全 文 ：大黄 种饮片中 * 个二苯乙烯苷类成分含量测定
李丽! 张村! 肖永庆!! 陈东东! 田国芳! 王云
中国中医科学院 中药研究所! 北京 $$%$$#
$摘要%!目的&进行大黄 种饮片中 * 个二苯乙烯苷类成分的含量测定) 方法&采用YE`<法$对大黄生&酒&醋&熟&炭饮
片中反4)$$&c4三羟基二苯乙烯基4&c4!
N34葡萄糖苷!B&反4)$$&c4三羟基二苯乙烯基4&c4!
N3N!#VN<4没食子酰基葡萄糖
苷!\进行含量测定) 流动相为甲醇4j冰醋酸溶液$柱温 ) h$流速 g$ /` ./N1e$检测波长分别为 *($$)$$ 1/) 结果&
大黄 种饮片中均能检测到上述 * 种成分$且 * 种成分的变化趋势相同) 大黄生&酒&醋片中 * 种成分含量较高且较接近$炮
制为熟片和炭片后$* 种成分的含量$与生片相比均降低 ($j以上) 结论&B$\ 均为苷类成分$高温加热炮制对其含量均有显
著的影响$进一步分析比较苷类成分及其相应苷元的含量变化$将为科学阐释炮制前后大黄物质基础的变化规律提供科学依
据)
$关键词%!大黄*饮片*二苯乙烯苷*含量测定
$稿件编号%!*$$$*$$$#
$基金项目%!国家自然科学基金重点项目!)$%)$
$通信作者%!!肖永庆$研究员$博士生导师$主要从事中药化学$中
药炮制方向研究$RMS#!$$(&$&$**$U4/BNS#6,?MbN2#)g-./
$作者简介%!李丽$在职博士生$主要从事中药化学&质量标准及中
药炮制研究$U4/BNS#SNSN%%2#)g-./
!!大黄中含有多种苷类成分$主要有蒽醌苷类&苯
丁酮苷类&二苯乙烯苷类等+, ) 蒽醌类成分为大黄
主要有效成分$因此$国内外的研究者围绕此类成分
进行了大量药理&药效及质量标准方面的研究$而对
于其他成分的研究则鲜有报道) 课题组前期对大黄
种饮片指纹图谱的研究中发现+*, $大黄生片中含
量最高的成分为本文测定的反4)$$&c4三羟基二苯
乙烯基4&c4!
N3N!#VN<4没食子酰基葡萄糖苷!\$
且显著高于任一蒽醌类成分$是大黄饮片物质基础
的重要组成部分$其药理活性也是不容忽视的) 因
此$本文以课题研究中提取分离得到的上述 * 个二
苯乙烯苷为对照品$对大黄 种饮片进行了含量比
较$为尽可能科学&全面地阐释大黄炮制后物质基础
变化规律提供科学依据$并为进一步的药效学比较
研究奠定基础)
!材料
XB@MCO高效液相色谱仪 !XB@MCO AT/A$
XB@MCO*&(% 检测器$U/A.+MC数据处理软件*超声
清洗器 J^ 4$$IU!昆山市超声仪器有限公司*甲
醇为色谱纯$水为纯净水$使用前均经 $g&

/滤
膜滤过*其他试剂均为分析纯)
对照品反4)$$&c4三羟基苯乙烯基4&c4!
N34葡
萄糖苷!B&反4)$$&c4三羟基苯乙烯基4&c4!
N3N
!#VN<4没食子酰基葡萄糖苷!\$均为本实验室从
大黄中分离鉴定$经 YE`<面积归一化法测定纯度
达 7(j以上)
实验用药材采自青海玉树$经中国中医科学院
中药研究所胡世林教授鉴定为掌叶大黄 G(*6+
$.-.+.!6+ ,`的根及根茎*供试饮片以掌叶大黄药
材为样品$按照中国药典(&全国中药炮制规范(
相关项下的炮制方法$分别制备成 $ 批大黄生片&
酒炙片&醋炙片&熟大黄片以及大黄炭片$供实验分
析用)
!方法与结果
U!色谱条件!3DNSM1@U-SNAOMKIG4<
(
柱 !&g#
//m*$ //$

