全 文 ：大黄５种饮片指纹图谱色谱峰的归属与比较
李丽，张村，肖永庆，林娜，刘春芳，逄镇，
李桂柳，陈东东，田国芳
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］　目的：对大黄不同饮片指纹图谱中色谱峰进行归属，比较各饮片化学成分的变化规律。方法：采用ＨＰＬＣ，甲醇
１％冰醋酸梯度洗脱，比较各饮片以及饮片与药材在２８０，４３０ｎｍ下，指纹图谱的变化情况。结果：大黄生、酒、醋片ＨＰＬＣ指纹
图谱较相似，均可归属２４个色谱峰，熟大黄饮片归属１９个色谱峰，大黄炭饮片可归属２２个色谱峰。４３０ｎｍ下，除熟大黄饮片
归属７个色谱峰外，其他饮片均可归属出８个色谱峰。结论：大黄生、酒、醋片指纹图谱较相似。熟大黄及大黄炭饮片与生片
相比，化学成分的组成及含量变化显著。
［关键词］　大黄；饮片；指纹图谱；归属
［收稿日期］　２００９０１２３
［基金项目］　国家自然科学基金重点项目（３０７３０１１１）
［通信作者］　肖永庆，研究员，博士生导师，Ｔｅｌ：（０１０）８４０４０２２１，
Ｅｍａｉｌ：ｘ．ｈｅｑｉ＠１６３．ｃｏｍ
　　大黄为中医临床上应用最为广泛的中药之一，为
蓼科植物掌叶大黄ＲｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍＬ．、唐古特大黄
Ｒ．ｔａｎｇｕｔｉｃｕｍＭａｘｉｍｅｘＢａｌｆ或药用大黄Ｒ．ｏｆｉｃｉｎａ
ｌｅＢａｉｌ的干燥根及根茎。常以不同的炮制品组方入
药，以发挥其独特的治疗作用。生大黄气味重浊，走
而不守，直达下焦，以攻积泻导滞、泻火解毒为主，泻
下作用峻烈，易伤胃气；大黄酒炙后泻下作用稍缓，并
借酒升提之性，引药上行，可清上焦实热；醋大黄泻下
作用减弱，以消积化瘀为主，用于食积痞满，症瘕癖
积；熟大黄经酒蒸后，泻下作用缓和，能减轻腹痛等副
作用，并增强了活血祛瘀的功效；大黄炭泻下作用极
弱，并有止血作用，用于大肠有积滞的大便下血［１］。
大黄化学成分复杂，主要含有蒽醌苷及苷元，蒽
酮类成分，二苯乙烯苷及其苷元、以及鞣质类等多种
化学成分。各饮片由于炮制工艺的不同，其化学成
分也发生了不同程度的变化，其内在物质基础的变
化，与其所独特的功效有着密切的关系。利用指纹
图谱可以较为全面的反映大黄各饮片化学成分的信
息，同时结合化学成分的归属，可以明确其物质基础
及其变化规律，对于揭示炮制改变大黄药性的科学
内涵具有重要的意义。
１　材料
Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪（Ｗａｔｅｒｓ２６９５Ｓｅｐａｒａ
ｔｉｏｎｓＭｏｄｕｌｅ，Ｗａｔｅｒｓ２９９６ＰＡＤ检测器，Ｅｍｐｏｗｅｒ数
据处理软件）；超声清洗器 ＫＱ５００ＤＢ（昆山市超声
仪器有限公司）；ＥＹＥＬＡ旋转蒸发器；甲醇为色谱
纯，水为纯净水；其他试剂均为分析纯。
实验用药材采自青海玉树，经中国中医科学院中
药研究所胡世林教授鉴定为掌叶大黄Ｒ．ｐａｌａｍａｔｕｍ
的根及根茎；供试饮片以掌叶大黄药材为样品，按照
《中国药典》、《全国中药炮制规范》相关项下的炮制
方法，分别制备成１０批大黄生片、酒炙片、醋炙片、熟
大黄片以及大黄炭片。
实验所用对照品儿茶素、表儿茶素（中国药品
生物制品检定所，批号分别为８７７２００００１，１１０８７８
２００１０２），其余均为本实验室分离制备并经 ＮＭＲ鉴
定。纯度达９０％以上。
２　方法与结果
２．１　色谱条件［２］　ＺｏｒｂａｘＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢＣ１８柱（４６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ保护柱，柱芯（３
ｍｍ×４ｍｍ）；流动相甲醇（Ａ）１０％冰醋酸溶液
（Ｂ）梯度洗脱，０～１０ｍｉｎ，５％～３０％Ａ；１０～４０ｍｉｎ，
３０％～６０％Ａ；４０～６０ｍｉｎ，６０％Ａ；６０～７０ｍｉｎ，６０％～
