全 文 ：#研究报告#
°≤ 测定银翘散中牛蒡子苷的含量
刘雅茹t o王雪峰u 3 o孟宪生u o冯雪松t
kt1 中国医科大学 药学院 o辽宁 沈阳 ttssst ~
u1 辽宁中医学院 o辽宁 沈阳 ttssvul
≈收稿日期 ussy2st2sz
≈基金项目 国家教育部博士点基金kusswstyusswl
≈通讯作者 3 王雪峰 oר¯ }ksuwl{yutv{wu o ∞2°¤¬¯}©µ¨ t¨|yuxtw
¼¤«²²1¦²°1¦±
银翘散是清代温病学家吴鞠通5温病条辨6中的
著名方剂 o由金银花 !连翘 !竹叶 !荆芥 !牛蒡子 !桔
梗 !薄荷 !淡豆豉 !甘草 |味药材组成≈t o具有辛凉解
表 o清热解毒的功能 ∀用于风热感冒 o发热头痛 o咳
嗽 o口干 o咽喉疼痛等≈u ∀本方收载于5中华人民共
和国卫生部药品标准#中药成方制剂k第 u册l6 o现
标准中只有药材的显微鉴别项目 o尚无含量测定项
目 ∀银翘散抗流感病毒有效部位群中的主要成分是
黄酮类和木脂素类≈v o臣药牛蒡子中的牛蒡子苷为
木脂素类化合物 o是银翘散抗流感病毒的主要有效
成分之一 ∀为了更有效的控制银翘散的质量 o作者
采用 °≤测定银翘散中牛蒡子苷的含量 o本法操
作简便 !结果准确 !重复性好 o可作为银翘散制剂的
质量控制方法 ∀
1 仪器与试药
日本岛津 ≤ p y 液相色谱仪 o中北工作站 o
≥°⁄p y∂ 检测器 ∀牛蒡子苷对照品k中国药品生
物制品检定所 o供含量测定用 o批号 tts{t|2
usswswl ∀银翘散≈长春高士达生化药业k集团l股份
有限 公 司 生 产 o批 号 sxsutt osxsutw osxsutx o
sxsutz ∀自制缺牛蒡子的阴性样品k所用药材由辽
宁省医药股份有限公司中药材分公司提供l ∀乙腈 !
甲醇为色谱纯 o水为重蒸馏水 ~其余所用为分析纯 ∀
2 方法与结果
211 色谱条件
≥«¬°2³¤¦® ≤≤2⁄≥ 柱 kw1y °° ≅ txs °° ox
Λ°l o柱温 ws ε ∀流动相甲醇2乙腈2³ u1x磷酸三
乙胺水溶液kusΒtxΒyxl o流速 t1s °#°¬±pt o检测波
长 uz| ±° o进样量 x Λ~理论塔板数按牛蒡子苷峰计
算不低于 x sss ∀
212 溶液的配制
21211 对照品溶液制备 精密称取牛蒡子苷对照
品适量 o加甲醇溶解 o制成 s1sy °ª#°pt的对照品
溶液 ∀
21212 供试品溶液制备 取本品 v ª研细 o取粉末
s1x ªo精密称定 o置具塞锥形瓶中 !精密加入甲醇 ux
°o密塞 o称重 o超声处理k功率 uxs • o频率 vv ®½l
vs °¬±o放冷 o称重k必要时补足原重l o摇匀 o用干滤
器滤过 o精密量取续滤液 u °o置 ux °棕色量瓶
中 o加入甲醇稀释至刻度 o摇匀 o溶液经微孔滤膜
ks1x Λ°l滤过 o滤液作为供试品溶液 ∀
21213 检测波长的选择 取牛蒡子苷对照品溶液
和供试品溶液 ouss ∗ wss ±°扫描 o结果牛蒡子苷对
照品溶液与供试品溶液均在 uz| ±°处有最大吸收 o
故选择 uz| ±°为检测波长 ∀
21214 阴性溶液制备 取除去牛蒡子以外的其他
药材 o按处方比例及工艺制得不含牛蒡子的阴性样
品 o按供试品溶液的制备方法操作制成阴性溶液 ∀
21215 方法的专属性 按 211 色谱条件 o分别精密
吸取对照品溶液 !供试品溶液 !阴性溶液 x Λ注入
液相色谱仪中 o结果在对照品色谱相应的位置上 o供
试品溶液具有相同保留时间的色谱峰 o阴性液在此
峰位无吸收 o对本品中牛蒡子苷含量测定无干扰 o方
法专属性良好 ∀见图 t ∀
213 标准曲线的制备 精密称取在五氧化二磷干
燥器中减压干燥 uw «牛蒡子苷对照品 tx1uu °ªo置
xs °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至刻度 o摇匀 o精
密吸取 x °o置 ux °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o
摇匀 o制成 s1sys {{ °ª#°pt的溶液 ∀分别精密吸
取 u ow oy o{ ots otu Λ溶液 o注入液相色谱仪中 o测定
色谱峰面积 o以进样量为横标 o色谱峰面积为纵标绘
制标准曲线 o回归方程为 Ψ yyt xss Ξ p z |{w o
#vttt#
第 vt卷第 tv期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tv
∏¯¼ oussy
