全 文 ：麝香酮对谷氨酸所致 ＰＣ１２细胞损伤的保护
及作用机制研究
孙蓉１，张作平２，黄伟３，吕丽莉１，尹建伟２
（１．山东省中医药研究院，山东 济南 ２５００１４；
２．济南杏林生物技术有限公司，山东 济南 ２５０１０１；３．山东中医药大学，山东 济南 ２５０３５５）
［摘要］ 目的：考察麝香酮对谷氨酸引起 ＰＣ１２细胞损伤的保护作用及作用机制。方法：将大鼠嗜铬细胞瘤细胞株
（ｐｈｅｏｃｈｒｏｍｏｃｙｔｏｍａｃｅｌｓ，ＰＣ１２）分为正常组、模型组、麝香酮１００，１０，０１μｍｏｌ·Ｌ－１高、中、低剂量组和１μｍｏｌ·Ｌ－１尼莫地
平组，用５００μｍｏｌ·Ｌ－１谷氨酸造成ＰＣ１２细胞损伤，采用药物预处理给药方法，ＭＴＴ法测定细胞存活率，流式细胞仪测定细胞
凋亡率，采用Ｆｕｒａ３／ＡＭ为荧光指示剂，用Ｖｅｃｔｏｒ２１４２０多标记免疫分析仪研究麝香酮对谷氨酸所致损伤ＰＣ１２细胞内Ｃａ２＋的
作用，流式细胞仪检测线粒体跨膜电位，考察不同浓度麝香酮对ＰＣ１２细胞的保护作用。结果：麝香酮可明显提高谷氨酸诱导
的ＰＣ１２细胞还原能力，抑制该细胞ＬＤＨ的释放，提高细胞存活率；抑制兴奋性氨基酸所引起的细胞内Ｃａ２＋含量的升高；降低
ＰＣ１２细胞的凋亡百分率，并呈剂量相关性。结论：麝香酮可抑制谷氨酸诱导的ＰＣ１２细胞凋亡，其作用机制可能与抑制细胞内
钙超载，稳定细胞线粒体跨膜电位有关。
［关键词］ 麝香酮；谷氨酸；ＰＣ１２细胞；凋亡；线粒体膜电位；Ｃａ２＋
［收稿日期］ ２００９０１２０
［基金项目］ 山东省自然科学基金项目（Ｙ２００３Ｃ０２）；济南市重大
科技招标项目（０６４０３６）
［通信作者］ 孙蓉，硕士生导师，研究员。Ｔｅｌ：１３６０５３１１７９９，Ｆａｘ：
（０５３１）８２９６８４７３，Ｅｍａｉｌ：ｓｕｎｒｏｎｇ１０７＠１６３．ｃｏｍ
谷氨酸（ｇｌｕｔａｍａｔｅ，Ｇｌｕ）是中枢神经系统含量最
高的一种兴奋性氨基酸，在维持神经元正常信号传
递过程中起重要作用［１］。Ｇｌｕ大量释放或被靶组织
所摄取或清除抑制，导致神经细胞损伤，现代研究证
实，脑缺血及ＣＩＲＩ和 ＤＮＤ过程中的病理变化均与
Ｇｌｕ神经毒性有关，Ｇｌｕ具有作用靶点高并介导其他
一系列神经毒性和损伤机制［２３］。
在神经元损伤保护作用的体外筛选实验中，作
者对氰化钠加缺糖致ＰＣ１２细胞缺血损伤［４］和对连
二亚硫酸钠造成 ＰＣ１２细胞缺氧损伤［５］进行了研
究，结果表明，麝香酮对缺血、缺氧和缺糖导致的细
胞损伤具有明显的保护作用，提示对缺血性脑损伤
有保护作用。同时在动物生理和病理状态下麝香酮
跨血脑屏障转运功能实验中发现有明显的药理活
性，也证实了其芳香开窍的功效。为了考察麝香酮
对神经元细胞的保护作用，本试验以大鼠嗜铬细胞
瘤细胞株（ｐｈｅｏｃｈｒｏｍｏｃｙｔｏｍａｃｅｌｓ，ＰＣ１２）为对象，
用５００μｍｏｌ·Ｌ－１谷氨酸造成细胞损伤模型，考察
不同浓度麝香酮对 ＰＣ１２细胞的保护作用及其作用
机制探讨。
１ 材料
１．１ 药品与试剂
麝香酮（纯度＞９７０％，济南宏济堂制药有限责
任公司，批号２００５０７０８）。尼莫地平（山东新华制药
厂，批号 ２００４１０１５）。谷氨酸（Ｇ８４１５）噻唑蓝（ｔｈｉａ
ｚｏｌｙｌｂｌｕｅ，ＭＴＴ），Ｆｕｒａ２／ＡＭ，碘化丙啶（ＰＩ），核糖核酸
酶（ＲＮａｓｅＡ），Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ１２３（Ｒｈ１２３）购自 Ｓｉｇｍａ公
司；小牛血清（中国农业科学院），ＤＭＥＭ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ
公司）；乳酸脱氢酶试剂盒（南京生物工程公司）。
１．２ 细胞株
ＰＣ１２细胞是大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株，中
国科学院上海细胞生物学研究所提供。
１．３ 仪器
ＸＩＤＰ超净台（苏州实验动物器材厂）。ＸＳＺＤ
