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Studies on chemical constituents from leaves of Cassia alata

对叶豆黄酮类化学成分研究


目的:分离鉴定对叶豆Cassia alata中的化学成分,为其药效物质研究奠定基础。方法:采用溶剂萃取、正相硅胶色谱、凝胶色谱等方法进行分离;应用1DNMR,IR,UV,MS等谱学方法进行结构鉴定。结果:分离得到12个化合物,分别鉴定为金圣草素(1),山柰酚(2),槲皮素(3),5,7,4′ 三羟基二氢黄酮(4),山柰酚 3 O β D 葡萄糖苷(5),山柰酚 3 O 葡萄糖 (6→1) O 葡萄糖苷(6),17 羟基三十四烷(7),正三十二烷醇(8),正三十醇(9),棕榈酸二十六酯(10),硬脂酸(11),棕榈酸(12)。结论:除化合物1,2外,其余10个化合物均是首次从对叶豆中分离得到。

Objective: To isolate and identify chemical constituents of Cassia alata.  Method: Compounds were separated and purified by column chromatography with silica gel and Sephadex LH 20, elucidated by spectroscopic methods including 1D and 2D NMR, IR and MS techniques.  Result: Twelve compounds were isolated from C. alata, which were identified as chrysoeriol (1), kaempferol (2), quercetin (3), 5,7,4′ trihydroflavanone (4), kaempferol 3 O β D glucopyranoside (5), kaempferol 3 O β D glucopyranosyl (1→6) β D glucopyranoside (6), 17 hydrotetratriacontane (7), n dotriacontanol (8), n triacontanol (9), palmitic acid ceryl ester (10), stearic acid(11), palmitic acid (12).  Conclusion: Compounds 3 12 were isolated from C. alata for the first time.


全 文 :对叶豆黄酮类化学成分研究
刘 安1,徐丽珍2,邹忠梅2,杨世林2
(1.中国中医科学院 中药研究所,北京 100700;
2.中国医学科学院 药用植物研究所,北京 100193)
[摘要] 目的:分离鉴定对叶豆Casiaalata中的化学成分,为其药效物质研究奠定基础。方法:采用溶剂萃取、正相硅胶
色谱、凝胶色谱等方法进行分离;应用1DNMR,IR,UV,MS等谱学方法进行结构鉴定。结果:分离得到12个化合物,分别鉴定
为金圣草素(1),山柰酚(2),槲皮素(3),5,7,4′三羟基二氢黄酮(4),山柰酚3OβD葡萄糖苷(5),山柰酚3O葡萄糖(6
→1)O葡萄糖苷(6),17羟基三十四烷(7),正三十二烷醇(8),正三十醇(9),棕榈酸二十六酯(10),硬脂酸(11),棕榈酸
(12)。结论:除化合物1,2外,其余10个化合物均是首次从对叶豆中分离得到。
[关键词] 对叶豆;化学成分;黄酮
[收稿日期] 20081105
[基金项目] 教育部留学回国人员科研启动基金
[通信作者] 刘安,Tel:(010)640144112938,Email:la62@163.
com,徐丽珍,Email:xulizhen2002@hotmail.com
  对叶豆CasiaalataL.是豆科决明属植物,又名
有翅决明、非洲木通,其辛,温,入心、脾二经,可以杀
虫止痒,主治神经性皮炎、牛皮癣、湿疹、皮肤瘙痒、
疮疖疼痛,多鲜用,外用。在傣族医药中,对叶豆多
用于治疗皮肤病。VilasenorIM,SomchiMN和
CrocketCO等课题组均报道对叶豆的提取物具有
抗炎、抗菌作用[13]。这些研究结果部分说明了对叶
豆治疗皮肤病的作用机制。为了寻找对叶豆治疗皮
肤病的物质基础,本课题组进行了系统的化学成分
研究。该文主要报道其中6个黄酮类化学成分和6
个其他类化合物。
1 材料
FisherJohns熔点测定仪(温度未校正);Bruker
ARX400和600核磁共振仪(TMS内标);ZAB2F,
ZABSPEC,Peikinelmer983G红外仪,KBr压片;色
谱硅胶用青岛海洋化工厂产品,100~200目;Sepha
dexLH20(Pharmacia);溶剂均为分析纯。对叶豆
原料采自云南省西双版纳市,由中国医学科学院药
用植物研究所林余霖研究员鉴定为C.alata。
2 提取分离
对叶豆的叶(5kg,粗粉)用95%乙醇回流提取
(5倍量体积,每次2h,共3次),过滤,减压蒸干溶
剂,浸膏分散溶于水中,分别用石油醚、醋酸乙酯、正
丁醇萃取。各部分分别经闪柱分段,其中石油醚部
分用石油醚丙酮梯度洗脱,醋酸乙酯部分用三氯甲
烷甲醇梯度洗脱。分段后各部分经反复硅胶柱色
谱,同时配合 TLC选择合适的流动相和检查纯度,
部分化合物利用 SephadexLH20分离纯化。其中
