全 文 ：书丹皮酚微乳凝胶剂的制备及体外透皮特性研究
刘继勇，韩盈，杨明，朱全刚，胡晋红
（第二军医大学 长海医院 药学部，上海 ２００４３３）
［摘要］ 目的：制备丹皮酚微乳和微乳凝胶剂，并对其含量、理化性质和体外透皮特性进行考察。方法：以 ＩＰＭ为油相，
卵磷脂／ＡＰＧ为表面活性剂，１，２丙二醇为助表面活性剂，在室温下采用磁力搅拌法滴加水到油相中，制备丹皮酚微乳。采用
ＨＰＬＣ测定丹皮酚微乳中丹皮酚的含量。采用透射电镜和激光粒径测定仪分别测定微乳的形态和粒径。以卡波姆９４０为基
质，制备丹皮酚微乳凝胶。采用Ｆｒａｎｚ扩散池对微乳、微乳凝胶的体外透皮特性进行了考察。结果：制备的丹皮酚微乳为Ｏ／Ｗ
型微乳，外观圆整、均匀，粒径 ３２ｎｍ，含量稳定。丹皮酚饱和水溶液、微乳、微乳凝胶的稳态渗透速率分别为４７８４６，１０３７６０，
７０４０１μｇ·ｃｍ－２·ｈ－１，１２ｈ的累积渗透量分别为６５７１７９，１２６６４８４，８８１２１７μｇ·ｃｍ－２。结论：丹皮酚微乳、微乳凝胶的１２
ｈ累积渗透量和渗透速率均优于丹皮酚饱和水溶液，可为丹皮酚经皮给药提供一种新的剂型。
［关键词］ 丹皮酚；微乳；微乳凝胶；经皮给药
［收稿日期］ ２００９０７１４
［基金项目］ 国家自然科学基金（３０８０１５５７）
［通信作者］ 胡晋红，Ｔｅｌ：（０２１）８１８７３７４７，Ｅｍａｉｌ：ｈｕｊｈ＠ｓｍｍｕ．
ｅｄｕ．ｃｎ
［作者简介］ 刘继勇，博士，主管药师，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｊｉｙｏｎｇ９９９＠ｙａｈｏｏ．
ｃｏｍ．ｃｎ
丹皮酚（ｐａｅｏｎｏｌ）又称牡丹酚，是毛茛科植物牡
丹ＰａｅｏｎｉａｓｕｆｒｕｔｉｃｏｓａＡｎｄｒ．根皮和萝雐科植物徐长
卿Ｐｙｃｎｏｓｔｅｌｍａｐａｎｉｃｕｌａｔｕｍ（Ｂｕｎｇｅ）Ｋ．Ｓｃｈｕ全草的
主要活性成分，具有镇静、催眠、解热、镇痛、抗炎、抗
过敏、抗菌等多种药理活性［１］。丹皮酚在临床上主
要以牡丹皮或徐长卿的复方应用，也有以单体形式
给药。目前上市的制剂主要有丹皮酚注射剂、丹皮
酚片以及丹皮酚软膏等，用于治疗风湿痛、胃痛和其
他疼痛、湿疹、过敏性皮炎等，具有较好疗效［２］。丹
皮酚经皮给药，克服了传统激素类药物副作用大的
缺点，且具有使用方便、持续起效等优点。但由于其
水溶性差、熔点低、易挥发、稳定性差等缺点，限制了
其临床应用［３］。
微乳（ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎ，ＭＥ）作为一种非常有前景
的经皮给药载体，为解决难溶性药物的经皮吸收提
供了一种新的途径。
本研究首先将丹皮酚制成微乳经皮给药系
统，并对其含量和理化性质进行了考察。为了提
高微乳的黏度，方便给药，进一步将其制备成微
乳凝胶剂，并对微乳、微乳凝胶的体外透皮行为
进行了考察，可望为丹皮酚经皮给药提供一种新
的剂型。
１ 材料
ＬＣ１０ＡＤＶＰ型高效液相色谱仪（日本岛津制作
所）；ＤＦ１０１Ｓ集热式恒温加热磁力搅拌器（巩义市
英峪予华仪器厂）；透皮扩散仪（自制，长海医院药
学部）；ＺｅｔａｓｉｚｅｒＮａｎｏＺＳ９０测定仪 （英国马尔文公
司）；ＨＩＴＡＣＨＩＨ６００透射电子显微镜（日本日立
公司）。
丹皮酚原料药（上海青浦凤凰精细化工有限公
司，批号０７１２０１，纯度≥９８％）；丹皮酚对照品（中国
药品生物制品检验所，批号１１０７０８２００５０６，纯度≥
９８％）；ＬｅｃｉｔｈｉｎＥ２００（德国 Ｄｅｇｕｓｓａ公司）；肉豆蔻
酸异丙酯（ＩＰＭ，国药集团化学试剂有限公司）；烷基
葡萄糖苷（ＡＰＧ，中国日用化学工业研究院）；卡波
姆９４０（上海卡乐康公司）；甘油（上海制药有限公
司）；１，２丙二醇（上海制药有限公司）；甲醇为色谱
纯，水为重蒸水。
昆明种小鼠，雌性，体重（２０±２）ｇ，第二军医大
学动物中心提供，动物合格证号：ＳＹＸＫ（沪）２００７
０００３。
２ 方法和结果
２．１ 丹皮酚微乳的处方和制备工艺
通过前期研究，笔者确定了丹皮酚微乳的处方
