全 文 :青蒿主要农艺性状与单株产量和青蒿素含量及
总量间相关分析
廖凯,吴卫,郑有良,黎开强,刘志刚
(四川农业大学 农学院,四川 雅安 625014)
[摘要] 目的:本试验旨在研究青蒿主要农艺性状间及与单株产量和青蒿素含量及总量间相关关系,为高产高青蒿素含
量新品种选育提供理论依据和参考。方法:对四川野生和引种的青蒿资源主要农艺性状、单株产量、青蒿素含量和总量进行
考察和测定,并分析了各性状间相关关系。结果:单株茎秆干重与单株产量间呈极显著正相关,分枝数和茎直径与单株产量
间为显著正相关;花蕾期、始花期和盛花期则与青蒿素含量间呈极显著正相关;始花期和盛花期与单株青蒿素总量间呈极显
著正相关;单株茎秆干重、秆直径和花蕾期与单株青蒿素总量间呈显著正相关。紫红色茎秆青蒿的青蒿素含量和总量显著高
于深绿色茎秆者。进一步通过逐步回归分析,得到单株产量的最优回归方程为 Y=006121-000008X1+030378X3-
000051X4-000031X5(F=2015,P<00001),青蒿素含量的最优回归方程为Y=-145849-000099X1-024079X3+
013362X6-000719X7+001454X9(F=4655,P<00001),单株青蒿素总量的最优回归方程为 Y=-267001-
000249X1+098873X3+030037X6+001113X9(F=2262,P<00001)。结论:选育高产、高青蒿素含量的青蒿新品种时
应重点选择茎秆紫色、粗壮,株高较高,分枝数和花期适中,分枝角度较小的材料。
[关键词] 青蒿;农艺性状;单株产量;青蒿素;相关分析
[收稿日期] 20081023
[基金项目] 四川省育种攻关项目(2006yzgg12)
[通信作者] 吴卫,Tel:(0835)2882108,Email:ewuwei@sicau.
edu.cn
青蒿 ArtemisiaannuaL.是我国传统中药材,主
治暑邪发热、阴虚发热、疟疾寒热和湿热黄疸等证。
从青蒿中提取的青蒿素,以其高效低毒等特点成为
抗疟特效药[1],是我国仅有的2个收入世界药典的
中药之一,更是中国唯一被世界卫生组织(WHO)认
可的按西药研究标准研究开发的中药。青蒿素还对
血吸虫病、艾滋病并发症、红斑狼疮和肿瘤等也有很
好疗效。青蒿素类相关化合物主要存在于青蒿叶和
花中,在茎中仅少量发现,在种子和根中没有发现。
卫云等对山东引种的青蒿,在不同生育时期进行青
蒿素含量测定,认为蕾期青蒿素含量最高[2],韦霄
等也报道了青蒿在蕾期青蒿素含量较高[3]。目前,
从青蒿中提取青蒿素是获取青蒿素的主要来源。青
蒿适应性强,分布广,全世界均有分布,除我国少部
分地区外,青蒿素含量普遍低于05%,无生产利用
价值。不同地区青蒿资源产量以及青蒿素含量差异
较大,岑丽等对比不同纬区及不同栽培条件的青蒿
中青蒿素含量,发现我国种植的青蒿其青蒿素含量
由南往北逐渐降低[4]。朱卫平等报道了青蒿一些
生物学性状同青蒿素含量的关系,认为青蒿裂叶越
细,其青蒿素含量越高[5],但对青蒿主要农艺性状
与单株产量和青蒿素含量间的关系研究尚未见报
道。四川青蒿野生分布广泛,但对其产量以及青蒿
素含量情况研究不多。目前,已有不少企业在四川
引种推广青蒿,考察在四川地区野生和引种的青蒿
主要农艺性状和单株产量,分析其青蒿素含量,并探
讨彼此间相关关系,将对青蒿资源开发、保护和新品
种的选育有着重要意义。
1 材料与方法
1.1 材料
供试材料经四川农业大学农学院吴卫教授鉴定
为青蒿A.annua,采集于四川和重庆等地(表 1)。
其中四川12份,重庆3份,新疆和海南各1份。
1.2 田间试验
本试验于2007年春季在四川农业大学教学农
场试验地进行。试验地前作红花,土壤为砂质土壤,
pH650,土壤含水量284%,有机质246%,有效
氮 2329mg·kg-1,有效磷3995mg·kg-1,有效
钾 25995mg·kg-1。采用完全随机区组试验
设计。试验材料于1月14日播种,4月18-19日
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表1 试验材料来源及其茎色
No. 采集号 采集地 生境 茎色
1 L0605 四川省雅安市雨城区多营镇 野生、路边、向阳坡地 深绿
2 L0614 新疆自治区石河子市 野生、林地 深绿
3 L0626 四川农业大学新区农场 野生、路边斜坡、杂草 深绿
4 L0627 四川省雅安市雨城区大兴乡 野生、路边、农田杂草 深绿
5 L0632 重庆市酉阳县板溪乡 野生、林地、路边斜坡 紫红
