全 文 ：人参皂苷 Ｒｅ在大鼠体内的代谢研究
陈广通１，杨敏２，果德安２
（１．南通大学 医学院，江苏 南通 ２２６００１；
２．中国科学院 上海药物研究所 上海中药现代化研究中心，上海 ２０１２０３）
［摘要］ 目的：研究人参皂苷Ｒｅ在大鼠体内的代谢情况并了解其代谢产物。方法：将６只ＳＤ大鼠按１００ｍｇ·ｋｇ－１灌胃
给予人参皂苷Ｒｅ，收集给药后１２，２４，３６，４８，６０，７２ｈ粪便，预处理后采用ＨＰＬＣＥＳＩＭＳ／ＭＳ方法，以人参皂苷Ｒｅ的微生物转
化产物为对照品，检测大鼠体内的代谢产物。结果：在大鼠体内共检测到６个代谢产物，并利用对照品鉴定了它们的结构分别
为：２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｇ２，２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｈ１，２０（Ｒ）人参皂苷Ｒｈ１，人参皂苷Ｆ１，３羰基人参皂苷Ｒｈ１和原人参三醇。结论：
人参皂苷Ｒｅ在大鼠体内的代谢产物较多，且与微生物转化产物具有很强的相似性。
［关键词］ 人参皂苷Ｒｅ；微生物转化；ＬＣＭＳ／ＭＳ
［收稿日期］ ２００８１０１０
［通信作者］ 陈广通，Ｔｅｌ：（０５１３）８５０５１７４９，Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎｇｕａｎｇｔｏｎｇ
＠ｔｏｍ．ｃｏｍ
三七 Ｐａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ是我国的传统珍贵药
材，具有止血、散瘀、消肿、止痛等功效。三七中的达
玛烷型三萜皂苷是其主要有效成分之一，所含的达
玛烷型三萜皂苷包括原人参二醇型和原人参三醇
型［１］。人参皂苷 Ｒｅ属于原人参三醇型，是三七中
主要的皂苷成分之一，具有益智［２］、抗衰老［３］、抗缺
血性心律失常［４］等作用。近年来，虽然对人参皂苷
Ｒｅ的药物动力学研究可见报道［５］，但尚未见人参皂
苷Ｒｅ的体内代谢产物的报道。由于人参皂苷类化
合物的药效与体内代谢产物间有着极其密切的关
系，因此研究人参皂苷 Ｒｅ在机体内的代谢产物对
阐明其药效作用具有重要意义。由于药物的体内代
谢产物往往与其微生物转化产物具有一定的相似
性，因此，微生物转化可以作为药物代谢的模型，辅
助鉴定其代谢产物［６８］。本研究以前期工作中分离
得到的人参皂苷 Ｒｅ微生物转化产物为对照品，利
用ＨＰＬＣＥＳＩＭＳ／ＭＳ技术，对人参皂苷 Ｒｅ在大鼠
体内的代谢进行了研究，鉴定了６个代谢产物的结
构，并探讨了此化合物在微生物与大鼠体内代谢的
相似性。
１ 材料
１．１ 动物 ＳＤ大鼠６只，雄性，体重２００～２２０
ｇ，清洁级，由上海中医药大学动物中心提供，合
格证号ＳＣＸＫ（沪）２００３０００２。
１．２ 试剂与药品 色谱纯乙腈（Ｍｅｒｃｋ，Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，
Ｇｅｒｍａｎｙ），去离子水经过 ＭｉｌｉＱ系统纯化（Ｍｉｌｉ
ｐｏｒｅ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ，ＵＳＡ），人参皂苷 Ｒｅ（昆明众正
生物科技有限公司，纯度 ＞９８％），其余人参皂苷对
照品由作者采用微生物转化方法获得，其纯度均大
于９５％［９］。其余试剂均为分析纯（国药集团化学试
剂公司）。
１．３ 仪器 液质联用仪 ＴＳＱＱｕａｎｔｕｍＬＣＭＳ（Ｓａｎ
Ｊｏｓｅ，ＣＡ，ＵＳＡ），使用ＦｉｎｎｉｇａｎＸｃａｌｉｂｕｒ数据处理系
统。Ｔｈｅｒｍｏ液相色谱仪，ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＳＢＣ１８反相
色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘ
ＳＢＣ１８保护柱（４ｍｍ×２０ｍｍ，５μｍ）。
２ 方法
２．１ 粪便样品采集 取大鼠６只饲养３ｄ，待其充
分适应环境后，禁食２４ｈ（自由饮水），同时接取粪
便做为空白。大鼠按１００ｍｇ·ｋｇ－１剂量灌胃给予
人参皂苷Ｒｅ，置于代谢笼中，继续禁食，收集给药后
１２，２４，３６，４８，６０和７２ｈ粪便，冷冻保存，待处理。
２．２ 粪便样品的处理 将 １ｇ粪便称重后研磨，
加入２ｍＬ甲醇超声提取３０ｍｉｎ后于３０００ｒｍｉｎ－１
离心１０ｍｉｎ，上清液经０４５μｍ滤膜过滤，续滤
液备用。
２．３ ＨＰＬＣＤＡＤ分析条件 流动相乙腈水，梯度
洗脱，０～３０ｍｉｎ，１５％ ～２２％；５０ｍｉｎ，３０％乙腈；８０
ｍｉｎ，４０％乙腈；１２０ｍｉｎ，６０％乙腈。流速１０ｍＬ·
ｍｉｎ－１，柱温 ３０℃，检测波长 ２０３ｎｍ。进样量 ２０
μＬ。
２．４ ＬＣＭＳ分析条件 流动相乙腈０２％醋酸水，
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梯度洗脱程序０～１０ｍｉｎ，由２０％的乙腈线性升至
