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Standard operating procedure for Astragalus membranaceus

中药材黄芪GAP标准操作规程



全 文 :Synergisticefectsofbioticandabioticelicitorsontheproductionof
tanshinonesinSalviamiltiorrhizahairyrootculture
YANQiong1,2,HUZongding1,WUJianyong2
(1.ColegeofChemicalEngineering,TianjinUniversity,Tianjin300072,China;
2.DepartmentofAppliedBiology&ChemicalTechnology,theHongKongPolytechnicUniversity,HongKong,China)
[Abstract] Objective:Toinvestigatethesynergisticefectsofabioticelicitoryeastextractanddiferentabioticelicitors(Ag+,Co2+
andαaminoisobutyricacid)ontheproductionoftanshinonesinSalviamiltiorhizahairyroot.Method:Diferentelicitorsandtheircombina
tionswereaddedtoS.miltiorhizahairyrootcultureandthecontentsofthreemajortanshinones(crypotanshinone,tanshinoneIandtanshi
noneⅡA)wereanalyzedbyHPLC.Result:Thecombinationsofyeastextractwithdiferentabioticelicitorshadnotablesynergisticefectson
thetanshinoneIandtanshinoneⅡAproductionbutnotoncrypotanshinone.ThecombinationofyeastextractandAg+(300μmol·L
-1)yielded
thehighesttanshinoneIcontent,whichwasnearly14foldofthecontrol,andthesynergisticelicitationcoeficientwas30.Thecombination
ofyeastextractandCo2+(100μmol·L
-1)ledtothehighesttanshinoneIAcontent,whichwasabout145foldofthecontrol,andthesyner
gisticelicitationcoeficientwas21.Onlyyeastextractcombinedwithαaminoisobutyricacid(200μmol·L
-1)increasedthecrypotanshinone
contentmoreefectivelythansingleelicitors.Thehighestcrypotanshinonecontentwas128mg·g-1,about30foldofthecontrolwithasyner
gisticelicitationcoeficientof13.Conclusion:Theelicitationbythecombinationofabioticelicitorandanabioticelicitorcangenerateasyn
ergisticefect,whichismoreefectivethansingleelicitorstopromotesecondarymetaboliteproductioninplanttissuecultures.
[Keywords] bioticandabioticelicitors;synergisticefects;tanshinones;Salviamiltiorhizahairyroot
[责任编辑 张宁宁]
[收稿日期] 20041112
[基金项目] 国家科技部中药现代化研究与产业化开发项目
(999290103A)
[通讯作者] 杨春清,Tel:(010)62899743
中药材黄芪 GAP标准操作规程
杨春清,张丽萍,孙明舒,赵永华
(中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所,北京 100094)
[摘要] 为了保证药材的优质、安全、可控性、无公害、无污染,提高质量,稳定可控的中药原料,作者按照我国
