全 文 :延胡索中的生物碱成分
胡甜甜1,张雪1,马世中1,程翼宇2,姚新生1
(1.沈阳药科大学 中药学院,辽宁 沈阳 110016;
2.浙江大学 药学院,浙江 杭州 310058)
[摘要] 目的:研究延胡索Corydalisyanhusuo块茎60%乙醇提取物的生物碱成分。方法:采用多种色谱学方法进行分离
纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果:从延胡索块茎60%乙醇提取物的氯仿可溶部分分离得到9个生物
碱,分别鉴定为7醛基脱氢海罂粟碱(1),O甲基南天竹碱(2),(+)O甲基球紫堇碱(3),d紫堇碱(4),四氢黄连碱(5),8
氧黄连碱(6),巴马亭(7),四氢巴马亭(8)和去氢紫堇碱(9)。结论:化合物1为首次从生物样品中获得,首次报道了其核磁
数据,化合物3为首次从罂粟科植物中分离得到,化合物6为首次从该植物中分离得到。
[关键词] 延胡索;化学成分;生物碱
[收稿日期] 20090130
[通信作者] 姚新生,Tel:(024)23993994,Email:yaoxinsheng@
vip.tom.com;张雪,Email:zxalice@sohu.com
中药延胡索又称元胡、延胡、玄胡等,为罂粟科
紫堇属植物延胡索 CorydalisyanhusuoW.T.Wang
的干燥块茎,是著名的“浙八味”之一,主产于浙江
省东阳、磐安一带,河北、山东、江苏等地亦有栽
培[1]。延胡索味辛、苦,性温,归心、肝、脾经。具有
活血、利气、止痛之功效,用于胸胁、脘腹疼痛、经闭
通经、产后瘀阻、跌扑肿痛等。现在,临床主要集中
用于气滞血瘀诸痛、冠心病心绞痛及心律失常
等[2]。为了搞清延胡索作用于主要靶标的活性物
质基础,作者对其60%乙醇提取物的氯仿可溶部分
进行了系统分离,从中得到9个生物碱,其中化合物
1为首次从生物中获得,本文首次报道了其核磁数
据,化合物3为首次从罂粟科植物中分离得到(图
1),化合物6为首次从该植物中分离得到。
图1 化合物1,3的结构式
1 材料
Brukeresquire2000低分辨质谱仪;Agilent6210
高分辨质谱仪;BrukerAV400核磁共振波谱仪;
JASCOP1020旋光光谱仪;日本岛津LC6A制备型
高效液相色谱仪,检测器为紫外检测器(SPD20A),
色谱柱为 YMCPACKPREPODS色谱柱(20mm×
250mm)。薄层色谱用硅胶 GF254、硅胶 G及柱色
谱硅胶(100~140目,200~300目)均为青岛海洋
化工有限公司生产。色谱纯试剂为天津康科德公司
产品,分析纯试剂为天津大茂试剂厂产品。
药材采自浙江省磐安,经浙江大学贺庆副教授
鉴定为C.yanhusuo,标本保存于沈阳药科大学中药
学院。
2 提取与分离
延胡索干燥块茎10kg,用60%乙醇回流提取3
次,每次3h,合并提取液,减压浓缩得浸膏739g,混
悬于10倍量水中,依次用等体积的水饱和氯仿、醋
酸乙酯和正丁醇萃取,回收溶剂得到氯仿萃取物
829g、醋酸乙酯萃取物148g和正丁醇层萃取物
779g。氯仿萃取物经硅胶柱色谱分离,环己烷氯
仿甲醇梯度洗脱,得到9个流分(A1~A9),其中流
分A3经反复硅胶柱色谱、制备型薄层色谱、制备型高
效液相色谱等多种色谱学方法,从中分离得到8个化
合物,分别为化合物1(12mg),2(113mg),3(51
mg),4(903mg),5(806mg),6(53mg),7(405
mg)和8(4504mg)。流分A7经硅胶柱色谱,氯仿
甲醇梯度洗脱,得到8个流分(A71~A78),其中A74
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经重结晶,得到化合物9(1801mg)。
3 结构鉴定
化合物1 黄色粉末,碘化铋钾反应呈阳性,提
示可能为生物碱。ESIMS给出准分子离子峰 m/z
404[M+Na]+;HRTOFMS给出化合物的相对分
子质量为3811568(Cal.3811576),确定化合物
分子式为C22H23NO5,计算其不饱和度为12。
1HNMR(CD3COCD3,400MHz)共显示 23个
氢信号,其中低场区给出1个醛基氢信号 δ1025
(1H,s),3个芳香氢信号 δ902(1H,s),883(1H,
s),722(1H,s);高场区给出 4个甲氧基氢信号 δ
403(3H,s),395(3H,s),393(3H,s),384(3H,s),