图 t 牛蒡子 °≤图
1 对照品 ~
1 样品 ~≤1 阴性对照 ~t1牛蒡子苷
ρ s1||| y ∀测定结果提示 o牛蒡子苷进样量在
s1tu ∗ s1zv Λª线性关系良好 ∀
214 精密度试验
精密吸取同一供试液 x Λo按 211色谱条件 o重
复进样 x次 o测定色谱峰面积 o结果牛蒡子苷峰面积
平均值为 t|y utv1u o ≥⁄为 t1t h ∀
215 稳定性试验
精密吸取新配制的同一批供试品溶液 x Λo分
别在 s ou ow oy o{ oty ouw «进样 o测定色谱峰面积 o结
果 ≥⁄为 t1w h k ν xl o表明供试液在 uw «内基本
稳定 ∀
216 重复性试验
取同一批样品 x份 o平行测定 x次 o结果供试液
牛蒡子苷平均质量分数为 tv1|x °ª#ªpt o ≥⁄ 为
v1s h ∀
217 回收率试验
取本品 x份k含量 tv1|x °ª#ªptl o每份 s1x ªo
精密称定 o精密加入牛蒡子苷对照品溶液ks1tzv y
°ª#°ptlx °o测定 o结果见表 t ∀
表 t 牛蒡子苷加样回收率
取样量
rª
样品中
含量r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
≥⁄
r h
s qxsu v z qssz tx qzwv |y q{
s qxtu s z qtwv tx qwtx |x qv
s qxs| s z qtst tx qx|s |z q{ |z qy t qy
s qxsv s z qstz tx qx{w |{ qz
s qxt| | z quxv tx q{zu || qv
注 }对照品加入量均为 {1y{s °ª
218 样品测定
取不同批号的样品 o分别精密吸取 x Λo按外标
法计算牛蒡子苷含量 o结果批号 sxsutt osxsutw o
sxsutx osxsutz 样品牛蒡子苷平均质量分数 tv1| o
|1vz ott1| otu1w °ª#ªpt o ≥⁄为 t1{{ h ∀
3 讨论
311 提取溶剂选择
根据牛蒡子苷的化学性质 o分别以乙醇与甲醇
为溶媒 o对牛蒡子苷提取量比较研究 ∀结果乙醇为
溶媒的含量测定结果为 tv1|| °ª#ªptk ν xl o甲醇
为溶媒的含量测定结果为 tw1ts °ª#ªptk ν xl ∀结
果表明 u种溶媒提取效率基本相同 o鉴于乙醇提取
供试液中其他组分较多 o易污染色谱柱 o故选用甲醇
为提取溶剂 ∀
312 超声处理条件
采用超声处理法制备供试液 o并对不同超声处
理条件进行了考察 ∀考察超声时间分别为 us ovs ows
°¬±o样品含量为 ts1t otv1| otv1{ °ª#ªpt ∀超声提取
vs °¬±o样品中牛蒡子苷已基本提取完全 o故确立超
声处理 vs °¬±为提取方法 ∀超声处理条件考察分
别为功率 uxs • o频率 vv ®½~功率 tss • o频率 ws
®½o样品含量分别为 tv1| otu1t °ª#ªpt ∀故选用功
率 uxs • o频率 vv ®½∀
313 流动相的选择及改进
5中国药典6usss年版一部/牛蒡子0项下测定
牛蒡子药材中牛蒡子苷采用甲醇2水ktΒt1tl为流动
相 o但在本品中牛蒡子苷色谱峰与其他干扰组分色
谱峰的分离效果不好 ∀水的比例增加能使分离效果
改善 o但仍不能基线分离 o流出慢 o峰形宽 ∀当加入
缓冲溶液及乙腈时 o分离效果有所改善 o经过调整不
同比例多次试验 o最后确定最佳配比为甲醇2乙腈2
³ u1x磷酸三乙胺水溶液kusΒtxΒyxl为流动相 ∀分
离效果较好 o色谱图形对称而尖锐 o拖尾因子 s1|{ o
重复性强 ∀
≈参考文献
≈t 谢 鸣 q方剂学 q北京 }人民卫生出版社 oussu }| q
≈u 杜力军 o凌一揆 q银翘散实验研究综述 1 中成药 ot||u otwkvl }
wt q
≈v 石 钺 o石任兵 q银翘散抗流感病毒有效部位群化学成分的
分离与鉴定 q中国中药杂志 oussv ou{ktl }wv q
≈w 中国药典 1 一部 1usss1 附录 ∂ ⁄}v{ q
≈x 陈发奎 q常用中草药有效成分含量测定 q北京 }人民卫生出版
社 ot||z q
≈责任编辑 鲍 雷
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第 vt卷第 tv期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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