全 文 ：６种淫羊藿黄酮抗氧化和抗肿瘤活性的比较
王 婷１，２，张金超２，３，陈 瑶２，黄 锋１，４，杨梦盨２，肖培根１
（１．中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所，北京 １０００９４；
２．香港城市大学 深圳研究院，广东 深圳 ５１８０５７；
３．河北大学 化学与环境科学学院，河北 保定 ０７１００２；
４．深圳市中药药学及分子药理研究重点实验室，广东 深圳 ５１８０５７）
［摘要］ 目的：初步探讨淫羊藿黄酮的抗氧化活性与其化学结构的关系以及抗肿瘤作用与取代基的关系。方
法：利用硅胶和凝胶柱色谱分离淫羊藿中单体黄酮成分，根据化合物光谱数据（ＥＳＩＭＳ，１ＨＮＭＲ和１３ＣＮＭＲ）鉴定其
结构，利用ＭＴＴ法和ＤＰＰＨ法测定６个单体黄酮的细胞毒性和抗氧化清除自由基的能力。结果：从地上部分的醋
酸乙酯萃取物中分离得到６个化合物，分别为淫羊藿苷（Ⅰ），木犀草素（Ⅱ），宝藿苷Ｉ（Ⅲ），金丝桃苷（Ⅳ），朝藿
素Ｂ（Ⅴ）及宝藿苷Ｉ（Ⅵ）。活性研究结果表明，在３１２５～２００μｍｏｌ·Ｌ－１剂量，化合物Ⅰ，Ⅲ和Ⅵ对 ＤＰＰＨ自由基
基本上没有清除作用，而化合物Ⅱ，Ⅳ和Ⅴ对ＤＰＰＨ则显示出了较好的自由基清除作用，并随浓度的增加清除作用
增强，其作用强度明显好于维生素Ｃ；化合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ和Ⅵ对人乳腺癌细胞株（ＭＣＦ７）和人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２）的
生长均表现出增殖抑制作用，而化合物Ⅲ和Ⅳ对２种细胞株的生长则基本没有影响。结论：Ｂ环是黄酮类物质抗氧
化、清除自由基的主要活性部位；黄酮８位异戊烯基取代不是其抗肿瘤活性的决定因素。
［关键词］ 淫羊藿；黄酮；抗氧化；抗肿瘤
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）０８０７１５０４
［收稿日期］ ２００６０３１０
［基金项目］ 国家８６３计划资助项目（２００３ＡＡ２Ｚ２０５２）
［通讯作者］ 肖培根：Ｔｅｌ：（０７５５）２６７１２３６４，Ｆａｘ：（０７５５）２６
７１２３６４，Ｅｍａｉｌ：ｘｉａｏｐｇ＠ｐｕｂｌｉｃ．ｂｔａ．ｎｅｔ．ｃｎ
淫羊藿味辛、甘，性温，归肝、肾经，药用历史悠
久，疗效确切，是临床常用中药。其传统功能是补肾
阳，强筋骨，祛风湿。用于阳痿遗精，筋骨痿软，风湿
痹痛，麻木拘挛。现代药理实验研究表明［１］，淫羊
藿能增强心脑血管血流量、促进造血功能、调节骨代
谢、提高免疫功能、还具有抗衰老、抗肿瘤和抗艾滋
病等多种功效，临床被用于治疗骨质疏松、更年期综
合征、高血压、冠心病、小儿麻痹症、慢性支气管炎等
疾病。淫羊藿由于其丰富的药用植物资源，多样的
药理作用和确切的临床疗效一直是国内外研究的热
点，具有巨大的研究和开发潜力。
目前研究证明，淫羊藿总黄酮为淫羊藿主要有效
成分。我国学者研究发现，淫羊藿中的主要黄酮类成
分———淫羊藿苷（ｉｃａｒｉｎ），具有调节免疫功能，诱导
白血病细胞分化、凋亡，逆转实体瘤细胞恶性表型等
作用，是一种极具潜能的抗白血病或抗肿瘤的活性物
质［１３］。迄今为止，关于淫羊藿的抗肿瘤作用是否与
其所含黄酮的抗氧化性有关仍然不清楚，为进一步探
究其抗肿瘤活性与抗氧化性之间的关系，本试验研究
了朝鲜淫羊藿 ＥｐｉｍｅｄｉｕｍｋｏｒｅａｎｕｍＮａｋａｉ中６种黄
酮，以了解其抗氧化性和抗肿瘤活性。
１ 材料
１．１ 仪器 ＢｒｕｋｅｒＡＶ－４００型核磁共振仪；Ｔｈｅｒｍｏ
Ｆｉｎｎｉｇａｎ－ＬＣＱ质谱仪；Ｂｉｏ－ＲＡＤＭｏｄｅｌ６８０型酶
联免疫检测仪。
１．２ 试剂 色谱用硅胶为青岛海洋化工厂产品；葡
聚糖凝胶（ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０）为 Ｐｈａｒｍａｃｉａ产品；培
养基ＲＰＭＩ１６４０及胎牛血清均购自 Ｇｉｂｉｃｏ公司；四
氮唑溴［ＭＴＴ，３（４，５ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ２ｙｌ）２，５ｄｉ
ｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ］为 ＡＭＲＥＳＣＯ公司产品，
由上海生物工程有限公司分装；二苯代苦味肼基
（ＤＰＰＨ，１，１Ｄｉｐｈｅｎｙｌ２ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ）购自Ｓｉｇｍａ公