/$3DNSM1@保护柱!&g# //m
*g //$

/*流速 g$ /`./N1e*柱温 ) h)
B流动相甲醇4j冰醋酸溶液!*$i($$检测波
长 *($ 1/*\流动相甲醇4j冰醋酸溶液!)*i#($
检测波长 )$$ 1/) 在此条件下大黄样品中对照品
B$\与其他组分均能达到基线分离$见图 $*)
U!供试品溶液的制备!分别称取大黄饮片粉末
!过 &$ 目筛各 $g D$精密称定$置具塞三角瓶中$
精密加入 $j甲醇 * /` $称重$超声提取 )$ /N1$
放冷$以甲醇补足失重$摇匀$滤过$取续滤液过微孔
滤膜!$g&

/$作为供试品溶液$测定对照品B)
分别称取大黄不同饮片粉末!过 &$ 目筛各
.&.
第 ) 卷第 期
*$$ 年 # 月
!!!!!! ! ! ! ! ! !!!! ! ! ! !
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VT1M$ *$$
!!
B,反4)$$&c4三羟基乙烯基4&c4!
N34葡萄糖苷)
图 !对照品B与供试品YE`<图
\,反4)$$&c4三羟基乙烯基4&c4!
N34!#v4<4没食子酰基葡萄糖苷)
图 *!对照品 \ 与供试品YE`<图
$g D$精密称定$置具塞锥形瓶中$精密加入甲醇 *
/` $密塞$称重$回流提取 ?$放冷$密塞$再称重$
用甲醇补足失重$摇匀$滤过$取续滤液$以微孔滤膜
!$g&

/滤过$作为供试品溶液$测定对照品 \)
U&!对照品溶液的制备!精密称取对照品 B$\ 各
适量$分别加甲醇制成 $g$(% *$$g$( $ D.`e的溶
!!
液$作为对照品溶液)
U_!线性关系考察!取上述 * 种对照品溶液$分别
进样 $$$$$*$

依`法测定$以进样量!

D为
横坐标$峰面积为纵坐标绘制标准曲线$并计算回归
方程 B9f* *)& ()g$%% *J l *& %#*$
0f$g777 **\ 9f) $( *$)g#(% # Je7% *$0f
$g777 7) 结果表明$B在 $g$(% * kg%&& $

D$\在
$g$( k*g#

D有良好的线性关系)
U$!精密度试验!取大黄生片粉末 $g D$精密称
定$制备成 * 种供试品溶液$精密吸取供试品溶液

$`重复进样 次$结果各对照品峰面积积分值的
>8I分别为 g#j$g%j)
U)!稳定性试验!精密吸取 * 种供试液溶液各

$`分别在 $$*$&$#$($*$*& ?进样测定$由峰面积
值统计结果可见样品溶液在 *& ? 内保持稳定$>8I
分别为 g)j$*gj)
U%!重复性试验!取大黄生片粉末 份$各约 $g
D$精密称定$制备成供试品溶液$依法测定并计算含
量$结果各对照品 次测定值的>8I分别为 g7j$
gj)
U`!加样回收试验!精密称定已知含量的大黄生
片粉末适量$共 # 份$分别精密加入各对照品适量$
按供试品溶液制备$进行色谱分析$结果见表 )
表 !大黄生片加样回收
成分 样品量=/D 加入量=/D 测得量=/D 回收率=j 平均值=j >8I=j
B g*% g*% ) *g& # 77g7) 77g*# *g&
g*7# 7 g*% ) *g) 7g&*
g*%$ $ g*% ) *g& % 77g%&
g*7* 7 g*% ) *g7) & $*g$$
g*%% g*% ) *g& ( 77g7
g*% g*% ) *g& # 77g7)
\ )g$ & )g$&$ ( #g*&* % $)g*$ $)g)# g$#
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)g)% )g$&$ ( #g*(( * $g$
)g*% # )g$&$ ( #g*7 7 $&g**
)g$ & )g$&$ ( #g*&* % $)g*$
U#!样品测定!取大黄不同饮片粉末!过 &$ 目
筛各 $g D$精密称定$依法制备成供试品溶液) 精
密吸取对照品溶液

