全 文 ：磷素对怀牛膝耐铜毒性的影响研究
王新民１，２，陈士林２，魏志华１，介晓磊１
（１．郑州牧业工程高等专科学校，河南 郑州 ４５００１１；
２．中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所，北京 １００１９３）
［摘要］　目的：通过施磷（Ｐ）来调控怀牛膝对铜（Ｃｕ）的吸收和累积，防止怀牛膝过量吸收重金属Ｃｕ。方法：采用２因素
完全设计，用自制ＰＶＣ管栽培。结果与结论：Ｃｕ处理间、Ｐ处理间以及Ｃｕ，Ｐ交互间怀牛膝生物量差异都达到显著水平，土壤
中Ｐ，Ｃｕ均为１００ｍｇ·ｋｇ－１时生物量最大；低Ｃｕ可以增加怀牛膝产量，Ｃｕ超过２００ｍｇ·ｋｇ－１后，怀牛膝产量、质量均下降，但
对药材中活性成分齐墩果酸和脱皮甾酮的含量无影响。Ｐ的施入可以减轻高Ｃｕ对植株的毒害，怀牛膝产量增加，重金属 Ｃｕ
含量降低，但是当土壤Ｃｕ超过２００ｍｇ·ｋｇ－１后，怀牛膝药材中Ｃｕ高于２００ｍｇ·ｋｇ－１的限度，因此要生产出合格的怀牛膝药
材，种植基地土壤中Ｃｕ一定要低于２００ｍｇ·ｋｇ－１。
［关键词］　怀牛膝；铜；磷
［收稿日期］　２００８０９０４
［基金项目］　河南省杰出青年基金项目（０７４１００５１００１８）；中国博士
后科学基金项目（２００７０４１０６１６）
［通信作者］　陈士林，Ｔｅｌ：（０１０）６２８９９７００，Ｅｍａｉｌ：ｋｉｒｋ１２３＠１６３．
ｃｏｍ
［作者简介］　王新民，博士，副教授，从事药用植物栽培研究，Ｅ
ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉｎｍｉｎｄｒ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．ｃｎ
　　中药材中重金属含量过高一直是限制我国中药
材出口的一个瓶颈［１２］。怀牛膝为苋科牛膝属植物
牛膝ＡｃｈｙｒａｎｔｈｅｓｂｉｄｅｎｔａｔａＢｌｕｍｅ．的根，有补肝肾，
强筋骨，祛瘀通经，引血下行的作用，是河南道地药
材，为著名的“四大怀药”之一，有近千年的种植历
史，然而由于当地药农为了追求产量，又缺乏 ＧＡＰ
种植方面的知识，在施肥和管理过程中具有很大的
盲目性，生产牛膝的品质往往达不到标准。作者课
题组通过在怀牛膝道地产区２年的调查和取样检
测，发现高铜（Ｃｕ）含量的猪粪以及高 Ｃｕ杀菌剂的
大量施用，使得本地区耕层土壤中 Ｃｕ大量富集，个
别地块全Ｃｕ已经达３５０ｍｇ·ｋｇ－１；对产区１５个点
所产的怀牛膝药材的测定结果中，有８个点的药材
含Ｃｕ量超过２０ｍｇ·ｋｇ－１。磷（Ｐ）是维持作物生长
的三大要素之一，是许多植物组织结构的重要组成
部分，Ｐ肥的大量施用也是当地药农获得高产的一
个措施。有关 Ｐ与重金属间的交互作用的研究已
很多［３４］。但是关于 Ｐ，Ｃｕ交互作用对怀牛膝生长
的影响尚未见报道。本实验采用自制 ＰＶＣ管土培
方法，研究了 Ｐ素对怀牛膝耐重金属 Ｃｕ毒性的影
响，旨在为通过施 Ｐ肥来调控怀牛膝对 Ｃｕ的吸收
和累积，以期能够防止怀牛膝过量吸收重金属 Ｃｕ，
为建立符合国家及国际标准的怀牛膝生产技术规范
提供理论依据。
１　材料与方法
１１　土壤及供试作物　土壤取自河南武陟怀牛膝
道地产区耕层（０～２０ｃｍ）无污染土壤，母质为黄河
冲积物发育的石灰性潮土，质地轻壤，砂粒３２６％，
粉粒３７２％，黏粒３０２％，有机质１０８ｇ·ｋｇ－１，ｐＨ
７８５（土水比为１∶１０），ＣＥＣ７２６ｃｍｏｌ·ｋｇ－１，全 Ｐ
１６４０４ｍｇ·ｋｇ－１，全 Ｋ９５０２ｍｇ·ｋｇ－１，全 Ｃｕ
２８８２ｍｇ·ｋｇ－１，ＯｌｓｅｎＰ１１９５ｍｇ·ｋｇ－１，可交换性
Ｋ１０３５２ｍｇ·ｋｇ－１，ＣａＣｌ２提取Ｃｕ０２５ｍｇ·ｋｇ
－１，供
试作物为当地药农广泛种植牛膝品种风筝棵。
１２　试验设计　试验采用２因素完全设计，Ｐ取２
个水平（０，１００ｍｇ·ｋｇ－１风干土），分别记为Ｐ０，Ｐ１００；
Ｃｕ取５个水平（０，１００，２００，４００，６００ｍｇ·ｋｇ－１风干
