全 文 ：黄毛耳草药材质量标准研究
李晶１，周国平２，李才堂１，文萍１，应萍３，虞金宝１，巫火娣１
（１．江西省中医药研究院，江西 南昌 ３３００７７；
２．江西省食品药品检验所，江西 南昌 ３３００４６；３．江西省人民医院 药剂科，江西 南昌３３０００６）
［摘要］　目的：建立黄毛耳草药材的质量标准。方法：以乙腈水（７∶９３）为流动相，测定波长为２３８ｎｍ，采用 ＨＰＬＣ测定
黄毛耳草药材中鸡矢藤苷甲酯的含量。结果：鸡矢藤苷甲酯在２２０８～５５２ｍｇ·Ｌ－１与峰面积呈良好线性关系，加样回收率为
９９７％（ｎ＝６），ＲＳＤ０７２％。结论：方法简便、快速，可作为黄毛耳草药材的质量标准。
［关键词］　黄毛耳草；鸡矢藤苷甲酯；ＨＰＬＣ
［收稿日期］　２００９０４０１
［基金项目］　家科技支撑计划（２００６ＢＡＩ０６Ａ０１０１）；江西省中医药
科研计划（２００８Ａ０９４）
［通信作者］　虞金宝，Ｔｅｌ／Ｆａｘ：（０７９１）８５０１４０４，Ｅｍａｉｌ：ｙｊｂ２２１７＠
１６３．ｃｏｍ
　　黄毛耳草来源于茜草科植物金毛耳草 Ｈｅｄｙｏｔｉｓ
ｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａ的干燥全草。具有清热除湿、解毒消肿、
活血舒筋之功效，用于湿热黄疸、水肿、乳糜尿、痢
疾、腹泻，跌打损伤，无名肿毒，乳腺炎；为江西特色
中成药品种肠炎宁片的主要组成之一。该药材收载
于江西省中药材标准（１９９６年版），该药材标准中仅
有一个显微鉴别和一个理化鉴别，质量标准非常落
后。现有文献中除一篇有关黄毛耳草中槲皮素含量
研究报道［１］外，未见有关黄毛耳草药材质量标准的
研究报道。作者在进行肠炎宁片的质量控制技术研
究时，对黄毛耳草药材的标准也进行了研究，并建立
了其质量标准。
１　仪器与试药
ＨＰ１１００高效液相色谱仪（美国：包括１３２２Ａ在
线脱气机、Ｇ１３１１Ａ四元梯度泵、Ｇ１３１５Ｂ二极管阵
列检测器、ＨＰ化学工作站），ＳＰＵⅠ自动喷雾显色
器（日本）；ＰＢＱⅠ薄层自动铺板器（四川重庆）；
ＳｉｍｐｌｉｃｉｔｙＴＭ个人型超纯水系统（Ｍｉｌｉｐｏｒｅ公司），
定量毛细管（美国Ｄｒｕｍｍｏｎｄ公司），ＣＱ２５０超声波
清洗仪（上海船舶电子设备研究所），ＡＧ１３５电子分
析天平（梅特勒托利多公司）。
鸡矢藤苷甲酯对照品（自制，经ＨＰＬＣ归一化法
测定，纯度达９８６％），乙腈（色谱纯），其他试剂均
为分析纯。
黄毛耳草分别采于江西、福建、浙江和广西等不
同产地，经江西省食品药品检验所周国平主任药师
鉴定均为茜草科植物金毛耳草 Ｈ．ｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａ的干
燥全草。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　ＡｇｉｌｅｎｔＨＣＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ），流动相乙腈水（７∶９３），流速１ｍＬ
·ｍｉｎ－１；经光谱扫描结果显示，鸡矢藤苷甲酯在
２３８ｎｍ处有最在吸收，故检测波长定为２３８ｎｍ，柱
温为室温。在此条件下，对照品、供试品在约９ｍｉｎ
的相同时间有一色谱峰，理论塔板数在３０００以上，
鸡矢藤苷甲酯的分离度达５以上；见图１。
Ａ．对照品；Ｂ．样品；１．鸡矢藤苷甲酯。
图１　对照品及样品ＨＰＬＣ图
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２．２　线性关系的考察　精密称取鸡矢藤苷甲酯对
照品１３８ｍｇ，置２５ｍＬ量瓶中，用甲醇溶解并稀
释至刻度，摇匀，即得（每 １ｍＬ含鸡矢藤苷甲酯
０５５２ｍｇ）。精密吸取适量，加甲醇稀释成００２２１，
００４４１６，０１１０４，０２２０８，０３３１２，０４４１６，０５５２
ｍｇ·ｍＬ－１的溶液。分别吸取１０μＬ，注入液相色谱
仪中，按上述色谱条件测定对照品峰面积，以进样浓
度与峰面积进行回归处理，回归方程为 Ａ＝７
６０３４６Ｃ－３５８８，ｒ＝０９９９７，鸡矢藤苷甲酯对照品
在２２０８～５５２μｇ进样量与峰面积呈良好的线性
关系。
２．３　精密度试验　精密吸取对照品溶液２０μＬ连