6 L0638 四川省成都市龙泉驿区 野生、溪边 深绿
7 L0639 重庆市南川 重庆南川药物所选育黄花蒿2号 紫红
8 L0641 四川省乐山市五通桥区 野生、农田杂草 深绿
9 L0642 四川省遂宁市大英县蓬莱镇 野生、路边、溪边 深绿
10 L0643 四川省阿坝州汶川县威州镇 野生、阴生 紫红
11 L0644 四川省雅安市雨城区姚桥镇 野生、路边斜坡 深绿
12 L0645 四川省安岳县 野生、路边 深绿
13 L0646 四川省成都市新都区 野生、路边斜坡 深绿
14 L0647 四川省威远县 野生、林地 深绿
15 L0648 重庆市合川市 野生、路边 深绿
16 L0649 四川省宜宾市 野生、溪边、阴生 深绿
17 L0651 海南省 野生、林地 深绿
移栽,小区面积1440m2,以60cm×80cm窝距栽
种,每小区30株。种后常浇水保持土壤的湿润,其
他管理措施同大田生产。在花蕾期,于晴朗的下午
14:00时左右按小区每份材料随机选择10株采收
青蒿叶片和小枝,晒干、称重、计为单株产量(kg)。
考察的其他性状包括茎秆颜色、株高(cm),分枝高
度(cm)、单株茎秆干重(kg)、枝干夹角(度)、分枝
数(枝)、茎基部直径(简称茎直径,cm)、花蕾期
(d)、始花期(d)、盛花期(d)和青蒿素单株总量(g/
株)等。
1.3 青蒿素含量测定
1.3.1 仪器与试剂 Agilent公司1100型高效液相
色谱仪(含脱气机、四元梯度泵、自动进样器进样、柱
温箱、DAD检测器),Sartorius公司 BP211D型电子天
平,Milipope公司 MiliQ型纯水仪。青蒿素对照品
(纯度为998%),由 ALDRICH公司提供;甲醇为色
谱纯,由 TEDIA公司提供。NaOH固体,NaH2PO4·
2H2O固体,Na2HPO4·12H2O固体等试剂为分析纯。
1.3.2 样品处理 分别称取 17份青蒿材料各 3
份,约25g于具塞三角瓶中,精密加入无水乙醇25
mL,放置3h,超声提取30min,过滤,精密吸取滤液
1mL于10mL量瓶中,加02% NaOH溶液4mL,
摇匀,置 50℃水浴中反应 30min,流水冷却,加
008mol·L-1的醋酸稀释至刻度,摇匀,在检测条
件下检测。
1.3.3 色谱条件 HypersilODSC18色谱柱(40
mm×250mm,5μm),流动相 CH3OH(NaH2PO4
Na2HPO4)缓冲液(55∶45),流速10mL·min
-1,柱
温35℃,紫外检测波长260nm。
1.3.4 数据处理 所有数据分析都在 EXCEL和
DPS[6]中完成。
2 结果与分析
2.1 青蒿主要农艺性状表现、单株产量及青蒿素含
量和总量情况
青蒿主要农艺性状方差分析结果表明,除分枝
高度和分枝数外,青蒿各材料其他农艺性状间差异
均达显著或极显著水平,说明试验材料在多数农艺
性状间均存在真实的遗传差异。9个农艺性状的
RSD在 759% ~7550%。以分枝高度的 RSD最
大,为 7550%,而盛花期的变异幅度最小,仅
759%。说明分枝高度变异丰富,有较大的选择空
间,而盛花期变异范围小,选择空间也小。试验结果
还表明,单株产量及青蒿素含量和总量的RSD也较
大,分别为 4070%,3250%,5610%。说明不同
的青蒿资源,其单株产量以及青蒿素含量和总量间
差异均较大。
在所有供试材料中,单株产量最高的为 L06
45,其来自四川省安岳县,平均每株产 023kg干
叶,较平均单株产量高6291%,其青蒿素质量分数
也较高,为 0559%;产量最低的材料来自海南
(L0651),其单株产量不到平均单株产量的一半,
为007kg,其青蒿素含量也较低,无商业应用价值。
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青蒿素含量最高的材料为来自重庆市酉阳县板溪乡
的野生材料L0632,其青蒿素达0762%,较平均青
蒿素质量分数高6466%,其单株产量也较高(015
kg);其次是 L0639,为重庆南川药物研究所选育的
青蒿品种黄花2号,其青蒿素质量分数为0720%,
单株产量为016kg;青蒿素含量最低的材料为L06
42,来自四川省遂宁市大英县蓬莱镇,其青蒿素
0250%,仅为平均青蒿素含量的5408%。单株青
蒿素总量最高的为 L0645(129g/株),其次为
L0639(129g/株),分别较平均单株青蒿素总量高
9816%,7665%;最低的为 L0627,仅为平均单株
青蒿素总量的5684%(表2)。
表2 青蒿主要农艺性状表现与单株产量、青蒿素含量和总量情况及方差分析
