全 文 ：表儿茶素对牛磺酸脱氧胆酸诱导
Ｈｕｈ７细胞凋亡的作用
余　晶１，ＶｌａｄｉｍｉｒＫｈａｏｕｓｔｏｖ２，徐玉敏２，ＢｏｒｉｓＹｏｆｅ２
（１．广西中医学院 第一附属医院 肝病内科，广西 南宁 ５３００２３；
２．贝勒医学院 医学系 迈克尔德贝基退伍军人医疗中心，美国德克萨斯州 休斯敦，７７０３０）
［摘要］　目的：探索表儿茶素对牛磺酸脱氧胆酸诱导Ｈｕｈ７细胞凋亡的抑制作用及其作用机制。方法：对牛磺酸脱氧胆
酸（ＴＤＣＡ）４００μｍｏｌ·Ｌ－１和表儿茶素干预培养４８ｈ的 Ｈｕｈ７细胞，应用 ＭＴＴ法检测细胞活力，荧光探针测定细胞内活性氧
（ＲＯＳ）生成量，荧光ｃａｓｐａｓｅ３／７分析法探测细胞凋亡，免疫蛋白印迹测定促凋亡蛋白Ｂａｘ，细胞色素Ｃ和磷酸化ｐ３８蛋白激酶
含量。结果：ＴＤＣＡ孵育可诱导Ｈｕｈ７细胞凋亡，存活率下降（５４２４±２２０）％，细胞经表儿茶素与 ＴＤＣＡ共孵育后，细胞存活
率提高到（８５６４±０８４）％；表儿茶素能显著抑制ＴＤＣＡ引起的 Ｈｕｈ７细胞 ＲＯＳ生成，ｃａｓｐａｓｅ３／７蛋白酶活性升高。ＲＯＳ生
成下降５４２％，ｃａｓｐａｓｅ３／７活性下降５２３％（Ｐ＜００１）。表儿茶素抑制 ＴＤＣＡ诱导 Ｈｕｈ７细胞凋亡随剂量增加抑制作用加
强。表儿茶素抑制ＴＤＣＡ诱导促凋亡蛋白Ｂａｘ表达，细胞色素Ｃ释放及ｐ３８蛋白激酶磷酸化。结论：表儿茶素抑制 ＴＤＣＡ诱
导Ｈｕｈ７细胞线粒体损伤而导致的细胞凋亡。其作用机制是通过减少细胞内活性氧和促凋亡蛋白 Ｂａｘ生成，抑制细胞色素 Ｃ
释放及ｐ３８蛋白激酶磷酸化。
［关键词］　表儿茶素；牛磺酸脱氧胆酸；活性氧；凋亡
［收稿日期］　２００８０８０９
［基金项目］　广西教育厅广西财政资助出国留学项目［桂教国交
（２００５）８６］
［通信作者］　余晶，Ｔｅｌ：（０７７１）５８４８５０３，Ｅｍａｉｌ：ｊｉｎｇｙ１２３７＠１２６．
ｃｏｍ
　　胆汁淤积引起肝细胞坏死是多种肝胆疾病引起
患者肝损伤的主要原因。疏水性胆汁酸具有去垢性
可引起肝细胞坏死，然而近来报道在胆汁淤积性肝
病中存在明显的肝细胞凋亡现象［１２］。牛磺酸脱氧
胆酸（ｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ，ＴＤＣＡ）是一种生理性疏
水性胆汁酸，胆汁淤积时其在肝内浓度显著增高。
表儿茶素（ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ）广泛存在于植物如绿
茶、可可、葡萄及多种中药如大黄、鸡血藤、钩藤等
中。流行病学调查表明，食物中的黄酮类包括表儿
茶素可减少慢性疾病包括癌症的发生［３］。表儿茶
素抗氧化、调节免疫和抗肿瘤作用已经作了广泛研
究。但是表儿茶素对抗胆酸引起的肝细胞凋亡作用
有很大潜力，但相关研究缺乏，迫切需要对其进行系
统研究。本研究通过观察表儿茶素对牛磺酸脱氧胆
酸引起的Ｈｕｈ７细胞凋亡作用并调查其作用机制，
为寻找天然药物治疗胆汁淤积性肝病提供线索。
１　材料
１．１　细胞系与细胞培养　人高分化肝癌来源细胞
系列，Ｈｕｈ７细胞（ＡＴＣＣ，美国）。在含有１０％小牛
血清，１００Ｕ·Ｌ－１青霉素，１００ｍｇ·Ｌ－１链霉素的有
酚红ＤＭＥＭ培养液中常规培养。设定无细胞空白
对照，细胞未处理对照，２５～３００μｍｏｌ·Ｌ－１表儿茶
素处理，４００μｍｏｌ·Ｌ－１ＴＤＣＡ处理４８ｈ［４］，和表儿
茶素加ＴＤＣＡ处理 ５组。
１．２　药物　表儿茶素（Ｓｉｇｍａ公司，批号 Ｅ４０１８）及
ＴＤＣＡ溶解在二甲基亚砜（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ，ＤＭ
ＳＯ）（Ｓｉｇｍａ公司，Ｄ２６５０），表儿茶素储存液的浓度
