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吡虫啉对化橘红野漆树苷含量的影响



全 文 :* 基金项目:国家科技部“十一五”科技支撑项目(2006BAI09B04)
* 通讯作者:陈君,Tel:(010)62890659;E-mail:junzichen@ 263. net
收稿日期:2011 - 10 - 28
吡虫啉对化橘红野漆树苷含量的影响*
郭 昆1,乔海莉1,陈 君* 1,林 励3,陈荣敏2,覃蓉敏2,陈永刚3,李向明2,程惠珍1
(1. 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京 100094;2. 化州市绿色生命有限公司,广东化州 525100;
3. 广州中医药大学,广东广州 510405)
摘要:目的:研究吡虫啉对化橘红重要指标成分野漆树苷含量的影响,为使用吡虫啉防治化橘红害虫提供实验证据。
方法:在采收期,向化橘红果树基部注射不同浓度的吡虫啉,定期取样,烘干备用。野漆树苷用索氏提取法提取,高效液相
色谱法检测。以甲醇 -水 -醋酸(48∶ 50. 5∶ 1. 5)为流动相;室温;流速:1. 0ml /min;检测波长为 345nm。结果:注射吡虫啉
的化橘红样品与对照样品之间野漆树苷的量没有显著性差异。结论:吡虫啉对化橘红野漆树苷的含量没有显著影响,应
用吡虫啉防治化橘红害虫的方法安全。
关键词:高效液相色谱法;吡虫啉;化橘红;野漆树苷
Doi:10. 3969 / j. issn. 1002 - 1108. 2012. 02. 14
中图分类号:R927. 2 文献标识码:A 文章编号:1002 - 1108(2012)02 - 0029 - 03
中药化橘红是由芸香科植物化洲柚(Citrus grandis
‘Tomentosa’)或柚(Citrus grandis (L_)Osbeck)未成熟或
近成熟的果实外果皮干燥而成,具有化痰止咳、理气健胃
的功效,主治风寒咳嗽、痰多气逆、实积暖气等证[1]。近年
来,化橘红的应用越来越受到中医药界的重视。随着种植
面积的扩大和年限的增加,病虫害问题日益突出,曲牙土
天牛、星天牛等害虫已对化橘红生产造成严重威胁[2]。吡
虫啉(Imidacloprid)是新烟碱类超高效杀虫剂,具有高效、
低毒、广谱、内吸性等特点[3,4],在药用植物害虫防治方面
有很好的应用前景,吡虫啉可以有效地防治化橘红主要害
虫,果实的农药残留量在安全范围以内[5],并且吡虫啉的
使用对化橘红的有效成分之一柚皮苷的含量没有显著影
响[6],而其对化橘红的另一种重要指标成分野漆树苷的含
量的影响还未见报道。本文研究了施用农药吡虫啉对化
橘红主要次生代谢物野漆树苷的影响,旨在为吡虫啉在化
橘红中的安全使用提供依据,进而为化橘红的高产、优质
栽培提供技术支持。
1 材料
实验地点为广东化州市绿色生命有限公司种植基地,
实验对象为 9 年生化橘红树。施用药剂为 60%吡虫啉可
溶性液剂(青岛艾路可生物科技有限公司,2008 年 5 月 28
日生产)。仪器主要有高效液相色谱仪(美国 Dionex公司,
包括:ASI - 100 Automated Sample Injector;P680 HPLC
Pump;PDA - 100 Photodiode Array Detector) ;BP211D 电子
分析天平(d = 0. 01mg,德国 Sartorius 公司)。药剂有自制
野漆树苷对照品(经面积归一化法测定,纯度高于
98. 4%) ;双蒸水;甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。
2 方法
2. 1 样品采集及制备 2009 年 5 月 12 日,在化橘红采收
期,在化橘红种植基地选择生长相对一致的化橘红结果
树,分别以每厘米树干胸径 0. 8 ml /cm、1. 5 ml /cm 药液量
在树干基部注射药液,对照树注射等量的水,重复 3 次。药
后 1、3、7、14、21、30d随机采集化橘红果,按照传统方式加
工干燥后将干燥果粉碎,过 40 目筛网,待测。
2. 2 分析方法
2. 2. 1 色谱条件 色谱柱:Luna C18,5μm,150mm ×
4. 6mm;以甲醇 -水 -醋酸(48∶ 50. 5∶ 1. 5)为流动相;柱温:
室温;流速:1. 0ml /min;检测波长为 345nm;理论塔板数按