土），分别记为 Ｃｕ０，Ｃｕ１００，Ｃｕ２００，Ｃｕ４００，Ｃｕ６００。土壤风
干，过２ｍｍ筛。
试验所用 ＰＶＣ管（内径为１１０ｃｍ，长度为１０
ｍ）埋于地下，上端露出地面５ｃｍ。ＰＶＣ管下部分
（０～８０ｃｍ）装土１２５ｋｇ，上部分（８０～９５ｃｍ）装土
２０ｋｇ，上部分土壤按照试验设计分别加入相应量的
Ｃｕ（ＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ）和Ｐ（ＫＨ２ＰＯ４），每个ＰＶＣ管中均
加入 ２４０ｍｇＮ（以尿素形式加入）和 ２００ｍｇＫ
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（以Ｋ２ＳＯ４形式加入），４次重复。沉化１５ｄ。２００５年
７月２２日用精选牛膝种子直接播种，每个ＰＶＣ管接
近中心点播５粒，１５ｄ时间苗至１株／管，生长期间根
据土壤墒情用蒸馏水进行浇灌，２００５年１１月１５日收
获。收获时地上部和地下部分开，先自来水冲洗，再
用蒸馏水冲干净，滤纸吸干，称鲜重，７０℃烘干，称干
重。对地上部和地下部分别进行植株分析。
１３　试验指标测定　土壤质地分析用比重计法；ｐＨ
用酸度计（水土比 １０∶１）测定 ；有机质用油浴加
热———重铬酸钾容量法；土壤和植株全 Ｐ采用
Ｈ２ＳＯ４Ｈ２Ｏ２消化，钼锑抗比色，全 Ｋ采用 Ｈ２ＳＯ４Ｈ２
Ｏ２消化，火焰光度计测定；速效 Ｐ（ＯｌｓｅｎＰ）用 ０５
ｍｏｌ·Ｌ－１ＮａＨＣＯ３浸提，钼锑抗比色；速效 Ｋ用１０
ｍｏ１·Ｌ－１ＮＨ４Ａｃ和０５ｍｏｌ·Ｌ
－１ＨＣｌ混合液浸提，
火焰光度计测定；土壤和植株全 Ｃｕ用 ＨＮＯ３ＨＣｌＯ４
消化原子吸收法；活性Ｃｕ用００１ｍｏ１·Ｌ－１ＣａＣｌ２提
取原子吸收法［５］。
１４　怀牛膝中齐墩果酸和脱皮甾酮含量的测定［６７］
　仪器和试剂：高效液相色谱仪（美国 Ｗａｔｅｒｓ公
司），齐墩果酸和甾酮对照品（河南省药品检验所，
批号分别为 ０７３９９８０８，１６３８０４０２，纯度均为 ＞
９８％），甲醇为色谱纯，流动相用水为双蒸馏水，其
余试剂均为分析纯。色谱柱为十八烷基硅胶键合硅
胶柱，流动相为甲醇水（测定齐墩果酸时为９０∶１０，
测定脱皮甾酮时为４５∶３５），流速０８ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱
温４０℃，测定齐墩果酸时检测波长为２１５ｎｍ，测定
脱皮甾酮时检测波长为２４３ｎｍ。供试样品的制备：
精确称取约 ２ｇ过 ４０目筛的牛膝药材细粉，加入
７０％乙醇浓盐酸（９∶１）溶液（药材与试剂比例为
２０∶１），于８５℃水浴中回流提取２ｈ，趁热过滤，洗
涤，合并滤液，回干溶剂，残渣用水溶解，氯仿萃取，
萃取液回干，甲醇溶解，作为供试品。对照品溶液的
制备：分别精密称量齐墩果酸对照品约５ｍｇ和脱皮
甾酮对照品约１ｍｇ，置于５０ｍＬ棕色量瓶中，加甲
醇至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。取各供试品溶
液和对照品溶液各 ５μＬ，注入液相色谱仪，计算
含量。
样品元素分析质量以全程序空白值、平行样、加
标回收等进行控制，加标回收率为（１００±１０）％，平
行样最大相对偏差１５％以内。数据用 ＳＡＳ软件进
行统计检验分析。
２　结果与分析
２．１　不同处理对怀牛膝的生物学效应　Ｃｕ处理
间、Ｐ处理间以及Ｃｕ，Ｐ交互间怀牛膝地上部干重和
根部干重差异都是显著的。随着施 Ｃｕ量的增加，
怀牛膝地上部干重和根部干重均是先增加后减小，２
个磷素水平下均在施Ｃｕ量为１００ｍｇ·ｋｇ－１时生物
量最大，然后随着施 Ｃｕ量的增加怀牛膝生物量明
显下降（表１）。原因是由于 Ｃｕ是植物必需的微量
元素，Ｃｕ含量低时可以促进植物叶绿素含量的形
成，而Ｃｕ含量高导致叶绿体酶活性失调，降低了叶
绿素含量，植株光合作用减少。这和王文星等［８］在
紫花苜蓿上的研究以及李华等［９］在海洲香薷上的
