全 文 ：ＨＰＬＣ测定参仙片中淫羊藿苷的含量
谢香菊，杨清林，王贤英，赵健权
（重庆中药研究院，重庆 ４０００６５）
［摘要］ 目的：建立ＨＰＬＣ测定参仙片中淫羊藿苷的含量。方法：采用ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），
流动相乙腈水（３５∶６５），流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长２７０ｎｍ。结果：淫羊藿苷在进样量０５９２～２９６μｇ内线性关系良好
（ｒ＝０９９９９），平均加样回收率为９９１２％，ＲＳＤ０５％（ｎ＝６）。结论：本法操作简便、准确，灵敏度高，重现性好，可用于参仙
片的质量控制。
［关键词］ 参仙片；淫羊藿苷；ＨＰＬＣ
［收稿日期］ ２００９０３１２
［通信作者］ 王贤英，Ｔｅｌ：（０２３）８９０２９０９７，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉａｎｙｉｎｇ＿
３１５＠１６３．ｃｏｍ
［作者简介］ 杨清林，副主任中药师，从事中药工艺及质量研发工
作，Ｔｅｌ：（０２３）８９０２９０９９
参仙片是由淫羊藿、女贞子、仙茅、人参和制何
首乌五味药材组成，功能与主治为“温肾益精、补气
养血。适用于肾阴阳两虚，心气不足所致的腰膝酸
软，神疲乏力，头晕耳鸣，胃寒肢冷，心悸气短，夜尿
频多等症”。本实验选用 ＨＰＬＣ测定处方中淫羊藿
苷的含量，为参仙片质量的控制提供依据。
１ 材料
ＬＣ２０１０Ａ型高效液相色谱仪（自动进样器，紫
外检测器，四元泵），ＳｈｉｍａｄｚｕＣＬＡＳＳＶＰＶ６１２ＳＰ４
工作站（日本岛津公司）。
乙腈为色谱纯；其他试剂均为分析纯；水为超纯
水；淫羊藿苷对照品（中国药品生物制品检定所，批
号０７３７２００１１１）；参仙片样品及缺淫羊藿的阴性样
品由重庆市中药研究院制药厂提供；硅胶Ｇ（青岛海
洋化工厂）。
２ 含量测定
２．１ 色谱条件与系统适用性 ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８柱
（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈水（３５∶
６５），流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温２５℃，检测波长２７０
ｎｍ，进样量１０μＬ。理论塔板数按淫羊藿苷峰计算，
应不低于５０００。在上述条件下，淫羊藿苷色谱峰与
其他杂质峰均能达到基线分离。
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取淫羊藿苷对照
品适量，加甲醇制成每１ｍＬ含１４８μｇ的淫羊藿苷
对照品溶液。
２．３ 线性关系考察 分别取淫羊藿苷对照品溶液
４，６，８，１０，１６，２０μＬ，进样测定淫羊藿苷色谱峰积分
面积（每种浓度进样３次）。以峰面积为纵坐标，淫
羊藿苷进样量为横坐标，绘制标准曲线，并计算回归
方程Ｙ＝１７６×１０６Ｘ＋２９２４３，ｒ＝０９９９９。结果表
明，淫羊藿苷在 ０５９２～２９６μｇ呈良好的线性关
系，见图１。
Ａ．淫羊藿苷对照品；Ｂ．参仙片样品；Ｃ．缺淫羊藿阴性样品。
图１ 对照品及样品ＨＰＬＣ图
２．４ 精密度试验 精密吸取淫羊藿苷对照品溶液
１０μＬ按上述色谱条件连续进样 ６次，结果 ＲＳＤ
１１％，说明仪器精密度较好。
２．５ 稳定性试验 精密吸取新配制的淫羊藿苷对
·４８９１·
第３４卷第１５期
２００９年８月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １５
Ａｕｇｕｓｔ，２００９
照品溶液１０μＬ，分别于０，２，４，８，１２，１６ｈ各进样１
次，共进样６次，６次测定淫羊藿苷相对应峰的峰面