为 １００ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ＴＤＣＡ储存液的浓度为 １００
ｍｍｏｌ·Ｌ－１，储存于－２０℃备用。
１３　 试 剂 　 ＤＭＥＭ 培 养 液 （Ｇｉｂｃｏ，批 号
１０５６４０１１），小牛血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，批号 １０４３７０２８），
细胞增殖检测试剂盒（ＲｏｃｈｅＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，批号
１１４６５００７００１），２′，７′二氯荧光素（２，７ｄｉｃｈｌｏ
ｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｉｎｄｉｃｔａｔｅ，ＤＣＦＤＡ）（Ｓｉｇｍａ，批号３５８４７），
均质ＡＭＣｃａｓｐａｓｅ３／７检测试剂盒（ＡｎａＳｐｅｃＣｏｒｐｏ
ｒａｔｅ，批号７１１１８），细胞色素Ｃ（ｓａｎｔａｃｒｕｚｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ
ｏｇｙ，批号ｓｃ１３５６１），凋亡蛋白 Ｂａｘ抗体（ｓａｎｔａｃｒｕｚ
ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，批号 ｓｃ７４８０），磷酸化 ｐ３８ＭＡＰＫ抗
体（ｃｅｌｓｉｇｎａｌｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．批号 ９２１６），ｐ３８
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ＭＡＰＫ抗体 （ｃｅｌｓｉｇｎａｌｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．批号
９２１２），βａｃｔｉｎ抗体（Ｓｉｇｍａ，批号Ａ５４４１），羊抗兔和
羊抗鼠抗体（Ｐｉｅｒｃｅ，批号３４０７５），ＥＣＬ化学发光剂
（Ｐｉｅｒｃｅ，批号３４０７５）。
１．４　仪器　２４０６２型细胞培养箱（ＳＨＥＬＬＡＢ，俄
勒冈，美国），超净台，ＧＥＮｉｏｓ型荧光分光光度计
（Ｔｅｃａｎ，ＸＦＬＵＯＲ４，Ｖｅｒｓｉｏｎ：Ｖ４．４０，北卡罗来纳，
美国），电泳仪（ＢｉｏＲｅｄ，美国）。
２　方法
２．１　细胞增殖检测　细胞接种于９６孔板贴壁后，加
入不同浓度的表儿茶素首先观察 Ｈｕｈ７细胞对不同
浓度表儿茶素的反应，选出毒性最小，细胞增殖率最
高的浓度，作为表儿茶素的试验剂量进行以后试验。
以不同浓度的表儿茶素与４００μｍｏｌ·Ｌ－１ＴＤＣＡ［４］共
同孵育Ｈｕｈ７细胞，选出最适合的表儿茶素剂量作为
保护细胞的剂量。细胞接种于９６孔板，在细胞培养
箱过夜后，去掉培养液，换成无血清培养液，分别加入
４００μｍｏｌ·Ｌ－１ＴＤＣＡ与不同浓度表儿茶素培养４８
ｈ，去掉培养液后，加入无血清 ＤＭＥＭ，每孔加入１０
μＬＭＴＴ继续培养４ｈ，有紫色结晶形成后，每孔加入
含有０１ｍｍｏｌ·Ｌ－１盐酸１０％ ＳＤＳ１００μＬ经过１２ｈ
后，在５７０ｎｍ测定每孔吸光度（Ａ）。
细胞存活率（％）＝Ａ实验组／Ａ对照组 ×１００％
２．２　细胞内活性氧水平检测　细胞内活性氧（ｒｅ
ａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）水平按ＷａｎｇａｎｄＪｏｓｅｐｈ，
ＪＡ［５］建立的荧光探测方法检测。用黑色 ９６孔板，
Ｈｕｈ７细胞按１×１０４个／ｍＬ接种于每孔，过夜，去掉
原培养液，换无血清培养液。设置空白对照，未处理
细胞，表儿茶素１００μｍｏｌ·Ｌ－１，表儿茶素提前孵育