中药材GAP规范化生产的综合技术要求,对黄芪生产中的选地、种植、田间管理、病虫害防治、采收加工、包装贮藏、
运输、质量监测等技术要求,通过生产调查和试验研究后制定出了标准操作规程。
[关键词] 黄芪;规范化生产;操作规程
[中图分类号]S567 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2006)03019104
为了保证药材的优质、安全、可控性、无公害、无
污染,提供质量稳定可控的中药原料,国家科技部
“九五”“十五”都在积极探索中药材生产管理规范
(GoodAgriculturalPractice,GAP)实施和基地建设。
经过3年的研究实施和基地建设,本课题组已完成
黄芪规范化种植项目,并于2003年通过科技部组织
的专家组验收。现将黄芪生产管理规范(GAP)标准
操作规程(SOP)总结如下。
1 内容适用范围
本规程适用于我国黄芪分布的主要生产区,如
内蒙古、山西、陕西、河北、北京及新疆产区均可参照
执行。
2 质量及检测引用标准
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大气环境质量标准GB30951982;大气污染物最
高允许浓度标准 GB91371988;农田灌溉水质标准
GB50841992;土壤环境质量执行二级标准 GB15618
1995;国家地面水环境质量标准 GB38361988;农药
安全使用标准 GB42861989;农药残留检测 GB/
T1551711995。国家食品药品监督管理局《中药材
质量管理规范(GAP)》,《中国药典》2000年版。
3 具体要求
31 黄芪生长适宜的生态环境
311 气候条件 黄芪对气候适应较强,干旱、风
多、光照充足热量资源丰富、积温较高、昼夜温差大
的地方最适合黄芪生长。在北方半干旱地区,我国
具有独特的地理优势,当地年极端最高气温 37℃,
极端最低气温-32℃,无霜期125~138d。年平均
降水量240~250mm的地方都有黄芪的分布。黄芪
生长的适应范围较宽,如内蒙古东、西部,新疆,甘
肃,宁夏,山西,陕西,东北,河北均可种植。
312 土壤及环境条件 生产基地应选择水质、
土壤、大气等无污染源的地区,远离公路、铁路、医院
等,周围不得有污染源,灌溉水质应符合“农田灌溉
水”质量标准(GB50841992);土壤环境质量应符合
国家相关二级标准(GB156181995);大气环境应符
合“大气环境”质量标准的二级标准(GB30951982)。
32 物种和品种类型
在我国黄芪共有10种。种质资源非常丰富,其
中蒙古黄芪 Astragalusmembranaceusvarmongholicus
和膜荚黄芪Amembranaceus是《中国药典》2000年
版收载的2种黄芪,也是生产上主要的栽培品种,均
可入药。主要分布在内蒙古、山西、陕西、甘肃、宁
夏、东北、黑龙江、新疆等地。主产区为内蒙古包头、
固阳,山西省等地。
33 选地与整地
331 选地 黄芪以根入药,属深根类植物。应
选择土质疏松,沙层较厚的风沙土,沙壤质具块状结
构的土壤。一般选择土壤疏松肥沃,排水良好的沙
壤土;山地选择土层深厚,向阳的缓坡地,可选荒地,
不宜选重茬地。黄芪对土壤酸碱度要求不严,一般
以pH65~8的沙壤土最为适宜,重金属含量不超
标。参照《土壤环境质量》的二级标准(GB15618
1995)的风沙土、淡棕黏土、灰黏土的土壤质量标准。
332 整地作畦 作畦可根据土壤质地,排灌水情
况及当地气候条件和耕作习惯不同而定,沙质土透
性好,排水方便或少雨区,春季注意土壤保墒,可分
成几大块做平畦或打垄。
34 繁殖方法
黄芪主要采用种子繁殖也可采用根茎繁殖,但
由于种种原因根茎繁殖生长缓慢,繁殖系数较低,较
费工,经济效益差等原因,在生产中难以推广,一般
不采用。种子繁殖可直播也可育苗移栽。播种前应
作种子处理。黄芪种子外皮坚实而厚,并有胶质层,
透性不良,种子不易发芽,播种前应作种子处理。一
般生产上用动力碾米机处理1次,然后用50℃温水
浸泡 4~6h种子发芽率可提高,该方法费用少,方
便,安全可靠。
341 直播法 内蒙古固阳、河北怀来基地一般
4~5月播种,春季风沙为害严重的地带5月上旬到6
月下旬播种最为理想。采用条播。行距 45cm左
右;因黄芪种子子叶顶土力弱,应根据不同的土质,
确定播种深度。如沙质土为 25cm,黏土地为
15~2cm。大面积种植用机引播种机或畜力耧播。
每公顷播种量225~30kg。
342 育苗移栽法 内蒙古包头固阳、河北怀来播
种时间为4月底到 7月中旬,尤以 4月至 5月份播
种最佳。大面积种植以条播为好,行距为 10~20
cm,用机引播种机或畜力耧播,小面积播种可用锄
开沟手撒播或用人工播种器播。播种深度参照直
播,播种量每公顷120~150kg。
育苗1年后即可移栽。移栽时间以春季4月上