积ＲＳＤ０８％，表明淫羊藿苷对照品溶液在１６ｈ以
内稳定。
２．６ 供试品溶液制备方法 取参仙片２０片，除去
糖衣，研细，取约０１５ｇ，精密称定，置５０ｍＬ量瓶
中，加甲醇适量，超声３０ｍｉｎ，放冷，用甲醇稀释至刻
度，摇匀，过０４５μｍ微孔滤膜，即得。
２．７ 阴性样品干扰考察 按处方比例制备缺淫羊
藿药材的阴性对照样品，再按上述供试品溶液制备
方法制备阴性对照液。分别吸取对照品溶液、供试
品溶液和阴性对照液各１０μＬ，注入 ＨＰＬＣ仪。结
果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有
相同的色谱峰出现，而阴性对照液无此峰出现，表明
参仙片中其他成分对淫羊藿苷的含量测定无干扰，
见图１。
２．８ 供试品稳定性试验 精密吸取新配制的供试
品溶液１０μＬ（批号０７０５０１），分别于０，２，４，８，１２，
１６ｈ进样１次进行测定，计算淫羊藿苷的含量，其
ＲＳＤ１５％，表明样品供试品１６ｈ以内稳定。
２．９ 重复性试验 取同一批号的参仙片（批号
０７０５０１）２０片，去糖衣，分别研成细粉，各取量约
０１５ｇ，精密称定，共５份，按照供试品制备方法制
备供试品溶液，取供试品溶液１０μＬ，并按上述色谱
条件进行测定，计算含量，其 ＲＳＤ１０％，表明方法
重复性较好。
２．１０ 回收率试验 取已知含量的供试品，分别
精密加入淫羊藿苷（质量浓度为 ０１４８ｇ·Ｌ－１）
对照品 ２０，４０，６０ｍＬ，按照供试品制备方法
制备供试品溶液，并按上述色谱条件测定，计算
回收率，淫羊藿苷平均回收率为 ９９１２％ ，ＲＳＤ
０５％，见表１。
表１ 淫羊藿苷加样回收率试验
取样量
／ｇ
样品中
量／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测定量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
０１５０４ ０８８８９ ０２９６０ １１６７０ ９８４９
０１５３１ ０９０４８ ０２９６０ １１９３９ ９９４２
０１５２１ ０８９８９ ０５９２０ １４７５９ ９８９９
９９１２ ０５
０１５０１ ０８８７１ ０５９２０ １４７９５ １０００３
０１５３７ ０９０８４ ０８８８０ １７７８４ ９９００
０１５８２ ０９３５０ ０８８８０ １８０１４ ９８８２
２．１１ 参仙片中淫羊藿苷的含量测定 分别称取不
同批号的参仙片，按照供试品溶液制备方法制备供
试品溶液，分别精密吸取对照品溶液１０μＬ与供试
品溶液１０μＬ，依正文色谱条件测定，采用外标一点
法计算片剂中淫羊藿苷的含量，结果批号为
０５０１０１，０５０３０２，０６０７０１，０６１００２，０７０５０１，０７０８０２样
品中淫羊藿苷分别为４２８，４３７，５５４，５７３，５９１，
５６９ｍｇ·ｇ－１。
３ 讨论
试验中对淫羊藿苷的提取考察了冷浸、超声２
种提取方法，结果表明，超声３０ｍｉｎ的提取量比冷
浸２４ｈ高，故确定采用超声提取方法。试验还考察
了不同超声时间（１５，３０，４５，６０ｍｉｎ）对提取量的影
响，结果表明，超声３０ｍｉｎ后含量不再增加，故确定
超声提取时间为３０ｍｉｎ。
参照相关文献报道［１２］，笔者将对照品溶液及样
品供试液进行光谱检测，对照品溶液和样品供试液
的最大吸收峰均在波长２７０ｎｍ处出现，故选择２７０
ｎｍ作为本品测定淫羊藿苷的检测波长。
［参考文献］
［１］ 中国药典．一部［Ｓ］．２００５：２２９．
［２］ 向东，李晔，王鲁．ＨＰＬＣ法测定前列通片中淫羊藿苷的含量
［Ｊ］．中国药房，２００８，１９（２１）：１６４５．
［责任编辑 周驰］
·５８９１·
第３４卷第１５期
２００９年８月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １５
Ａｕｇｕｓｔ，２００９