３ｈ后加入ＤＣＦＨＤＡ５μｍｏｌ·Ｌ－１，孵育３０ｍｉｎ后，
去掉含ＤＣＦＨＤＡ的培养液，用３７℃ ＤＭＥＭ清洗。
在ＴＤＣＡ处理组和共同处理组加入ＴＤＣＡ４００μｍｏｌ
·Ｌ－１，孵育３０ｍｉｎ。用荧光分光光度计检测其荧光
强度，Ｅｘ４８５ｎｍ／Ｅｍ５３５ｎｍ。
２．３　ｃａｓｐａｓｅ３／７活性分析　Ｈｕｈ７细胞按 ７×１０３
个／ｍＬ接种于黑色９６孔板，１００μｍｏｌ·Ｌ－１表儿茶
素提前孵育３ｈ后加入 ＴＤＣＡ４００μｍｏｌ·Ｌ－１孵育
４８ｈ，加入 ＡＭＣｃａｓｐａｓｅ３／７活性测定液，每孔 ５０
μＬ，避光室温１００ｒ·ｍｉｎ－１摇动 １ｈ后，用荧光分光
光度计在Ｅｘ３４５ｎｍ／Ｅｍ４４２ｎｍ测定荧光强度，荧
光强度代表样品中存在的活性ｃａｓｐａｓｅ３／７的量。
２．４　免疫印迹试验　将细胞以３×１０６个／ｍＬ接种
于４个１０ｃｍ直径培养器中。设定细胞未处理对
照，表儿茶素处理，ＴＤＣＡ处理，和表儿茶素加ＴＤＣＡ
处理 ４组。表儿茶素提前孵育３ｈ后加入ＴＤＣＡ４８
ｈ。处理结束，收集细胞，提蛋白，测蛋白浓度，取等
量蛋白上样，ＳＤＳＰＡＧＥ凝胶电泳。经过转膜，抗体
孵育，清洗；抗体孵育。ＥＣＬ化学发光。Ｘ射线胶
片感光显影。测定细胞色素 Ｃ，凋亡蛋白 Ｂａｘ，磷
酸化 Ｐ３８ＭＡＰＫ。
２．５　统计分析　计量数据经过３次以上独立试验
取得相似结果，以 珋ｘ±ｓ表示。用 Ｓｔｕｄｅｎｔ＇ｓｔｔｅｓｔ软
件，比较２组处理间差异显著性，用配对计量资料比
较ｔ检验。Ｐ＜００５为差异有显著性。
３　结果
３．１　对Ｈｕｈ７细胞凋亡的影响　经细胞毒性试验
选出１００μｍｏｌ·Ｌ－１表儿茶素为最佳保护细胞剂
量，因此这个剂量用于以后表儿茶素的试验中。细
胞增殖检测试验结果显示，与未处理细胞相比，４００
μｍｏｌ·Ｌ－１ＴＤＣＡ孵育细胞４８ｈ后，Ｈｕｈ７细胞存活
率下降了（５４２４±２２０）％。而与表儿茶素共同孵
育的细胞存活率达到（８４７４±０８４）％，用不同剂
量表儿茶素与４００μｍｏｌ·Ｌ－１ＴＤＣＡ共同孵育，可见
细胞的存活率随表儿茶素剂量增加而增加（表１）。
表１　表儿茶素对ＴＤＣＡ诱导Ｈｕｈ７细胞凋亡的影响
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
分组
剂量
／μｍｏｌ·Ｌ－１
Ａ
细胞存活率
／％
正常 　０ ０５９±００２０ １００
表儿茶素 １００ ０７０±００１９ １１８６
ＴＤＣＡ ４００ ０３２±００３０１） ５４２４
表儿茶素＋ＴＤＣＡ １００＋４００ ０５０±００１５ ８４７４
　　注：与正常细胞比较１）Ｐ＜０００１。
３．２　Ｈｕｈ７细胞内活性氧生成　细胞内活性氧测定
发现，４００μｍｏｌ·Ｌ－１ＴＤＣＡ处理细胞内活性氧含量
比未处理对照细胞活性氧含量升高 ８２％（Ｐ＜
０００１），表儿茶素与 ＴＤＣＡ共同孵育的细胞活性氧
含量比 ＴＤＣＡ处理细胞内活性氧含量下降了
５４２％（Ｐ＜０００１）。随着表儿茶素的剂量增加，细
胞内活性氧生成减少（表２）。表儿茶素抑制 ＴＤＣＡ
诱导Ｈｕｈ７细胞内活性氧生成作用与剂量成正比。
３．３　Ｈｕｈ７细胞促凋亡蛋白 Ｂａｘ表达　４个样本结
果显示，ＴＤＣＡ处理细胞促凋亡蛋白 Ｂａｘ表达增多，
但是表儿茶素加ＴＤＣＡ处理细胞促凋亡蛋白Ｂａｘ表
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　　 表２　活性氧平均荧光强度变化（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
分组
表儿茶素／μｍｏｌ·Ｌ－１
０ ２５ ５ １０ ２０ ５０ １００
对照 ５１１±１７４２ １８９±５２５ １２６±０６５ ６７±０９２ ６８±１１４ ４２±１１７ １８±０３