$`供试品溶液 $

$`注入液
相色谱仪测定$见表 *)
&!讨论
本文首次建立了大黄 种饮片中反4)$$&c4三
!!
表 *!大黄 种饮片含量测定!
#
?p&$)f$ j
饮片 B 生大黄 $g#*$ % p$g$&# g)$ p$g(# %
酒大黄 $g#$& 7 p$g$ * g*(( * p$g&) &
醋大黄 $g#7( # p$g*# g)#( ( p$g)* )
熟大黄 $g7 % p$g$*& % $g*)) & p$g$) )
大黄炭 $g$%7 7 p$g$) $ $g*$& p$g$7 $
.#&.
第 ) 卷第 期
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羟基苯乙烯基4&c4!
N34葡萄糖苷!B&反4)$$&c4三
羟基苯乙烯基4&c4!
N3N!#VN苷!\的 YE`<测定方法) 试验中对不同提取溶
剂&提取方法进行了比较$确定供试品制备以 $j
甲醇$超声提取 )$ /N1$成分 B的含量最高*以甲醇
回流提取 ?$成分 \的含量最高) 丰富了大黄饮片
的质量评价指标)
通过对大黄生&酒&醋&熟&炭等 种各 $ 批次
饮片中成分B$\的含量测定$结果显示$大黄 种饮
片中 * 种成分的变化趋势相同) * 种成分在大黄
生&酒&醋片中含量较高且较接近$炮制为熟片和炭
片后$* 种成分的含量均显著降低$与生片相比均降
低 ($j以上)
大黄饮片中含有多种苷类成分$但无论是蒽醌
苷类&苯丁酮类还是二苯乙烯苷类成分$经过高温加
热炮制后其含量均有非常显著的下降$苷类成分含
量的大幅度降低$既有可能是转化为相应的苷元$也
有可能被破坏$因此还必须结合饮片炮制前后相应
苷元成分的含量测定$才能准确&客观地分析出各种
成分在炮制前后的变化途径) 从而确切掌握该类成
分的变化规律$为阐释炮制前后大黄物质基础的变
化规律提供科学依据)
$参考文献%
+,!匡海学,中药化学+9,,北京#中国中医药出版社$*$$)#7&,
+*,!李丽$张村$肖永庆$等,大黄 种饮片化学成分的变化规律
+V,,北京中医药大学学报$*$$7$)*!*#()7,
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AC.-MOOMQ AC.QT-@O$ B1Q @?MNC-.1@M1@O+MCM/.CM-S.OMN1 @?M1.4ABC-?MQ ANM-MO$ @?MdN1MDBCC.BO@OANM-MOB1Q @?M+N1MC.BO@ANM-MO,
Y.+MdMC$ @?M-.1@M1@OCMQT-MQ OND1NPN-B1@S5N1 .@?MC@+.ZN1QO.PANM-MO+?N-? +MCMS.+MC@?B1 ($ AMC-M1@.P1.4ABC-?MQ ANM-MO,0@A+
R/GI.@A# YND? @M/AMCB@TCM/B5CMOTS@N1 BOND1NPN-B1@CMQT-@N.1 .1 DS5-.ONQMN1 @?MANM-MO.PC?T\BC\$ B1Q +M?BdMCM-MNdMQ ON/NSBCCM4
OTS@OPC./QM@MC/N1B@N.1 .P.@?MCDS5-.ONQM-./A.T1QO,HTC@?MCB1BS5ONOB1Q -./ABCNO.1 +N@? @?M-.1@M1@.P@?MNC-.CMOA.1QN1DBDS54
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+ ?^D Z@EFI,!G(*6+$.-.+.!6+* AC.-MOOMQ AC.QT-@O* O@NS\M1MDS5-.ONQM* QM@MC/N1B@N.1
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$责任编辑!周驰%
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