全 文 ：昆虫病原线虫对曲牙土天牛室内致死效应初步研究
徐常青! 徐江! 陈君!! 于晶! 陈荣敏+! 覃荣敏+! 徐荣! 周峰! 程惠珍
-中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所! 北京 $$*)%
+-化州市绿色生命有限公司! 广东 化州 +$$#
摘要#!目的$为探索昆虫病原线虫对化橘红主要蛀干害虫曲牙土天牛的防治效果) 方法$采用生产上常用的昆虫病原
线虫小卷蛾斯氏线虫 G,9-)9/)9+7 A7/;%A7;?79!4S%嗜菌异小杆线虫O9,9/%/>7:<-,-?:7A,9/-;>%/7!E$#%蝼蛄斯氏线虫 G,9-)9/)9!
+7 ?A7;,9/-?A-!88) 个品系进行曲牙土天牛幼虫室内侵染试验$分别以每头天牛幼虫 $$ $$$$$ $$$ 条线虫接种量接种) 结
果和结论$4S$E$#$88 ) 个品系对曲牙土天牛幼虫都有很高的致病力$致死率与线虫接种量之间存在剂量效应$接种量越大$
天牛死亡率越高$死亡越快$尤其E$# 品系$每头幼虫接种 $ $$$ 条线虫$接种 & J后致死率达到 $$e) 线虫不同品系对天
牛幼虫致死速率特征不同$E$# 具有 个死亡峰$线虫接种后天牛幼虫迅速死亡$4S和 88具有前后 + 个死亡峰$中间有 段
死亡率低的平台期) 昆虫病原线虫有望用于田间防治曲牙土天牛的危害)
关键词#!昆虫病原线虫+ 化橘红+ 曲牙土天牛
稿件编号#!+$$*$*$+$$(
基金项目#!国家科技支撑计划项目!+$$#R4:$*R$&
通信作者#!!陈君$PMS#!$$#+(**%)$I50BNS#1L2YN.?M23+#)-
2M@$1.?M23N0ASBJ-B.-.2
!!化橘红基原植物为芸香科植物化州柚 1-,/*?
(/7)<-?!G- HU\MK lBC-,%+9),%?7 E/C@-$以未成熟
的外果皮入药) 曲牙土天牛 0%/?,>9)9?>FBU./MU是新近发现对化橘红危害最为严重的虫害
之一$其幼虫为害化橘红根系$由侧须根向主根茎方
向取食韧皮部$最终导致化橘红根茎韧皮部完全破
坏$地上部枯死) 于曲牙土天牛幼虫在土壤中取食
为害$地上部分枯死前难于发现$因此防治难度极
大$药物防治不但难以达到效果$而且会严重污染环
境.5+/ )
国内采用昆虫病原线虫防治蛀干害虫已经取得
一定进展$国际上采用昆虫病原线虫防治地下害虫
和钻蛀性害虫也已取得很大成功.)/ $但对于曲牙土
天牛这类以树木根系为食的钻蛀性害虫效果尚未可
知) 为探索无公害防治曲牙土天牛的方法$作者应
用昆虫病原线虫对曲牙土天牛幼虫进行了室内毒力
试验)
!材料与方法
_!线虫
昆虫病原线虫小卷蛾斯氏线虫 GCA7/;%A7;?79
!4S品系%嗜菌异小杆线虫 O9,9/%/>7:<-,-?:7A,9!
