全 文 ：ＧＵＯＪｕａｎ，ＣＨＥＮＣｈａｎｇｘｕｎ，ＧＵＷｅｉｌｉａｎｇ，ＤＵＪｕｎ，ＳＨＥＮＹｕｎｈｕｉ
（ＤｅｐｔａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＴｉｎｇｌｉｚｉｏｎｃｏｌａｇｅｎｖｏｌｕｍｅｆｒａｃｔｉｏｎ（ＣＶＦ）ａｎｄｐｅｒｉｖａｓｃｕｌａｒｃｏｌａｇｅｎｖｏｌ
ｕｍｅａｒｅａ（ＰＶＣＡ）ｉｎｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｌｅｔｉｓｓｕｅｏｆｃａｒｄｉａｃｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｂｄｏｍｉｎａｌａｏｒｔｉｃｂａｎｄｉｎｇｉｎｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ
ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｂｄｏｍｉｎａｌａｏｒｔｉｃｂａｎｄｉｎｇ（ＡＡＢ）ｉｎｒａｔｓ．Ａｆｔｅｒ３０ｄａｙｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｔｈｅｓｙｓｔｏｌｉｃｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ（ＳＢＰ），ｄｉａｓ
ｔｏｌｉｃｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ（ＤＢＰ）；ｈｅａｒｔｒａｔｅ（ＨＲ）ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ．ＴｈｅｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌａｓｓａｙｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆｔｈｅＨＥｓｔａｉｎｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｔｈｅｍｙｏ
ｃａｒｄｉｕｍｃｅｌｃｒｏｓｓｓｅｃｔｉｏｎａｎｄｃｏｌａｇｅｎｓｔａｉｎ（ＶａｎＧｉｅｓｏｎ＇ｍｅｔｈｏｄ）ｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｃｏｌａｇｅｎｃｏｎｔｅｎｔ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｃｏｌａｇｅｎｖｏｌｕｍｅｆｒａｃｔｉｏｎ
（ＣＶＦ）ａｎｄｐｅｒｉｖａｓｃｕｌａｒｃｏｌａｇｅｎｖｏｌｕｍｅａｒｅａ（ＰＶＣＡ）．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄａｔａｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔＴｉｎｇｌｉｚｉｄｅｃｒｅａｓｅｄＳＢＰ，
ＤＢＰ，ＨＲａｎｄｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｌａｇｅｎｃｏｎｔｅｎｔ（ＣＶＦ，ＰＶＣＡ）ａｎｄｌｅｓｓｅｎｔｈｅｍｙｏｃａｒｄｉｕｍｃｅｌｃｒｏｓｓｓｅｃｔｉｏｎ（Ｐ＜
００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｉｎｇｌｉｚｉｍａｙｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｌａｇｅｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆｖｅｎｔｒｉｃｌｅａｎｄａｔｅｎｕａｔｅｔｈｅｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｉｎｄｕｃｅｄｂｙ
ａｂｄｏｍｉｎａｌａｏｒｔｉｃｂａｎｄｉｎｇ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｔｉｎｇｌｉｚｉ；ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ；ｐｅｒｉｖａｓｃｕｌａｒｃｏｌａｇｅｎｖｏｌｕｍｅａｒｅａ；ｃｏｌａｇｅｎｖｏｌｕｍｅｆｒａｃｔｉｏｎ
［责任编辑　古云侠］
［收稿日期］　２００７０６１０
