全 文 ：正交试验优化复方卡力孜然凝胶剂的提取工艺
赵媛! 邢建国+! 王新春!)!! 薛桂蓬+! 党学良
f石河子大学 药学院! 新疆 石河子 ()+ $$$% +f新疆维吾尔自治区药物研究所! 新疆 乌鲁木齐 ()$$ $&% )f石河子大学 医学院 第一附属医院! 新疆 石河子 ()+$$( #$摘要%!目的&优选复方卡力孜然凝胶剂的最佳提取工艺( 方法&采用正交试验设计$分别以补骨脂素%异补骨脂素%蛇 床子素和浸膏收率为指标$优化补骨脂等 ( 味药材的提取工艺)以二苯乙烯苷和浸膏收率为指标$优选白芥子与何首乌 + 味药 材的提取工艺( 结果&( 味药最佳提取工艺为 ( 倍量 #$g乙醇$提取 + 次$每次 ?)何首乌和白芥子的最佳提取工艺为 ( 倍量
&$g乙醇$提取 + 次$每次 ?( 结论&优选的提取工艺稳定%可行($关键词%!补骨脂素) 异补骨脂素) 蛇床子素) 二苯乙烯苷) 复方卡力孜然凝胶剂
$稿件编号%!+$$*$(+ $$& $基金项目%!自治区科技支疆项目!+$$ *#)自治区高技术与
发展计划项目!+ $$($$
$通信作者%!!王新春$主任药师$博士$NQV#!$**) +((+%$H5
0BRV#.,1,7.3#)f./0
!!复方卡力孜然凝胶剂是一种由补骨脂%蛇床子%
驱虫斑鸠菊%何首乌等 $味药材制成的外用制剂$该
方具有祛风燥湿%活血化瘀%舒经活络之功效$是维吾 尔民族用于治疗白癜风的经典名方*+ ( 为了确保疗 效$最大程度发挥活性成分作用$作者根据方中药材 所含有效成分的性质$拟定了本方药材的提取方法(
采用正交试验设计法$以多种有效成分为指标$筛选
了复方卡力孜然凝胶剂的最佳提取工艺条件$为复方 卡力孜然凝胶剂的进一步研究奠定了基础( !材料 8GI5$4\G型高效液相色谱仪!日本岛津制造
所)MG+I型电子天平!=$万$SBC@/CRWS)9RVR5
A/CQSR0AVR.R@65(超纯水器!美国密理博公司)Ia5
bZ5型电热恒温水浴锅!北京市光明医疗仪器厂(
补骨脂素!批号 $%)*5+$$#))异补骨脂素!批 号$%)(5+ $$)蛇床子素!批号 $(++5+$$ &$# 均够自中国药品生物制品检定所( 甲醇为色谱纯!美 国ERS?QC公司提供$批号 $#&*$磷酸为分析纯!西
安化学试剂厂提供$批号$$%$+$水为超纯水( 本 实验中所用的药材均由安徽亳州提供( !方法与结果 ]!补骨脂素%异补骨脂素及蛇床子素的含量测定 ]]!补骨脂素%异补骨脂素对照品溶液的制备 分别取补骨脂素和异补骨脂素对照品适量$精密称
定$于 + 0F棕色量瓶中$制成质量浓度为 +) $$+&$ 0D-F d的储备液( 分别吸取上述储备液 +f$$ +f
0F至 + 0F棕色量瓶中$加甲醇稀释至刻度$即得
质量浓度 +)f $$*f+$ 0D-Fd补骨脂素和异补骨 脂素的混合对照溶液( ]]!蛇床子素对照品溶液的制备!取蛇床子素 对照品适量$精密称定$于 + 0F棕色量瓶中$加 *g乙醇配制成蛇床子素质量浓度为 %$ 0D-Fd 的储备液$吸取储备液 )f$ 0F至 + 0F量瓶中$加 *g乙醇稀释至刻度$即得质量浓度为 +$f&$ 0D- F d的蛇床子素对照溶液( ]]&!色谱条件!8?R0BUYW \G5OI8 色谱柱!&f# 00i+$ 00$ 0)流动相甲醇!45$f&g磷酸 !M$梯度洗脱 $ j 0R2$45M!r&*) j+ 0R2$45M!r&* j%&r+#)+ j) 0R2$45M!%&r +#)双波长检测 +& 20!检测补骨脂素%异补骨脂 素$)++ 20!检测蛇床子素)流速 0F-0R2d)柱 温 ) h( 分别测定样品%对照品和阴性样品$色谱 图见图 ( 结果表明$在此色谱条件下样品中其他 成分对补骨脂素%异补骨脂素和蛇床子素的测定无 干扰( ]]Y!补骨脂素%异补骨脂素标准曲线的绘制!分 别精密吸取混合对照溶液 $)$$ % $$0F$依法稀 释得系列对照品溶液( 精密吸取各对照品溶液 $ F$在上述色谱条件下分别测定分析$以对照品浓 度为横坐标K$峰面积为纵坐标 L$得补骨脂素%异 补骨脂素标准曲线( 结果见表 ( -$)- 第 ) 卷第 * 期 +$$ 年 月
!!!!!! ! ! ! ! !!!!!! ! ! ! !