1个甲基氢信号 δ338(3H,s)和两组 t峰 δ359
(2H,t,J=65Hz),319(2H,t,J=65Hz),提示结
构中存在结构片段CH2CH2。
13CNMR(CD3COCD3,
100MHz)共显示22根谱线,结合DEPT135谱确定
结构中有1个醛基碳δ1882,11个sp2杂化的季碳,
3个sp2杂化的叔碳δ1064,1104,1117,4个甲氧
基碳 δ557,559,567,601,2个仲碳 δ508,
279,以及1个甲基碳δ496,结合其化学位移值及
分子式,推断该甲基直接与 N原子相连。综合以上
信息,推测该化合物为阿朴菲型母核结构的生物碱。
在NOESY图谱中可见 δ722(H3)和 δ403(2
OCH3),319(H4);δ883(H8)和 δ395(9
OCH3);δ902(H11)和 393(10OCH3)以及 δ
1025(CHO)和 δ338(NCH3)的相关信号,结合
HMBC图谱中 δ1025(CHO)和 δ1103(C7),
1284(C7a)的相关信号,可知结构中的醛基连在
C7位,确定化合物1为7醛基去二氢海罂粟碱(7
formyldidehydroglaucine)。其氢谱碳谱数据归属如
下:1HNMR(CD3COCD3,400MHz)δ:1025(1H,s,
CHO),902(1H,s,H11),883(1H,s,H8),722
(1H,s,H3),403(3H,s,2OCH3),395(3H,s,9
OCH3),393(3H,s,10OCH3),384(3H,s,1
OCH3),359(2H,t,J=65Hz,H5),338(3H,s,
NCH3),319(2H,t,J=65Hz,H4)。
13CNMR
(CD3COCD3,100MHz)δ:1882(CHO),1561(C
6a),1547(C2),1510(C9),1473(C10),1454
(C1),1320(C3a),1284(C7a),1280(C1a),
1199(C1b),1196(C11a),1117(C3),1104
(C11),1103(C7),1064(C8),601(1OCH3),
567(2OCH3),559(9OCH3),557(10OCH3),
508(C5),496(NCH3),279(C4)。该化合物
为首次从生物中获得,JoseL.Castro等人曾报道由
去二氢海罂粟碱(didehydroglaucine)通过一系列化
学反应(CHCl3,NaOH,TEBA)可合成该化合物
[34],
但是其核磁数据未见文献报道。本研究首次报道了
7醛基去二氢海罂粟碱的核磁数据,并对其所有碳
信号和氢信号进行了归属。
化合物 2 黄色针晶,碘化铋钾反应呈阳性。
ESIMSm/z340[M+H]+。1HNMR(CDCl3,600
MHz)δ:793(1H,s,H11),675(1H,s,H3),659
(1H,s,H8),597(2H,d,J=90Hz,OCH2O),
387(3H,s,2OCH3),365(3H,s,1OCH3),314
(1H,m),302(1H,m),296(2H,m),267(1H,
m),252(3H,s,NCH3),249(2H,m)。
13CNMR
(CDCl3,150MHz)δ:1521(C2),1467(C9),
1465(C10),1447(C1),1310(C7a),1288(C
1b),1275(C3a),1271(C1a),1257(C11a),
1108(C3),1091(C11),1084(C8),1010
(OCH2O),627(C6a),604(1OCH3),560(2
OCH3),534(C5),442(NCH3),353(C7),
294(C4)。根据文献[56]确定化合物为 O甲基
南天竹碱(nantenine)。
化合物3 无色棱状结晶,碘化铋钾反应呈阳
性。[α]250D +230(MeOH,c01);ESIMSm/z340
[M+H]+。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:697(1H,d,
J=84Hz,H8),685(1H,d,J=84Hz,H9),660
(1H,s,H3),605(1H,d,J=18Hz,OCH2aO),
588(1H,d,J=18Hz,OCH2bO),387(3H,s,10
OCH3),376(3H,s,11OCH3),313(1H,m,Hb
4),306(1H,m,Hb7),303(1H,m,Hb5),299