［基金项目］　教育部“长江学者和创新团队发展计划”项目
（ＩＲＴ０４１３）
［通讯作者］　崔巍，Ｔｅｌ：（０１０）８４０１３６９５，Ｅｍａｉｌ：ｃｕｉｗｅｉ１１１７＠
ｓｉｎａ．ｃｏｍ
承气生血方抗肿瘤及调节细胞免疫作用的研究
唐炳华１，崔　巍２，王继峰１，严美花１，李　进１
（１．北京中医药大学 基础医学院 人体机能系，北京 １０００２９；
２．国家教育部 中医内科学重点实验室，中医内科学北京市重点实验室，
北京中医药大学 附属东直门医院，北京 １００７００）
［摘要］　目的：研究承气生血方抗肿瘤及调节细胞免疫作用，分析其对敏感肿瘤凋亡率和Ｔ淋巴细胞亚群的
影响。方法：选用Ｓ１８０腹水型和Ｌｅｗｉｓ肺癌实体型荷瘤小鼠筛选敏感瘤株。５５只敏感瘤株负荷小鼠进行抗肿瘤治
疗，随机分为５组：模型组、环磷酰胺组（３０ｍｇ·ｋｇ－１）和承气生血方２４，１２，０６ｇ·ｋｇ－１３个剂量组。治疗后以
流式细胞术分析小鼠敏感肿瘤外周血Ｔ淋巴细胞亚群百分比和肿瘤细胞凋亡率的变化。结果：Ｌｅｗｉｓ肺癌实体型
肿瘤为承气生血方敏感肿瘤。ＰＩ染色法分析，承气生血方高、中剂量组能明显诱导肿瘤细胞凋亡，与模型组比较有
显著性差异（Ｐ＜００５）。ＡｎｎｅｘｉｎⅤ与ＰＩ双染法分析，各给药组均出现肿瘤细胞早期凋亡（Ｐ＜００１）。Ｔ淋巴细胞
亚群结果分析，模型组ＣＤ３，ＣＤ４和ＣＤ４／ＣＤ８与正常组比较明显降低（Ｐ＜００１），ＣＤ８变化不明显；给药组 ＣＤ３，
ＣＤ４和ＣＤ８比正常组明显降低（Ｐ＜００１），ＣＤ４／ＣＤ８变化不明显。结论：承气生血方可选择性抑制小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌
实体型肿瘤生长，并具有抗转移作用，其抗肿瘤作用可能通过诱导肿瘤细胞凋亡而实现。承气生血方通过提高
ＣＤ４／ＣＤ８改善小鼠细胞免疫功能。
［关键词］　承气生血方；抗肿瘤；细胞凋亡；Ｔ淋巴细胞亚群
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）０３０２８７０５
　　承气生血方是治疗恶性肿瘤的经验方，采用增
液承气汤加减，重在驱邪，兼有化痰、清热、解毒及补
血活血之功。临床上用于治疗肿瘤病人气血两虚证
取得了较为满意的疗效。作者对其药效已做了初步
研究［１，２］，认为承气生血方抗肿瘤作用明显，且疗程
短，毒副作用小。随着研究的深入，作者又发现承气
生血方抑制肿瘤的作用具有选择性，并对荷瘤小鼠
细胞免疫功能有一定调节作用。因此，对承气生血
方进行肿瘤筛选就可以找到其最有效的靶向肿瘤，
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第３３卷第３期
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指导临床用药。
１　材料
１．１　动物　ＩＣＲ小鼠 ７０只，Ｃ５７ＢＬ纯系小鼠 ７０
只。均为雄性，体重１８～２２ｇ。由北京维通利华实
验动物技术有限公司提供，合格证号 ＳＣＸＫ（京）
２００２０００３。
１．２　瘤株　Ｓ１８０荷瘤小鼠（腹水型），由中国中医
科学院广安门医院提供。Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠（实
体型），由中国医学科学院药物研究所药理室提供。
１．３　药物　承气生血方处方组成：天花粉８ｇ，雄黄
２ｇ，大黄１０ｇ，柴胡１０ｇ，牛黄２ｇ，当归５ｇ，甘草５ｇ
等。经炒焦、打碎、过１２０目筛网制成药粉。临床给
药量：每人每天８ｇ。按照成人标准体重６０ｋｇ，小鼠
给药量为人的 ９倍剂量，推算出小鼠的等效剂量：
８×９／６０＝１２ｇ·ｋｇ－１。以此作为中剂量设置小鼠
给药的高、中、低剂量分别为每天０６，１２，２４ｇ·
ｋｇ－１。阳性对照药环磷酰胺等效剂量为每天３０ｍｇ
·ｋｇ－１，上海华联制药有限公司产品，批号０４０３０６。
１．４　试剂　碘化丙啶（ＰＩ），ＲＮａｓｅＡ：均为Ｓｉｇｍａ公
司产品。ＡｎｎｅｘｉｎⅤＦＩＴＣＡｐｏｐｔｏｓｉｓＤｅｔｅｃｔｉｏｎＫｉｔ
（Ｃａｔ５５６５４７，Ｌｏｔ５８６３８），ＣＤ３ｅＦＩＴＣ（Ｃａｔ５５３０６１，
Ｌｏｔ３０１１６），ＣＤ４ＰＥ（Ｃａｔ５５７３０８，Ｌｏｔ３７６７７），
ＣＤ８ａＰＥＣｙ５（Ｃａｔ５５３０３４，Ｌｏｔ３７８７９）：均为美国
ＢＤ公司产品。
１．５　仪器　ＲＭ２１３５石蜡切片机，德国ＬＥＩＣＡ公司生
产；ＢＸ６０荧光显微镜，日本ＯＬＹＭＰＵＳ公司产品；美国
ＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．ＳＰＯＴ－Ⅱ数码成相系统及
ＵｎｉｖｅｒｓａｌＩｍａｇｉｎｇＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ．ＭｅｔａＭｏｒｐｈ图像分析系
统；ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ流式细胞仪，美国ＢＤ公司产品。
２　方法
２．１　造模及体内抑瘤试验　采用 Ｓ１８０腹水型和
Ｌｅｗｉｓ肺癌实体型２种荷瘤小鼠进行筛选。严格按
照药理实验方法学中动物移植性肿瘤实验法［３］造
模，ＩＣＲ小鼠腹腔接种 Ｓ１８０瘤株，Ｃ５７ＢＬ小鼠腋皮
下接种Ｌｅｗｉｓ肺癌实体肿瘤。接种后第１天，将动
物称体重，随机分为５组，每组１１只。试验高、中、
低剂量组分别给予承气生血方每天２４，１２，０６ｇ
·ｋｇ－１，阳性药组每天给予环磷酰胺３０ｍｇ·ｋｇ－１，
模型组给予同体积生理盐水。剩余动物作为正常组
小鼠，不接种肿瘤细胞，同样给予同体积生理盐水。
灌胃体积０２ｍＬ／只，每日１次。环磷酰胺组连续
给药７ｄ，中药组、正常组及模型组连续灌胃１０ｄ。
２．２　腹水型肿瘤疗效评价　实验期间逐日记录动
物死亡情况。观察３０ｄ，分别记录模型组和治疗组
动物的平均生存时间，计算生命延长率：
生命延长率（％）＝（实验组生存时间／模型组生存时
间－１）×１００％
２．３　实体瘤疗效评价　停药后第２天，各组动物眼
球取血１ｍＬ（肝素抗凝２０Ｕ·ｍＬ－１），称体重，并剖
取各组动物的肿瘤及肺组织，称重。统计各组动物
的肿瘤抑制率。观察肺组织的形态变化、有无转移
灶，称重后以福尔马林固定，制作石蜡切片，ＨＥ染
色后显微镜观察。
肿瘤抑制率（％）＝（１－实验组瘤重／模型对照组瘤
重）×１００％
２．４　ＰＩ染色法分析肿瘤细胞凋亡　将实体瘤制备
成细胞悬液。取 １×１０６个／ｍＬ细胞离心，弃上清，
加入７０％冰乙醇固定过夜。次日，取出固定细胞，
１０００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，弃上清，用 ＰＢＳ洗２次，
加入ＲＮａｓｅＡ（终浓度２０μｇ·ｍＬ－１），３７℃水浴孵
育３０ｍｉｎ，再加入ＰＩ（终浓度５０μｇ·ｍＬ－１），４℃冰
箱避光染色１ｈ，过３００目尼龙网，流式细胞仪测定
细胞凋亡率。
２．５　定量分析肿瘤细胞早期凋亡　严格按Ａｎｎｅｘｉｎ
Ⅴ－ＦＩＴＣＡｐｏｐｔｏｓｉｓＤｅｔｅｃｔｉｏｎＫｉｔ说明书操作对肿瘤
细胞进行 ＰＩ及 ＡｎｎｅｘｉｎⅤＦＩＴＣ双染，流式细胞仪
测定早期细胞凋亡率。
２．６　荷瘤小鼠Ｔ淋巴细胞亚群测定　将上述各组
动物抗凝血以ＣＤ３ｅＦＩＴＣ，ＣＤ４ＰＥ，ＣＤ８ａＰＥＣｙ５标
记染色，溶解红细胞后，ＰＢＳ洗涤，流式细胞仪测定
Ｔ淋巴细胞亚群。
２．７　统计学分析　实验数据以 珋ｘ±ｓ表示，采用
ＳＰＳＳ１３０软件用单因素方差分析统计数据。
３　结果
３．１　对Ｓ１８０腹水瘤和Ｌｅｗｉｓ肺癌实体瘤的抑制作用
　实验结果表明，承气生血方对小鼠Ｓ１８０腹水型肿
瘤不敏感，生命延长率无明显改善。承气生血方对小
鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌实体型肿瘤敏感，停药后第２天取材，肉
眼可见各实验组比模型组肿瘤明显减小；环磷酰胺组
１０只动物有３只未发现肿瘤生长，该组其他动物肿瘤
也很小。经统计学分析除承气生血方低剂量组外，其
他各组与模型组比较均差异显著（Ｐ＜００１）。肿瘤
抑制率环磷酰胺组高达９０５％，承气生血方高、中剂
量组分别为４７６％和３３３％。见表１。
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表１　承气生血方对Ｓ１８０腹水瘤和Ｌｅｗｉｓ肺癌实体瘤的抑制作用（珋ｘ±ｓ）
组别
剂量
／ｇ·ｋｇ－１
Ｓ１８０腹水瘤
ｎ 平均生存时间／ｄ 生命延长率／％
Ｌｅｗｉｓ肺癌
ｎ 瘤重／ｇ 抑制率／％
正常　　　 － １１ ３０ － １０ ０ －
模型　　　 － １０ １６７±４９５ ０ ９ ２１±０４６ ０
环磷酰胺　 ００３ １１ ２０９±５５８１） ２５１ １０ ０２±０２４１） ９０５
承气生血方 ２４ １０ １４５±３６０ －１３２ ８ １１±０４９１） ４７６
　 １２ １１ １３１±４８７ －２１５ １０ １４±０８５１） ３３３
