶液20
μL注入高效液相色谱仪,测定鸡矢藤苷甲酯的峰面
积值,计算RSD16%。
2.5 重复性试验 取黄毛耳草药材粗粉6份,每份
约03g,分别精密称定,置 50mL量瓶中,加入
50%甲醇至近刻度,超声处理30min,放冷,以50%
甲醇补足至刻度,摇匀,滤过,取续滤液2mL高速离
心(15000r·min-1)10min,取上清液作为供试品
溶液。按上述色谱条件测定,计算平均含量为
092%,RSD22%。
2.6 加样回收率试验 取已知含量的黄毛耳草药
材粗粉 6份,每份约 015g,分别精密称定,置 50
mL量瓶中,精密加入以50%甲醇制成的鸡矢藤苷
甲酯溶液(06798g·L-1)2mL,加50%甲醇至近
刻度,超声处理30min,放冷,以50%甲醇补足至刻
度,摇匀,滤过,取续滤液2mL高速离心(15000r·
min-1)10min,取上清液作为供试品溶液。按上述
色谱条件测定并计算回收率,结果见表1。计算平
均回收率1017%,RSD23%。
表1 鸡矢藤苷甲酯回收率
药材中量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
RSD
/%
13397 26721 9800    
13469 27301 10174    
13415 27110 10073
1017 2313487 27897 10424    
13424 27212 10141    
13469 27628 10414    
  注:加入量13596mg。
2.7 样品测定 取不同产地的黄毛耳草药材粗粉
约03g,精密称定,按上述供试品溶液制备方法分
别制备各供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液、供
试品溶液各20μL,注入液相色谱仪,测定,计算,即
得。结果见表2。
表2 不同产地药材中鸡矢藤苷甲酯的质量分数(n=3)
产地 质量分数/% RSD/%
江西昌北 049 103
江西弋阳 092 122
江西产Ⅱ 066 076
福建产  142 070
浙江瞿州 014 714
广西蒙山 064 079
3 讨论
  黄毛耳草系民间中草药,收载于江西省中药
材标准(1996年版),主用于治疗湿热黄疸、水肿、
痢疾、腹泻等;黄毛耳草主含环烯醚萜类、黄酮类
及内酯类成分等[2],现有文献资料中未见有关黄
毛耳草的薄层鉴别研究。本实验中还分别对黄毛
耳草的化学成分及其中环烯醚萜、黄酮及内酯三
类成分的薄层色谱进行了研究,结果显示,环烯醚
萜类在黄毛耳草中含量较高,且鸡矢藤苷甲酯为
其主要成分之一。现有文献中除见黄毛耳草中黄
酮成分[1]和熊果酸[3]的含量测定报道外,未见有
关鸡矢藤苷甲酯的测定报道。根据鸡矢藤苷甲酯
属环烯醚萜类成分的特点,参照《中国药典》中有
关栀子苷的测定方法[4],分别对提取方法(回流提
取、索氏提取和超声提取)、提取溶剂(水、甲醇、
50%甲醇和 70%乙醇)、提取时间(15,30,45和
60min)、溶剂用量(25,50,75,100mL)进行了比
较研究,结果以50mL50%甲醇超声处理 30min
为优。
本实验含量测定结果及实验中进行的薄层色谱
研究结果显示,不同产地黄毛耳草药材中环烯醚萜
类、黄酮类及内酯类成分的含量相差较大。黄酮类
及内酯成分以江西产为高,环烯醚萜类成分以福建
产最高,该三类成分均以浙江瞿州最低,且鸡矢藤苷
甲酯的含量福建产是浙江瞿州产的10倍,这可能与
不同产地的生态环境如气候、土壤等条件有密切关
系。但是,这几类成分是否为黄毛耳草的主要药效
成分或这些成分含量的高低与黄毛耳草的药理作用
相关性,还有待于进一步研究。
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[参考文献]
[1] 李萍.高效液相色谱法测定黄毛耳草中槲皮素的含量[J].广
东药学院学报,2006,22(1):57.
[2] 袁青梅,赵静峰,李良.耳草属植物化学成分[J].国外医学·
植物药分册,2001,16(4):148.
[3] 邹盛勤,陈武,李开泉,等.30种省产天然植物中乌索酸含量的
HPLC测定[J].江西农业大学学报,2005,27(1):22.
[4] 中国药典.一部[S].2005:173.
DeterminationofscandosidemethylesterinHedyotischrysotrichabyHPLC
LIJing1,ZHOUGuoping2,LICaitang1,WENPing1,YINGPing3,YUJinbao1,WUHuodi
(1.JiangxiProvincialInstitutionofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330077,China;
2.JiangxiInstituteforFoodandDrugControl,Nanchang330046,China;
3.People'sHospitalofJiangxiProvince,Nanchang330006,China)
[Abstract] Objective:TodevelopanHPLCmethodfordeterminationofscandosidemethylesterinHedyotischrysotricha.
Method:ThedeterminationwascariedoutonanHCC18columnelntedwithacetonitrilewater(7∶93)asmobilephase,andthede
tectionwavelengthwassetat238nm.Result:Thereisagoodlinearityintherange2208552mg·L-1ofscandosidemethylester
andtheaveragerecoveryis977% (n=6),RSD072%.Conclusion:Thismethodisconvenient,quick,andisapplicabletothe
qualitycontrolofH.chrysotricha.
[Keywords] Hedyotischrysotricha;scandosidemethylester;TLC;HPLC
[责任编辑 王亚君]
《中国中药杂志》被国内外数据库收录情况和引证数据
1 国外数据库收录
美国SciFinder数据库:进入医学索引MEDLINE;进入《化学文摘》(CA);荷兰 Elsevier公司 Scopus数据
库;《国际药学文摘》(IPA);《毒物学文摘》(ToxFile);俄罗斯《文摘杂志》(AJ);波兰《哥白尼索引》(IC);
WHO西太平洋地区医学索引(WPRIM)。
2 国内数据库收录
“中国科学引文数据库”来源期刊;“中国学术期刊综合评价数据库”来源期刊;中国自然科学核心期刊;
中国中文核心期刊;中国科技核心期刊;《中国学术期刊文摘》中、英文版。
3 主要引证数据或数据库统计结果
《中国中药杂志》在中国知网(CNKI)的2008年下载量为31万,国内外用户达到2000余家。
据中国科学技术信息研究所分析研究中心发布的中国科技期刊核心版引证报告(2007):影响因子为
0.693,总被引频次3937,基金论文比0.53,被引半衰期5.68;扩展版:影响因子1.052;引文频次6853。
据中国学术期刊综合引证报告(2008版):影响因子为1.056,总被引频次6828,5年影响因子1.304。
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