(1H,m,Ha6),265(1H,m,Ha4),255(3H,s,N
CH3),252(1H,m,Ha5),242(1H,m,Ha7)。
13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:1521(C10),1469
(C2),1468(C11),1432(C1),1300(C7a),
1283(C1b),1255(C3a),1241(C11a),1223
(C8),1139(C1a),1116(C9),1073(C3),
1005(OCH2O),629(C6a),608(11OCH3),
559(10OCH3),529(C5),438(NCH3),352
(C7),289(C4)。根据文献[7]确定化合物为
(+)O甲基球紫堇碱 [(+)Omethylbulbocap
nine]。该化合物为首次从罂粟科植物中分离得到。
化合物 4 白色粉末,碘化铋钾反应呈阳性。
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ESIMSm/z370[M+H]+。1HNMR(CDCl3,400
MHz)δ:690(1H,d,J=84Hz,H12),682(1H,d,
J=84Hz,H11),669(1H,s,H1),661(1H,s,
H4),420(1H,d,J=158Hz,He8),387(12H,
m,OCH3),369(1H,brs,H14),350(1H,d,J=
158Hz,Ha8),323(1H,m,H13),318(2H,m,
H6),261(2H,m,H5),095(3H,d,J=69Hz,
CH3)。
13CNMR(CDCl3,100MHz)δ:1496(C9),
1472(C3),1471(C2),1445(C10),1345(C
12a),1280(C4a),1280(C14a),1235(C8a),
1235(C12),1108(C11),1106(C4),1084(C
1),626(C14),596(OCH3),557(OCH3),554
(OCH3),553(OCH3),540(C8),509(C6),
376(C13),289(C5),178(CH3)。根据文献
[8]确定化合物为d紫堇碱(dcorydaline)。
化合物5 无色针状结晶,碘化铋钾反应呈阳
性。ESIMSm/z324[M+H]+。1HNMR(CDCl3,
400MHz)δ:672(1H,s,H1),668(1H,d,J=80
Hz,H11),663(1H,d,J=80Hz,H12),658
(1H,s,H4),593(2H,s,OCH2O),591(2H,s,
OCH2O),409(1H,d,J=153Hz,He8),357
(1H,brs,H14),354(1H,d,J=153Hz,Ha8),
323(1H,m,He13),313(2H,m,H6),282(1H,
m,Ha13),264(2H,m,H5)。13CNMR(CDCl3,100
MHz)δ:1462(C9),1460(C3),1450(C2),
1433(C10),1307(C14a),1285(C12a),1277
(C4a),1210(C12),1168(C8a),1084(C4),
1068(C11),1055(C1),1010(OCH2O),1008
(OCH2O),598(C14),529(C8),512(C6),
364(C13),295(C5)。根据文献[9]确定化合物
为四氢黄连碱(tetrahydrocoptisine)。
化合物 6 黄色粉末,碘化铋钾反应呈阳性。
ESIMSm/z336[M+H]+。1HNMR(DMSOd6,400
MHz)δ:747(1H,s,H1),733(1H,d,J=83Hz,
H11),715(1H,d,J=83Hz,H12),711(1H,s,H
13),691(1H,s,H4),619(2H,s,OCH2O),606
(2H,s,OCH2O),4,08(2H,t,J=61Hz,H6),286
(2H,t,J=61Hz,H5)。13CNMR(DMSOd6,100
MHz)δ:1596(C8),1494(C3),1483(C2),
1475(C9),1470(C10),1362(C13a),1330
(C12a),1313(C4a),1245(C13b),1208(C
12),1154(C11),1112(C8a),1093(C4),
1060(C1),1035(OCH2O),1030(C13),1027