No.
株高
/m
分枝高度
/m
单株茎秆
干重/g
枝干夹角
/度
分枝数
/枝
秆直径
/cm
花蕾期
/d
始花期
/d
盛花期
/d
单株产量
/kg
青蒿素质
量分数/%
单株青蒿素
总量/g/株
L0605 19657 157 045 607 800 214 2050 2173 2270 013 0340 044
L0614 17960 40 030 450 757 183 2303 2410 2527 009 0553 050
L0626 23173 757 029 527 660 199 2080 2173 2290 010 0387 039
L0627 24053 340 041 570 820 205 2083 2210 2330 011 0338 037
L0632 20870 723 050 540 823 203 2577 2707 2820 015 0762 114
L0638 24813 523 061 600 853 242 2080 2210 2360 015 0439 066
L0639 26213 630 060 467 873 260 2567 2683 2803 016 0720 115
L0641 24907 730 048 560 810 252 2057 2137 2260 014 0302 042
L0642 23783 317 068 537 750 191 2100 2197 2310 020 0250 050
L0643 24230 347 055 483 893 294 2307 2423 2533 014 0593 083
L0644 26337 323 052 503 937 229 2400 2480 2603 014 0448 063
L0645 24330 340 066 491 880 275 2343 2463 2580 023 0559 129
L0646 24143 683 063 567 830 227 2063 2177 2297 016 0322 052
L0647 28073 787 064 577 960 249 2270 2337 2467 019 0445 085
L0648 2250 1113 049 437 860 213 2100 2197 2327 014 0325 046
L0649 23013 20 036 470 647 191 2403 2533 2620 010 0541 054
L0651 22773 227 023 363 810 201 2377 2453 2540 007 0540 038
F区组间 224 238 180 055 027 462 053 117 182 168 115 2291
F处理间 5482) 187 2471) 6662) 172 4712) 23302) 18952) 19782)33432) 243 44432)
注:1,2)分别表示5%和1%显著水平(表3同)。
从茎色来看,供试材料中,茎秆颜色为紫红的材
料有3份,分别采自重庆市酉阳县板溪乡,重庆市南
川和四川省汶川县,3份材料的青蒿素含量是所有
材料中最高的。14份深绿色茎秆青蒿与3份紫红
色茎秆青蒿的青蒿素含量作 t检验(P=0013),表
明紫红色茎秆青蒿的青蒿素含量显著高于深绿色茎
秆青蒿。深绿色茎秆与紫红色茎秆青蒿的单株青蒿
素总量作t检验(P=0020),表明紫红色茎秆青蒿
的单株青蒿素总量显著也高于深绿色茎秆者。
比较四川野生和引种的青蒿资源各主要农艺性
状以及单株产量、青蒿素含量和单株青蒿素总量,可
以看出四川野生青蒿平均单株产量为015kg,而引
种的青蒿平均单株产量为013kg,差异不大,且引
种材料L0632,L0639的单株产量在所有材料中也
属较高者;而四川野生青蒿的青蒿素平均质量分数
为0414%,平均单株青蒿素总量为0620g/株;引
种的青蒿青蒿素平均质量分数为0580%,较前者
平均高4018%,其平均单株青蒿素总量为 0726
g/株,也高于野生青蒿。且青蒿素含量和总量最高
的2份材料均为引种者。
2.2 主要农艺性状间及与单株产量、青蒿素含量和
总量间相关分析
9个主要农艺性状间相关系数分析结果表明,
分枝数与茎直径、花蕾期与始花期、花蕾期与盛花
期、始花期与盛花期分别呈极显著正相关,以始花期
与盛花期间相关系数最大,达09966(表3)。除枝
干夹角与花蕾期呈显著负相关外,株高与单株茎秆
干重、株高与分枝数、株高与秆直径、株高与盛花期、
单株秆干重与分枝数、单株茎秆干重与秆直径、均呈