ＴＤＣＡ ９３０±２９２８１） ４２６±１３３６２） ３５０±１３５１２） ３２０±５３２） ２５９±１９７２） ２２５±４７８２） １９０±５６２）
　　注：与对照组细胞比较１）Ｐ＜０００１；与ＴＤＣＡ处理细胞比较２）Ｐ＜０００１。
达量减少（图１）。
Ｃ．未处理对照细胞；Ｅ．表儿茶素１００μｍｏｌ·Ｌ－１处理细胞；
ＴＤ．ＴＤＣＡ４００μｍｏｌ·Ｌ－１处理细胞；Ｅ＋Ｔ．表儿茶素＋ＴＤＣＡ。
图１　表儿茶素抑制ＴＤＣＡ诱导Ｈｕｈ７细胞
促凋亡蛋白Ｂａｘ表达
３．４　细胞色素Ｃ释放　４个样本的结果显示，胆酸
处理细胞胞浆内细胞色素 Ｃ含量增加，表儿茶素加
ＴＤＣＡ处理胞浆内细胞色素Ｃ含量减少（图１）。
３．５　Ｈｕｈ７细胞ｐ３８ＭＡＰＫ磷酸化　将细胞设为未
处理对照，１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＴＤＣＡ，４００μｍｏｌ·Ｌ－１
ＴＤＣＡ孵育１ｈ，和４ｈ。免疫印迹试验检测 ｐ３８
ＭＡＰＫ，和磷酸化 ｐ３８ＭＡＰＫ。可见随时间和剂量
的增加，磷酸化 ｐ３８ＭＡＰＫ增加 （图２）。但是表
儿茶素加 ４００μｍｏｌ·Ｌ－１ＴＤＣＡ处理细胞磷酸化
ｐ３８ＭＡＰＫ的量减少 （图１）。
图２　ＴＤＣＡ诱导Ｈｕｈ７细胞产生磷酸化ｐ３８ＭＡＰＫ
３．６　Ｈｕｈ７细胞 ｃａｓｐａｓｅ３／７活性增加　检测线粒
体途径中的效应因子 ｃａｓｐａｓｅ３／７活性可见，ＴＤＣＡ
４００μｍｏｌ·Ｌ－１作用４８ｈ后，ｃａｓｐａｓｅ３／７活性明显
增高是正常未处理细胞的５０７倍（Ｐ＜０００１），而
表儿茶素加 ＴＤＣＡ处理的细胞 ｃａｓｐａｓｅ３／７活性降
低了５２３％（Ｐ＜０００１）。这说明表儿茶素抑制ＴＤ
ＣＡ导致Ｈｕｈ７细胞ｃａｓｐａｓｅ３／７活性增加（表３）。
表３　表儿茶素抑制ＴＤＣＡ导致Ｈｕｈ７细胞ｃａｓｐａｓｅ３／７
活性增加（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
分组 剂量／μｍｏｌ·Ｌ－１ ｃａｓｐａｓｅ３／７活性
正常细胞 　０ ５９４５±１４６４
表儿茶素 １００ ４３０９±２３８０
ＴＤＣＡ ４００ ３０１２±８５７０１）
表儿茶素＋ＴＤＣＡ １００＋４００ １４３８±５８８０２）
　　注：与正常细胞比较１）Ｐ＜０００１；与 ＴＤＣＡ处理比较２）Ｐ＜
０００１。
４　讨论
应用ＴＤＣＡ诱导Ｈｕｈ７细胞凋亡作为胆酸诱导
肝细胞凋亡的模型，观察表儿茶素对 ＴＤＣＡ损伤肝
细胞的作用。通过细胞增殖检测，活性氧测定，和
ｃａｓｐａｓｅ３／７活性测定等一系列实验，结果显示表儿
茶素抑制ＴＤＣＡ诱导 Ｈｕｈ７细胞凋亡，其作用呈量
效递增关系。
线粒体是细胞内能量产生的场所，在能量生成
的氧化呼吸链中也生成活性氧。细胞内活性氧作用
具有双重性；适量活性氧可维持细胞正常生理功能，
但是过多活性氧生成，对机体形成氧化应激，耗竭细
胞内抗氧化防御系统。活性氧破坏生物物质的还原
状态，形成氧化修饰，线粒体膜和细胞膜脂质过氧
化，激活细胞凋亡信号通路。疏水胆酸盐可诱导细
胞内生成过多的活性氧，在胆酸诱导凋亡过程中，
活性氧的生成是激活凋亡信号通路的必须信号，［６］
它激发凋亡连锁反应。表儿茶素抑制过度活性氧生
成，是其抗ＴＤＣＡ诱导 Ｈｕｈ７细胞凋亡的主要机制。
表儿茶素其抗氧化作用机制是与 Ｏ２反应阻止自由
基的引发，与金属离子螯合阻止·ＯＨ的生成，与脂
质过氧化基ＲＯＯ·反应阻断脂质过氧化［７８］。
Ｂａｘ是位于线粒体外膜上 Ｂｃｌ２基因家族细胞
凋亡调节因子，Ｂｃｌ２与Ｂａｘ协同作用才能维持细胞
生存其表达强度决定细胞命运。Ｂａｘ占优势时，Ｂａｘ
移位到线粒体膜上形成膜孔，细胞凋亡。本实验结
