全 文 ：水蛭炮制前后质量比较
张永太
（上海中医药大学 中药学院，上海 ２０１２０３）
［摘要］ 目的：讨论炮制方法对水蛭的影响。方法：以热浸法测定水溶性浸出物与醇溶性浸出物的含量；以凝
血酶法测定水蛭素的含量；以ＨＰＬＣ测定次黄嘌呤的含量。结果：生水蛭的含水量，水溶性浸出物含量，醇溶性浸
出物含量，水蛭素含量，均高于制水蛭的含量，而制水蛭的次黄嘌呤含量则高于生水蛭的次黄嘌呤含量。结论：滑
石粉炒水蛭使水蛭药性峻烈的活性成分含量降低，从而降低毒性，缓和其破血通经之性。
［关键词］ 水蛭；炮制；浸出物；水蛭素；次黄嘌呤；含量比较
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）０７０７６６０３
［收稿日期］ ２００７０７２５
［基金项目］ 上海市科委中药现代化专项基金项目（０６ＤＺ
１９７２３）
［通讯作者］ 张永太，Ｔｅｌ：（０２１）５１３２２２１０，Ｅｍａｉｌ：ａｎａｌｙｓｉｓｄｒｕｇ＠
１２６．ｃｏｍ
水蛭炮制入药，始载于《伤寒论》，历代曾有熬、
炒微黄、煨令微黄、水浸去血子米炒、石灰炒过再熬、
炒焦、盐炒等炮制方法［１］，而今主流炮制方法为滑
石粉炒法，且２００５年版《中国药典》［２］和第７版全
国规范化高等中医药院校教材《中药炮制学》［１］均
只收载“滑石粉炒法”一种炮制方法。本研究着重
从水蛭所含主要活性成分的变化入手，研究水蛭经
滑石粉烫制后主要活性成分的变化情况，并以此为
依据，初步探讨水蛭炮制的机制。
１ 试药与仪器
水蛭（产地安徽）购自上海养和堂中药饮片有
限公司，经本校生药学教研室赵志礼教授鉴定为水
蛭科动物水蛭 ＨｉｒｕｄｏｎｉｐｐｏｎｉｃａＷｈｉｔｍａｎ的干燥全
体。牛纤维蛋白原（９８ｍｇ）、牛凝血酶（１９０Ｕ）、次
黄嘌呤对照品（批号４０６６１２００４０２），购于中国药品
生物制品检定所；甲醇（分析纯、色谱纯）、乙醇（分
析纯）、盐酸（分析纯），国药集团化学试剂有限公司
生产；氯化钠注射液，双鹤集团生产；三羟甲基氨基
甲烷由上海的奥生物科技公司提供。真空干燥箱
ＤＺＦ－６０５０（上海精宏实验设备有限公司）；电热恒
温水浴锅 ＨＨＳ（上海医疗器械五厂）；电子天平
ＭＤ１００－１（上海天平仪器厂）；便携式数字温度指
示仪 Ｘｍｘ－８０１（上海娄山热工仪表厂）。
２ 方法与结果
２．１ 水蛭炮制
称取水蛭药材２００ｇ，滑石粉８０ｇ。锅预热，锅
温１８０℃。取滑石粉置锅内，加热炒至灵活状态时
投入净选后的水蛭段，勤加翻动，武火炒至微鼓起，
表面呈黄棕色时取出，筛去滑石粉。检测药材温度
范围１１０～１４０℃，药材温度炒制后期基本在１３０～
１４０℃。药材放凉，碾碎过三号筛，备用。
２．２ 药材含水量测定［３］
取供试品约２ｇ，平铺于干燥至恒重的扁形称量
瓶中，厚度不超过５ｍｍ，精密称定，打开瓶盖在１０５
℃干燥 ５ｈ将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却 ３０
ｍｉｎ，精密称定质量，再在上述温度干燥１ｈ，冷却，称
重，至连续２次称重差异不超过５ｍｇ为止。计算得
生水蛭平均含水量为１０１０％，制水蛭平均含水量
为５４７％，均符合规定。
２．３ 水溶性浸出物的含量测定［３］
采用热浸法：取供试品约３ｇ，精密称定质量，置
２５０ｍＬ的锥形瓶中，精密加水１００ｍＬ，密塞，称定质
量，静置１ｈ后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保
持微沸１ｈ。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定质量，
用水补足减失的质量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密
量取滤液２５ｍＬ，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水
浴上蒸干后，于１０５℃干燥３ｈ，移置干燥器中，冷却
３０ｍｉｎ，迅速精密称定质量，以干燥品计算供试品中
水溶性浸出物的含量（％）。结果见表１。
２．４ 醇溶性浸出物的含量测定［３］
取供试品约３ｇ，精密称定质量，置２５０ｍＬ的锥
形瓶中，精密加５０％乙醇１００ｍＬ，密塞，称定质量，
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第３３卷第７期
２００８年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ７
Ａｐｒｉｌ，２００８
表１ 生水蛭与制水蛭浸出物、水蛭素含量比较
药材
水浸膏得率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
醇浸膏得率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
凝血酶
／Ｕ·ｇ－１
平均值
／Ｕ·ｇ－１
ＲＳＤ
／％
生１ ２６９５ ２７５３ １４３ １８１８ １８０３ ２１０ ８８０５ ８８２２ ０６６
生２ ２７４３ １７７７ ８７５１
生３ ２７７１ １７５２ ８８２６
生４ ２８０２ １８４３ ８９１２
生５ ２７５４ １８２７ ８８１６
制１ ２１３７ ２０７６１） １８６ １７７９ １７６７２） ０８９ ２７１８ ２８２１１） ２１０