和制备方法。丹皮酚微乳的处方为 ＩＰＭ１１８％，卵
磷脂 ６１％，ＡＰＧ１２２％，１，２丙二醇 ９１％，水
５９８％，丹皮酚药物１％。按处方比例将丹皮酚溶
１
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入ＩＰＭ，加入卵磷脂／ＡＰＧ作为表面活性剂，１，２丙
二醇为助表面活性剂，溶解混合为含药内相。在室
温下采用磁力搅拌器边搅拌边缓慢滴加水到含药内
相中，３００ｒ·ｍｉｎ－１恒速搅拌至澄清透明，即得丹皮
酚微乳。
２．２ 丹皮酚微乳的含量测定［４５］
２．２．１ 色谱条件 ＤｉａｍｏｎｄＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇水（７０∶３０）；流速１０ｍＬ·
ｍｉｎ－１；检测波长２７３ｎｍ；进样量２０μＬ；柱温室温；
灵敏度００１ＡＵＦＳ。
２．２．２ 标准曲线的建立 精密称取丹皮酚对照品
２１ｍｇ，于１００ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，
得２１０ｍｇ·Ｌ－１的储备液，密封，于４℃冰箱保存。
分别精密量取储备液０１，０２５，０５，１０，２０，４０，
８０ｍＬ置于２５ｍＬ量瓶中，用甲醇定容，制备质量
浓度分别为０８４，２１，４２，８４，１６８，３３６，６７２ｍｇ
·Ｌ－１的标准溶液。按上述色谱条件依次进样。以
测得峰面积Ａ与其浓度 Ｃ线性回归，得标准曲线方
程Ａ＝１１５０９７Ｃ＋５０７７６，ｒ＝０９９９９，线性范围
０８４～６７２ｍｇ·Ｌ－１。
２．２．３ 样品溶液的配制 空白体系溶液的配制：精
密量取不含丹皮酚的空白微乳制剂１ｍＬ于１０ｍＬ
量瓶中，加５ｍＬ甲醇破乳，用甲醇稀释至刻度，超声
１０ｍｉｎ，再取０５ｍＬ破乳液于１０ｍＬ量瓶中，用甲
醇稀释至刻度，得空白体系溶液。
样品溶液的配制：精密量取含１％丹皮酚的微
乳１ｍＬ于１０ｍＬ量瓶中，加５ｍＬ甲醇破乳，用甲
醇稀释至刻度，超声 １０ｍｉｎ，再取 ０５ｍＬ破乳液
于１０ｍＬ量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得丹皮酚
样品溶液。
上述溶液分别进样２０μＬ，将所得谱图进行比
较，见图１。
Ａ．丹皮酚对照品；Ｂ．空白微乳；Ｃ．丹皮酚微乳。
图１ 丹皮酚对照品及样品ＨＰＬＣ图
从上图可见，辅料对丹皮酚的测定无干扰，表明
本方法专属性好。
２．２．４ 稳定性考察 取微乳样品，按样品溶液的处
理方法进行处理，制备成待测液后，于０，１，２，４，６，８
ｈ进样测定，记录峰面积值，ＲＳＤ０１７％，表明供试
品在处理后８ｈ内基本稳定。
２．２．５ 加样回收率试验 分别精密称取丹皮酚原料
药４０，５０，６０ｍｇ，置１０ｍＬ量瓶中，加入处方量的空白
微乳，用甲醇使其全部溶解并定容至刻度，超声１０
ｍｉｎ，再精密量取０５ｍＬ破乳液于１０ｍＬ量瓶中，用
甲醇稀释至刻度，进样测定，计算回收率，回收率分别
为（９６８±０４）％，（９６９±０３）％，（９８８±０２）％。
２．２．６ 丹皮酚微乳的含量测定 取３批样品，依样
品溶液处理方法制备成供试品溶液，按２２３项下
测定。用标准曲线计算３批样品中丹皮酚的质量分
数，结果见表１。
表１ 丹皮酚微乳质量分数 ％
批号 丹皮酚 ＲＳＤ
１ ９６００ ０４０
２ １００６８ ０６６
３ １０３６０ ０１５
２．３ 丹皮酚微乳理化性质的考察
２．３．１ 形态观察 采用透射电镜对微乳的形态进
行观察：按磷钨酸负染法，滴１滴微乳于覆有 Ｆｏｒｍ
ｖａｒ膜的铜网上，１～２ｍｉｎ后取出铜网，用滤纸从铜
网边缘吸干多余液体，再将铜网放置于１％磷钨酸
中负染１～２ｍｉｎ，用滤纸从铜网边缘吸干多余液体，
晾干后置透射电子显微镜下观察形态，见图２。微
乳呈圆整均一的球体，大小均在３０ｎｍ左右。
２
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图２ 丹皮酚微乳电镜照片（×５００００）
２．３．２ 粒径 采用激光散射法测定了丹皮酚微乳