倒置显微镜（重庆光学仪器厂）。ＢＢ１６型二氧化碳
培养箱（德国 ＨＥＲＡＥＵＳ）。ＵＶ２１００紫外可见分光
光度计（中美合资上海ｕｎｉｎｃ仪器有限公司）。酶标
仪Ｂｉｏ２Ｒａｄ５５０型。ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ流式细胞仪（Ｂｅｃ
ｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｉｏｎ公司）。１４２０Ｖｉｃｔｏｒ２多标记免疫分析
仪（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒＬｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅ公司）。ＨＨ２数显恒温
箱（新华仪器有限公司）。
·１０７１·
第３４卷第１３期
２００９年７月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １３
Ｊｕｌｙ，２００９
２ 方法
２．１ ＰＣ１２细胞的培养
复苏后的 ＰＣ１２细胞接种于培养瓶中进行培
养，培养液为含１０％的小牛血清的 ＤＭＥＭ培养液，
在３７℃ ５％ＣＯ２培养箱中培养。隔天传代细胞，待
细胞长满瓶底后，倾去培养液，用ＤＨａｎｋｓ液轻轻荡
洗２次，加入适量的０２５％胰蛋白酶消化，然后用
含１０％小牛血清的ＤＭＥＭ培养液终止消化，用吸管
轻轻吹打数次，使细胞在瓶底分散成单层细胞悬液，
根据实验所需调整细胞密度，接种培养板中培养，以
备实验时使用。
２．２ 用药观察
细胞用含２ｍｍｏｌ·Ｌ－１谷氨酰胺和１０％的小牛
血清的ＤＭＥＭ培养基，在３７℃ ５％ＣＯ２培养箱中培
养。隔天传代细胞在倒置显微镜下观察均匀贴壁生
长时加入５００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｇｌｕ，常规继续培养。在加
入Ｇｌｕ前３０ｍｉｎ加入０１，１０，１００μｍｏｌ·Ｌ－１的
麝香酮和１μｍｏｌ·Ｌ－１尼莫地平（Ｎｉｍ）进行药物预
处理。
２．３ 观察指标
２．３．１ ＭＴＴ测定及其抑制率 在９６孔培养板中
每孔接种２００μＬ共１×１０４个细胞，常规培养１ｄ后
处理细胞，培养２０ｈ后，每孔加入ＭＴＴ溶液（１０ｍｏｌ
·Ｌ－１）２０μＬ，３７℃孵育４ｈ，终止培养，小心吸弃培
养板中的液体，每孔加入 １５０μＬＤＭＳＯ，振荡 １０
ｍｉｎ，使结晶物充分溶解。在酶标仪上以５７０ｎｍ波
长测定各孔吸光度（Ａ）。
２．３．２ ＬＤＨ活性测定 由于细胞损伤至死亡过程
中ＬＤＨ释放入培养上清液中，上清液 ＬＤＨ水平反
映出细胞的损伤或死亡程度。损伤作用发生后的
２４ｈ，收集培养液０５ｍＬ，测定细胞培养液中 ＬＤＨ
活性，根据下式计算各给药组对 ＰＣ１２细胞损伤模
型的抑制率。
抑制率＝
ＬＤＨ模型组 －ＬＤＨ给药组
ＬＤＨ模型组 －ＬＤＨ正常组
×１００％
２．３．３ 细胞凋亡率测定 各组细胞以 ＰＢＳ洗涤
后，用胰酶消化，离心弃去胰酶液，用ｐＨ７４ＰＢＳ液
制成单细胞悬液，调整细胞密度为 ５×１０５个／ｍＬ。
取１００μＬ样本液中加入５００μＬ荧光染色液（５０ｍｇ
·Ｌ－１碘化丙啶，和５０ｍｇ·Ｌ－１核糖核酸酶），避光
３７℃孵３０ｍｉｎ［３］，用流式细胞仪采集数据进行亚二
倍体峰分析，以 Ｇ０～Ｇ１期前特征性亚二倍体峰
（ｓｕｂＧ１）所占比例计算细胞凋亡率。
２．３．４ 细胞内钙测定 细胞经 ＤＭＥＭ洗涤后加
Ｃａ２＋荧光指示剂Ｆｕｒａ２／ＡＭ，３７℃孵育３０ｍｉｎ，再次
洗涤后，用１４２０Ｖｅｃｔｏｒ２多标记免疫分析仪在３４０～
３８０ｎｍ激发波长条件下进行检测。培养与９６孔板
上的ＰＣ１２细胞长满单层后，加入 Ｆｕｒａ２／ＡＭ（终浓
度５ｍｍｏｌ·Ｌ－１）于３７℃孵箱中孵育６０ｍｉｎ，负载后
的细胞以含０２％的牛血清白蛋白的 Ｈａｎｋｓ液洗２
次。分别加入含５００μｍｏｌ·Ｌ－１谷氨酸、５００μｍｏｌ·