续进样６次，测定鸡矢藤苷甲酯的峰面积值，计算
ＲＳＤ１８％。
２．４　稳定性试验　按上述测定条件，分别于 ０，
１０，２０，４０，８０，１００ｈ精密吸取供试品溶液２０
μＬ注入高效液相色谱仪，测定鸡矢藤苷甲酯的峰面
积值，计算ＲＳＤ１６％。
２．５　重复性试验　取黄毛耳草药材粗粉６份，每份
约０３ｇ，分别精密称定，置 ５０ｍＬ量瓶中，加入
５０％甲醇至近刻度，超声处理３０ｍｉｎ，放冷，以５０％
甲醇补足至刻度，摇匀，滤过，取续滤液２ｍＬ高速离
心（１５０００ｒ·ｍｉｎ－１）１０ｍｉｎ，取上清液作为供试品
溶液。按上述色谱条件测定，计算平均含量为
０９２％，ＲＳＤ２２％。
２．６　加样回收率试验　取已知含量的黄毛耳草药
材粗粉 ６份，每份约 ０１５ｇ，分别精密称定，置 ５０
ｍＬ量瓶中，精密加入以５０％甲醇制成的鸡矢藤苷
甲酯溶液（０６７９８ｍｇ·ｍＬ－１）２ｍＬ，加５０％甲醇至
近刻度，超声处理３０ｍｉｎ，放冷，以５０％甲醇补足至
刻度，摇匀，滤过，取续滤液２ｍＬ高速离心（１５０００ｒ
·ｍｉｎ－１）１０ｍｉｎ，取上清液作为供试品溶液。按上
述色谱条件测定并计算回收率，结果见表１。计算
平均回收率１０１７％，ＲＳＤ２３％。
表１　鸡矢藤苷甲酯回收率测定
药材中量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
ＲＳＤ
／％
１３３９７ １３５９６ ２６７２１ ９８００ 　 　
１３４６９ １３５９６ ２７３０１ １０１７４ 　 　
１３４１５ １３５９６ ２７１１０ １００７３
１０１７ ２３
１３４８７ １３５９６ ２７８９７ １０４２４ 　 　
１３４２４ １３５９６ ２７２１２ １０１４１ 　 　
１３４６９ １３５９６ ２７６２８ １０４１４ 　 　
２．７　样品测定　取不同产地的黄毛耳草药材粗粉
约０３ｇ，精密称定，按上述供试品溶液制备方法分
别制备各供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液、供
试品溶液各２０μＬ，注入液相色谱仪，测定，计算，即
得。结果见表２。
表２　不同产地药材中鸡矢藤苷甲酯的质量分数（ｎ＝３）
产地 质量分数／％ ＲＳＤ／％
江西昌北 ０４９ １０３
江西弋阳 ０９２ １２２
江西产Ⅱ ０６６ ０７６
福建产　 １４２ ０７０
浙江瞿州 ０１４ ７１４
广西蒙山 ０６４ ０７９
３　讨论
　　黄毛耳草系民间中草药，收载于江西省中药
材标准（１９９６年版），主用于治疗湿热黄疸、水肿、
痢疾、腹泻等；黄毛耳草主含环烯醚萜类、黄酮类
及内酯类成分等［２］，现有文献资料中未见有关黄
毛耳草的薄层鉴别研究。本实验中还分别对黄毛
耳草的化学成分及其中环烯醚萜、黄酮及内酯三
类成分的薄层色谱进行了研究，结果显示，环烯醚
萜类在黄毛耳草中含量较高，且鸡矢藤苷甲酯为
其主要成分之一。现有文献中除见黄毛耳草中黄
酮成分［１］和熊果酸［３］的含量测定报道外，未见有
关鸡矢藤苷甲酯的测定报道。根据鸡矢藤苷甲酯
属环烯醚萜类成分的特点，参照中国药典中有关
栀子苷的测定方法［４］，分别对提取方法（回流提
取、索氏提取和超声提取）、提取溶剂（水、甲醇、
５０％甲醇和 ７０％乙醇）、提取时间（１５，３０，４５和
６０ｍｉｎ）、溶剂用量（２５，５０，７５，１００ｍＬ）进行了比
较研究，结果以５０ｍＬ５０％甲醇超声处理 ３０ｍｉｎ
为优。
本实验含量测定结果及实验中进行的薄层色谱
研究结果显示，不同产地黄毛耳草药材中环烯醚萜
类、黄酮类及内酯类成分的含量相差较大。黄酮类
及内酯成分以江西产为高，环烯醚萜类成分以福建
产最高，该三类成分均以浙江瞿州最低，且鸡矢藤苷
甲酯的含量福建产是浙江瞿州产的１０倍，这可能与
不同产地的生态环境如气候、土壤等条件有密切关
系。但是，这几类成分是否为黄毛耳草的主要药效
成分或这些成分含量的高低与黄毛耳草的药理作用
相关性，还有待于进一步研究。
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［参考文献］
［１］　李萍．高效液相色谱法测定黄毛耳草中槲皮素的含量［Ｊ］．广
东药学院学报，２００６，２２（１）：５７．