研究结论是一致的。施入 Ｐ后，怀牛膝地上部干重
和根部干重都明显增加，说明 Ｐ能够减轻高 Ｃｕ对
植株的毒害作用，促进了植株生物量的积累。王海
鸥等［１０］报道了施加磷元素后小麦可以有效的阻止
高铜对叶片中叶绿素的破坏。
表１　不同处理对怀牛膝地上部和根部干重的影响
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝４） ｇ／株　
Ｐ处理 Ｃｕ处理 地上部干重 根部干重
Ｐ０ Ｃｕ０ １８３２±１０５ １３４５±１１６
　 Ｃｕ１００ ２１２２±２１６ １５６４±１８６
　 Ｃｕ２００ １３５８±１３４ １０４８±１２３
　 Ｃｕ４００ ８３９±１２７ ７７２±０８５
　 Ｃｕ６００ ２４５±０７５ １３３±０６６
Ｐ１００ Ｃｕ０ ３２１１±４８５ ２６４８±３３６
　 Ｃｕ１００ ３８２６±４５５ ３０８４±３５６
　 Ｃｕ２００ ３５５８±４０４ ２５８９±３１１
　 Ｃｕ４００ ２２３９±３３７ １４７２±２０３
　 Ｃｕ６００ １２４５±２４３ ８１４±１１２
２．２　不同处理对怀牛膝吸收Ｃｕ和Ｐ的影响　Ｐ处
理间怀牛膝地上部和根部 Ｃｕ和 Ｐ含量差异都是显
著的，Ｃｕ处理间Ｃｕ含量差异显著，而Ｐ含量差异不
显著，Ｃｕ，Ｐ交互间 Ｃｕ和 Ｐ含量差异都不显著（表
２）。Ｐ肥的施入使得植株 Ｐ含量显著增加，随着土
壤中Ｃｕ浓度的增加，植株中 Ｃｕ含量增加，这与康
立娟等［１１］通过盆栽试验研究水稻和玉米对铜的吸
收累积规律的结论是一致的。不施 Ｐ时，土壤 Ｃｕ
为２００ｍｇ·ｋｇ－１处理的怀牛膝地上部和根部 Ｃｕ分
别达到５６４，１４８５ｍｇ·ｋｇ－１，均超过了我国《药用
植物及制剂进出口绿色行业标准》规定的２００ｍｇ
·ｋｇ－１的限度［１２］。当施入 Ｐ后，植株中 Ｃｕ含量减
少，但当土壤 Ｃｕ为２００ｍｇ·ｋｇ－１时怀牛膝地上部
和根部 Ｃｕ仍然超过 ２００ｍｇ·ｋｇ－１的限度，根据
《中国药典》［１３］要求中药材种植基地土壤要符合我
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国土壤环境质量二级标准（Ｃｕ低于 ２００ｍｇ·
ｋｇ－１），如果土壤中 Ｃｕ接近于２００ｍｇ·ｋｇ－１，那么
所生产的怀牛膝药材就很有可能会产生 Ｃｕ含量超
标问题。具体结论有待进一步研究。
表２　不同处理对怀牛膝地上部和根部Ｃｕ和Ｐ质量分数的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝４） ｍｇ·ｋｇ－１　
Ｐ处理 Ｃｕ处理
地上部
Ｃｕ Ｐ
根部
Ｃｕ Ｐ
Ｐ０ Ｃｕ０ 　３２±０８ １３５４３±２５２６ 　７２±０９ １８２８２±２５８８
　 Ｃｕ１００ １０２±１６ １３２６６±１５５３ １６６±２２ １８７２１±２３２３
　 Ｃｕ２００ ５６４±８１ １２４８４±１６７３ １４８５±１８４ １７５２６±２２６１
　 Ｃｕ４００ ８００±１０４ １０７５８±１７５５ ２４３５±３８６ １８０５２±２１１０
　 Ｃｕ６００ １５８３±２１５ ９６８４±１２４３ ５２６７±７７３ １７２２６±２０９４
Ｐ１００ Ｃｕ０ 　３０±０５ ３４７４６±４９５７ 　５１±０９ ３７２５９±４３５３
　 Ｃｕ１００ １２４±１８ ３７５５８±３９６２ １７１±２２ ４２５８６±５３６７
　 Ｃｕ２００ ３８０±６５ ２８３６７±３４９８ １０７４±１５２ ３３８９１±４２５６
　 Ｃｕ４００ ５１３±９４ ２０６７６±２８４８ １４９３±２０５ ２７５６３±３１５２
　 Ｃｕ２００ ３８０±６５ ２８３６７±３４９８ １０７４±１５２ ３３８９１±４２５６
　　从表２还可知，在施 Ｐ处理中，１００ｍｇ·ｋｇ－１
Ｃｕ的加入使得植株中 Ｐ含量最高（地上部３７５５８
ｍｇ·ｋｇ－１，根部４２５８６ｍｇ·ｋｇ－１），表明Ｃｕ含量低
时可以促进植物对 Ｐ素的吸收［１４］；当 Ｃｕ超过４００