Ｌ－１谷氨酸 ＋不同浓度麝香酮、５００μｍｏｌ·Ｌ－１谷氨
酸＋１μｍｏｌ·Ｌ－１Ｎｉｍ的ＤＭＥＭ培养液１００μＬ，孵育
２，４，６，８，１０，１２ｈ，用１４２０Ｖｉｃｔｏｒ２多标记免疫分析仪
分别以３４０，３８０ｎｍ为激发波长，５１０ｎｍ为发射波长，
测定荧光强度并计算荧光比值（Ｆ３４０／Ｆ３８０）。
２．３．５ 细胞线粒体跨膜电位测定 将不同处理后
的ＰＣ１２细胞用体积分数０２５％胰蛋白酶消化，收
集１×１０６个细胞，经ＰＢＳ清洗２次，与１μｍｏｌ·Ｌ－１
Ｒｈ１２３在３７℃共同孵育３０ｍｉｎ，ＰＢＳ清洗２次，用
流式细胞仪检测其荧光强度，以处理组细胞的荧光
强度与正常细胞的比值为相对跨膜电位。
２．４ 统计学方法
采用ＳＰＳＳ１１５统计软件对各组数据进行采用
两样本均数比较的ｔ检验，采用 珋ｘ±ｓ表示，Ｐ＜００５
为有显著性差异。
３ 结果
３．１ 对ＭＴＴ比色的影响
加入５００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｇｌｕ能导致细胞损伤，使细
胞对 ＭＴＴ摄取能力明显降低，即在５７０ｎｍ处的 Ａ
显著降低，麝香酮高、中、低浓度处理后的细胞可以
不同程度提高Ａ，与模型组比较均有极显著性差异，
提示麝香酮能够提高细胞的生存率，且高低浓度之
间有显著性差异（表１）。
表１ 麝香酮对谷氨酸致ＰＣ１２损伤细胞的影响
（Ａ，珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别 浓度／μｍｏｌ·Ｌ－１ Ａ５７０
正常 － １１２８±０１０２１）
模型 ０３１５±００４０
麝香酮 １００ ０９３０±０１３０１）
１０ ０８２４±０１１４１）
０１ ０６９４±０１４３１，３）
尼莫地平 １０ ０８０４±０１０４１，２）
注：与模型组比较１）Ｐ＜０００１；与麝香酮高剂量组比较２）Ｐ＜
００１，３）Ｐ＜０００１（表２同）。
·２０７１·
第３４卷第１３期
２００９年７月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １３
Ｊｕｌｙ，２００９
３．２ 对乳酸脱氢酶活性的影响
加入５００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｇｌｕ能导致细胞损伤，使细
胞大量释放 ＬＤＨ，使培养介质的 ＬＤＨ活性明显升
高。麝香酮高、中、低浓度处理后的细胞可以不同程
度抑制ＬＤＨ的释放，与模型组比较均有极显著性差
异，麝香酮高浓度组抑制率达６７０８％，中浓度组抑
制率达６７０８％，低浓度组抑制率达６７０８％，尼莫
地平组抑制率达 ５９７９％；提示麝香酮对 Ｇｌｕ所致
ＰＣ１２细胞损伤有减弱Ｇｌｕ的细胞毒性作用（表２）。
表２ 麝香酮对谷氨酸致ＰＣ１２细胞损伤的保护作用
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别 浓度／μｍｏｌ·Ｌ－１ ＬＤＨ抑制率／％
正常 － １２６１±１７１１）
模型 ７０５８±１１０３
麝香酮 １００ ３１７０±５８６１）
１０ ４３９２±１０１１１，２）
０１ ４５８０±９２６１，３）
尼莫地平 １０ ３５９２±４２３１）
３．３ 对细胞凋亡的影响
Ｇｌｕ作用２４ｈ后，ＰＣ１２细胞出现凋亡，用流式
细胞术进行亚二倍体峰分析，以Ｇ０～Ｇ１期前特征性
亚二倍体峰所占比例计算细胞凋亡率，正常组凋亡
率为１３６％，模型组凋亡率可达到４１３３％，麝香酮
高、中、低剂量组凋亡率分别为 １７４５％，２３５７％，
２７１２％，均可显著降低 ＰＣ１２细胞的凋亡率，提示
麝香酮可减少Ｇｌｕ对ＰＣ１２细胞凋亡的诱导。
３．４ 对线粒体跨膜电位的影响
Ｇｌｕ处理的ＰＣ１２细胞荧光强度明显升高（Ｐ＜
０００１）；给予麝香酮后，高、中浓度组荧光强度则显
著低于模型组，有极显著性差异（Ｐ＜０００１），麝香
酮低浓度组呈显著性差异（Ｐ＜００５），表明麝香酮
具有显著的降低 ＰＣ１２细胞内游离钙超载作
用（图１）。
