全 文 ： 表３ １０个预测集样品对校正模型的检验结果 ｇ·Ｌ－１
序号
丹酚酸Ｂ
真实值 预测值 相对误差／％
丹参酮ⅡＡ
真实值 预测值 相对误差／％
葛根素
真实值 预测值 相对误差／％
１ ０３６６１ ０３７２５ －１７５ ００１５８ ００１５８ ０ ０１７５７ ０１９０２ －８２５
２ ０５８９４ ０５７９９ １４４ ００１５４ ００１４９ ３２５ ００８７２ ００８５５ １９５
３ ０７５７５ ０７５４４ ０４１ ００２５８ ００２４９ ３４９ ０３４５７ ０３６４９ －５５５
４ ０３５９６ ０３５６４ ０８９ ００２６０ ００２５８ ０７７ ０１６３９ ０１７０９ －４２７
５ ０６２４５ ０６２１５ ０４８ ０００５２ ０００５０ ３８５ ０６４４４ ０６４７８ －０５３
６ ０３７４２ ０３７６０ －０４８ ０００８５ ０００９２ －８２４ ０６０３４ ０６３３２ －４９４
７ ０９９８５ １００９５ １１０ ００１６３ ００１６６ －１８４ １０８５６ １１０１９ －１５０
８ ０４５４３ ０４５６５ －０４８ ００１４９ ００１５１ －１３４ ０９０９０ ０８８２３ ２９５
９ ０５６３３ ０５５００ ２３６ ００１６６ ００１７２ －３６１ ０７８５９ ０７９９８ －１７７
１０ ０８０５６ ０７９０４ １８９ ００２０３ ００２１３ －４９３ ０９８７６ ０９９７３ －０９８
的含量，得到校正集中的决定系数分别为０９６７７，
０９８８６，０９７０４，校正标准偏差分别为 ００８１３，
００２４３，０００１６４；预测集的决定系数分别为０９６９
９，０９７６１，０９６８３，相对标准偏差分别为００６８３，
００３１３，０００１１１。该方法在同时定量分析复方多
组分体系时，具有分析结果准确、简便、快速廉价、易
于推广使用等优点。但由于建立模型时样品数太
小，在增大样品代表性的基础上，其决定系数会更加
优化。
［参考文献］
［１］ 芦永军，曲艳玲，曹志强，等．人参总糖的近红外光谱定量分析
［Ｊ］．光谱学与光谱分析，２００６，８（２６）：１４５７．
［２］ 王 丽，何 鹰，邱招钗，等．光纤近红外光谱法在中草药分析
中的应用———甘草中甘草酸含量的测定［Ｊ］．光谱学与光谱分
析，２００５，９（２５）：１３９７．
［３］ 谷筱玉，王日燕，徐可欣，等．冰片的近红外光谱法检测［Ｊ］．光
谱学与光谱分析，２００４，２（２４）：１５５．
［４］ 瞿海斌，刘 全，程翼宇．近红外漫反射光谱法测定黄连浸膏
粉中生物碱含量［Ｊ］．分析化学，２００４，４（３２）：４７７．
［责任编辑 王亚君］
［收稿日期］ ２００７０９１２
［通讯作者］ 李曼玲，Ｔｅｌ：（０１０）６４０１４４１１２９３９
吴茱萸药材中绿原酸的含量测定
康 琛，李曼玲，殷文光，刘淑芝
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
吴茱萸为芸香科植物吴茱萸 Ｅｖｄｉａｒｕｔａｅｃａｒｐ
（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ．，石虎 Ｅ．ｒｕｔａｅｃａｒｐ（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ．
Ｖａｒ．ｏｆｉｃｉｎａｌｉｓ（Ｄｏｄｅ）Ｈｕａｎｇ或疏毛吴茱萸 Ｅ．ｒｕ
ｔａｅｃａｒｐ（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ．Ｖａｒ．ｂｏｄｉｎｉｅｒｉ（Ｄｏｄｅ）Ｈｕａｎｇ
的干燥近成熟的果实。２００５年版《中国药典》以吴
茱萸碱和吴茱萸次碱为对照品对吴茱萸药材进行鉴
别和含量测定，据报道吴茱萸碱和吴茱萸次碱为吴
茱萸药材的镇痛成分［１２］，近年来研究发现吴茱萸中
含有绿原酸成分［３］。本研究参考文献［４］建立了
吴茱萸中绿原酸高效液相含量测定方法。
１ 仪器、试剂与药材
Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪，四元泵，７７２５ｉ手动进
样器，ＵＶ检测器及 Ｍｉｌｅｎｎｉｕｍ３２色谱工作站。甲醇
为优级纯，其他试剂均为分析纯，水为自制高纯水。
绿原酸对照品（批号０７５３９９１０）购自中国药品生物