１００％Ａ；７０～７５ｍｉｎ，１００％Ａ；检测波长２８０ｎｍ，４３０
ｎｍ。柱温３０℃；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１。在此条件下，
不同大黄饮片均可得到较好分离（图１，２）。
２．２　供试品溶液的制备　取 ５种大黄饮片粉末
（过４０目筛）各０５ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，
分别精密加入甲醇２５ｍＬ，密塞，称重，超声提取１０
ｍｉｎ后，放冷，密塞，再称重，以甲醇补足减失的质
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Ａ．生大黄；Ｂ．酒大黄；Ｃ．醋大黄；Ｄ．熟大黄；Ｅ．大黄炭（图２～６同）。
图１　大黄饮片指纹图谱（２８０ｎｍ）
图２　大黄饮片指纹图谱（４３０ｎｍ）
量，摇匀，滤过，取续滤液，以微孔滤膜（０４５μｍ）滤
过，即得。
２．３　对照品溶液的制备　称取各对照品适量，加甲
醇制备成供试品溶液。
２．４　大黄各饮片指纹图谱色谱峰的归属及比较　
将各对照品溶液及大黄各饮片供试品溶液，分别进
行 ＨＰＬＣ测定。采用《中药色谱指纹图谱相似度评
价系统２００４１０版》对图谱进行处理，依据对照品
相对保留时间对大黄各饮片中色谱峰进行归属和比
较。在２８０ｎｍ下，大黄生、酒、醋片ＨＰＬＣ指纹图谱
中均可归属２４个色谱峰，熟大黄饮片归属１９个色
谱峰，大黄炭饮片可归属２２个色谱峰（图３）。
大黄５种炮制品的指纹图谱叠加图及镜像比较
图（图３，４），准确的反映了各饮片化学成分的变化情
况。２８０ｎｍ下，大黄生片与酒片、醋片的指纹图谱相
似。大黄熟片与生片相比，指纹图谱中色谱峰１２（没
食子酸），１３（大黄酸），１４（大黄素），１５（大黄酚），１６
（大黄素甲醚）的峰面积明显增加，其他色谱峰峰面积
均显著降低，其中色谱峰２（儿茶素），４（表儿茶素），
　　
１．没食子酸；２．儿茶素；３．表儿茶素；４．反３，５，４′三羟基苯乙烯
基４′ＯβＤ葡萄糖苷；５．没食子酸乙酯；６．４′羟基苯基２丁酮
４′ＯβＤ（６″没食子酰基）葡萄糖苷；７．４′羟基苯基２丁酮；８．
芦荟大黄素８Ｏ葡萄糖苷；９．二苯乙烯苷；１０．反３，５，４′三羟基
苯乙烯基４′ＯβＤ（６″Ｏ没食子酰基）葡萄糖苷；１１．大黄酸８
Ｏ葡萄糖苷；１２．番泻苷 Ａ；１３．二苯乙烯；１４．４′羟基苯基２丁酮
４′ＯβＤ［６″Ｏ（４羟基）桂皮酰基］葡萄糖苷；１５．邻二羟基苯；
１６．４′羟基苯基２丁酮４′ＯβＤ［２″Ｏ没食子酰基６″Ｏ（４″′羟
基）桂皮酰基］葡萄糖苷；１７．大黄素８Ｏ葡萄糖苷；１８．芦荟大黄
素３ＣＨ２ＯβＤ葡萄糖苷；１９．４′羟基苯基２丁酮４′ＯβＤ（６″
Ｏ桂皮酰基）葡萄糖苷；２０．芦荟大黄素；２１．大黄酸；２２．大黄素；
２３．大黄酚；２４．大黄素甲醚。
图３　大黄饮片指纹图谱色谱峰的归属（２８０ｎｍ）
５（没食子酸乙酯），６，７｛４′羟基苯基２丁酮４′Ｏβ
Ｄ［６″Ｏ（４羟基）桂皮酰基］葡萄糖苷｝，８，１０［４′
羟基苯基２丁酮４′ＯβＤ（６″Ｏ桂皮酰基）葡萄糖
苷］，１１几乎检测不到。大黄炭片与生片指纹图谱相
比，除８（大黄素），９（大黄酚），１０（大黄素甲醚）有所增
加外，其他色谱峰峰面积均显著降低甚至无法检测。
图４　大黄各饮片镜像比较（２８０ｎｍ）
另外４３０ｎｍ下，除熟大黄饮片归属７个色谱峰
外，其他饮片均可归属出８个色谱峰（图５）。大黄各
饮片４３０ｎｍ指纹图谱的比较也说明（图６），大黄生
片与酒片、醋片的指纹图谱相比，色谱峰的数量及峰
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面积均较相似。大黄熟片与生片指纹图谱相比，色谱
峰８（芦荟大黄素），９（大黄酸），１０（大黄素），１１（大黄
酚），１２（大黄素甲醚）的峰面积显著增加，但色谱峰
１，２，４，５，６，７，３（大黄酸８Ｏ葡萄糖苷）峰面积大幅降
低甚至检测不到。大黄炭片与生片相比，除色谱峰