注：与模型组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜０００１。
图２ ＰＣ１２细胞内钙测定
３．５ Ｇｌｕ作用
２４ｈ后，ＰＣ１２细胞内 Ｒｈ１２３荧光强度下降
（Ｐ＜０００１），表明线粒体跨膜电位下降，提示 Ｇｌｕ
对ＰＣ１２细胞的线粒体造成了损伤。经过不同浓度
的麝香酮预处理后，细胞相对线粒体跨膜电位有明
显的提高（Ｐ＜０００１），提示麝香酮对 Ｇｌｕ引起的线
粒体损伤有明显的保护作用（表３）。
表３ 麝香酮对Ｇｌｕ引起的线粒体损伤的保护作用
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 浓度／μｍｏｌ·Ｌ－１ ＭＭＰ／％
正常 － １０００±００３１１）
模型 ０３９５±００７６
麝香酮 １００ ０７２２±００８９１）
１０ ０５７０±００９５１，２）
０１ ０５５７±００７８１，３）
尼莫地平 １０ ０５７３±００８０１，２）
注：与模型组比较１）Ｐ＜０００１；与麝香酮高剂量组比较２）Ｐ＜
００１，３）Ｐ＜０００１。
４ 讨论
Ｇｌｕ是中枢神经系统主要的兴奋性神经递质，
在脑缺血造成的神经元损伤过程中发挥重要作用。
脑缺血时多种机制参与了 Ｇｌｕ释放的的调节，如
Ｃａ２＋依赖性的出胞式释放、Ｇｌｕ转运体调节释放、水
肿诱发释放和受体调节释放等［６］。Ｇｌｕ是脑组织内
主要的兴奋性氨基酸（ＥＡＡ），过量则对神经元有毒
性作用［７］。脑缺血时，有Ｇｌｕ大量释放，其兴奋毒性
是神经细胞变性坏死的重要原因之一［８］。Ｇｌｕ神经
毒性是由ＧｌｕＲ介导。根据药理学特征，将受体分
为ＮＭＤＡＲ，ＫＡＲ，ＡＭＰＡＲ，ＬＡＰ４Ｒ和反式 ＡＣＰＤ
Ｒ５个亚型。在脑缺血时 ＥＡＡ产生的早期兴奋毒
性主要是通过 ＫＡＲ和 ＡＭＰＡＲ，而迟发性损伤主
要是通过ＮＭＤＡＲ这一配体门控性 Ｃａ２＋通道来实
现。Ｇｌｕ可通过多种机制引起神经细胞内钙超载，
使神经细胞内钙失衡，引起神经细胞凋亡。另外，
Ｇｌｕ神经毒性可致 ＰＣ１２细胞 ＮＭＤＡＲ表达增强和
ＣＢ表达下降，导致离子通道开放，使得更多 Ｃａ２＋进
入细胞内进而加重了神经细胞损伤［９］。线粒体是
细胞能量代谢的主要部位，对细胞内 Ｃａ２＋有一定的
缓冲作用。线粒体内Ｃａ２＋累积，可直接或间接损伤
线粒体膜，造成膜电位下降，所以 ＥＡＡ是导致脑损
伤一个早期最主要的因素。
本研究发现麝香酮可对抗 Ｇｌｕ引起的 Ｃａ２＋浓
·３０７１·
第３４卷第１３期
２００９年７月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １３
Ｊｕｌｙ，２００９
度升高、ＬＤＨ释放增多、线粒体膜电位下降，通过
不同程度的提高 ＭＴＴ吸光度、降低 ＬＤＨ释放和降
低 ＰＣ１２细胞内游离钙来抑制谷氨酸诱导的 ＰＣ１２
细胞细胞凋亡，其对细胞的保护作用与浓度密切
相关，实验结果表明，麝香酮高、中、低不同浓度之
间有显著性差异。因此，麝香酮对过量谷氨酸通
过 ＮＭＤＡ受体介导的神经元内 Ｃａ２＋超载，继而级
联细胞内许多酶激活，细胞膜磷脂代谢异常而最
终导致细胞死亡的病理过程呈现明显的保护
作用。
［参考文献］
［１］ ＴｅｌｆｏｒｄＷＧ，ＫｉｎｇＬＥ，ＦｒａｋｅｒＰＪ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ
ｉｎｄｕｃｅｄＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｍｏｕｓｅｔｈｙｍｏｃｙｔｅｓｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ
［Ｊ］．ＣｅｌＰｒｏｌｉｆ，１９９１，２４（５）：４４７．
［２］ ＬｉｕＷＢ，ＷａｎｇＹＰ．ＭａｇｅｓｉｕｍｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍａｔｅＢｉｎｈｉｂｉｔｓｈｙｐｏｘｉａ
