全 文 ：白附子加压炮制品中５羟甲基糠醛含量变化的研究
张振凌，张红伟，刘博
（河南中医学院，河南 郑州 ４５０００８）
［摘要］ 目的：探讨白附子加压炮制品中５羟甲基糠醛（５ＨＭＦ）的含量变化规律。方法：采用ＲＰＨＰＬＣ，ＡｇｉｌｅｎｔＨＣＣ１８
色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相甲醇水（１１∶８９），检测波长２８０ｎｍ，流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１。结果：不同加压炮制工艺制
得的白附子中都检测到５ＨＭＦ，其含量在一定范围内随加压温度升高而降低，随加热时间延长而升高，随白矾用量的增加先
升高后降低。结论：白附子质量控制和饮片加工与炮制规范化研究应重视提供参考依据。
［关键词］ 白附子；炮制；高效液相色谱法；５羟甲基糠醛
［收稿日期］ ２００８１０２８
［基金项目］ 国家“十一五”科技支撑计划项目（２００６ＢＡＩ０９Ｂ０６）；
２００４２００５年河南省重大科技攻关项目（０４２２０３０７００，０５２２０３０２００）
［通信作者］ 张振凌，教授，从事中药炮制学教学与研究。Ｔｅｌ：
（０３７１）６５６８０９７０，Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｚｌ６７５８＠１６３．ｃｏｍ
白附子（习称禹白附）为天南星科犁头尖属植
物独角莲 ＴｙｐｈｏｎｉｕｍｇｉｇａｎｔｅｕｍＥｎｇｌ．的干燥块茎。
辛，温；有毒。归胃、肝经。具有祛风痰、定惊搐、
解毒散结止痛之功效［１］。白附子有毒，多用其炮
制品。《中国药典》２００５年版载制白附子采用姜
矾制。研究表明，白附子含有脂肪酸、甾体类化合
物、挥发油、氨基酸、微量元素、胆碱、尿嘧啶、胡萝
卜苷、肌醇、蔗糖、蛋白质凝集素、粘液质［２］等化学
成分。前期本实验室以白矾用量，饮片厚度，煎煮
时间，加压温度为因素，选取不同水平，以浸出物
含量为指标结合药理实验，通过正交试验优选出
了加压炮制白附子的新工艺，并且从白附子炮制
前后的指纹图谱对比中，发现白附子加压制品指
纹图谱中有新的色谱峰产生，经过提取分离，得到
了炮制后新产生成分，经鉴定为５羟甲基糠醛（５
ＨＭＦ）。本研究测定不同加压条件炮制白附子中
５ＨＭＦ含量，考察加压炮制对白附子中 ５羟甲基
糠醛含量的影响，为白附子炮制工艺研究提供参
考依据。
１ 材料
岛津ＬＣ２０ＡＴ高效液相色谱分析仪，ＳＰＤ２０Ａ
紫外检测器，ＣＢＭ１０２工作站；ＫＱ５００ＤＶ型数控
超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；ＭＥＴ
ＴＬＥＲＡＥ２４０型电子天平（１／１０万）；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ电子
天平（１／万）；ＤＨＧ９０７６Ａ型电热恒温鼓风干燥箱
（上海精宏实验设备有限公司）；岛津 ＵＶ２２０１紫
外可见分光光度计；ＦＷ１００高速万能粉碎机（北京
中兴伟业仪器有限公司）；ＳＺ９３自动双重纯水蒸馏
器（上海亚荣生化仪器厂）；ＬＤＺＸ４０ＳＣＩ型高压灭
菌器（上海申安医疗器械厂）。
白附子药材购于郑州市中药材市场，主产于河
南禹州市。经河南中医学院生药学科陈随清教授鉴
定为天南星科犁头尖属植物独角莲Ｔ．ｇｉｇａｎｔｅｕｍ的
干燥块茎。以实验室优选出的白附子加压炮制新工
艺为基础制备各炮制品。
色谱甲醇，水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。
对照品５羟甲基糠醛为实验室从白附子制品
中分离精制得到（纯度为９９％以上）。
２ 方法与结果
２．１ 样品制备
取大小一致净白附子，分别用白矾水浸泡（每
１００ｋｇ白附子，用白矾６ｋｇ），泡透，再加入生姜碎片
（每１００ｋｇ白附子，用生姜 １２５ｋｇ），置耐压容器
中，按照要求分别调整压力、温度和时间蒸煮后取
出，除去生姜末，晾至六七成干，切厚片，６０℃烘干，
粉碎，过２０目筛，备用。
２．２ ＨＰＬＣ法测定不同制品中５ＨＭＦ含量