旬至5月上旬为宜。移栽时按行距45cm开深10~
15cm的沟。再按株距15cm将种根斜放在沟内,然
后覆土7~10cm,种植密度为 15~225万株/hm2。
用畜力犁开沟,隔一犁移植一行,将种根按行株距摆
放。移植时如土壤水分重要条件好,可覆土 7~10
cm。
35 田间管理
351 中耕除草 一般在播种前浇水,抢墒播种,
黄芪出苗进入三叶期进行除草,蔬苗 1次,苗高
10~15cm进行中耕除草,从第 2年起黄芪生长迅
速,杂草难与其竞,一般除草2~3次,第3年根系发
达,生活力增强很快封垅,可在中期拔除田间大草。
352 施肥 播种前施足底肥,第2年就不用再施
肥了。黄芪有根瘤,有固氮作用,第3年生黄芪生长
旺盛,根郭发育较快,可结合中耕除草,适宜施些磷
钾肥。
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353 灌溉与排水 黄芪出苗与返青期,有灌溉
条件的每年视墒情灌水3~5次,如遇干旱应及时浇
水,雨季土壤湿度大,易积水的地块要及时排水,以
防烂根。
36 黄芪主要病虫害及其防治
361 病害 黄芪主要病害有白粉病、根腐病、黄
芪菟丝子。可采用综合防治措施:冬季清园,将干草
枯枝落叶及杂草集中处理并深埋,消灭越冬的病菌。
春天5℃以上时喷硫悬浮剂 200倍液。增施磷肥,
促进植株健壮,增强抗病力。喷 50%多菌灵 1000
倍液,25%粉锈宁1000倍液或喷5%小苏打200倍
液。以上措施每隔10~15d轮喷1次药,基本上可
以控制各种病害严重发生。
362 害虫 对黄芪为害严重,造成经济损失较
大的害虫有小地老虎,食心虫,蚜虫、芫菁 4类。其
防治方法如下:①农业防治:轮作倒茬,不宜与豆科、
茄科植物轮作。精细整地,清除枯枝落叶,合理密植
进行科学的田间管理。黄芪出苗后,墒情能满足生
长需要,则不宜多灌水。土壤湿度过大容易引起根
病发生,不利于幼苗健壮生长。②生物防治:自然保
护天敌,保持天敌和病虫有比较稳定的生态平衡状
态。也可以用植物源农药防治,做到无公害、无污
染。③物理防治:如黑光灯诱杀害虫,人工捕杀等。
④化学防治:关键是合理用药,选择低残留,低毒化
学农药,选好施药时间,尽量避开天敌高峰期,也可
混合用药兼治多种病虫。6~8月份可用 036%神
雨苦参碱水剂等500~2000倍液防治蚜虫、芫菁等
多种害虫。
芫菁防治方法:人工捕捉芫菁成虫,其成虫可用
于抗癌药。害虫发生期喷西维因粉 225kg·hm-2,
可迅速杀死芫菁,控制为害。地老虎防治方法:苗期
人工捕捉地老虎幼虫。即初孵幼虫期喷 036%神
雨苦参碱水剂,或每克含有 150亿孢子的苏芸金杆
菌药剂在卵期喷雾。黄芪种子小蜂防治方法:人工
网捕成虫或5%西维因粉225kg·hm-2或036%苦
参碱水剂1000~2000倍液喷雾。以上3种药任何
一种在黄芪花期,种子形成期喷3~4次,对防治种
子小蜂均有较好的效果,可以兼治其他害虫。黄芪
种子成熟时分批采种防止种子落地,以减少越冬虫
源。收获后可入库用磷化铝熏蒸4~6g·m-3,密闭
72h。蚜虫防治方法:利用天敌如草蛉、食蚜蝇、瓢
虫等,或苏云金杆菌喷杀蚜虫,或 036%苦参碱水
剂1000~2000倍液喷雾。
363 黄芪主要害虫的防治指标 地下害虫播种
前 1~5头/m2,种子小蜂一年生膜荚黄芪 10~
50头/株,二年生 30~100头/株;蚜虫 10~50头/
株,即可进行喷药防治。
37 留种
一般采收三年生后植株结的种子,最好随熟随
采,及时把荚果晒干,脱粒即可。
38 采收与加工
种子繁殖的一般栽后3~4年收获;育苗移栽的
一般1~2年后秋收。以秋收为好。采收时应选晴
天,人工采挖或机械翻耕采挖,挖根后,去掉泥土。
除去残茎、须和芦头、晾晒七成干,按规格打捆,晒干
后打包。
39 质量标准及监测
391 质量标准 外观性状:黄芪呈圆柱形,有的
有分支,上端较粗,长 30~90cm,直径 1~35cm。
表面淡棕黄色或淡棕褐色,有不整齐的纵皱纹或纵
沟。质硬而韧,不易折断;断面纤维性强,并显粉性,
皮部黄白色,木部淡黄色有放射状纹理及裂隙;老根
中心偶有枯朽状,黑褐色或呈空洞。气微味微甜,嚼
之微有豆性味。以条粗长、断面黄白色、有粉性者为
好。
黄芪商品规格标准:①特等品:干货。呈圆柱形
的单条,斩去疙瘩头或喇叭头,顶端间有空心。表面
灰白色或淡褐色。质硬而韧。断面外层白色,中部
淡黄色或黄色,有粉性。味甘,有生豆气。长 70cm
以上,上中部直径 2cm以上,末端直径不小于 06
cm。无根须、老皮、虫蛀、霉变。②一等品:干货。
呈圆柱形的单条,斩去疙瘩头或喇叭头,顶端间有空
心。表面灰白色或淡褐色。质硬而韧,断面外层白
色,中部淡黄色或黄色,在粉性。味甘,有生豆气。
长50cm以上,上中部直径15cm以上,末端直径不
小于05cm。无根须、老皮、虫蛀、霉变。③二等品:
干货。呈圆柱形的单条,斩去疙瘩头或喇叭头,顶端