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果表明，表儿茶素抑制ＴＤＣＡ诱导的Ｂａｘ表达，从而
减少细胞色素Ｃ的释放形成下游凋亡复合体。
活性氧还可激活细胞内其他需要氧的凋亡信号
途径如丝裂原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏ
ｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）［９］。ｐ３８信号通路是 ＭＡＰＫ通
路的一条重要分支，它在炎症、细胞应激、凋亡、细胞
周期和生长等多种生理和病理过程中起重要作用。
本实验发现ＴＤＣＡ随着孵育时间延长，剂量增大，细
胞内ｐ３８ＭＡＰＫ磷酸化水平增高，但是表儿茶素组
ｐ３８ＭＡＰＫ磷酸化程度比 ＴＤＣＡ组明显降低。这说
明ｐ３８ＭＡＰＫ的活化参与 ＴＤＣＡ诱导的 Ｈｕｈ７细胞
凋亡过程，而表儿茶素通过抑制ｐ３８ＭＡＰＫ磷酸化，
抑制ＴＤＣＡ诱导Ｈｕｈ７细胞凋亡。
综上所述，表儿茶素抑制 ＴＤＣＡ诱导 Ｈｕｈ７细
胞凋亡，其作用机制是通过抑制线粒体内过多活性
氧生成，稳定线粒体膜，抑制促凋亡蛋白 Ｂａｘ表达，
线粒体释放细胞色素Ｃ和ｐ３８ＭＡＰＫ磷酸化。
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ｌｉｐｉｄｂｉｌａｙｅｒｓ［Ｊ］．ＡｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓ，１９９４，１：２７８．
［９］　ＫｕｌｉｓｚＡ，ＣｈｅｎＮｉｎｇｆａｎｇ，ＣｈａｎｄｅｌＮＳ，ｅｔａｌ．ＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＲＯＳ
ｉｎｉｔｉａｔｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｏｆｐ３８ＭＡＰｋｉｎａｓｅｄｕｒｉｎｇｈｙｐｏｘｉａｉｎｃａｒ
ｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ［Ｊ］．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＬｕｎｇＣｅｌＭｏｌＰｈｙｓｉｏｌ，２００２，６：
１３２４．
ＥｐｉｃａｔｅｃｈｉｎａｂｏｌｉｓｈｅｄＴＤＣＡｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎＨｕｈ７ｃｅｌｂｙ
ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＢａｘ，ｐ３８ＭＡＰＫａｎｄＲＯＳｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
ＹＵＪｉｎｇ１，ＶｌａｄｉｍｉｒＫｈａｏｕｓｔｏｖ２，ＸＵＹｕｍｉｎ２，ＢｏｒｉｓＹｏｆｅ２
（１．ＨｅｐａｔｏｌｏｇｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＧｕａｎｇｘｉＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３００２３，Ｃｈｉｎａ；
２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＭｉｃｈａｅｌＥ．ＤｅＢａｋｅｙＶｅｔｅｒａｎｓＡｆａｉｒｓＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ，ＢａｙｌｏｒＣｏｌｅｇｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，