ｍｇ·ｋｇ－１后，植株含Ｐ量明显减少，表明高 Ｃｕ抑制
了植株对Ｐ的吸收，这和徐加宽等［１５］的研究结论是
一致的。
２．３　不同处理对怀牛膝根部齐墩果酸、脱皮甾酮以
及总Ｋ含量的影响　齐墩果酸１０７％～１０３％，脱
皮甾酮０１６％～０１０％，各处理间怀牛膝根部齐墩
果酸含量和脱皮甾酮含量差异都不显著（表３）。Ｐ
处理间怀牛膝根部 Ｋ含量差异显著，Ｐ的施入增加
了植株对Ｋ的吸收，而Ｃｕ处理和Ｃｕ，Ｐ交互处理对
怀牛膝根部Ｋ含量没有产生影响。
表３　不同处理对怀牛膝根部齐墩果酸、脱皮甾酮
以及总Ｋ的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝４）
Ｐ
处理
Ｃｕ
处理
齐墩果酸
／％
脱皮甾酮
／％
总Ｋ
／ｍｇ·ｋｇ－１
Ｐ０ Ｃｕ０ １０５±００９ ０１６±００２ ２４５８０５±３３５６６
　 Ｃｕ１００ １０５±０１３ ０１４±００２ ２５０１６４±３３７２５
　 Ｃｕ２００ １０７±０１４ ０１２±００２ ２４４４８７±３１５６８
　 Ｃｕ４００ １０６±０１４ ０１０±００２ ２５１９１６±３６５４３
　 Ｃｕ６００ １０６±０１１ ０１５±００３ ２４９８５３±３４６２５
Ｐ１００ Ｃｕ０ １０３±０１２ ０１５±００２ ６８５４７８±９３２１４
　 Ｃｕ１００ １０５±０１６ ０１３±００３ ６６５８２５±７４５３６
　 Ｃｕ２００ １０３±０１４ ０１６±００３ ６７９８５４±８５８４５
　 Ｃｕ４００ １０５±０１６ ０１３±００３ ６７４７３６±７７８２３
　 Ｃｕ６００ １０５±０１６ ０１３±００３ ６８１４４３５±７５６２８
２．４　不同处理对怀牛膝 Ｃｕ，Ｐ专性吸附常数的影
响　怀牛膝Ｃｕ，Ｐ专性吸附常数表示每克怀牛膝根
干重所吸收的总Ｃｕ，Ｐ的毫克数，可用下式计算。
Ｃｕ专性吸附常数 ＝怀牛膝吸收的 Ｃｕ总量（ｍｇ）／怀牛
膝根干重（ｇ）
Ｐ专性吸附常数 ＝怀牛膝吸收的 Ｐ总量（ｍｇ）／怀牛膝
根干重（ｇ）
整体而言，Ｐ专性吸附常数（ＳＰＵ）要比 Ｃｕ专性
吸附常数（ＳＣｕＵ）高出一个数量级，主要是因为处理
中怀牛膝吸收的 Ｃｕ要远小于怀牛膝吸收的 Ｐ。高
Ｃｕ处理施Ｐ后ＳＣｕＵ均减小，而在Ｃｕ０和Ｃｕ１００处理时
几乎无差别（表４），说明在高Ｃｕ时，增施Ｐ减少了植
株对Ｃｕ的吸收。施Ｐ处理的ＳＰＵ均大于不施Ｐ处
理，表明增施Ｐ增加了植株对Ｐ的吸收，而Ｐ１００，Ｃｕ１００
处理的ＳＰＵ最大说明了２种元素在此浓度下有协同
作用，这和前面植株生物量最大的结论是一致的。
表４　不同处理对怀牛膝Ｃｕ和Ｐ专性吸附常数的影响
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝４）
Ｐ处理 Ｃｕ处理 Ｃｕ专性吸附常数 Ｐ专性吸附常数
Ｐ０ Ｃｕ０ ００１２±０００１ ７６７３±０６４０
　 Ｃｕ１００ ００３０±００００ ７６７２±０４６０
　 Ｃｕ２００ ０２２２±００３０ ７３７０±０５４０
　 Ｃｕ４００ ０３３０±００５０ ６９７４±０４６０
　 Ｃｕ６００ ０８１８±０１００ ７５０６±０４６０
Ｐ１００ Ｃｕ０ ０００９±０００１ １１９３９±０８７０
　 Ｃｕ１００ ００３２±００００ １２９１８±０６３０
　 Ｃｕ２００ ０１６０±００１０ １１２８８±０８５０
　 Ｃｕ４００ ０２２７±００２０ ９９０１±０６３０
　 Ｃｕ６００ ０４６３±００５０ ９１２７±０６３０
３　结论
土壤中低量的 Ｃｕ可以增加怀牛膝产量，生产
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出的怀牛膝质量符合标准；Ｃｕ超过 ２００ｍｇ·ｋｇ－１
后，所生产的怀牛膝不但产量下降，而且药材中重金
属Ｃｕ含量也超标，但对药材中活性成分齐墩果酸
和脱皮甾酮的含量没有产生影响。Ｐ的施入减轻了
高Ｃｕ对植株的毒害作用，怀牛膝生物量明显增加，