/-;>%/7!E$# 品系%蝼蛄斯氏线虫 GC?A7;,9/-?A-!88
品系来自广东省昆虫研究所)
_(!害虫
曲牙土天牛0C>市绿色生命有限公司化橘红种植基地)
_&!线虫的制备与计量
将低温保存的线虫在烧杯中加入蒸馏水得到线
虫稀释液$混匀后用移液管吸取线虫液 $d 0G滴
于载玻片上$在解剖镜!GMN.B8( 4FH型下分别统
计 ) 滴液体内的线虫数$求出平均值$根据试验要求
准备各品系线虫数量)
_Q!线虫对天牛的致死效应
_Q_!不同品系昆虫病原线虫对曲牙土天牛幼
虫致病性的影响!将直径为 * 00的培养皿洗
净$在 $) KFB压力下灭菌 $d ?$用直径为 * .0
的定性滤纸垫于培养皿中$以适量的蒸馏水湿
润) 选取体色正常%健壮%个体差异相对一致的
天牛幼虫置于滤纸上$每皿 头$每品系 头$将
) 个品系线虫接种量调制一致$分别滴加到天牛
幼虫体上$对照用等量蒸馏水$供试 +$ 头) 置于
+# h黑暗条件下进行培养$定期观察统计天牛幼
虫的表现及死亡情况)
_Q_(!线虫接种量对曲牙土天牛幼虫致病性的影
响!试验采用每品系约 $$$$$ $$$ 条=头 + 个处
理$每个处理重复 + 次$以蒸馏水做对照$供试天牛
幼虫 ) 头$按上述实验方法确定有效的接种量$对
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第 ) 卷第 $ 期
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9B6$ +$$
天牛幼虫进行滴加线虫

培养观察)
_$!数据分析
试验数据采用 8ND0BAS/@$d$ 进行分析绘图)
(!结果与分析
(_!线虫侵染过程及天牛幼虫死亡症状
接种线虫后$天牛幼虫体表可见大量线虫在不
停蠕动$虫体的凹陷部位聚集线虫较多) + ? 后肉
眼观察天牛幼虫体表的线虫明显减少$显微镜下可
观察到线虫分别能从天牛幼虫的口腔%气门%肛门%
节间膜等部位侵入)
天牛被侵染后$初期表现活跃$虫体频繁翻滚$
表现出不适状$+& ? 后活动减少$行动迟缓$虫体变
软$体色由乳白色变为乳黄色$&( ? 后体色逐渐加
深$渐变为褐色$慢慢向黑色转变$相继死亡) 解剖
被侵染的天牛幼虫$体内清晰可见大量线虫) 染病
幼虫死后体壁皱缩)
(_(!线虫对天牛的致死效应
(_(_!不同品系昆虫病原线虫对曲牙土天牛幼虫
致死率及致死速率!观察不同品系线虫对曲牙土天
牛幼虫的致死率$结果见图 )
图 !线虫不同品系对曲牙土天牛幼虫的致死率
从线虫致死率曲线看$4S和 E$# 对天牛幼虫
的最终致死率较高$88 致死率相对较低$尤其 E$#
致死速率较高$处理 J 致死率即达 $$e) 4S$88
的致死速率相似$处理后死亡相对较慢$随时间增加
死亡率逐渐提高$到第 +) 天死亡率才分别达到
$$e$($e)
不同品系线虫对曲牙土天牛致死速率表现出 +
种明显不同的特征见图 +$4S和 88 具有类似的致
死特征$表现为线虫接种后有前期和后期 + 个死亡
高峰$中间有一段相对平稳的时间$天牛幼虫死亡率
较低) E$# 对天牛的作用呈现出前高后低的特征$
只有 个死亡峰$速效性好$死亡集中出现在线虫接
种后 + g& J)
图 +!不同品系线虫对曲牙土天牛致死速率
(_(_(!线虫接种量对曲牙土天牛致死率及死亡速
率的影响!不同浓度的线虫接种量对曲牙土天牛幼
虫的致死率都表现出剂量效应$见图 )) 随着线虫
接种浓度的增加$天牛幼虫死亡时间提前$死亡率提
高$死亡率与线虫接种量成正比关系)
图 )!不同浓度线虫接种量对曲牙土天牛致死率
线虫不同的接种量对曲牙土天牛幼虫死亡速率
也表现出剂量效应见图 &$但不同品系表现出不同
的规律) 4S$88 表现为 + 个死亡高峰$中间具有
段相对稳定的时期$天牛死亡率很低) E$# 表现为
个死亡高峰$接种后天牛幼虫迅速死亡) 从总体
上看$) 个品系均表现出线虫接种量增加$天牛的死
亡速率增加的特征)
*$&+*
第 ) 卷第 $ 期
+$$ 年 月
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9B6$ +$$
图 &!线虫接种量对曲牙土天牛幼虫死亡速率
&!结论与讨论
曲牙土天牛是化橘红的主要害虫之一$危害严
重$且目前没有很好的防治方法$从长远角度考虑$
生物防治为首选方法) 室内试验表明$昆虫病原线
虫对曲牙土天牛具有良好的效果$尤其是E$#$对天
牛幼虫致死率高$死亡快$表现出很高的活性)
线虫接种量对曲牙土天牛幼虫的死亡率和死亡
速率有影响$增加接种量能够提高天牛死亡率和死
!!
亡速率$但防治成本也会随着接种量的增加而增加$
生产上存在一个最佳接种水平$需要进一步试验)
筛选致病力强的昆虫病原线虫是能否用昆虫病
原线虫有效控制某一种害虫的关键) 如何高效筛选
或者在田间采集本地感染天牛线虫$提高线虫在土
壤中的存活率和寿命是提高曲牙土天牛防效的关
键$但也有学者研究发现$线虫在土壤中难以定居和
存活.&5/ $因此土壤是否会影响昆虫病原线虫对曲牙
土天牛的防治效果$值得深入研究)
致谢#!广东昆虫研究所提供昆虫病原线虫$长江大
学学生向娇%谭伟华参与试验)
参考文献#
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责任编辑!吕冬梅#
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