Ｈｏｕｓｔｏｎ７７０３０，ＴＸＵＳＡ）
　　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎａｎｔｉａｐｏｐｔｏｔｉｃｅｆｅｃｔｓｏｆｅｐｉｃａｔｈｅｃｈｉｎｉｎｌｉｖｅｒｃｅｌｓ．
Ｍｅｔｈｏｄ：Ｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｍａｃｅｌｌｉｎｅ（Ｈｕｈ７）ｗａｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ４００μｍｏｌ·Ｌ－１ｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ（ＴＤＣＡ）ｆｏｒ４８ｈｏｕｒｓｔｏｉｎｄｕｃｅ
ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｉｎｔｒａｃｅｌｕｌａｒｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ（ＲＯＳ）ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈＤＣＦＨＤＡａｓｓａｙ．Ｃａｓｐａｓｅ３／７ａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓａｎａ
ｌｙｚｅｄｗｉｔｈＥｎｚｏＬｙｔｅＨｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓＡＭＣｋｉｔ．ＣｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙＭＴＴａｓｓａｙ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢａｘ，Ｐｈｏｓｐｈｏｐ３８
ＭＡＰＫａｎｄｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴＤＣＡｄｅｐｅｎｄｅｎｔｉｎｔｒａｃｅｌｕｌａｒＲＯＳｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
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Ｃｒｅｌｅａｓｅｆｒｏｍｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ，ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｃａｓｐａｓｅ３／７ａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄｐ３８ＭＡＰＫｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎｐｒｏｔｅｃｔｓ
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［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ；ｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ；ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
［责任编辑　古云侠］
·５７２１·
第３４卷第１０期
２００９年５月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１０
　 Ｍａｙ，２００９