石油醚部分经石油醚丙酮(10∶1)洗脱得到的3个
亚部分:第1亚部分经石油醚醋酸乙酯(30∶1)洗脱
得到化合物10;第2亚部分经石油醚丙酮(30∶1)
洗脱得到化合物7~9;第3亚部分经石油醚丙酮
(10∶1)洗脱得到化合物11,12。醋酸乙酯部分经三
氯甲烷甲醇(5∶1)洗脱得到的5个部分:第1个亚
部分经三氯甲烷甲醇(10∶1)洗脱,并经 Sephadex
LH20(甲醇洗脱)纯化,得到化合物1,2;第2个亚
部分经三氯甲烷甲醇(8∶1)洗脱,并经 Sephadex
LH20(甲醇洗脱)纯化,得到化合物4,3。醋酸乙酯
部分经三氯甲烷甲醇(3∶1)洗脱得到3个亚部分:
第1个亚部分经三氯甲烷甲醇(4∶1)洗脱得到化合
物5;第1个亚部分经三氯甲烷甲醇(3∶1)洗脱得
到化合物6。
3 结构鉴定
化合物 1 淡黄色粉末,mp>270℃,EIMS
m/z(%)300[M]+(90),270(100),241(80),213。
1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:690(1H,s,H3),
619(1H,d,J=20Hz,H6),651(1H,d,J=20
Hz,H8),751(2H,m,H2′,6′),694(1H,d,J=
89Hz,H5′),384(3H,s,OCH3);
13 CNMR
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 April,2009
(DMSOd6,100MHz)数据与文献[4]报道一致,因
而鉴定为金圣草素。
化合物2 黄色粉末,mp>270℃,EIMSm/z
(%)286[M]+(100),258(20),229(15),213
(10),184(5),153(10),143(10),121(25),108
(7),93(10)。1HNMR(DMSOd6,400MHz)与
13C
NMR(DMSOd6,100MHz)数据与文献[5]报道一
致,因而鉴定为山柰酚。
化合物 3 黄色粉末,EIMSm/z302[M]+
(100),301,285,274,257,245,229,200,153,137,
128。1HNMR(CD3OD,600 MHz)与
13CNMR
(CD3OD,150MHz)数据与文献[5]报道一致,因而
鉴定为槲皮素。
化合物 4 无色结晶,EIMSm/z272[M]+
(100),255,229,179,166,153,120。1 HNMR
(CD3OD,600MHz)δ:533(1H,dd,J=132,30
Hz,H2),268(1H,dd,J=174,30Hz,H3′),
310(1H,dd,J=174,132Hz,H3′),589(1H,d,
J=24Hz,H6),587(1H,d,J=24Hz,H8),
680(2H,dd,J=66,24Hz,H3′,5′),730(2H,
dd,J=66,24Hz,H2′,6′)。13CNMR(CD3OD,150
MHz)数据与文献[4]报道一致,因而鉴定为5,7,4′
三羟基二氢黄酮。
化合物5 黄色针晶,mp242~244℃,EIMS
m/z286,258,257,229,213,184,143,121。1HNMR
(DMSOd6,400MHz)δ:621(1H,d,J=20Hz,H
6),644(1H,d,J=20Hz,H8),803(2H,dd,J=
90,26Hz,H2′,6′),690(2H,dd,J=90,26
Hz,H3′,5′),546(1H,d,J=73Hz,H1″),317
(1H,m,H2″),321(1H,m,H3″),308(2H,m,H
4″,5″),357(1H,dd,J=115,52Hz,H6″a),331
(1H,m,H6″b);13CNMR(DMSOd6,100MHz)δ:
1562(C2),1332(C3),1774(C4),1612(C
5),986(C6),1641(C7),936(C8),1563(C
9),1040(C10),1209(C1′),1308(C2′,6′),
1151(C3′,5′),1599(C4′),1008(C1″),742
(C2″),765(C3″),699(C4″),775(C5″),608
(C6″)。以上数据与文献[6]报道一致,因而鉴定
为山柰酚3OβD葡萄糖苷。
化合物6 无色针晶,EIMSm/z283[M-162×
2]+,257,229,213,143,121。1HNMR(DMSOd6,400
MHz)δ:619(1H,d,J=20Hz,H6),641(1H,d,
J=20Hz,H8),802(2H,d,J=88Hz,H2′,6′),
688(1H,d,J=88Hz,H3′,5′),537(1H,d,J=
73Hz,H1″),319(1H,m,H2″),328(1H,m,H
3″),317(1H,m,H4″),296(1H,m,H5″),385
(1H,d,J=11Hz,H6″a),345(1H,dd,J=11,6
Hz,H6″b),403(1H,d,J=77Hz,H1),284
(1H,m,H2),321(1H,m,H3),296(1H,m,H
4),284(1H,m,H5),351(1H,d,J=11Hz,H
6a),333(1H,m,H6b);13CNMR(DMSOd6,100
MHz)δ:1565(C2),1332(C3),1774(C4),
1611(C5),987(C6),1641(C7),937(C8),
1564(C9),1040(C10),1208(C1′),1309(C