间有空心。表面灰白色或淡褐色。质硬而韧。断面
外层白色,中部淡黄色或黄色,有粉性,味甘,有生豆
气。长40cm以上,上中部上径 1cm以上,末端直
径不于 04cm。间有老皮,无根须、霉变。④三等
品:干货。呈圆柱形的单条,斩去疙瘩头或喇叭头,
顶端间有空心。表面灰白色或淡褐色。有粉性,味
甘,有生豆气。不分长短,上中部直径 07cm,末端
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直径不小于03cm,间有破短节子,无根须、虫蛀、霉
变。
392 质量监测 有效成分含量测定参照《中国
药典》2000年版附录 VID高效液相色谱法测定,本
品含黄芪甲苷(C42H62O16)不得少于0040%。
农药残留含量测定参照国家外经贸部2001年7
月颁布的《药用植物及制品进出口绿色行业标准》。
六六六≤01mg·kg-1;DDT≤01mg·kg-1;五氯硝
基苯PCNB<01mg·kg-1;艾氏剂 Aldrin≤002mg·
kg-1。
重金属含量检测参照《中国药典》2000年版附
录 IX重金属检查法。参照国家外贸部2001年颁发
的《药用植物及制品进出口绿色行业标准》。重金属
总量≤200mg·kg-1;铅(Pb)≤50mg·kg-1;镉(Cd)
≤03mg·kg-1;汞(Hg)≤02mg·kg-1;砷(As)≤20
mg·kg-1。
4 包装、贮藏、运输
黄芪晾干后捆把用麻袋打包,每件 50kg,要贮
藏于通风干燥处理,30℃以下,相对温度 60%~
75%,商品安全含水量10%~13%,本品易吸潮后发
霉,虫蛀,为害的仓库害虫有家茸天牛、咖啡豆象、印
度谷螟,贮藏期应定期检查、消毒,经常通风,必要时
可以密封氧气充氮养护,发现虫蛀可用磷化铝等薰
蒸。
StandardoperatingprocedureforAstragalusmembranaceus
YANGChunqin,ZHANGLipin,SUNMingshu,ZHAOYonghua
(1InstituteofMedicinalPlantDevelopment,ChineseAcademyofMedicalSciences
andPekingUnionMedicalColege,Beijing100094,China)
[Abstract] InordertoensurethesuperiorqualityandsafetyoftherawmaterialsoftheChineseherbalmedicine,astandardoperating
procedureforastragaluswasestablishedonthebaseoftheGAPoftheChineseherbalmedicineaswelaspracticeinvestigationandexperi
mentsThisstandardoperatingprocedureprovidesthetechnicalrequirementsforastragalus’sgrowing,fieldmanagement,controlingofthe
diseasesandpests,harvesting,processing,packing,storing,transportingandqualitymonitoring
[Keywords] Astragalusmembranaceus;GAP;standardoperatingprocedure
[责任编辑 张宁宁]
[收稿日期] 20050714
[基金项目] 国家“十五”攻关项目(2001BA701A5514)
[通讯作者] 肖永庆,Tel:(010)84040221
HPLC梯度洗脱法测定防风中 4种主要成分含量
李 丽,刘元艳,耿立冬,肖永庆
(中国中医科学院 中药研究所,北京 100700)
[摘要] 目的:在原有防风HPLC含量测定方法基础上改进测定条件。方法:应用HPLC法,以防风中4种主要
成分为指标;采用AltimaC18(46mm×150mm,5μm)色谱柱,以甲醇水梯度洗脱,流速10mL·min
-1。结果:运用
梯度洗脱,建立防风中防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷,防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷,防风色原酮Ⅰ,防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷的
HPLC含量测定方法,与前方法相比测定结果无显著性差异。结论:HPLC梯度洗脱法测定防风中4种主要成分含
量比原方法(两种流动相系统)简便、易于操作。
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