和空白微乳的粒径和粒度分布（测定条件：波长６３３
ｎｍ，温度２５℃，激光检测角度９０°），结果丹皮酚微
乳的平均粒径为３２５ｎｍ，呈正态分布，多分散系数
为０１６７，表明该制剂粒径小且均一。空白微乳的
粒径与载药微乳的粒径无差异。
２．４ 丹皮酚微乳凝胶的制备［６］
按照微乳处方首先制备丹皮酚微乳———丹皮酚
５０ｍｇ，ＩＰＭ０５８ｇ，卵磷脂０３ｇ，ＡＰＧ０６ｇ，１，２丙
二醇０４５ｇ，水３ｇ。然后取１００ｍｇ卡波姆９４０加
入１ｍＬ甘油研磨润湿，然后逐渐加入上述制备的微
乳研磨均匀，放置溶胀后，即得透明的淡黄色丹皮酚
微乳凝胶。
２．５ 丹皮酚微乳、丹皮酚微乳凝胶体外透皮特性的
考察
２．５．１ 离体皮肤的制备 按文献［７］方法，制备小
鼠离体皮肤，生理盐水洗净，－２０℃冷藏备用。
２．５．２ 标准曲线的建立 按２２２项下方法，建立
丹皮酚体外透皮分析的标准曲线方程 Ａ＝１３７１９３Ｃ
＋１２１８４１，ｒ＝０９９９６，线性范围０８９６～７１６８ｍｇ
·Ｌ－１。色谱图表明，空白皮肤接收液对丹皮酚的含
量测定无影响。精密度试验和回收率试验均符合测
定要求。
２．５．３ 体外透皮试验［８］ 采用 Ｆｒａｎｚ扩散池，有效
渗透面积Ａ为０８５ｃｍ２，接收介质为生理盐水，接收
池体积为 ５ｍＬ。分别量取丹皮酚的饱和水溶液
（５０５５２ｍｇ·Ｌ－１）、丹皮酚微乳各１ｍＬ和丹皮酚
微乳凝胶１ｇ置于供给池中，于（３２±１）℃，６００ｒ·
ｍｉｎ－１条件下进行实验，分别于０５，１，２，４，６，８，１０，
１２ｈ将全部接收液取出（同时补充同温等量生理盐
水），１００００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，取上清液，注入高
效液相仪测定，计算单位面积累积经皮渗透量Ｑｎ。
Ｑｎ＝（ＣｎＶｎ＋∑ＣｉＶｉ）／Ａ。
Ｃｎ为第 ｎ个取样点药物的校正浓度，Ｃｉ是第 ｉ
个取样点测得的药物浓度，Ｖｎ和 Ｖｉ分别是接收池
的体积（５ｍＬ）和取样体积（５ｍＬ），Ａ是扩散池
的扩散面积（Ａ＝０８５ｃｍ２）。以 Ｑｎ对时间 ｔ作
图，并对曲线中的直线部分线性回归，求出直线
斜率 ｄＱｎ／ｄｔ，即稳态渗透速率 Ｊｓ（μｇ·ｃｍ
－２·
ｈ－１），结果见表２。
表２ 各体系体外透皮吸收的比较（ｎ＝３）
体系 回归方程 Ｑｎ／μｇ·ｃｍ－２ Ｊｓ／μｇ·ｃｍ－２·ｈ－１
饱和水溶液 Ｑ＝４７８４６ｃ＋１７１４２０，ｒ＝０９４０３ ６５７１７９±２４６７８ ４７８４６
微乳 Ｑ＝１０３７６０ｃ＋５５３００，ｒ＝０９９８６ １２６６４８４±９１３８２ １０３７６０
微乳凝胶 Ｑ＝７０４０１ｃ＋６１３５７，ｒ＝０９９８７ ８８１２１７±１０３１５１ ７０４０１
从上述结果可见，丹皮酚饱和水溶液、微乳、微
乳凝胶的稳态渗透速率分别为 ４７８４６，１０３７６０，
７０４０１μｇ·ｃｍ－２·ｈ－１，１２ｈ的累积渗透量分别为
６５７１７９，１２６６４８４，８８１２１７μｇ·ｃｍ－２，表明微乳、
微乳凝胶的１２ｈ累积渗透量和渗透速率均优于丹
皮酚饱和水溶液，微乳凝胶的渗透速率低于微乳。
３ 讨论
测定微乳药物含量时一般需先破乳，再以适当
的溶剂提取分离后测定。而本研究中丹皮酚微乳中
的肉豆蔻酸异丙酯溶于甲醇，故根据各成分的溶解
特性，采用甲醇破乳，破乳后溶液呈澄清透明，无需
提取分离，可直接进样测定，实验中发现采用乙腈、
乙醚等破乳时均不能形成澄清透明溶液。
有文献报道［９］，微乳的低黏度限制了其在经皮
给药中的应用，而最近发现生物相容性的水凝胶与
微乳中的表面活性剂具有较小的相互作用，能改变
微乳的流变学性质。例如角叉菜胶、卡波姆９４０等
水凝胶加入微乳后会导致微乳产生较弱的凝胶行为
和黏度的改变。因此本研究参考相关文献，采用卡
波姆９４０作为微乳凝胶的基质。
卡波姆为水性凝胶基质，是一种引湿性很强的
白色松散粉末，可在水中迅速溶胀，但不溶解。其分
３
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子结构中的羧酸基团使其水分散液呈酸性，黏度较