2′,6′),1151(C3′,5′),1599(C4′),1010(C
1″),741(C2″),762(C3″),697(C4″),765(C
5″),680(C6″),1031(C1),734(C2),762
(C3),697(C4),765(C5),608(C6)。以
上数据与文献[7]报道一致,因而鉴定为山柰酚3
O葡萄糖(6→1)O葡萄糖苷。
化合物7 白色粉末,mp74~76℃,EIMSm/z
44,57,71,83,97,111,125,139,152,166,180,194,
211(25),225(77),239(100),255(77),269(25),
281(10),295,309,393,406,422,434,450。结合1H
NMR(CDCl3,400MHz),
13CNMR(CDCl3,100MHz)
推断该化合物为17羟基三十四烷。
化合物8 白色粉末,mp82~84℃,EIMSm/z
448[M]+,420,292,364,195,139,125,111,97。结
合1HNMR(CDCl3,400MHz)和
13CNMR(CDCl3,
100MHz)推断该化合物鉴定为三十二烷醇。
化合物9 白色粉末,mp82~84℃,EIMSm/z
421[M+H]+,393,365,265,251,237,195,153,
139,125,111,137,97(100),83。结合1HNMR
(CDCl3,400MHz)与
13CNMR(CDCl3,100MHz)推
断该化合物鉴定为正三十醇。
化合物 10 白色蜡状物,mp79~82℃,
(CH3)。ESIMSm/z619[M-H]
-;EIMSm/z257
[620-363,C15H31CO2H +H]
+,364[620-
C15H31CO2H]
+(麦氏重排),43,57,71,83,97,111,
139,166,195,209,229,285,313,341,369,392;结
合1HNMR(CDCl3,400MHz)与
13CNMR(CDCl3,
100MHz)推测该化合物为正十六烷酸二十六酯。
化合物 11 白色粉未,mp46~48℃;EIMS
m/z284[M]+,256,213,185,129,73。IRcm-1:
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3000,2900,2845,1715,1380,1375,1330,1225。
与对照品混合熔点不下降,TLCRf一致。依据以上
数据,该化合物鉴定为硬脂酸。
化合物 12 白色粉未,mp54~56℃;EIMS
m/z256[M]+,227,213,185,171,157,129,115,97。
IRcm-1:3000,2925,2850,1710,1380,1375,
1320,1220,与对照品IR一致。与对照品混合熔点
不下降,TLCRf一致。依据以上数据,该化合物鉴
定为棕榈酸。
[参考文献]
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StudiesonchemicalconstituentsfromleavesofCassiaalata
LIUAn1,XULizhen2,ZOUZhongmei2,YANGShilin2
(1.InstituteofChineseMateriaMedica,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100700,China;
2.InstituteofMedicinalPlantDevelopment,ChineseAcademyofMedicalSciences,Beijing100193,China)
[Abstract] Objective:ToisolateandidentifychemicalconstituentsofCasiaalata.Method:Compoundswereseparatedand
purifiedbycolumnchromatographywithsilicagelandSephadexLH20,elucidatedbyspectroscopicmethodsincluding1Dand2D
NMR,IRandMStechniques.Result:TwelvecompoundswereisolatedfromC.alata,whichwereidentifiedaschrysoeriol(1),
kaempferol(2),quercetin(3),5,7,4′trihydroflavanone(4),kaempferol3OβDglucopyranoside(5),kaempferol3OβDglu
copyranosyl(1→6)βDglucopyranoside(6),17hydrotetratriacontane(7),ndotriacontanol(8),ntriacontanol(9),palmitic
acidcerylester(10),stearicacid(11),palmiticacid(12).Conclusion:Compounds312wereisolatedfromC.alataforthefirst
time.
[Keywords] Casiaalata;chemicalconstituents;flavone
[责任编辑 王亚君]
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