１３（大黄素），１４（大黄酚），１５（大黄素甲醚）明显增加
外，其他色谱峰峰面积均显著降低甚至消失。
１．大黄酸８Ｏ葡萄糖苷；２．大黄素８Ｏ葡萄糖苷；３．芦荟大黄
素３ＣＨ２ＯβＤ葡萄糖苷；４．芦荟大黄素；５．大黄酸；６．大黄素；
７．大黄酚；８．大黄素甲醚。
图５　大黄饮片指纹图谱色谱峰的归属（４３０ｎｍ）
图６　大黄各饮片镜像比较（４３０ｎｍ）
２．５　大黄饮片与药材指纹图谱的比较　鉴于大黄
炮制成各种饮片后，化学成分发生了不同程度的变
化，本实验还对大黄生片和未经炮制的同来源掌叶
大黄药材进行了指纹图谱的比较，以观察药材炮制
成生片的过程中，化学成分的变化情况。
结果显示，２８０ｎｍ下主要有５个成分变化较显
著（图７）。其中，饮片中色谱峰１（没食子酸），２（未
知），４（４′羟基苯基２丁酮），５（大黄酸）的峰面积
与药材相比明显增加，其中又以４（４′羟基苯基２
丁酮）增加的幅度最大。其余色谱峰峰面积均有不
同程度降低。
Ａ药材；Ｂ饮片（图８同）。
图７　大黄药材与饮片镜像比较（２８０ｎｍ）
大黄生片与药材４３０ｎｍ的指纹图谱相比，有５
个成分变化较明显（图８）。其中，饮片中色谱峰１
（芦荟大黄素），２（大黄酸），３（大黄素），４（大黄
酚），５（大黄素甲醚）的峰面积明显增加，其他色谱
峰变化不明显。
图８　大黄药材与饮片镜像比较（４３０ｎｍ）
３　讨论
对大黄生、酒、醋片２８０ｎｍ指纹图谱中的２４个
色谱峰、４３０ｎｍ指纹图谱中的８个色谱峰进行了指
定，熟大黄饮片指纹图谱归属１９个色谱峰，大黄炭
饮片指纹图谱可归属２２个色谱峰。４３０ｎｍ下，除
熟大黄饮片归属７个色谱峰外，其他饮片均可归属
出８个色谱峰。
通过对大黄５种炮制品指纹图谱的比较，初步
明确了各种饮片化学成分的变化规律。大黄生片、
酒片及醋片的化学成分组成及含量较相近。熟片由
于炮制温度及时间最长，其化学成分变化也最为显
著，除没食子酸及５种游离蒽醌（芦荟大黄素、大黄
酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚）含量显著增加外，
其余成分均呈明显的下降趋势。大黄炭饮片的炮制
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温度最高，为３２０℃左右，因此除５种游离蒽醌含量
与生片相比有所增加外，其他成分均呈下降趋势，增
加的游离蒽醌可能是由相应的苷类成分转化而来。
另外，大黄药材及生片指纹图谱的比较结果显
示，二者最大的区别在于４′羟基苯基２丁酮、没食
子酸及５种游离蒽醌的含量呈明显升高趋势，而蒽
醌苷、苯丁酮苷等苷类成分则表现为不同程度的降
低。说明在饮片炮制过程中，受加热温度、时间等因
素的影响，部分鞣质、蒽醌苷、苯丁酮苷等成分受到
破坏，转变为没食子酸或相应的苷元。
　　不同的饮片具有不同的药理作用及临床疗效，
根源在于其特有物质基础。因此，探明不同饮片物
质基础的异同，不仅对于阐明饮片的炮制原理，揭示
饮片临床组方的依据，同时，对于进一步研究含大黄
中药复方的物质基础及其作用机制，均具有重要的
科学意义。
［参考文献］
［１］　龚千锋．中药炮制学［Ｍ］．北京：中国中医药出版社，２００３：
１７０．
［２］　张村，肖永庆，李丽，等．大黄不同饮片指纹图谱研究［Ｊ］．北京
中医药大学学报，２００９，３２（２）：１１８．
ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｎＨＰＬＣ
ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｆｉｖｅＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂａｌｐｉｅｃｅｓｆｒｏｍＲｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍ
ＬＩＬｉ，ＺＨＡＮＧＣｕｎ，ＸＩＡＯＹｏｎｇｑｉｎｇ，ＬＩＮＮａ，ＬＩＵＣｈｕｎｆａｎｇ，ＰＡＮＧＺｈｅｎ，ＬＩＧｕｉｌｉｕ，