２２％；２０ｍｉｎ，升至３０％；５０ｍｉｎ，升至４０％；７０ｍｉｎ，
升至６０％。ＥＳＩ离子源，正离子模式；质谱条件经过
反复优化，最终确定为：鞘气流速４０ａｒｂ；助气流速
１０ａｒｂ；喷雾电压４５ｋＶ；毛细管温度３００℃。
３ 结果
３．１ 代谢产物 ＨＰＬＣ分析结果 共检测到底物人
参皂苷Ｒｅ和５个代谢产物的色谱峰。经与对照品
进行比对确定代谢产物的结构分别为：２０（Ｓ）人参
皂苷Ｒｇ２（Ｍ１），２０（Ｓ）人参皂苷 Ｒｈ１（Ｍ２），２０（Ｒ）
人参皂苷Ｒｈ１（Ｍ３），人参皂苷 Ｆ１（Ｍ４）和原人参三
醇（Ｍ５）。
同时记录所测的底物和３个代谢产物：２０（Ｓ）
人参皂苷 Ｒｇ２，原人参三醇，２０（Ｒ）人参皂苷 Ｒｈ１的
色谱峰面积，与时间作图，记录粪便中的含量变化，
见图１。
图１ 人参皂苷Ｒｅ及其代谢产物在粪便中的含量变化曲线
３．２ 代谢产物 ＨＰＬＣＥＳＩＭＳ／ＭＳ分析结果 样品
经ＬＣＭＳ／ＭＳ分析，进行全离子和选择离子扫描，检
测到了底物及６个代谢产物 Ｍ１Ｍ６。其 ＬＣＭＳ选
择离子流图见图２，ＭＳ和ＭＳＭＳ质谱图见图３。分
别对６个代谢产物进行 ＭＳ和 ＭＳＭＳ分析，将所得
的碎片离子与对照品进行比较。
图２ 大鼠粪便样品的ＬＣＭＳ图谱
在ＭＳ谱中，Ｍ１显示ｍ／ｚ７８５［Ｍ＋Ｈ］＋准分子
离子峰，比人参皂苷 Ｒｅ的 ｍ／ｚ９４７［Ｍ＋Ｈ］＋少
１６２，提示为脱去一分子葡萄糖基的代谢产物。在
ＭＳＭＳ谱中，代谢产物显示了３个主要的碎片离子
峰ｍ／ｚ４４１，４２３和４０５，提示代谢产物结构中含有１
个葡萄糖基。将对照品 ２０（Ｓ）人参皂苷 Ｒｇ２进行
ＬＣＭＳ／ＭＳ分析，所得到的 ＭＳ和 ＭＳ／ＭＳ数据及色
谱保留时间与代谢产物 Ｍ１相同，因此该代谢产物
的结构鉴定为２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｇ２。
在ＭＳ谱中Ｍ２，Ｍ３和Ｍ４均显示ｍ／ｚ６３９［Ｍ＋
Ｈ］＋准分子离子峰，比人参皂苷Ｒｅ的ｍ／ｚ９４７［Ｍ＋
Ｈ］＋少３０８，提示均为脱去一分子鼠李糖基和葡萄
糖基的代谢产物。在ＭＳＭＳ谱中，上述３个代谢产
物均显示了３个主要的碎片离子峰 ｍ／ｚ４４１，４２３和
４０５，提示代谢产物结构中含有１个葡萄糖基。分别
将对照品 ２０（Ｓ）人参皂苷 Ｒｈ１，２０（Ｒ）人参皂苷
Ｒｈ１和人参皂苷 Ｆ１进行 ＬＣＭＳ／ＭＳ分析，将 ＭＳ和
ＭＳＭＳ数据及色谱保留时间与代谢产物相比较。
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图３ 代谢产物的ＥＳＩＭＳ（ａ）和ＥＳＩＭＳ／ＭＳ（ｂ）图谱
分别与代谢产物Ｍ２，Ｍ３和Ｍ４一致，因此这３个代
谢产物的结构分别鉴定为２０（Ｓ）人参皂苷 Ｒｈ１，２０
（Ｒ）人参皂苷Ｒｈ１和人参皂苷Ｆ１。
在ＭＳ谱中，代谢产物 Ｍ５显示 ｍ／ｚ４７７［Ｍ＋
Ｈ］＋准分子离子峰，比人参皂苷 Ｒｅ的［Ｍ＋Ｈ］＋
９４７ｍ／ｚ少４７０，提示为脱去二分子葡萄糖基和一分
子鼠李糖基的代谢产物。经与对照品原人参三醇的
ＭＳ和ＭＳＭＳ数据及保留时间相比较，鉴定代谢产
物Ｍ５的结构为原人参三醇。
在ＭＳ谱中，代谢产物 Ｍ６显示 ｍ／ｚ６３７［Ｍ＋
Ｈ］＋准分子离子峰，比人参皂苷 Ｒｈ１的 ｍ／ｚ６３９
［Ｍ＋Ｈ］＋少２，提示为１个羟基变成羰基的代谢产
物。在ＭＳＭＳ谱中显示了３个主要的碎片离子峰
ｍ／ｚ４４１，４２３，４０５，提示代谢产物结构中含有１个葡
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萄糖基。因此鉴定代谢产物的结构为 ３羰基人参
皂苷Ｒｈ１。
４ 讨论
人参皂苷并不是完全以原药形式吸收入血，而
是通过酸碱水解、肠道菌群代谢或肝脏代谢变成水
解物或代谢物，进而产生疗效。故在考察人参皂苷
的体外抗菌、抗肿瘤等作用时，不能仅考虑原型药物
的作用，还要考虑其在体内是否代谢，代谢产物是否
有活性及其活性强弱［１０］。
本实验发现大鼠口服人参皂苷 Ｒｅ后，大量的
原形药物通过粪便排泄出体外，１２ｈ内能检测到的
代谢产物很少，表明人参皂苷 Ｒｅ在体内需要经过
肠内菌的代谢，从而导致检测的时限延长。ＨＰＬＣ
ＥＳＩＭＳ／ＭＳ检测结果表明人参皂苷 Ｒｅ在大鼠体内
代谢的产物与微生物转化的产物基本一致，进一步
证明了可以利用微生物转化模型来模拟人参皂苷在
人类或动物体内的代谢。
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Ｒｇ１ａｎｄＲｂ１ｉｎｔｈｅｄｉｇｅｓｔｉｖｅｔｒａｃｔｏｆｒａｔ［Ｊ］．ＣｈｅｍＰｈａｒｍＢｕｌ，
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ＭｅｔａｂｏｌｉｃｓｔｕｄｙｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｅｉｎｒａｔｓ
ＣＨＥＮＧｕａｎｇｔｏｎｇ１，ＹＡＮＧＭｉｎ２，ＧＵＯＤｅａｎ２