２．２．１ 色谱条件
ＡｇｉｌｅｎｔＨＣＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），
流动相甲醇水（１１∶８９），流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温２５
℃。有效塔板数按５ＨＭＦ计算不低于３０００，在此
条件下样品中５ＨＭＦ与其他相关峰均能达到基线
分离，特征峰保留时间在１０ｍｉｎ。
２．２．２ 检测波长的选择
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第３４卷第１９期
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将５ＨＭＦ对照品，经紫外可见分光光度计全
波长扫描，结果表明在２８０ｎｍ处有最大吸收，故选
择２８０ｎｍ作为检测波长。
２．２．３ 样品提取条件的选择
２．２．３．１ 提取方法的选择 精密称取白附子１号
制品粗粉（过２０目筛）０５ｇ，置１００ｍＬ具塞锥形瓶
中，加８０％甲醇溶液５０ｍＬ，密塞，称重，超声提取或
回流提取后放冷，再称重，用８０％甲醇补足减失的
重量，摇匀，滤过，取续滤液２ｍＬ，置５ｍＬ量瓶中，
８０％甲醇定容，摇匀。微孔滤膜（０４５μｍ）滤过，作
为样品溶液，进样量１０μＬ。
试验结果表明，２种方法提取率没有显著差
别，水浴回流提取法含量略高于超声提取法含量，
但考虑到水浴回流提取是在９０℃的高温条件下进
行，可能会使白附子的糖类成分发生降解反应，生
成更多的 ５ＨＭＦ，因此不采用水浴回流提取法。
超声提取可以缩短提取时间，节省溶剂，提高有效
成分的提取效率，简化提取操作步骤，故选择超声
提取法。
２．２．３．２ 样品提取溶剂和时间的选择 以超声提
取法作为５ＨＭＦ的提取方法，精密称取白附子１号
制品粗粉（过２０目筛）１０份，每份１ｇ，选择不同的
提取时间和溶剂进行试验，结果表明，以３０％甲醇
的提取率最高，提取时间以３０ｍｉｎ提取率均最高，
故选择３０ｍｉｎ。
２．２．４ 供试品溶液的制备
精密称取不同炮制条件加压制白附子粉末１ｇ，
置１００ｍＬ具塞锥形瓶中，精密加入 ３０％甲醇 ５０
ｍＬ，密塞，称重，超声提取３０ｍｉｎ，放冷，再称重，用
３０％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液４
ｍＬ，置５ｍＬ量瓶中，用３０％甲醇定容，摇匀。微孔
滤膜（０４５μｍ）滤过，作为供试品溶液。
２．２．５ 对照品溶液
精密称取５ＨＭＦ对照品约２ｍｇ，置５ｍＬ量瓶
中加甲醇溶解并定容至刻度作为储备液，从储备液
中精密吸取１ｍＬ至２５ｍＬ量瓶中，加３０％甲醇稀
释并定容作为对照品溶液。
２．２．６ 线性关系考察
照上述色谱条件分析，分别进样，以峰面积积分
值Ｙ为纵坐标，５ＨＭＦ含量 Ｘ（μｇ）为横坐标，绘制
标准曲线，得回归方程 Ｙ＝２３０６６１１１７Ｘ－２１
３３３２５，ｒ＝０９９９６，表明 ５ＨＭＦ在 ００１９５２～
０１７５６８μｇ线性关系良好。
２．２．７ 精密度试验
取５ＨＭＦ对照品溶液，在上述色谱条件下，连
续进样５次，每次１０μＬ，根据峰面积积分值，ＲＳＤ
１１５％，表明其精密度良好。
２．２．８ 重复性试验
取白附子１号制品粗粉（过２０目筛）５份，每份
１ｇ，精密称定，按２２５项下方法进行制备。分别
精密吸取此样品溶液１０μＬ，注入液相色谱仪，计算
５ＨＭＦ含量，计算 ＲＳＤ。结果 ＲＳＤ１７４％，表明重
复性良好。
２．２．９ 稳定性试验
取白附子１号制品粗粉（过２０目筛）１ｇ，精密
称定，按２５项下方法进行制备。分别精密吸取此
供试品溶液１０μＬ在制备后０，２，４，８，１２ｈ测定，
ＲＳＤ１４９％，表明样品中的５ＨＭＦ在１２ｈ内稳定
性良好。
２．２．１０ 加样回收率试验
取含量测定项下已知含量为 ０２５１６６ｍｇ·
ｇ－１的白附子１号制品粗粉（过２０目筛）０５ｇ，共
５份，精密称定，置１００ｍＬ具塞锥形瓶中，各精密
加入含５ＨＭＦ０１２５８３ｍｇ的对照品溶液，再加
入３０％甲醇使提取溶液达到 ５０ｍＬ，其余按 ２５