(OCH2O),400(C6),290(C5)。根据文献
[10]确定化合物为8氧黄连碱(8oxocoptisine)。该
化合物为首次从延胡索中分离得到。
化合物7 黄色针状结晶,碘化铋钾反应呈阳
性。ESIMSm/z352[M]+。1HNMR(CD3OD3,400
MHz)δ:963(1H,s,H8),866(1H,s,H13),798
(1H,d,J=91Hz,H11),790(1H,d,J=91Hz,
H12),753(1H,s,H4),693(1H,s,H1),483
(2H,t,J=64Hz,H6),4,10(3H,s,OCH3),399
(3H,s,OCH3),388(3H,s,OCH3),383(3H,s,
OCH3),316(2H,t,J=64Hz,H5)。
13CNMR
(CD3OD3,100MHz)δ:1538(C3),1519(C9),
1509(C2),1463(C8),1457(C10),1397(C
14),1353(C12a),1301(C4a),1281(C13),
1245(C12),1233(C14a),1213(C11),1205
(C8a),1123(C4),1100(C1),625(OCH3),
577(C6),574(OCH3),570(OCH3),567
(OCH3),278(C5)。根据文献[11]确定化合物
为巴马亭(palmatine)。
化合物 8 黄色针晶,碘化铋钾反应呈阳性。
ESIMSm/z356[M+H]+。1HNMR(CDCl3,400
MHz)δ:688(1H,d,J=84Hz,H12),679(1H,d,
J=84Hz,H11),674(1H,s,H1),662(1H,s,
H4),425(1H,d,J=158Hz,He8),389(3H,s,
OCH3),387(3H,s,OCH3),386(3H,s,OCH3),
385(3H,s,OCH3),356(2H,m),323(3H,m),
387(1H,m),266(2H,m)。13CNMR(CDCl3,100
MHz)δ:1503(C9),1476(C2),1475(C3),
1452(C10),1297(C14a),1286(C12a),1277
(C8a),1268(C4a),1238(C12),1115(C4),
1111(C11),1087(C1),602(OCH3),593(C
14),561(OCH3),559(OCH3),558(OCH3),
539(C8),515(C6),363(C13),291(C5)。
根据文献[8]确定化合物为四氢巴马亭(tetrahydro
palmatine)。
化合物9 黄色针状结晶,碘化铋钾反应呈阳
性。ESIMSm/z366[M]+。1HNMR(CDCl3,400
MHz)δ:1013(1H,s,H8),794(1H,d,J=92Hz,
H11),788(1H,d,J=93Hz,H12),718(1H,s,
H1),693(1H,s,H4),503(2H,t,J=56Hz,H
6),423(3H,s,OCH3),4,06(3H,s,OCH3),401
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(3H,s,OCH3),396(3H,s,OCH3),321(2H,t,
J=58Hz,H5),297(3H,s,CH3)。
13CNMR
(CDCl3,100MHz)δ:1514(C9),1504(C3),
1479(C2),1456(C10),1453(C8),1365(C
14),1338(C12a),1319(C4a),1292(C13),
1257(C11),1216(C8a),1201(C12),1193
(C14a),1140(C1),1108(C4),626(OCH3),
575(C6),570(OCH3),565(OCH3),563
(OCH3),282(C5),179(CH3)。根据文献[12]
确定化合物为去氢紫堇碱(dehydrocorydaline)。
[致谢] 深圳中药及天然药物研究中心黄敬辉,沈阳
药科大学分析测试中心李文、沙沂老师测试了核磁图谱;深
圳中药及天然药物研究中心李玲测试了低分辨质谱;感谢暨
南大学赵慧男老师测定了高分辨质谱;段营辉、穆祯强测定
了旋光数据。
[参考文献]
[1] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科学技术出版
社,2002:919.