药材中重金属含量降低，同时促进了怀牛膝对 Ｋ的
吸收，因此，在高Ｃｕ土壤中适当供 Ｐ对减轻怀牛膝
植株生长过程中受铜毒害的影响有着重要作用。
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ＥｆｅｃｔｏｆｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｏｎｃｏｐｐｅｒｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎＡｃｈｙｒａｎｔｈｅｓｂｉｄｅｎｔａｔａ
ＷＡＮＧＸｉｎｍｉｎ１，２，ＣＨＥＮＳｈｉｌｉｎ２，ＷＥＩＺｈｉｈｕａ１，ＪＩＥＸｉａｏｌｅｉ１
（１．ＺｈｅｎｇｚｈｏｕＣｏｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００１１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，
Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｏｎｃｏｐｐｅｒｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎＡｃｈｙｒａｎｔｈｅｓｂｉｄｅｎｔａｔａ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＡＰＶＣｐｉｐｅ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｓｏｆｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ（Ｐ）ａｎｄｃｏｐｐｅｒ（Ｃｕ），ｏｎｇｒｏｗｔｈ，ｅｌｅｍｅｎｔａｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎａｎｄ
ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＡ．ｂｉｄｅｎｔａｔａ．ＴｗｏｌｅｖｅｌｓｏｆｅｌｅｍｅｎｔａｌＰｗｅｒｅａｐｐｌｉｅｄａｔ０（Ｐ０）ａｎｄ１００（Ｐ１００）ｍｇ·ｋｇ
－１ｓｏｉｌｗｉｔｈ５ｌｅｖｅｌｓｏｆ
Ｃｕａｔ０（Ｃｕ０），１００（Ｃｕ１００），２００（Ｃｕ２００），２００（Ｃｕ４００），２００（Ｃｕ６００）ｍｇ·ｋｇ
－１ｓｏｉｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＲｅｓｕｌｔａｎｄＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｂｉ
ｏｍａｓｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｅｒｅｎｔＣｕｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ，ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ．Ｔｈｅｂｉｏｍａｓｓｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｍａｘｉ
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［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ａｃｈｙｒａｎｔｈｅｓｂｉｄｅｎｔａｔａ；ｃｏｐｐｅｒ；ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ
［责任编辑　吕冬梅］
·２９４１·
第３４卷第１２期
２００９年６月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１２
　 Ｊｕｎｅ，２００９