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[3] 杜利云.雪上一枝蒿总生物碱及其注射液含量测定方法的改
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[4] 高继武,蒋山好.离子对萃取光度法测定雪上一枝蒿总生物碱
含量[J].中国民族民间医药杂志,2000,46(02):17.
[责任编辑 鲍 雷]
[收稿日期] 20071020
[通讯作者] 贾魁荣,Tel:13651260118,(010)60123820,E
mail:jiakuirong611229@163com
巫山淫羊藿药材及饮片中朝藿定 C含量测定
贾魁荣
(北京市通州区妇幼保健院,北京 101100)
2005年版《中国药典》一部淫羊藿项下规定了
总黄酮及淫羊藿苷的含量限度,但作者在实际临床
应用中发现,巫山淫羊藿中淫羊藿苷含量极低,达不
到药典要求,不足以全面反映此种饮片质量。文献
报道[13]巫山淫羊藿含有大量的化学结构与淫羊藿
苷相似的黄酮苷类成分朝藿定 C,它的药理活性[4]
亦有报道。作者的预试验表明,朝藿定 C在淫羊
藿、箭叶淫羊藿中的含量较高,在巫山淫羊藿中含量
最高(远高于淫羊藿苷),并且炮制后会含量会发生
明显变化,因此朝藿定 C对于巫山淫羊藿饮品的质
量控制具有重要意义。作者对不同产地、不同批次
的巫山淫羊藿生品及饮片炮制前后朝藿定 C的含
量进行了比较,对结果进行了分析。
1 仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱仪(在线脱气机、四
元泵、自动进样器、柱温箱、DAD检测器);Kromasil
C18色谱柱(46mm×250mm,5μm);乙腈为色谱
纯,娃哈哈纯净水。
朝藿定 C对照品自制,经 HPLC面积归一化法
测定纯度达98%以上,可供含量测定用。购自河北
安国药材市场,经本室药师鉴定为巫山淫羊藿 Epi
mediumwushanenseTSYing的干燥地上部分;不
同炮制品包括生品、羊脂油炒制品,由作者按05版
药典淫羊藿炮制规范要求制备。
2 方法
21 色谱条件
KromasilC18色谱柱(46mm×250mm,5
μm);流动相乙腈水(25∶75);检测波长270nm;流
速1mL·min-1;柱温 25℃;进样量10μL;色谱分
析时间35min。色谱图见图1。
图1 巫山淫羊藿药材及饮片HPLC图
A.对照品;B药材;C;饮片;1朝藿定C
22 溶液的制备
221 对照品溶液的制备 精密称取朝藿定
C1350mg置25mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至
刻度,摇匀。即得。
222 供试品溶液的制备 取本品叶片粉末(过
40目筛)约02g〔同时另取本品叶片粉末测定水分
(药典水分含量测定第一法)〕,精密称定,置50mL
具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇20mL,密塞,称定
质量,超声处理1h,再称定质量,用稀乙醇补足减失
的质量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
23 线性关系考察
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第33卷第6期
2008年3月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.33,Issue 6
March,2008
分别精密吸取 l,2,5,10,15μL注入液相色谱仪,按
222项下色谱条件测定,记录峰面积。以峰面积
积分值为横坐标(X)、朝藿定C的量(μg)为纵坐标
(Y),绘制标准曲线,计算回归方程:Y=15428+
15468X(r=1,n=5)。结果表明朝藿定C在054
~81μg呈良好的线关系。
24 精密度试验
精密吸取朝藿定 C对照品溶液10μL,连续进
样5次,计算得朝藿定 C相对标准偏差,结果 RSD
105%,表明该方法精密度良好。
25 稳定性试验
取同一供试品溶液,分别于配制后0,2,4,6,8h
依法测定,结果 RSD0528%,结果表明,供试品溶
液在8h内稳定。
26 重复性试验
按222项下方法,分别称取同一批号样品5
份进行测定,计算得相对标准偏差,结果 RSD
095%。结果表明该方法重现性良好。
27 回收率试验
采取加样回收法,取已知含量的同一批号样品
约01g,精密称定,分别精密加入朝藿定C适量,按
222项下供试品溶液制备方法及色谱条件测定,
计算回收率,结果见表1。
表1 朝藿定C加样回收率
称样量
/g
样品中含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
01002 397 476 867 9878
01053 417 505 945 10451
01022 405 487 914 10456 10321241
01050 416 493 928 10395
01012 401 494 916 10428
试验结果表明,朝藿定C加样回收良好。
28 样品含量测定
取巫山淫羊藿药材及饮片按222项下方法制
备成供试品溶液,测定,结果见表2。
表2 样品中朝藿定C含量测定结果(n=3)
产地
药材 油炙饮片
第1批 第2批 第3批 第1批 第2批 第3批
麻江 505 497 493 461 452 455
农里 321 321 320 298 308 315
雷山1 363 357 359 284 288 282
雷山2 310 306 301 288 288 286
3 讨论
对朝藿定C进行了全波长扫描,结果其最大吸
收为2695nm,与《中国药典》2005年版一部淫羊
藿“含量测定”项下淫羊藿苷检测波长(270nm)同,
流动相也稍做增了调整。
淫羊藿叶中黄酮类化合物含量最高,根次之,茎
中最低,以全草入药时,药材药用部位混合比例的不
同,将会对临床疗效产生影响。实际生产时淫羊藿
饮片中往往混杂一些根及茎的碎片,本研究只取药
材及饮片的叶片部分来进行含量测定,这样就可以
避免由于取用药用部位不同而造成含量测定结果不
稳定的情况。
从朝藿定C的含量测定结果来看,不同产地的
巫山淫羊藿中朝藿定 C的含量差别较大,但总体水
平均远远高于淫羊藿苷(药典规定含量下限
05%),
观察炮制前后朝藿定 C的含量,发现它炮制后
有下降的趋势,有的甚至下降了2056%,说明炮制
对该成分影响较大,对于巫山淫羊藿来说,以朝藿定
C作为指标来控制其药材和饮片质量在灵敏度及稳
定性方面优于淫羊藿苷。
[参考文献]
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社,1999:156 [责任编辑 鲍 雷
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