　 ０６ １１ １６８±４５８ ０６ ８ ２２±０３６ －４７６
　　注：与模型组比较 １）Ｐ＜００１
３．２　对 Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠肺转移的抑制作用　解剖
小鼠取肺脏，肉眼观察模型组和给药组肺脏均较正
常组大，部分小鼠肺脏可见出血点，可能与灌胃有
关，模型组有２只动物观察到针尖大小转移灶，其
他组肉眼均未见肺转移。经福尔马林固定，石蜡切
片，ＨＥ染色后，显微镜下观察，模型组９只动物
均见肺部转移，其他组也有不同数量转移。结果表
明，环磷酰胺及承气生血方均能抑制肺转移，环磷
酰胺抑制率达９０％，承气生血方高、中、低剂量
组抑制率分别为７５％，６０％和６２５％；各给药组
平均转移结节数与模型组比较均有显著性差异
（Ｐ＜００１）。见表２。
表２　承气生血方对小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌转移的影响（珋ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ｎ 肺重／ｇ 肉眼转移／只 镜下转移／只 转移抑制率／％ 转移结节
正常　　　 － １０ ０１１７±０００９ － － － －
模型　　　 － ９ ０１４３±００１５２） ２ ９ ０ ３２０±２２０１
环磷酰胺　 ００３ １０ ０１３６±００１０２） ０ １ ９０ ０１０±０３１６１）
承气生血方 ２４ ８ ０１３４±００１３２） ０ ２ ７５ ０７２±１３２４１）
　 １２ １０ ０１３７±０００９２） ０ ４ ６０ ０９０±１２８７１）
　 ０６ ８ ０１４６±００１６２） ０ ３ ６２５ ０８８±１４５８１）
　　注：与模型组比较 １）Ｐ＜００１；与正常组比较２）Ｐ＜００１
３．３　ＰＩ染色法分析细胞凋亡　采用ＰＩ标记，流式细
胞仪测定结果。从肿瘤细胞比例分析，模型组较多
（６１７３％），环磷酰胺组较少（２５８９％），承气生血方
高、中剂量组也较少，分别为４５３８％和４９０７％，与模
型组比较有显著性差异（Ｐ＜００５）。从凋亡率分析，
承气生血方高、中剂量组肿瘤细胞凋亡率可达到
３０２４％和２９９４％，而模型组为１５７６％，与模型组比
较有显著差异（Ｐ＜００５）；承气生血方低剂量组凋亡
率为１９０８％，与模型组比较无显著性差异；而环磷酰
胺组凋亡率很低，仅为４４８％，说明环磷酰胺不以诱
导细胞凋亡途径抑制肿瘤细胞生长。从Ｓ期增殖水
平分析，各组间均无差异。见表３。
表３　流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡率（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ 肿瘤细胞比例／％ 凋亡率／％ Ｓ期／％
模型　　　 － ６１７３±９６９ １５７６±１０４０ ５２６９±６６４
环磷酰胺　 ００３ ２５８９±８３９１） ４４８±１５８１） ５６５０±２１３
承气生血方 ２４ ４５３８±９８７２） ３０２４±７６９２） ５３８４±４５３
　 １２ ４９０７±１２５３２） ２９９４±９２３２） ５２８４±４６８
　 ０６ ６１１８±１３９４ １９０８±８２６ ５６５８±３６０
　　注：与模型组比较 １）Ｐ＜００１，２）Ｐ＜００５
３．４　肿瘤细胞早期凋亡的定量检测　结果表明，各
给药组均能明显增加肿瘤细胞早期凋亡率（Ｐ＜
００１）。承气生血方高剂量组早期凋亡率高达
５００７％，中 剂 量 组 为 ３７９２％，低 剂 量 组 为
２７２５％，而模型组仅为 ８７０％。但晚期凋亡率变
化不明显。见表４。
表４　ＡｎｎｅｘｉｎⅤ与ＰＩ双染分析肿瘤细胞早期凋亡
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ 早期凋亡／％ 晚期凋亡／％
模型　　　 － ８７０±２７６ １１１２±１９５
承气生血方 ２４ ５００７±６５４１） １３４９±２４８
　 １２ ３７９２±４９８１） １４００±３７３
　 ０６ ２７２５±５３２１） １４４８±１８７
　　注：与模型组比较 １）Ｐ＜００１
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　　由于ＰＩ染色法提示环磷酰胺组凋亡率不明显，
因此ＰＩ和ＡｎｎｅｘｉｎⅤＦＩＴＣ双染法未检测环磷酰胺
组早期凋亡率。
３．５　Ｔ淋巴细胞亚群分析　结果表明，模型组、环磷
酰胺组和承气生血方高、中、低剂量组的总Ｔ淋巴细