ｉｎｄｕｃｅｄｃａｌｃｉｕｍｉｎｆｌｕｘａｎｄｎｉｔｉｃｏｘｉｄｅｒｅｌｅａｓｅｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌ
［Ｊ］．ＡｃｔａＰｈａｒｍａｃｏｌＳｉｎ，２００１，２２（１２）：１１３５．
［３］ ＳｈｉｍｉｚｕＳ，ＥｇｕｃｈｉＹ，ＫａｍｉｋｅＷ，ｅｔａｌ．Ｂｃｌ２ｂｌｏｃｋｓｌｏｓｓｏｆｍｉ
ｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｗｉｔｈＩＣＥｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓａｃｔｓａｔａｄｉｆｅｒ
ｅｎｔｓｔｅｐｄｕｒｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｄｅａｔｈｉｎｄｕｃｅｄｂｙｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｃｈａｉｎｉｎ
ｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，１９９６，１２（１）：２１．
［４］ 孙蓉，张作平，任海勇，等．麝香酮对氰化钠加缺糖致 ＰＣ１２细
胞缺血损伤的保护作用［Ｊ］．中药药理与临床，２００７，２３（６）：８．
［５］ 孙蓉，衣银萍，吕丽莉，等．麝香酮对连二亚硫酸钠造成ＰＣ１２细
胞缺氧损伤的保护作用［Ｊ］．中药药理与临床，２００８，２４（１）：１５．
［６］ 梅和珊，王永利．脑缺血时谷氨酸释放机制［Ｊ］．中国药理学通
报，２００５，２１（４）：３９３．
［７］ ＣｈｏｉＤＷ．Ｅｘｃｉｔｏｘｉｃｃｅｌｄｅａｔｈ［Ｊ］．ＮｅｕｒｏＢｉｏｌ，１９９２，２３：１２６１．
［８］ 吴彦，孙建宁，于绍坤，等．黄连解毒汤有效部位对培养大鼠皮
层神经元谷氨酸损伤的保护作用［Ｊ］．北京中医药大学学报，
２００４，２７（３）：５０．
［９］ 吴南，冯华，朱刚，等．谷氨酸毒性损伤致 ＰＣ１２细胞 ＮＭＤＡＲ
与ＣＢ表达的变化［Ｊ］．重庆医学，２００３，３２（２）：１３７．
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｓａｎｄｍａｃｈａｎｉｓｍｏｆｍｕｓｋｏｎｅｏｎ
ｐｈｅｏｃｈｒｏｍｏｃｙｔｏｍａｃｅｌｉｎｊｕｒｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｇｌｕｔａｍａｔｅ
ＳＵＮＲｏｎｇ１，ＺＨＡＮＧＺｕｏｐｉｎｇ２，ＨＵＡＮＧＷｅｉ３，ＬＶＬｉｌｉ１，ＹＩＮＪｉａｎｗｅｉ２
（１．ＳｈａｎｄｏｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＡｃａｄｅｍｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎａｎ２５００１４，Ｃｈｉｎａ；
２．ＪｉｎａｎＸｉｎｇｌｉｎＢｉｏｌｏｇｙＴｅｃｈｏｎｏｌｏｇｙＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｊｉｎａｎ２５０１０１，Ｃｈｉｎａ；
３．ＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎａｎ２５０３５５，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｇｌｕｔａｍａｔｅ（Ｇｌｕ）ｉｎｄｕｃｅｄＰＣ１２ｃｅｌａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｆ
ｍｕｓｃｏｎｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＰＣ１２ｃｅｌｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｓｉｘｇｒｏｕｐｓ：ｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐ（Ｎｏｒｍａｌ），ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｉｎｊｕｒｅｄｂｙｇｌｕｔａｍａｔｅ
（Ｇｌｕ），ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅｇｒｏｕｐ（Ｎｉｍ）ａｎｄｍｕｓｋｏｎｅｇｒｏｕｐｓ（Ｍｕｓ）ｏｆｈｉｇｈ，ｍｉｄｄｌｅａｎｄｌｏｗｄｏｓｅｓ．ＴｈｅＰＣ１２ｃｅｌｓｗｅｒｅｐｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｏｒ
ｗｉｔｈｏｕｔｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｍｕｓｋｏｎｅｆｏｒ３０ｍｉｎａｎｄｔｈｅｎｅｘｐｏｓｅｄｔｏｇｌｕｔａｍａｔｅ．ＭＴＴａｓｓａｙｆｏｒｃｅｌｓｕｒｖｉｖａｌ，ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅ
ｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｐｏｐｔｏｔｉｃｃｅｌｓ，ＤＣＦａｓｓａｙｆｏｒｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ（ＲＯＳ）ａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃａｓｓａｙｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｍｉ
ｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｉｎＰＣ１２ｃｅｌ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＰＣ１２ｃｅｌｄａｍａｇｅ，ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆ［Ｃａ２＋］，ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙＧｌｕ
ｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄａｆｔｅｒｂｅｉｎｇａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｗｉｔｈｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＭｕｓｋｏｎｅｉｎｈｉｂｉｔｅｄＧｌｕｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎＰＣ１２ｃｅｌｓ．Ｔｈｅ
ｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｉｎｔｒａｃｅｌｕｌａｒＣａ２＋ｏｖｅｒｌｏａｄａｎｄｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒａｌｍｅｍｂｒａｎｃｅｐｏｔｅｎｔｉａｌ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｍｕｓｃｏｎｅ；ｇｌｕｔａｍａｔｅ；ＰＣ１２ｃｅｌｓ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅｐｏｔｅｎｔｉａｌ；Ｃａ２＋
［责任编辑 古云侠］
·４０７１·
第３４卷第１３期
２００９年７月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １３
Ｊｕｌｙ，２００９