项下方法进行制备，作为加样回收供试品溶液，
每次进样 １０μＬ，按上述色谱条件进行测定，见
表 １。
表１ ５ＨＭＦ加样回收率试验（ｎ＝５）
样品重量
／ｇ
５ＨＭＦ
／ｍｇ
测得总量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
０４９９９ ０１２５８０ ０２５６２３ １０３６６
０５００１ ０１２５８５ ０２５３８７ １０１７４
０５００７ ０１２６００ ０２４８６１ ９７４４ １００３９ ２４３
０５００９ ０１２６０５ ０２５０３５ ９８７８
０５００４ ０１２５９３ ０２５２１４ １００３１
２．２．１１ 不同炮制条件加压制白附子中５ＨＭＦ含
量测定
精密吸取对照品溶液和供试品溶液各１０μＬ，
分别进样，按上述色谱条件测定不同炮制条件加压
制白附子中的５ＨＭＦ含量，结果见表２及图１～３。
３ 小结与讨论
本实验结果表明，不同炮制条件加压制白附子
中都检测到５ＨＭＦ，其含量在一定范围内随加压温
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表２ 不同炮制条件加压制白附子中５ＨＭＦ含量（ｎ＝３）
Ｎｏ．
加压时
间／ｍｉｎ
加压温度
／℃
白矾
用量／％
生姜
用量／％
５ＨＭＦ
／ｍｇ·ｇ－１
ＲＳＤ
／％
１ ３０ １１５ ６ １２５ ０２５１ １５４
２ ６０ １１５ ６ １２５ ０９５９ １７０
３ １２０ １１５ ６ １２５ ０９９３ ２０２
４ ３０ １１５ ０ １２５ ００８５ １６８
５ ３０ １１５ ３ １２５ ０３９２ １６１
６ ３０ １１５ ６ １２５ ０２５１ １５４
７ ３０ １１５ ９ １２５ １０１９ １２５
８ ３０ １１５ １２ １２５ ０８９４ ０８３
９ ３０ １１５ ２５ １２５ ０８１７ ０２０
１０ ３０ １０５ ６ １２５ ０１６２ ０３９
１１ ３０ １１５ ６ １２５ ０２５１ １５４
１２ ３０ １２０ ６ １２５ ０２０６ １１８
１３ ３０ １１５ ６ ０ ０８７９ １９６
图１ 不同加压时间制品５ＨＭＦ含量变化
图２ 不同白矾用量制品的５ＨＭＦ含量变化
图３ 不同加压温度制品的５ＨＭＦ含量变化
度升高而降低，原因可能是高温高压对５ＨＭＦ有一
定的破坏使其损失。不同炮制条件加压制白附子
５ＨＭＦ含量随加热时间延长而升高。文献报道５
ＨＭＦ在形成过程中受多种因素的影响，加热的时间
和温度是首要因素［３］。不论是中药的炮制过程，还
是在注射液的高温灭菌过程，均能使５ＨＭＦ的含量
呈规律性变化，有时其含量的增加与灭菌温度、时间
成正比［４］。
本实验结果还表明辅料白矾和生姜对 ５ＨＭＦ
含量有一定影响，总体趋势上看，制白附子 ５ＨＭＦ
含量随白矾用量的增加先升高后降低，以９％白矾
为最高；不加姜制品大于加姜制品。原因可能是白
矾水溶液有一定酸性，有利于糖苷键的水解和糖的
脱水反应，生成 ５ＨＭＦ，并且其水溶液电离出大量
金属离子，这些金属离子在高温状态下也可能会对
５ＨＭＦ的生成起催化作用［５］。
一般认为５ＨＭＦ具有一定刺激性毒性，但近
年来的研究表明５ＨＭＦ还具有抗氧化［６］、改善血
液流变学［７］等对人体有利的作用，因此，白附子炮
制后含量提高是否与白附子治疗痰厥头痛、眩晕
有关以及白附子加压炮制后的作用机制还有待进
一步研究。
［参考文献］
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ｓｔｏｒａｇｅ［Ｊ］．ＰｅｒｉｔＤｉａｌＩｎｔ，２００４，２４（４）：３８５．
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现状及相关药效探讨［Ｊ］．世界科学技术———中医药现代化，
２００５，７（６）：５２．
［责任编辑 周 驰］
７４
第３４卷第１９期
２００９年１０月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １９
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００９