低。当用碱中和使ｐＨ在６～１１时有最大黏度和稠
度。由于微乳呈弱碱性，故处方中不用再加三乙醇
胺或氢氧化钠，即可取得满意效果。实验中测得制
备的丹皮酚微乳凝胶的 ｐＨ为６５。而且实验中发
现三乙醇胺或氢氧化钠的加入使制备的微乳凝胶不
呈透明态，可能会导致微乳的破乳。
从表２，图４的结果中看出，微乳凝胶的渗透速
率低于微乳，卡波姆９４０的加入使体外渗透速率下
降了，可能是由于制备成凝胶后黏度增加，药物释放
需先从微乳内相扩散到外相，然后再从凝胶的网状
结构中渗透出来，因此渗透速度会有所下降。也有
可能是由于卡波姆的加入使得微乳转变为液晶结构
或者更高秩序的微结构，这与文献报道的结果相一
致［１０］。
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Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｐａｅｏｎｏｌｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎｇｅｌａｎｄｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏ
ＬＩＵＪｉＹｏｎｇ，ＨＡＮＹｉｎｇ，ＹＡＮＧＭｉｎｇ，ＺＨＵＱｕａｎｇａｎｇ，ＨＵＪｉｎｈｏｎｇ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＣｈａｎｇｈａｉＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００４３３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｐｒｅｐａｒｅｐａｅｏｎｏｌｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎａｎｄｇｅｌ，ａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｉｔｓｃｏｎｔｅｎｔ，ｐｈｙｓｉｃａｌａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒ
ｔｉｅｓ．Ｔｈｅｉｒｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｉｎｖｉｔｒｏｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄａｓｗｅｌ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＩＰＭａｃｔｅｄａｓｏｉｌｐｈａｓｅ，ｌｅｃｉｔｈｉｎ／ＡＰＧａｓｓｕｒｆａｃｔａｎｔ，１，２ｐｒｏ
ｐａｎｅｄｉｏｌａｓｃｏｓｕｒｆａｃｔａｎｔ，ｗａｔｅｒｗａｓａｄｄｅｄｄｒｏｐｗｉｓｅｔｏｔｈｅｏｉｌｐｈａｓｅｔｏｐｒｅｐａｒｅｐａｅｏｎｏｌｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎａｔｒｏｏｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｕｓｉｎｇｍａｇ
ｎｅｔｉｃｓｔｉｒｉｎｇ．ＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐａｅｏｎｏｌｉｎｐａｅｏｎｏｌｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎ．Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ
ａｎｄｌａｓｅｒｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅａｎａｌｙｚｅｒｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｓｈａｐｅａｎｄｓｉｚｅｏｆｔｈｅｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎ．Ｃａｒｂｏｐｏｌ９４０ｗａｓｕｅｓｄａｓｓｕｂｓｔｒａｔｅｔｏ