显著正相关,其余各性状间相关关系均不显著。
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表3 青蒿主要农艺性状间及与单株产量、青蒿素含量和总量间相关系数
相关系数 X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9
株高(X1)
分枝高度(X2) 02106
单株茎秆干重(X3) 055051) 01936
枝干夹角(X4) 01832 00800 04579
分枝数(X5) 053291) 01997 057521) 01021
秆直径(X6) 058281) 01057 058141) 01255 067162)
花蕾期(X7) 00569 -01456 -00387 -050361) 01929 01226
始花期(X8) 00135 -01734 -00264 -04689 01609 01200 099362)
盛花期(X9) 00490 -01265 00184 -04414 02059 01514 099032) 099662)
单株产量(Y1) 04704 01836 092842) 03741 049461) 053331) 00068 00957 00462
青蒿素含量(Y2) -00824 -00927 -00802 -04084 01469 02250 091322) 093252) 093572)
单株青蒿素总量(Y3) 02723 00895 055191) -00247 04700 057881) 067741) 069762) 072752)
由表3还可知,各主要农艺性状与单株产量均
为正相关,其中单株茎秆干重与单株产量呈极显著
正相关,相关系数达09284,分枝数与单株产量、
茎直径与单株产量间为显著正相关。其余各性状与
单株产量间相关均未达显著水平。主要农艺性状与
青蒿素含量间相关分析结果则表明,株高、分枝高
度、单株茎秆干重和枝干夹角均为负相关,但均未
达到显著水平。分枝数等其余农艺性状与青蒿素含
量间均为正相关。其中,花蕾期、始花期和盛花期
与青蒿素含量间相关系数达极显著水平,相关系数
分别高达09132,09325,09357。主要农艺性
状与单株青蒿素总量除枝干夹角呈负相关,其余各
主要农艺性状与单株青蒿素总量均为正相关。其中
单株青蒿素总量与始花期和盛花期呈极显著正相
关,与单株茎秆干重、秆直径和花蕾期等性状间呈
显著正相关。
2.3 主要农艺性状对单株产量和青蒿素含量及总
量的多元回归分析
2.3.1 主要农艺性状对单株产量的多元回归分析
以青蒿的株高等9个主要农艺性状为自变量,青蒿
单株产量为因变量,应用 DPS软件进行逐步回归分
析得出单株产量的最优回归方程为 Y=006121-
000008X1+030378X3-000051X4-000031X5
(F=2015,P<00001)。表明株高、单株秆干重、
分枝数和枝干夹角是影响青蒿单株产量的主要因
子。在这4个性状中,在一定范围内,当其他3个性
状固定时,株高每增加1cm,单株产量减少约008
g;单株秆干重每增加 1kg,单株产量增加约 030
kg;枝干夹角每减少1,单株产量增加约051g;分
枝数每减少1,单株产量增加约031g。
2.3.2 主要农艺性状对青蒿素含量的多元回归分析
以青蒿的株高等9个主要农艺性状为自变量,青蒿
素含量为因变量,应用 DPS软件进行逐步回归分析
得出青蒿素含量的最优回归方程为Y=-145849-
000099X1-024079X3+013362X6-000719X7+
001454X9(F=4655,P<00001)。表明株高、单株
秆干重、秆直径、现蕾期和盛花期是影响青蒿素含量
的主要因子。在这5个性状中,在一定范围内,当其
他5个性状固定时,株高每减少1cm,青蒿素增加
000099%;单株秆重每减少 1kg,青蒿素增加
024079%;秆直径每增加 1cm,青蒿素增加
013362%;花 蕾 期 每 推 迟 1d,青 蒿 素 增 加
000719%;盛 花 期 每 推 迟 1d,青 蒿 素 增 加
001454%。
2.3.3 主要农艺性状对单株青蒿素总量多元回归分
析 以青蒿的株高等9个主要农艺性状为自变量,单
株青蒿素总量为因变量,应用 DPS软件进行逐步回
归分析得出单株青蒿素总量的最优回归方程为
Y=-267001-0002 49X1 +0988 73X3 +
030037X6+001113X9(F=2262,P<00001)。
表明株高、单株秆干重、秆直径和盛花期是