制２ ２０３９ １７８１ ２８２１
制３ ２０８８ １７５２ ２８５８
制４ ２０５９ １７７６ ２８６０
制５ ２０５５ １７４８ ２８４６
注：与炮制后比较，１）Ｐ＜００１，２）Ｐ＜００５
静置１ｈ后，连接回流冷凝管，水浴加热至沸腾，并
保持微沸１ｈ。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定质
量，用水补足减失的质量，摇匀，用干燥滤器滤过。
精密量取滤液２５ｍＬ，置已干燥至恒重的蒸发皿中，
在水浴上蒸干后，于１０５℃干燥３ｈ，移置干燥器中，
冷却３０ｍｉｎ，迅速精密称定质量，以干燥品计算供试
品中醇溶性浸出物的含量（％）。结果见表１。
２．５ 水蛭素含量测定［２］
取本品粉末（过三号筛）约１ｇ，精密称定，精密
加入０９％氯化钠溶液 ５ｍＬ，充分搅拌，浸提 ３０
ｍｉｎ，并时时振摇，离心，精密量取上清液１００μＬ，置
试管（１０ｍｍ×１００ｍｍ）中，加入含０５％牛纤维蛋
白原（以固体物计）的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲
液（取 ０２ｍｏｌ·Ｌ－１三羟甲基氨基甲烷 ２５ｍＬ与
０１ｍｏｌ·Ｌ－１盐酸约４０ｍＬ，加水１００ｍＬ，调节 ｐＨ
７４）２００μＬ摇匀，置水浴（３７±０５）℃中缓缓滴加
每１ｍＬ中含４０Ｕ的凝血酶溶液（每 ｍｉｎ５μＬ边滴
加边轻轻摇匀）至凝固记录消耗凝血酶溶液体积，
按２００５年版《中国药典》所载方法计算水蛭素含量
（表１）。
经检验，生水蛭的水浸出物与制水蛭的水浸出
物含量相比具有极显著性差异，生水蛭的水浸出物
含量明显高于制水蛭；生水蛭的醇浸出物与制水蛭
的醇浸出物含量相比具有显著性差异，生水蛭的醇
浸出物含量显著高于制水蛭；生水蛭与制水蛭的每
克含抗凝血酶活性单位均大于１６０Ｕ，均符合２００５
年版《中国药典》中相关要求，生水蛭中水蛭素含量
明显高于制水蛭，水蛭炮制后水蛭素含量下降显著。
２．６ 次黄嘌呤含量测定
２．６．１ 色谱条件 迪马公司 ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱柱
（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相甲醇水（１０∶
９０），检测波长２５４ｎｍ，流速０６ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温
３５℃ ，进样量２０μＬ，见图１。
图１ 生品、制品水蛭次黄嘌呤ＨＰＬＣ图
Ａ对照品；Ｂ生品；Ｃ制品；１次黄嘌呤
２．６．２ 对照品与供试品溶液的制备 对照品溶液
制备：精密称取次黄嘌呤对照品２４７ｍｇ，置５０ｍＬ
量瓶中，加稀乙醇（５０％）溶解并稀释至刻度，摇匀，
作为对照品储备液。再精密吸取５ｍＬ，置５０ｍＬ量
瓶中，加稀乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照
品溶液（４９４μｇ· ｍＬ－１）。
供试品溶液的制备：分别取生水蛭与制水蛭粉
末（过三号筛）约０２５ｇ，各５份，精密称定，分别置
２５ｍＬ量瓶中，加稀乙醇约２０ｍＬ，在温水浴（５０℃）
中放置２ｈ，超声处理３０ｍｉｎ，放冷至室温，加稀乙醇
至刻度，摇匀，离心１０ｍｉｎ（３５００ｒ·ｍｉｎ－１），精密吸
取上清液２ｍＬ，置１０ｍＬ量瓶中，加稀乙醇至刻度，
摇匀，以０２μｍ有机滤膜滤过，取续滤液，即得。
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第３３卷第７期
２００８年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ７
Ａｐｒｉｌ，２００８
２．６．３ 对照品标准曲线的制备 精密吸取次黄嘌
呤对照品储备液０２，０５，１０，１５，２０，２５ｍＬ，分
别置１０ｍＬ量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀；微
孔滤膜滤过，精密吸取续滤液２０μＬ注入高效液相
色谱仪，记录色谱图。以对照品峰面积为纵坐标
（Ｙ），对照品溶液进样量为横坐标（Ｘ），计算回归方
程为Ｙ＝５６０６Ｘ＋２８９１，Ｒ２＝０９９９８，次黄嘌呤在
００１９７６～０２４７０μｇ呈良好线性关系。
２．６．４ 生水蛭与制水蛭供试品的次黄嘌呤的含量
比较 照２．６．１项下条件测定生品水蛭和制水蛭样
品供试液，测定结果见表２。
表２ 生炮水蛭供试品中次黄嘌呤含量（ｎ＝５）
药材 次黄嘌呤／ｍｇ·ｇ－１ 平均值／ｍｇ·ｇ－１ ＲＳＤ／％
生水蛭 １７３８１ １７３６１ ０２２
１７３１４
１７３９８
１７３２９
１７３８５
制水蛭 １８５６４ １８５７６２） ０４２
１８４５６
１８６７０
１８６０４
１８５８８
注：与炮制后比较２）Ｐ＜００１
以上数据经 ｔ检验后可得出：制水蛭的次黄嘌
呤的含量明显高于生水蛭的次黄嘌呤的含量。水蛭
经滑石粉炒制后，药材中次黄嘌呤含量增加明显。
３ 讨论
水蛭经炮制后，水浸出物含量、醇浸出物含量和
水蛭素均低于生品。因水蛭的主要活性成分为水溶
性成分，水蛭素是其重要的活性成分之一，研究表明
炮制品含量较生品偏低，可从物质变化角度较好地
说明水蛭炮制后药性趋缓、毒性降低的机理。而次
黄嘌呤的主要药理作用为平喘、舒张支气管、降压