司；其他试剂均为分析纯。
１．３ 药材 朝鲜淫羊藿购自吉林省长春市，经本所
资源室陈四保研究员鉴定为ＥｋｏｒｅａｎｕｍＮａｋａｉ。
２ 方法
２．１ 淫羊藿单体黄酮的分离鉴定 朝鲜淫羊藿的干
·５１７·
第３２卷第８期
２００７年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ８
Ａｐｒｉｌ，２００７
燥地上部分１５ｋｇ粉碎后，用９５％乙醇回流提取３
次，将提取物浓缩得干浸膏，将干浸膏用水悬浮后，依
次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取，回收溶剂。取
醋酸乙酯萃取物（１８０ｇ）进行反复的硅胶柱和凝胶柱
层析，ＭｅＯＨ重结晶后，共得到６个单体黄酮Ⅰ～Ⅵ。化
合物的光谱数据（ＥＳＩＭＳ，１ＨＮＭＲ和１３ＣＮＭＲ）与已
知物光谱数据［４］一致。６个化合物分别为：淫羊藿苷
（Ⅰ），木犀草素（Ⅱ），宝藿苷Ⅱ（Ⅲ），金丝桃苷（Ⅳ），朝藿
素Ｂ（Ⅴ）及宝藿苷Ⅰ（Ⅵ）。
２．２ 抗氧化清除ＤＰＰＨ自由基实验 根据Ｙｏｋｏｚａ
ｗａ等［５］描述的方法并加以改进，加 ＤＰＰＨ（１３×
１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１）于９６孔板，１９０μＬ／孔，待测样品用
ＤＭＳＯ溶解，以１０μＬ／孔体积加入９６孔板，使其终
浓度分别为６２５，１２５，２５，５０，１００，２００μｍｏｌ·Ｌ－１。
空白孔加１０μＬ含１％ ＤＭＳＯ的生理盐水，充分混
匀，以维生素 Ｃ为对照药封板后室温避光静置 ３０
ｍｉｎ，在５１５ｎｍ处测定吸光度（Ａ）。根据以下公式
计算自由基清除率。
自由基清除率（％）＝（１－Ａｔ／Ａｃ）×１００％
２．３ 细胞毒实验 所有受试药均用二甲基亚砜溶
解并稀释，使得二甲基亚砜在药液中的终浓度小于
５％。人乳腺癌细胞株（ＭＣＦ７）和人肝癌细胞株
（ＨｅｐＧ２）购于 ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｅｃｔｉｏｎ
（ＡＴＣＣ），用 ＲＰＭＩ１６４０培养基加１０％胎牛血清常
规培养传代。细胞以１×１０５个／ｍＬ密度接种于９６
孔板，９０μＬ／孔。过夜，加入受试化合物，使其终浓
度分别为３１２５，６２５，１２５，２５，５０，１００，２００μｍｏｌ·
Ｌ－１，以羟基喜树碱作为阳性对照药。加入受试药
４８ｈ后，每孔加入５ｍｇ·ｍＬ－１的 ＭＴＴ１０μＬ，继续
培养４ｈ后小心弃培养液，然后每孔中加入１００μＬ
ＤＭＳＯ，于酶联免疫检测仪５７０ｎｍ处测各孔Ａ，根据
以下公式计算细胞生长抑制率：
抑制率（％）＝（Ａｔ－Ａｃ）／Ａｃ×１００％
２．４ 统计分析 数据来自 ３次独立实验，使用
ＳＰＳＳ统计软件，采用 珋ｘ±ｓ表示。
３ 结果
３．１ 化合物对 ＤＰＰＨ自由基的清除作用 如图１
所示，在６２５～２００μｍｏｌ·Ｌ－１，化合物Ⅰ，Ⅲ和Ⅵ
对ＤＰＰＨ自由基基本上没有清除作用，而化合物Ⅱ，
Ⅳ和Ⅴ对 ＤＰＰＨ则显示出了较好的自由基清除作
用，并随浓度的增加清除作用增强，其作用强度明显
好于维生素Ｃ。
图１ 化合物Ⅰ～Ⅵ对ＤＰＰＨ自由基的清除作用
３．２ 化合物抗肿瘤活性 如图 ２，３所示，在
３１２５～２００μｍｏｌ·Ｌ－１，化合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ和Ⅵ对
ＭＣＦ７和 ＨｅｐＧ２２种细胞株的生长均表现出抑制
作用，除了化合物Ⅰ的个别浓度外，抑制作用基本上
呈现出随着浓度的增高而增强，而且随着浓度的升
高，化合物对肿瘤细胞增殖的抑制程度趋于平缓。
化合物Ⅲ和Ⅳ对２种细胞株的生长则基本没有影
响。羟基喜树碱对 ＨｅｐＧ２，ＭＣＦ７肿瘤细胞系细胞
毒作用的 ＩＣ５０分别为：（６４９±０２２），（１９１２±
１０５）μｍｏｌ·Ｌ－１。
图２ 化合物Ⅰ～Ⅵ对ＭＣＦ７肿瘤细胞系增殖的抑制作用
图３ 化合物Ⅰ～Ⅵ对ＨｅｐＧ２肿瘤细胞系增殖的抑制作用
４ 讨论
流行病学调查显示，长期食用富含黄酮类的食
物可在一定程度上预防某些肿瘤的发生，此后，便掀
起了研究黄酮与化学预防关系的热潮。随着研究的
深入，黄酮类化合物抗肿瘤的功效已经被确证［６８］。
目前认为黄酮类抗肿瘤的机制主要通过提高抗氧化
·６１７·
第３２卷第８期
２００７年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ８
Ａｐｒｉｌ，２００７