影响单株青蒿素总量的主要因子。在这 5个性
状中,在一定范围内,当其他 5个性状固定时,株
高每减少 1cm,单株青蒿素总量增加 000249
g;单株秆重每减少 1kg,单株青蒿素总量增加
098873g;秆直径每增加1cm,单株青蒿素总量
增加030037g;盛花期每推迟 1d,单株青蒿素
总量增加001113g。
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3 结论与讨论
青蒿地区差异很大,具有显著的生态地域性。
郑丽屏和陈大霞等分别应用 RAPD和 SRAP技术对
采自不同地区的青蒿进行多样性分析,发现青蒿资
源在DNA分子水平上存在丰富的遗传多样性[78]。
刘卫今等对不同地区青蒿进行形态学研究,结果表
明不同青蒿种质间存在丰富的多样性[9]。胡向荣
等报道了各地青蒿资源青蒿素含量存在较大差
异[10]。本试验通过同田种植不同来源青蒿材料,结
果发现四川引种和野生的不同青蒿资源的分枝高
度、单株产量以及单株茎秆干重等农艺性状和青蒿
素含量的RSD较大,进一步说明不同来源青蒿确实
存在明显遗传和表型性状差异。
青蒿资源分布广,但仅在我国部分地区青蒿素
含量较高。曹有龙、唐其展和钟国跃等曾分别报道
了人工栽培青蒿、广西青蒿和川东南、鄂西、湘西、黔
东北和北京等地青蒿资源的青蒿素质量分数分别为
001% ~060%,04% ~085%,0057% ~
1022%等[1113]。本试验所采集的青蒿材料,青蒿
素质量分数在0250% ~0762%。总体上,四川野
生青蒿的青蒿素含量普遍较低,但引种的优良青蒿
种质在四川种植后,其青蒿素含量仍较高。其中,以
重庆市酉阳县板溪乡的野生材料 L0632(0762%)
最高,黄花蒿2号 L0639(0720%)次之,2份材料
的产量也较高。据此认为,四川省可以作为一些优
良青蒿品种的推广地区。上述2份材料还可以作为
重点选育对象,经过逐代选育,以期得到更优的适合
四川栽培的青蒿新品种。
黄正方等曾报道过青蒿茎秆颜色与青蒿素含量
间的关系,认为紫红茎秆青蒿的青蒿素含量高于深
绿色茎秆[14],由本试验结果也发现,紫红色茎秆型
青蒿的青蒿素含量和单株青蒿素总量较高。此外,
本试验还发现花期与青蒿素含量和总量间呈极显著
正相关,即迟花期型青蒿的青蒿素含量和总量通常
较高。这对于从有茎色差异和花期差异的同一种群
青蒿中选育高青蒿素含量的品种有一定的指导意
义。
逐步回归分析进一步表明随着青蒿单株茎秆干
重增加,单株产量会按一定比例增加,而随着株高、
分枝数和枝干夹角的增加,青蒿单株产量则会减少。
由此在选育高产青蒿新品种(系)时,应重点选择枝
秆粗壮,分枝数和株高适中,分枝角度较小的材料。
相关分析结果还表明,花期与青蒿素含量间为显著
正相关,即花期越迟,其青蒿素含量越高,逐步回归
分析结果也表明,随着单株茎秆直径的增加,盛花期
的推迟,青蒿素含量会相应增加;但随株高、单株茎
秆干重的增加则会按一定比例减少。由以上分析可
知,在选育高青蒿素含量的青蒿新品种(系)时,应
注意对花期迟,枝干夹角小的材料的选择。回归分
析结果表明株高、单株茎秆干重、秆直径和盛花期是
影响单株青蒿素总量的主要因子。由此,选育单株
青蒿素总量高的新品种应着重选择茎秆粗壮、植株
比较高大的迟花型材料。
在实际生产中,对农户而言,产量高的品种其创
造的经济价值更高;且花期适当,有助于提高复种指
数;分枝角度小,有利于密植。但就抗疟疾新药的角
度来说,青蒿素含量高的品种更适合在工业化生产
中应用。工厂采用青蒿素含量高的原材料不仅投入
的成本低,且在工业化生产过程中节约的成本更多。
为兼顾农户和企业的利益,在选育青蒿新品种时,应
以青蒿素含量为主要指标,同时尽可能兼顾产量性
状,重点选育茎秆粗壮、呈紫色,株高较高,分枝数和
花期适中,分枝角度较小的材料。
[参考文献]
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第34卷第18期
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Correlationanalysisonmainagronomiccharacters,yieldperplant,
artemisininpercentagecontentsandtotalartemisinincontentperplant
ofArtemisiaannua
LIAOKai,WUWei,ZHENGYouliang,LIKaiqiang,LIUZhigang