野漆树苷峰计算应不低于 1500。
2. 2. 2 对照品溶液的制备 将野漆树苷对照品 110℃烘
干至恒重,精密称取 6mg,置 100ml量瓶中,加甲醇至刻度,
摇匀;精密量取 1ml,置 10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,
即得(每 1ml含野漆树苷 6μg)。
2. 2. 3 供试品溶液的制备 精密称定化橘红粉末(过四
号筛)0. 5g,置索氏提取器中,加石油醚(60 ~ 90℃)80ml,
水浴加热回流提取 3h,弃去石油醚液,待样品中残存的石
油醚全部挥去后,加甲醇 80ml,再置索氏提取器中提取 3h,
提取至无颜色,放冷,滤过,滤液转移至 100ml量瓶中,用少
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第 34 卷 第 2 期
2012 年 3 月
贵阳中医学院学报
JGCTCM
No. 2 Vol. 34
March 2012
许甲醇分数次洗涤容器,洗液滤入同一量瓶中,加甲醇至
刻度,摇匀。精密量取 2ml,置 5ml量瓶中,加甲醇至刻度,
摇匀,使用前用 0. 45μm滤膜滤过,即得。
3 结果与分析
3. 1 线性关系考察 精密吸取野漆树苷对照品溶液 2、4、
6、8、10μl进样,以峰面积积分值对进样量进行回归处理,
得回归方程 y = 1686x - 1. 1764,R2 = 0. 9999。结果表明
野漆树苷在 0. 012μg ~ 0. 06μg内呈现良好线性关系。
3. 2 精密度试验 取同一对照品溶液,连续进样 5 次,结
果野漆树苷峰面积积分值的 RSD 为 1. 1%,表明精密度
良好。
3. 3 重复性试验 精密称取第 14d 浓度为 0. 8mL /cm 的
化橘红样品 5 份,每份 0. 5g,分别精密称定,按“2. 2. 3”项
下方法制备供试品溶液,按上述色谱条件测定,结果野漆
树苷平均含量为 0. 29%,RSD为 2. 1%,表明重复性较好。
3. 4 稳定性试验 取同一供试品溶液,分别在 1、2、4、8、
12h内进样,结果野漆树苷峰面积积分值 RSD 为 0. 85%,
表明待测成分在 12h内稳定。
3. 5 加样回收率试验 精密称取已知含量的化橘红样品
0. 25g,精密加入同一体积一定浓度的野漆树苷对照品溶
液,按“2. 2. 3”项下制备方法进行试验,结果野漆树苷平均
回收率为 106. 02%,RSD为 3. 2%。
表 1 野漆树苷加样回收率试验(n = 5)
样品号 称样量 / g
野漆树
苷含量
/mg
野漆树
苷加入
量 /mg
测得值
/mg
野漆树苷回收率 /%
X X RSD
1 0. 2509 0. 4516 0. 448 0. 9392 108. 83 106. 02 3. 2
2 0. 2498 0. 4496 0. 9436 110. 27
3 0. 2498 0. 4496 0. 9205 105. 10
4 0. 2506 0. 4511 0. 9120 102. 89
5 0. 2503 0. 4505 0. 9120 103. 01
3. 6 样品含量测定 药后 1、3、7、14、21、30d 时,0. 8 ml /
cm和 1. 5 ml /cm 药液处理以及对照每次所测果实均为 3
次重复。每次测量时,取化橘红样品 0. 5g,按“2. 2. 3”项下
制备供试品溶液,分别测定(图 1)。两组处理和对照测量
结果间的差异采用 SPSS 15. 0 中的重复测量方差分析进行
统计分析。
图 1 不同浓度吡虫啉对化橘红中
野漆树苷含量的影响
统计结果表明低剂量 0. 8ml /cm 与高剂量 1. 5ml /cm 处理
间野漆树苷含量没有显著差异(P = 0. 718) ,低剂量处理组
和对照组之间无显著性差异(P = 0. 293) ,高剂量处理组和
对照组之间也无显著性差异(P = 0. 469) ,这些结果综合说
明了吡虫啉对化橘红野漆树苷的含量没有显著影响。
4 讨论
次生代谢产物是药用植物的重要有效成分,其成分和
含量直接决定了药用植物的品质。植物次生物质在植物
体内产生的种类和数量主要决定于植物的遗传特性,但外
界因素如环境条件、害虫侵染、化学农药等都会对植物的
次生代谢产生深刻的影响[7]。药用植物次生代谢与植物
药材质量密切相关,探讨影响药用植物次生代谢的各种因
素,并在生产实际中加以调控,对于控制植物药材质量意