[2] 杨云,冯卫生.中药化学成分提取分离手册[M].北京:中国
中医药出版社,1998:149.
[3] SaaJM,CavaMP.Dehydroaporphines,dichlorocarbeneaddi
tiontodehydronuciferine[J].OrgChem,1977,42:347.
[4] JoseLC,LuisC,RicardoR.Ringchomologationofapor
phines,anewsynthesisofhomoaporphines[J].OrgChem,
1987,52:3581.
[5] 胡廷默,赵守训.延胡索地上部分生物碱成分的研究[J].南
京药学院学报,1985,16(2):9.
[6] GuinaudeauH,LeboeufM,CaveA.Aporphinealkaloids[J].
NatProd,1979,42(4):330.
[7] ChouCJ,LinLC,ChenKT,etal.Northalifoline,anewiso
quinolonealkaloidfromthepedicelsoflinderamegaphyla[J].
NatProd,1994,57(6):691.
[8] 许翔鸿,王峥涛,余国奠,等.延胡索中生物碱成分的研究
[J].中国药科大学学报,2002,33(6):483.
[9] 刘川,赵守训.江苏元胡块茎中化学成分的研究[J].中国药
科大学学报,1989,20(5):261.
[10] 王薇,张庆文,叶文才,等.黄连中的异喹啉类生物碱[J].中
国天然药物,2007,5(5):348.
[11] 邓业成,徐汉虹.广西地不容块根生物碱成分研究[J].广西
师范大学学报:自然科学版,2004,22(4):73.
[12] 王文蜀,肖巍,喻蓉,等.中药延胡索化学成分研究[J].中央
民族大学学报:自然科学版,2007,16(1):80.
ChemicalconstituentsfromCorydalisyanhusuo
HUTiantian1,ZHANGXue1,MAShizhong1,CHENGYiyu2,YAOXinsheng1
(1.ColegeofTraditionalChineseMateriaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Shenyang110016,China;
2.ColegeofPharmaceuticalScience,ZhejiangUniversity,Hangzhou310058,China)
[Abstract] Objective:Tostudythechemicalconstituentsfromthe60% ethanolextractofCorydalisyanhusuo.Method:The
chemicalconstituentswereseparatedandpurifiedbyvariouschromatographictechniques,andtheirstructureswereelucidatedbychem
icalevidenceandspectroscopicanalysis.Result:Ninealkaloidswereobtainedanddeterminedas7formyldidehydroglaucine(1),
nantenine(2),(+)Omethylbulbocapnine(3),dcorydaline(4),tetrahydrocoptisine(5),8oxocoptisine(6),palmatine(7),
tetrahydropalmatine(8),anddehydrocorydaline(9),respectively.Conclusion:Compound1wasobtainedfromnaturalproductsfor
thefirsttime,anditsNMRdatawerefirstlyreported.Compound3wasreportedfromPapaveraceaeforthefirsttime,andcompound6
wasfirstlyreportedfromCorydalisyanhusuo.
[Keywords] Corydalisyanhusuo;chemicalconstituents;alkaloids
[责任编辑 王亚君]
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