胞 （ＣＤ３）百分比均明显低于正常组（Ｐ＜００１），说
明肿瘤和药物对小鼠细胞免疫功能都有不同程度的
损伤。同时发现肿瘤损伤主要表现为 Ｔ辅助细胞
（ＣＤ４）百分比降低（Ｐ＜００１），而药物损伤Ｔ辅助细
胞（ＣＤ４）和 Ｔ抑制细胞（ＣＤ８）百分比均降低（Ｐ＜
００１）。从ＣＤ４／ＣＤ８分析，模型组和环磷酰胺组与正
常组比较有显著性差异（Ｐ＜００１），承气生血方组与
正常组比较无差异，见表５。提示承气生血方可能通
过提高ＣＤ４／ＣＤ８改善小鼠细胞免疫功能。
表５　荷瘤小鼠外周血ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８测定（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ＣＤ３／％ ＣＤ４／％ ＣＤ８／％ ＣＤ４／ＣＤ８
正常　　　 － ７４８６±１９９１） ５８３３±３６０１） １５８６±０５１ ３６９±０３３１）
模型　　　 － ３７８５±７９２２） ２１０３±７９２２） １７０７±７２７ １３７±０５５２）
环磷酰胺　 ００３ ２１３３±４７５１，２） １４３５±３７７１，２） ７２４±２００１，２） ２０９±０６３１，２）
承气生血方 ２４ ２７０５±３６５１，２） ２０１４±２９２２） ６８４±１６４１，２） ３０５±０６５１）
　 １２ ３６１０±４９６２） ２５３８±２５６２） １０３２±２６０１，２） ２８７±０６０１）
　 ０６ ３８９６±４７８２） ２９９１±４６５１，２） １０３５±２１５１，２） ３００±０７８１）
　　注：与模型组比较 １）Ｐ＜００１；与正常组比较２）Ｐ＜００１
４　讨论
作者选用 Ｓ１８０腹水型和 Ｌｅｗｉｓ肺癌实体型荷
瘤小鼠同时进行抗肿瘤作用试验，结果表明：承气生
血方对小鼠 Ｌｅｗｉｓ肺癌实体型肿瘤敏感，而对小鼠
Ｓ１８０腹水型肿瘤不敏感。针对Ｌｅｗｉｓ肺癌实体型肿
瘤，承气生血方高、中剂量组明显抑制肿瘤细胞生长
（Ｐ＜００１），高、中、低剂量组明显抑制肿瘤细胞转
移（Ｐ＜００１）。提示：承气生血方选择性地作用于
Ｌｅｗｉｓ肺癌肿瘤细胞，临床用药也应根据不同肿瘤选
择用药。
从承气生血方组方分析，承气生血方的君药为
天花粉和雄黄。早在２０世纪７０年代，天花粉就被
用于恶性滋养叶肿瘤的治疗，并将天花粉蛋白作为
治疗恶性滋养叶肿瘤的首选药物之一［４］。高富红
等［５］报道天花粉蛋白具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导
肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞蛋白质的合成等作用。
鲁继斌等［６］研究表明，抗人肺腺癌单抗 ＣＭＵ１５Ａ与
天花粉蛋白的结合物即免疫毒素 ＣＭＵ１５ＡＴＣＳ对
荷瘤人肺癌裸鼠具有导向治疗作用，此免疫毒素靶
向抑癌效果明显，腹腔用药和肿瘤内用药的抑瘤率
分别为７６％和９９４％，且可明显延长荷瘤裸鼠的生
存时间。雄黄的主要成分为硫化砷（Ａｓ２Ｓ２），具有解
毒、杀虫、燥湿、祛痰等作用。潘炳力等［７］报道了雄
黄对ＮＢ４，Ｋ５６２及 ＨＬ６０等细胞的抗肿瘤作用，指
出诱导肿瘤细胞凋亡是雄黄抗肿瘤作用的一种比较
明确而重要的机制。陈建霞等［８］也研究了雄黄诱
导白血病细胞凋亡的作用，结果表明雄黄通过影响
白血病细胞ｂｃｌ２蛋白的表达，导致白血病细胞发生
凋亡。
本研究也证实，以天花粉和雄黄为君药的承气
生血方同样具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。在 ＰＩ
染色法实验中初步得出结论，承气生血方高、中剂量
组可明显诱导肿瘤细胞凋亡，凋亡率分别为
３０２４％和２９９４％（与模型组比较 Ｐ＜００５）。在
ＡｎｎｅｘｉｎⅤ与 ＰＩ双染法实验中又进一步证实，承气
生血方高、中、低３个剂量组均能诱导肿瘤细胞早期
凋亡，早 期 凋 亡 率 分 别 为 ５００７％，３７９２％，
２７２５％（与模型组比较 Ｐ＜００１），提示：承气生血
方诱导Ｌｅｗｉｓ肺癌肿瘤细胞凋亡主要是通过诱导早
期凋亡而实现的。
在抗肿瘤免疫效应中，细胞免疫比体液免疫起
着更为重要的作用，细胞免疫应答主要是 Ｔ细胞介
导的特异性细胞免疫，已证明 Ｔ细胞具有有效的抗
肿瘤作用［９］。有文献表明［１０，１１］，当不同的 Ｔ淋巴细
胞亚群在数量上和功能上发生异常时，即可导致机
体免疫紊乱并诱发一系列病理变化，其中包括肿瘤