(ColegeofAgronomySichuanAgriculturalUniversity,Ya'an625014,China)
[Abstract] Objective:Tostudytherelationshipsamongthemainagronomiccharacters,yieldperplant,contentofartemisinin
ofArtemisiaannua,andprovidethetheoreticalbasisforbreedingtheA.annuavarietieswithhighyieldandhighartemisinincontent.
Method:Themainagronomiccharacters,yieldperplant,artemisinincontentofthewildandcultivatedA.annuaofSichuanprovince
wereinvestigatedanddetermined,andthecorelatedrelationshipsamongthemwereanalyzed.Result:Itwasshowedthattheweightof
driedstemperplanthadverysignificantlypositivecorelationwiththeyieldperplant,andthenumberofprimarybranches,thediame
terofstemhadsignificantlypositivecorelationwiththeyieldperplant.Theflowerbudstage,firstfloweringstageandfulbloomstage
hadsignificantlypositivecorelationwiththeartemisinincontent.Thefirstfloweringstageandfulbloomstagehadsignificantlypositive
corelationwiththetotalartemisinincontentperplant.Theweightofdriedstemperplant,thediameterofstemandtheflowerbudstage
hadsignificantlycorelationwiththetotalartemisinincontentperplant.A.annuawiththepurplestemhadsignificanthigherartemisi
nincontentthanthatwiththegreenstem.Throughthemultipleregressionanalysis,theclassicmultipleregressionequationoftheyield
perplantwasgainedasY=0.06121-0.00008X1+0.30378X3-0.00051X4-0.00031X5(F=20.15,P<0.0001),theclassic
multipleregressionequationoftheartemisinincontentasY=-1.45849-0.00099X1-0.24079X3+0.13362X6-0.00719X7+
0.01454X9(F=46.55,P<0.0001),theclassicmultipleregressionequationofthetotalartemisinincontentperplantasY=
-2.67001-0.00249X1+0.98873X3+0.30037X6+0.01113X9(F=22.62,P<0.0001).Conclusion:Theplantwithpurple,
thickandstrongstem,higherplantheight,moderateprimarybranchesnumberandbloomstage,smalstembranchangleshouldbese
lectedforabreedingnewA.annuavarietieswithhighyieldandartemisinincontent.
[Keywords] Artemisiaannua;agronomiccharacter;artemisinincontent;yieldperplant;corelationanalysis
[责任编辑 吕冬梅]
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