［２］　袁青梅，赵静峰，李良．耳草属植物化学成分［Ｊ］．国外医药·
植物药分册，２００１，１６（４）：１４８．
［３］　邹盛勤，陈武，李开泉，等．３０种省产天然植物中乌索酸含量的
ＨＰＬＣ测定［Ｊ］．江西农业大学学报，２００５，２７（１）：２２．
［４］　中国药典．一部［Ｓ］．２００５：１７３．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｃａｎｄｏｓｉｄｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｉｎＨｅｄｙｏｔｉｓｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａｂｙＨＰＬＣ
ＬＩＪｉｎｇ１，ＺＨＯＵＧｕｏｐｉｎ２，ＬＩＣａｉｔａｎｇ１，ＷＥＮＰｉｎｇ１，ＹＩＮＧＰｉｎｇ３，ＹＵＪｉｎｂａｏ１，ＷＵＨｕｏｄｉ
（１．ＪｉａｎｇｘｉＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００７７，Ｃｈｉｎａ；
２．ＪｉａｎｇｘｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００４６，Ｃｈｉｎａ；
３．Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＪｉａｎｇｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３０００６，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｃａｎｄｏｓｉｄｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｉｎＨｅｄｙｏｔｉｓｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａ．
Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗａｓｃａｒｉｅｄｏｕｔｏｎａｎＨＣＣ１８ｃｏｌｕｍｎｅｌｎｔｅｄｗｉｔｈａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｗａｔｅｒ（７∶９３）ａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ａｎｄｔｈｅｄｅ
ｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ２３８ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｒｅｉｓａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙｉｎｔｈｅｒａｎｇｅ２２０８～５５２μｇ·ｍＬ－１ｏｆｓｃａｎｄｏｓｉｄｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ
ａｎｄｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｉｓ９７７％ （ｎ＝６），ＲＳＤｉｓ０７２％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ，ｑｕｉｃｋ，ａｎｄｉｓａｐｐｌｉｃａｂｌｅｔｏｔｈｅ
ｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＨ．ｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｈｅｄｙｏｔｉｓｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａ；ｓｃａｎｄｏｓｉｄｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ；ＴＬＣ；ＨＰＬＣ
［责任编辑　王亚君］
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