的发生与发展。有研究［１２］认为 Ｔ细胞亚群在机体
抗肿瘤免疫反应中起重要的作用，ＣＤ４细胞能促进
效应细胞抗肿瘤作用，ＣＤ８细胞则主要起相反的免
疫抑制作用，以ＣＤ４／ＣＤ８为中心的免疫调节细胞是
机体免疫状态的中心环节。本研究表明，荷瘤小鼠
ＣＤ３和ＣＤ４细胞百分比较正常组降低５０％以上，而
ＣＤ８细胞百分比变化不大，说明肿瘤引起 ＣＤ３细胞
降低，主要是通过影响 ＣＤ４而实现的，ＣＤ４的降低
可能与肿瘤的发生有关。承气生血方通过逐步升高
ＣＤ４，相对降低ＣＤ８，从而使ＣＤ４／ＣＤ８增高，由此提
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第３３卷第３期
２００８年２月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００８
高机体细胞免疫功能。
综上，承气生血方对实验性肿瘤有选择性抑制
作用，并可调控荷瘤小鼠的细胞免疫功能，对临床用
药具有辅助性指导意义。
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ａｎｄｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ
ＴＡＮＧＢｉｎｇｈｕａ１，ＣＵＩＷｅｉ２，ＷＡＮＧＪｉｆｅｎｇ１，ＹＡＮＭｅｉｈｕａ１，ＬＩＪｉｎ１
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２．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＩｎｔｅｒｎａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ（ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ），ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，
Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆＣｈｅｎｇｑｉＳｈｅｎｇｘｕｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｉｎａｎｔｉｔｕｍｏｒａｎｄｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｉｏｎａｎｄｔｏｅ
ｖａｌｕａｔｅｉｔｓｅｆｅｃｔｏｎａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｕｂｓｅｔｓｏｆｔｕｍｏｒｂｅａｒｉｎｇｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｓ１８０ａｓｃｉｔｅｓｔｕｍｏｒａｎｄＬｅｗｉｓｌｕｎｇｃａｒｃｉｎｏｍａ
ｔｕｍｏｒｂｅａｒｉｎｇｍｉｃｅｗｅｒｅｕｓｅｄｉｎｔｈｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．Ｔｈｅｎ５５ｍｉｃｅｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｒａｎｄｏｍｌｙｗｉｔｈｔｈｅｍｏｄｅｌ，ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ（３０ｍｇ·
ｋｇ－１），ｏｒｔｈｒｅｅｄｉｆｅｒｅｎｔｄｏｓａｇｅｓｏｆＣｈｅｎｇｑｉＳｈｅｎｇｘｕｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ（２４，１２，０６ｇ·ｋｇ－１）．Ａｆｔｅｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｔｕｍｏｒ
ｃｅｌａｎｄｐｅｒｉｐｈｅｒａｌＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｕｂｓｅｔｓｏｆｔｕｍｏｒｂｅａｒｉｎｇｍｉｃｅｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｌｅｗｉｓｌｕｎｇｃａｒｃｉｎｏｍａｗａｓａ
ｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｕｍｏｒｃｅｌｌｉｎｅｔｏＣｈｅｎｇｑｉＳｈｅｎｇｘｕｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｗａｓｏｂ
ｓｅｒｖｅｄａｆｔｅｒａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｈｉｇｈａｎｄｍｅｄｉｕｍｄｏｓｅｏｆＣｈｅｎｇｑｉＳｈｅｎｇｘｕｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ（Ｐ＜００５）ｂｙＰＩｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄｅａｒｌｙａｐ
ｏｐｔｏｓｉｓｉｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｏｓｅｓｏｆＣｈｅｎｇｑｉＳｈｅｎｇｘｕｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｂｙＡｎｎｅｘｉｎＶａｎｄＰＩｄｏｕｂｌｅｓｔａｉｎｉｎｇ
（Ｐ＜００１）．ＴｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｕｂｓｅｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆＣＤ３，ＣＤ４ａｎｄＣＤ４／ＣＤ８ｒａｔｉｏｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
ｌｙｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｗｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｒｍａｌｏｎｅｓ（Ｐ＜００１），ｗｈｉｌｅｎｏｃｈａｎｇｅｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎＣＤ８．Ｉｎａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｓ，
ＣＤ３，ＣＤ４ａｎｄＣＤ８ｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｎｏｒｍａｌｏｎｅｓ（Ｐ＜００１），ｂｕｔＣＤ４／ＣＤ８ｒａｔｉｏｄｉｄｎｏｔｃｈａｎｇｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕ
ｓｉｏｎ：ＣｈｅｎｇｑｉＳｈｅｎｇｘｕｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｈａｓｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙｉｎｈｉｂｉｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｍｏｕｓｅＬｅｗｉｓｌｕｎｇｃａｒｃｉｎｏｍａａｎｄｔａｋｅｓａｎａｎｔｉ
ｔｒａｎｓｆｅｒｒｏｌｅ．Ｉｔｓａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｅｃｔｍａｙｂｅｏｗｉｎｇｔｏｉｎｄｕｃｉｎｇｔｕｍｏｒｃｅｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ．ＣｈｅｎｇｑｉＳｈｅｎｇｘｕｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｉｍｐｒｏｖｅｓｃｅｌｕｌａｒｉｍ
ｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｅｎｈａｎｃｉｎｇＣＤ４／ＣＤ８ｒａｔｉｏ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ＣｈｅｎｇｑｉＳｈｅｎｇｘｕｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；Ｔｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｕｂｓｅｔｓ
［责任编辑　古云侠］
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第３３卷第３期
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