制品检定所。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ）；流动相 甲醇水冰醋酸（１５∶８５∶５５），
流速０７ｍＬ·ｍｉｎ－１。检测波长３２７ｎｍ。理论塔板
数按绿原酸峰计算不低于２０００。
·５９１２·
第３３卷第１７期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８
２．２ 线性关系的考察 精密称取绿原酸对照品，用
甲醇溶解，配制成００７６ｍｇ·ｍＬ－１标准溶液。分别
进样２，４，６，８，１０μＬ，以绿原酸进样量为自变量，以
峰面积为因变量，求得回归方程 Ｙ＝４３３×１０６Ｘ－
３６３×１０４，ｒ＝０９９９９。对照品进样量在 ０１５～
０７６μｇ与峰面积呈线性，且截距较小，采用外标一
点法定量。
２．３ 精密度试验 样品溶液连续进样５次，绿原酸
峰面积ＲＳＤ０１２％。
２．４ 重复性试验 对一批样品进行５次测定，绿原
酸峰面积ＲＳＤ０９０％。
２．５ 稳定性试验 取新制备的样品溶液，于０，１，
２，４，６，８，１６，２４ｈ进样分析，绿原酸含量 ＲＳＤ
１０％，样品溶液在２４ｈ内稳定。
２．６ 加样回收试验 采用加样回收法。取已知含
量的样品，分别添加绿原酸对照品，测得绿原酸的平
均回收率１０４９％，ＲＳＤ０７５％。结果见表１。
表１ 绿原酸加样回收率
称样量
／ｍｇ
样品中量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
１０００ ０４９０ １０３９ １０５６
１００４ ０４９２ １０３４ １０４２
１００３ ０４９２ １０４１ １０５７ １０４９ ０７５
１００２ ０４９１ １０３８ １０５２
１００１ ０４９０ １０３１ １０３９
注：样品含量为０４９％；加入量均为０５２０ｍｇ
２．７ 样品溶液制备 取样品粉末（过 ３号筛）约
０１ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入５０％甲
醇３０ｍＬ，称定质量，加热回流 １ｈ，取出，放冷，用
５０％甲醇补足减失的质量，滤过，用０４５μｍ微孔
滤膜，滤过，即得。
２．８ 样品测定 取对照品溶液１０μＬ与供试品溶
液１０μＬ，注入液相色谱仪，测定即得。产于四川、
贵州和湖南的吴茱萸的绿原酸质量分数分别是
０６８％，０５３％，０９８％。见图１。
３ 讨论
本研究采用高效液相色谱法对吴茱萸药材中绿
原酸进行含量测定，考察参考文献选用过的甲醇
水冰醋酸［４］，乙腈水磷酸［５］不同比例的流动相，
Ａ对照品；Ｂ样品；１绿原酸
图１ 绿原酸对照品及样品ＨＰＬＣ图
以甲醇水冰醋酸作为流动相得到较为满意的结
果。
方法学考察过程中发现，对超声处理、加热回流
及冷浸的提取方法进行了比较试验，结果表明加热
回流提取法测得的绿原酸含量高于其他２种方法。
根据绿原酸的溶解性选用甲醇、乙醇作为提取溶媒，
进行选择，并对３０％甲醇、５０％甲醇、甲醇、乙醇进
行了比较试验，结果表明提取溶媒为５０％甲醇时测
得的绿原酸含量高，故选用提取溶媒为５０％甲醇。
并对２０，３０，４０ｍＬ的５０％甲醇进行了比较试验，结
果表明以３０ｍＬ５０％甲醇作为提取溶媒测得的绿原
酸含量较高，故选用３０ｍＬ５０％甲醇作为提取溶媒
用量。确定选用回流提取法，分别又对回流３０ｍｉｎ，
１，１５，２ｈ进行了比较试验，结果表明回流提取１ｈ
测得的绿原酸含量较高，故选用回流提取１ｈ为样
品提取时间。
［参考文献］
［１］ 张明发，沈雅琴．吴茱萸的药理作用与其温里功效［Ｊ］．天然产
物研究与开发，１９９０，２（４）：５９．
［２］ 张明发，范荣培，郭惠玲，等．温里药镇痛作用研究［Ｊ］．陕西中
医，１９８９，１０（５）：２３１．
［３］ 张万明，甄 攀，白雪梅，等．ＲＰＨＰＬＣ测定吴茱萸中绿原酸的
含量［Ｊ］．中成药，２００６，２８（１）：１３０．
［４］ 张 丹，李章万，姜 焱．ＨＰＬＣ测定金银花、茵陈等１０种中药
中绿原酸的含量［Ｊ］．药物分析杂志，１９９６，１６（２）：８３．
［５］ 张忠春，管玉民，王官连．ＨＰＬＣ法测定金银花中绿原酸的含量
［Ｊ］．山东中医杂志，１９９９，１８（７）：３２４．
［责任编辑 王亚君］
·６９１２·
第３３卷第１７期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８