等，炮制后其含量增加，与中医之于水蛭炮制减毒的
说法并不矛盾。验之于中医临床，滑石粉制水蛭多
入丸散，直接内服，可相对温和地治疗内损瘀血、心
腹疼痛等症；生品因其性峻猛，多入煎剂，以期在湿
热环境下稍解其毒性，以破血逐瘀为主。
水蛭生用虽力专效宏，但终属破血之品，气腥味
烈。对一些脾胃虚弱、年迈体虚、特定临床需要的瘀
血症患者，并非所有都适合。水蛭制用历史悠久，对
制品的特点及适应症尚需做深入系统的研究。
［参考文献］
［１］ 龚千锋．中药炮制学［Ｍ］．北京：中国中医药出版社，２００３：
１６４．
［２］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：附录Ⅸ４７，５６．
ＱｕａｌｉｔｙｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＨｉｒｕｄｏｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｐｒｏｃｅｓｓｅｄｂｙＦｒｅｎｃｈｃｈａｌｋ
ＺＨＡＮＧＹｏｎｇｔａｉ
（ＣｏｌｅｇｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＨｅｒｂ，ＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓｏｆＨｉｒｕｄｏ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｂｏｔｈｗａｔｅｒａｎｄａｌｃｏｈｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｏｆ
ＨｉｒｕｄｏｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ（Ｅｄｉｔｉｏｎ２００５）．ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅｉｎＨｉｒｕｄｏｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｈｉｇｈ
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ａｎｄＨｉｒｕｄｉｎｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｒｏｍｂｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｗａｔｅｒ，ｗａｔｅｒｓｏｌｕｂｌｅ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｅｔｈａｎｏｌｓｏｌｕｂｌｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｈｉｒｕｄｉｎｉｎｃｒｕｄｅＨｉｒｕｄｏａｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｐｒｏｃｅｓｓｅｄＨｉｒｕｄｏ．Ｂｕｔｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｈｙｐｏ
ｘａｎｔｈｉｎｅｉｎｐｒｏｃｅｓｓｅｄＨｉｒｕｄｏｉｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｉｎｃｒｕｄｅＨｉｒｕｄｏ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＨｉｒｕｄｏｆｒｉｅｄｂｙＦｒｅｎｃｈｃｈａｌｋｃａｎｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅａｃｔｉｖｅｃｏｍ
ｐｏｎｅｎｔｓｗｉｔｈｈｉｇｈｉｎｔｅｎｓｉｖｅｄｒｕｇｐｒｏｐｅｒｔｙ，ａｃｃｏｒｄｉｎｇｌｙｔｈｅｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆＨｉｒｕｄｏｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄ．Ａｓａｒｅｓｕｌｔ，ｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆＨｉｒｕｄｏａｓｉｎｖｉｇ
ｏｒａｔｅｔｈｅｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎｏｆｂｌｏｏｄａｎｄｓｔｉｍｕｌａｔｅｔｈｅｍｅｎｓｔｒｕａｌｆｌｏｗｗｅｒｅａｂａｔｅｄ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｈｉｒｕｄｏ；ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｄｒｕｇ；ｅｘｔｒａｃｔｓ；ｈｉｒｕｄｉｎ；ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ；ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｃｏｎｔｅｎｔｓ
［责任编辑 鲍 雷］
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