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4f对照品!+& 20)Mf样品!+& 20)Ef阴性!缺补骨脂!)++ 20)f补骨脂素)+f异补骨脂素))f蛇床子素(
图 !复方卡力孜然凝胶剂中对照品%样品及阴性的JGF<图
表 !各指标标准曲线方程!-e
对照品 标准曲线 线性范围=0D-Fd %
补骨脂素!
Le%f$) i$
&
Km&f+* i$) +f) j+)f$ $f*** * 异补骨脂! Le(f%& i$
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f*+ j*f+ $f*** * 蛇床子素! Le)f* i$
&
Kmf) i$) +f$& j+$f&$ $f*** % 二苯乙烯苷 Le&f+) i$
&
Km%f(% i$) )f# j)#f$ $f*** # ]]$!蛇床子素标准曲线的绘制!分别精密吸取
对照品溶液 $+f$$%f$$0F$依法稀释得系列
对照品溶液( 进样 $F$在上述色谱条件下分别
测定分析$以对照品浓度为横坐标K$峰面积为纵坐
标L$得蛇床子素标准曲线( 结果见表 ( ]!二苯乙烯苷的含量测定 ]]!对照品溶液的制备!精密称取二苯乙烯苷 对照品适量$加稀乙醇配制成 ($0D-Fd二苯乙 烯苷储备液( 精密吸取储备液 0F$置 + 0F棕色
量瓶中$加稀乙醇稀释至刻度$摇匀$得质量浓度 )#f$ 0D-F
d的二苯乙烯苷对照品溶液(
]]!色谱条件!8?R05AB.[ \G5OI8 色谱柱!&f#
00i+$00$

0)流动相乙腈5水!+r%)检测
波长 )+$20)柱温 )$ h)流速 f$0F-0R2d( ]]&!标准曲线的制备!分别精密吸取对照品溶 液 f$$)f$$f$$%f$ $$f$ 0F$依法稀释$得系列对 照品溶液( 进样 $ F$在上述色谱条件分别测定 分析$以对照品浓度为横坐标 K$峰面积为纵坐标 L$得二苯乙烯苷标准曲线( 结果见表 ( ]&!浸膏收率的测定 精密量取各个正交试验号的醇提液 0F$置干 燥至恒重的蒸发皿中$水浴挥干$于 $ h干燥至恒 重后于干燥器中冷却 )$ 0R2$迅速精密称重( ]Y!供试品溶液的制备 分别按F * !) & 正交设计表对样品进行提取$提取 液稀释后过 $f& 0滤膜$即得供试品的测定溶液( ]$!提取工艺的优选 ]$]!正交试验设计!根据处方 ( 味药材药效成 分的作用*+5)+ $选用补骨脂素%异补骨脂素%蛇床子素 含量和浸膏得率为指标$依据单因素试验结果$采用 F * !) & 正交表进行试验$见表 +( ]$]!正交试验结果与分析!试验结果采用综合 评分法进行分析!权重系数分别为 $fr$f&r$f$ 结果见表 )$方差分析见表 &( -)- 第 ) 卷第 * 期 +$$ 年 月
!!!!!! ! ! ! ! !!!!!! ! ! ! !