义重大。目前,我国药用植物的病虫害防治仍以化学防治
为主,但有关化学农药对药用植物内次生代谢物影响的研
究还十分有限。农药的使用在提高了药用植物产量的同
时,是否会影响药用植物的品质?有关化学农药对害虫的
有效性、农药残留方面的研究已经很多[8],而有关农药对
中药材次生代谢物的影响方面的研究亟待开展。深入开
展药用植物次生代谢物代谢途径的研究可为提高有效成
分的含量提供理论基础,这方面还需要做大量的工作。
化橘红作为一种常绿乔木,其害虫主要有蛀茎害虫星
天牛、光盾绿天牛、褐天牛、溜皮虫、爆皮虫和蛀食根部的
曲牙土天牛[2]。这些害虫通常在植株内部,喷施农药不仅
污染环境且利用率低。吡虫啉作为一种高效的内吸性杀
虫剂,选用树茎基部进行给药,具有作用速度快、环境污染
小的特点,在农作物、果树和枸杞、金银花、麻黄等许多药
用植物上都有很好的杀虫效果[9,10],在化橘红害虫防治中
·03· 贵阳中医学院学报 第 34 卷
也已得到广泛应用。但是使用吡虫啉有效防治害虫,提高
化橘红产量的同时,是否影响到了化橘红内次生代谢物的
成分和含量,从而影响化橘红药材的品质的研究尚还不够
全面。于晶等研究发现吡虫啉的使用对化橘红柚皮苷的
含量没有显著影响[6],而本文进一步研究发现吡虫啉对野
漆树苷含量的影响不显著。结合以前的研究,在收果前一
个月施用 0. 8ml /cm或 1. 5ml /cm剂量的吡虫啉,不仅可以
有效杀死害虫,而且残留在安全范围内,同时对化橘红的
重要指标成分柚皮苷和野漆树苷的含量没有显著影响,总
体表明吡虫啉可以在化橘红害虫防治中安全使用,同时提
供了吡虫啉的有效浓度剂量,为吡虫啉在化橘红中的使用
提供依据和指导。
参考文献
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* 基金项目:广西防城港市科学研究与技术开发计划项目(合同编号:防科攻 1013004)
修回日期:2011 - 09 - 19
颈内静脉穿刺置管在神经内科住院患者中的
应用及护理*
邱春丽
(广西防城港市第一人民医院,广西防城港 538021)
摘要:目的:探讨颈内静脉穿刺置管在神经内科住院患者中临床应用及护理要点。方法:选取 2009 年 9 月 ~ 2011 年 6
月我院神经内科住院治疗患者共 100 例,行颈内静脉置管术,同时对颈内静脉置管术患者实施对应的护理措施。结果:100
例患者平均导管留置时间 22. 6 ± 3. 3 天;共发生导管阻塞 7 例,置管口感染 3 例,I 级、Ⅱ级静脉炎各 2 例,液体外渗 2 例,
置管口出血 7 例。结论:对于需要长期输液患者,可提倡推广应用颈内静脉置管术。护理人员要做好宣教工作,让更多病
人认识使用颈内静脉置管术,以减轻病人反复穿刺痛苦和提高护理质量。
关键词:颈内静脉穿刺置管;神经内科;临床应用;护理要点
Doi:10. 3969 / j. issn. 1002 - 1108. 2012. 02. 15
中图分类号:R248. 1 文献标识码:B 文章编号:1002 - 1108(2012)02 - 0031 - 03
颈内静脉穿刺置管术是临床上进行胃肠外营养、输注
化疗药物、快速扩容等有效途经。由于操作简便、安全,置
管成功率高,故对周围静脉穿刺困难及需要特殊用药等显
得至关重要。随着现代医学发展,中心静脉穿刺在临床应
用日益广泛,减轻了病人因反复穿刺带来痛苦。颈内静脉
是目前采用最多中心静脉置管途径之一,因其体表标志相
对明显、容易穿刺、操作简单、血流量充足、以及留置时间
长等优点而被临床作为血管通道广泛使用[1]。我院神经
内科自 2009 年 9 月 ~ 2011 年 6 月对 100 例住院患者行颈
内静脉置管术,取得满意效果,现报告如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 本研究选取 2009 年 9 月 ~ 2011 年 6 月我
院神经内科住院治疗行颈内静脉置管术患者共 100 例,其
中:男 59 例,女 41 例,年龄 35 ~ 84 岁;疾病以脑血栓、脑梗
死及肿瘤居多,并需要长期输液治疗。但这些病人由于长
期静脉输液或需要特殊用药等已致外周静脉穿刺非常
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第 34 卷 第 2 期
2012 年 3 月
贵阳中医学院学报
JGCTCM
No. 2 Vol. 34
March 2012