ｐｒｅｐａｒｅｐａｅｏｎｏｌｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎｇｅｌ．Ｆｒａｎｚｄｉｆｕｓｉｏｎｃｅｌｗａｓｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎａｎｄｇｅｌｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｉｎｖｉｔｒｏ．Ｒｅ
ｓｕｌｔ：ＴｈｅｐａｅｏｎｏｌｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎｉｓＯ／Ｗｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎ．Ｉｔｓｕｎｉｆｏｒｍｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅｉｓ３２ｎｍｗｉｔｈｒｏｕｎｄｎｅｓｓａｐｐｅａｒａｎｃｅａｎｄｓｔａｂｌｅｃｏｎ
ｔｅｎｔ．Ｐａｅｏｎｏｌｓａｔｕｒａｔｅｄａｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎ，ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎｇｅｌｓｔｅａｄｙｓｔａｔｅｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｒａｔｅｗｅｒｅ４７８４６，１０３７６０，
７０４０１μｇ·ｃｍ－２·ｈ－１，ａｎｄ１２ｈｃｕｍｕｌａｔｉｖｅａｍｏｕｎｔｏｆｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｗｅｒｅ６５７１７９，１２６６４８４，８８１２１７μｇ·ｃｍ－２．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：
Ｐａｅｏｎｏｌｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎ，ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎｇｅｌ１２ｈｃｕｍｕｌａｔｉｖｅｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｒａｔｅｗｅｒｅｂｅｔｅｒｔｈａｎｔｈｅｓａｔｕｒａｔｅｄａｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕ
ｔｉｏｎ．Ｐａｅｏｎｏｌｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎｇｅｌｉｓａｎｅｗｄｏｓａｇｅｆｏｒｍｆｏｒｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｐａｅｏｎｏｌ；ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎ；ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎｇｅｌ；ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙ
［责任编辑 周驰］
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Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ ２１
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