\/Vf)$:SSWQ!* 9B6$ + $$表 +!( 味药材提取正交设计因素水平 水平 # C > 乙醇浓度=g 乙醇倍数 提取时间=? $ ( + #$ $ f ) %$ + + !!由方差分析结果可知$因素#对综合指标的影响 有显著性$结合其极差分析$选取# + 水平)C$>对指标 影响均无显著性$水平可任选$结合大生产合理%节能 降耗的要求及其极差分析$C$>因素均选取水平 ( 综合分析$确定出 ( 味药材的较优工艺条件是 # + C > ( 即 (倍量 #$g乙醇$提取 +次$每次 ?( 表 )!( 味药材提取工艺的正交试验!-e) ;/f 补骨脂素 =0D-Dd 异补骨脂素=0D-Dd 蛇床子素=0D-Dd 浸膏收率=g 综合评分 &f*$ +f)# +)f( +)f$ *f+ + f&+ +f%+ ++f( +&f#& *f ) f$( +f +)f% +#f$# *)f*$ & f&$ +f%) +)f& +)f *f+ f# +f(# +)f( +&f&$ *(f#( # f +f%# +)f* +)f+ *%f# % &f* +f+# ++f +f (f*$ ( &f( +f) +f( +f&+ (#f& * &f*& +f)* +&f+ ++f) *f*+ !!注#综合评分e补骨脂素和异补骨脂素总含量=补骨脂素和异补骨脂素最大总含量i$ m蛇床子素含量=蛇床子素最大含量 i&$ m浸膏 得率=最大浸膏得率i$( 表 &!方差分析 变异来源 77 4 @7 N # +#f + #)f+ ++f%% C +$f** + $f&* )f%( > (f(( + &f&& f#$ 3 f# + +f%( 总变异 #f*) ( !!注#N $f$ !+$+ e*f$$ (
]$]&!验证试验!按上述较优工艺条件制备 ) 批样品$进行工艺验证$测定所得提取液中指标 性成分的含量$结果$补骨脂素含量为 f&( 0D -D d$>8If+g)异补骨脂素含量为 +f* 0D
-D
d
$>8I)f#g)蛇床子素含量为 +)f#( 0D -D d$>8I$f(%g)浸出物得率为 +)f+)g$
>8If*g( 可见按优化工艺进行提取$补骨脂 素%异补骨脂素%蛇床子素含量%浸出物得率均 取得较理想的结果( 表明该工艺合理% 稳定 可行( ][!+ 味药材提取工艺的优选 ][]!正交试验设计!根据处方 + 味药材的药物 性质及单因素考察结果$白芥子及何首乌 + 味药材
的提取以二苯乙烯苷含量和浸膏物得率为指标$采 用F * !) & 正交表进行试验$见表 (
表 !+ 味药材提取正交设计因素水平
水平
# C >
乙醇浓度=g 乙醇倍数 提取时间=?
)$( + &$ $f )$ + +
][]!正交试验结果与分析 实验结果采用综
合评分法分析试验结果$结果见表 #$方差分析
见表 %(
表 #!+ 味药材提取工艺的正交试验
;/f
出膏率
=g
二苯乙烯苷
=0D-D
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综合评分
++f% %f$(#f(+ + +)f$ %f+ ((f#(
) +)f* %f)) *$f$#
& +f)+ %f%* *&f+%
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# ++f# %f** *#f(+
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* *f$) %f( *f$$!!注#综合评分e二苯乙烯苷含量=二苯乙烯苷最大总含量i*$ m
浸膏得率=最大浸膏得率i$( -+)- 第 ) 卷第 * 期 +$$年 月 !!!!!! ! ! ! ! !!!!!! ! ! ! ! \/Vf)$ :SSWQ!*
9B6$+$$表 %!方差分析表 变异来源 77 4 @7 N # +f+) + #+f#+ )$f&+
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材$+$ $$+&!##&+#f 5JA-+-U,A-?@?I>MAD,QA-?@JD?Q>HHI?DQ?+JF@ET,.-U-D,@R>. S-AB?DAB?R?@,.E>H-R@ aJ4OKWB2 $ P:;LXRB2DW/ + $ Z4;LPR2.?W2 $) ! $ P_HLWRAQ2D + $ I4;LPWQVRB2D !f7.?<<(<=9?&%*&.B$ 7?;?+V;I-;J+%$;B$ 7?;?+V;()+$$ $$>?;-&)+fK;-D;&- :-$;)+<=@++%;& @+A;.&$ I%)*.?;()$$ $&$ >?;-&))fN;%$#=;(;&+A S<$E;&(<=@+A;.&(><(++$7?;?+V;I-;J+%$;B$7?;?+V;()+$$($ >?;-&
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