（１．ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，ＮａｎｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｔｏｎｇ２２６００１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｈａｎｇｈａｉＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｆｏｒＭｏｄｅｒｎｉｚａｔｉｏｎｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＳｈａｎｇｈａｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，
ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＺｈａｎｇｊｉａｎｇＳｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｙｓｔｅｍｉｃａｌｙｓｔｕｄｙｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｅｉｎｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＳｉｘＳＤｒａｔｓｗｅｒｅｕｓｅｄｄｉｖｉｄｅｄ
ｉｎｔｏ３ｇｒｏｕｐｓ．ＡｆｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｅａｔａｄｏｓａｇｅｏｆ１００ｍｇ·ｋｇ－１，ｆｅｃｅｓｗｅｒｅｃｏｌｅｃｔｅｄａｔ１２，２４，３６，４８，ａｎｄ
６０ｈ．ＴｈｅｍｉｃｒｏｂｉａｌｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｅｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｓｔａｎｄａｒｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ．ＨＰＬＣＥＳＩＭＳ／ＭＳａｎａｌｙｓｉｓｗａｓ
ｕｓｅｄｉｎｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｓｔｕｄｉｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＳｉｘｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｅｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎｒａｔｆｅｃｅｓｂｙＨＰＬＣＥＳＩＭＳ／ＭＳａｎａｌｙｓｉｓ．
Ｔｈｅｉｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓ２０（Ｓ）ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｇ２，２０（Ｓ）ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｈ１，２０（Ｒ）ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｈ１，ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＦ１，３ｏｘｏ
ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｈ１ａｎｄｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＧｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｅｈａｓｔｈｅｓａｍｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙｗｉｔｈｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ，ｔｏｓｏｍｅｅｘ
ｔｅｎｔ，ｊｕｓｔｉｆｉｅｄｔｈｅｕｓｅｏｆｍｉｃｒｏｂｉａｌｍｏｄｅｌｓｆｏｒｍａｍｍａｌｉａｎｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｓｔｕｄｉｅｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｅ；ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ；ＬＣＭＳ／ＭＳ
［责任编辑 古云侠］
·３４５１·
第３４卷第１２期
２００９年６月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １２
Ｊｕｎｅ，２００９