ＣＨＥＮＤｏｎｇｄｏｎｇ，ＴＩＡＮＧｕｏｆａｎｇ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａｌＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｅａｎｄｃｏｍｐａｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｎｔｈｅＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｆｉｖｅＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂａｌｐｉｅｃｅｓｆｒｏｍＲａ
ｄｉｘｅｔＲｈｉｚｏｍａＲｈｅｉ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＨＰＬＣａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｃａｒｉｅｄｏｕｔｗｉｔｈｍｅｔｈｙｌａｌｃｏｈｏｌ１％ ｇｌａｃｉａｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄａｓｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ，ｃｈａｎｇｅｓ
ｉｎｆｉｖｅＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂａｌｐｉｅｃｅｓａｎｄｍｅｄｉｃｉｎａｌｍａｔｅｒｉａｌｕｎｄｅｒ２８０ｎｍａｎｄ４３０ｎｍｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆｔｈｅｎｏ
ｐａｒｃｈｅｄｐｉｅｃｅｓ，ｔｈｅｌｉｑｕｏｒａｎｄｔｈｅｖｉｎｅｇａｒｒｏａｓｔｓｐｉｅｃｅｓｗｅｒｅｓｉｍｉｌａｒ，２４ｐｅａｋｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｕｎｄｅｒ２８０ｎｍ１９ｏｒ２２ｐｅａｋｓｃｏｕｌｄｂｅ
ｉｎｄｉｃａｔｅｄｉｎｔｈｅｂｒａｉｓｉｎｇｗｉｔｈｌｉｑｕｏｒａｎｄｔｈｅｃｈａｒｉｎｇｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｕｎｄｅｒ４３０ｎｍ，８ｐｅａｋｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｅｘｃｅｐｔｔｈｅｂｒａｉｓｉｎｇｗｉｔｈｌｉｑ
ｕｏｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆｔｈｅｎｏｐａｒｃｈｅｄｐｉｅｃｅｓ，ｔｈｅｌｉｑｕｏｒａｎｄｔｈｅｖｉｎｅｇａｒｒｏａｓｔｓｐｉｅｃｅｓａｒｅｓｉｍｉｌａｒｗｈｉｌｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｎ
ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｂｒａｉｓｉｎｇｗｉｔｈｌｉｑｕｏｒａｎｄｔｈｅｃｈａｒｉｎｇａｒｅｒｅｍａｒｋａｂｌｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｒｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍ；Ｃｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂａｌｐｉｅｃｅｓ；ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ
［责任编辑　周　驰］
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