物酶的活性，清除自由基；诱导肿瘤细胞凋亡；影响
某些酶如信号转导途径中的蛋白激酶，致癌剂的代
谢酶等的活性来抑制肿瘤的发生；同时还能提高肿
瘤细胞对化疗药物的敏感性等［９］。
由于结构上的特殊性———多元酚羟基的存在，
决定了黄酮类的基本性质是抗氧化性，抗氧化性的
强弱又与黄酮的具体结构有关，据文献报道［１０］，Ｂ
环是黄酮类物质抗氧化、清除自由基的主要活性部
位，Ｂ４′ＯＨ为强抗氧化性基，是决定抗氧化性强弱
的第一位因素；当 Ｂ４′ＯＨ存在时，Ｂ３′ＯＨ和５′
ＯＨ属于增效基；Ａ环 Ｃ７位羟基化属于增效基。本
实验结果表明，Ⅱ，Ⅳ和Ⅴ３个化合物，酚羟基的数
目最多，而且取代在Ｂ环的３′和４′位以及 Ａ环的５
和７位，其抗氧化作用较强，甚至好于维生素 Ｃ，这
与以上文献报道一致。另外，羟基成苷会使黄酮的
抗氧化性下降，甚至消失，化合物Ⅰ，Ⅲ和Ⅵ对 ＤＰ
ＰＨ自由基基本没有清除作用也说明了这一点。
淫羊藿主要含黄酮类成分，其中所含黄酮的特
征性在于８位有异戊烯基取代。本实验从淫羊藿
中分离得到了６种黄酮，其中Ⅰ，Ⅲ，Ⅴ和Ⅵ含有异
戊烯基取代，为淫羊藿中特有的黄酮；Ⅱ和Ⅳ是较为
普通的黄酮，普遍存在于自然界。活性研究表明，只
有化合物Ⅱ和Ⅴ既有较好的抗氧化又有显著的细胞
毒作用。通过观察６种黄酮对肿瘤细胞株的细胞毒
作用，并初步探讨其与自由基清除能力及结构的关
系，可以得到以下２点结论：①Ｂ环是黄酮类物质抗
氧化、清除自由基的主要活性部位；②黄酮 ８位异
戊烯基取代不是其抗肿瘤活性的决定因素，其他结
构的黄酮可能也会表现出较好的抗肿瘤活性，因此，
有必要运用现代分子生物学手段深入研究淫羊藿抗
肿瘤的物质基础以及机制。
［参考文献］
［１］ 李作洲，徐艳琴，王 瑛，等．淫羊藿属药用植物的研究现状
与展望［Ｊ］．中草药，２００５，３６（２）：２８９．
［２］ 赵 勇，崔正言，张 玲，等．淫羊藿苷对人急性早幼粒白血
病细胞分化的影响［Ｊ］．中华肿瘤杂志，１９９７，１９（１）：５３．
［３］ 毛海婷，张 玲，王 芸，等．淫羊藿苷抗癌作用机制的实验
研究［Ｊ］．中药材，２０００，２３（９）：５５４．
［４］ 张 玲，王 芸，毛海婷，等．淫羊藿甙抑制肿瘤细胞端粒酶
活性及其调节机制的研究［Ｊ］．中国免疫学杂志，２００２，１８
（３）：１９１
［５］ 李文魁．朝鲜淫羊藿和万山淫羊藿化学成分的研究［Ｄ］．北
京：中国协和医科大学研究生院，１９９５
［６］ ＹｏｋｏｚａｗａＴ，ＤｏｎｇＥ，ＮａｔａｇａｗａＴ，ｅｔａｌ．Ｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏ
ｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｅａ［Ｊ］．ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄ
Ｃｈｅｍ，１９９８，４６（６）：２１４３．
［７］ ＢｌｏｃｋＧ，ＰａｔｅｒｓｏｎＢ，ＳｕｂａｒＡ．Ｆｒｕｉｔ，ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ，ａｎｄｃａｎｃｅｒ
ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ：ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｖｉｄｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｎｕｔｒ
Ｃａｎｃｅｒ，１９９２，１８（１）：１．
［８］ ＢｒａｖｏＬ．Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ：ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｄｉｅｔａｒｙｓｏｕｒｃｅｓ，ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，
ａｎｄｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ［Ｊ］．ＮｕｔｒＲｅｖ，１９９８，５６（１１）：３１７．
［９］ ＫｕｏＳＭ．Ｄｉｅｔａｒｙｆｌａｖｏｎｏｉｄａｎｄｃａｎｃｅｒｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ：ｅｖｉｄｅｎｃｅａｎｄ
ｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍ［Ｊ］．ＣｒｉｔＲｅｖＯｎｃｏｇ，１９９７，８（１）：４７．
［１０］ ＤｉａｎｅＦＢｉｒｔ，ＳｕｚａｎｎｅＨｅｎｄｒｉｃｈ，ＷａｎｇＷＱ．Ｄｉｅｔａｒｙａｇｅｎｔｓｉｎ
ｃａｎｃｅｒｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ：ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｎｄｉｓｏｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ＆
Ｔｈｅｒ，２００１，９０：１５７．
［１１］ ＴａｋａｋｏＹｏｋｏｚａｗａ，ＤｏｎｇＥＢ，ＬｉｕＺＷ，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅａｃ
ｔｉｖｉｔｙｏｆｆｌａｖｏｎｅｓａｎｄｆｌａｖｏｎｏｌｓｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＰｈｙｔｏｔｈｅｒＲｅｓ，１９９７，
１１：４４６．
Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅａｎｄａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｓｉｘ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＥｐｉｍｅｄｉｕｍｋｏｒｅａｎｕｍ
ＷＡＮＧＴｉｎｇ１，２，ＺＨＡＮＧＪｉｎｃｈａｏ２，３，ＣＨＥＮＹａｏ２，ＨＵＡＮＧＦｅｎｇ１，４，ＹＡＮＧＭｅｎｇｓｕ２，ＸＩＡＯＰｅｉｇｅｎ１
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｒｎｅｎｔ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄ
ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｈｅｎｚｈｅｎＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｉｔｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＨｏｎｇＫｏｎｇ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ，５１８０５７，Ｃｈｉｎａ；
３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣｏｌｅｇｅｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ＆ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００２，Ｃｈｉｎａ；
４．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ５１８０５７，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅａｎｄａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＥｐｉｍｅｄｉｕｍｋｏｒｅａｎｕｍ．
Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｓｉｌｉｃａｇｅｌａｎｄＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０，ａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｓｐｅｃｔｒａｌａ
·７１７·
第３２卷第８期
２００７年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ８
Ａｐｒｉｌ，２００７
ｎａｌｙｓｉｓ（ＥＳＩＭＳ，１ＨＮＭＲａｎｄ１３ＣＮＭＲ）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＤＰＰＨｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｓｓａｙａｎｄＭＴＴａｓｓａｙｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅａｎ
ｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅａｎｄａｎｔｉｔｕｍｏｒａｂｉｌｉｔｉｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｓｉｘｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｔｈｅｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅｅｘｔｒａｃｔｏｆｔｈｅａｅｒｉａｌｐａｒｔ．Ｔｈｅｉｒ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓｉｃａｒｉｎ（Ⅰ），ｌｕｔｅｏｌｉｎ（Ⅱ），ｂａｏｈｕｏｓｉｄｅＩ（Ⅲ），ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ（Ⅳ），ｅｐｉｍｅｄｏｋｏｒｅａｎｉｎＢ（Ⅴ）ａｎｄｂａｏ
ｈｕｏｓｉｄｅＩ（Ⅵ）．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔａｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆ３１２５～２００μｍｏｌ·Ｌ－１，ｃｏｍｐｏｕｎｄⅠ，Ⅲ ａｎｄⅥ ｈａｄｎｏａｂｉｌｉｔｙｔｏ
ｓｃａｖｅｎｇｅｔｈｅＤＰＰＨｒａｄｉｃａｌ，ｂｕｔｔｈｅｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｂｉｌｉｔｙｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｓⅡ，Ⅳ ａｎｄⅤ ｗｅｒｅｓｔｒｏｎｇｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＶｉｔｃｉｎｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄａｎｔ
ｍａｎｎｅｒＣｏｍｐｏｕｎｄｓⅠ，Ⅱ，Ⅴ ａｎｄⅥ ｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＭＣＦ７ａｎｄＨｅｐＧ２ｉｎｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄａｎｔｍａｎｎｅｒ，ｂｕｔｃｏｍｐｏｕｎｄｓ
Ⅲ ａｎｄⅣ ｈａｄｎｏｅｆｅｃｔｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥ．ｋｏｒｅａｎｕｍｍａｙｂｅｐａｒｔｉａｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅａｎｔｉｏｘｉ
ｄａｎｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍｋｏｒｅａｎｕｍ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒ
［责任编辑 古云侠］
酸枣仁汤对小鼠试验性急性肝衰竭的影响
朱海鹏１，高志良１，谭德明２，钟艳丹２
（１．中山大学 附属第三医院 感染病科，广东 广州 ５１０６３０；
２．中南大学 湘雅医院 感染病科，湖南 长沙 ４１０００８）
［摘要］ 目的：研究酸枣仁汤对小鼠试验性急性肝衰竭的影响。方法：雄性昆明小鼠，给予 Ｄ半乳糖胺（Ｄ
ＧａｌＮ）和脂多糖（ＬＰＳ）同时腹腔注射，制备小鼠急性肝衰竭模型；并于造模前２ｈ，治疗组分别给予相应药物灌胃，
正常、模型组给予蒸馏水灌胃。比较各组小鼠的２４ｈ存活率，血清转氨酶水平，肝脏组织病理学改变，血清中肿瘤
坏死因子α（ＴＮＦα）、白介素１β（ＩＬ１β）的水平，肝脏组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、还原型谷胱甘
肽（ＧＳＨ）、谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）、一氧化氮（ＮＯ）、一氧化氮合酶［ＮＯＳ包括总一氧化氮（ＴＮＯＳ）和诱生型一氧化
氮（ｉＮＯＳ）］的水平。结果：ＤＧａｌＮ／ＬＰＳ可以导致小鼠急性肝衰竭；酸枣仁汤可以提高小鼠存活率，减轻肝脏病变
程度，降低血清转氨酶活性及ＴＮＦα，ＩＬ１β的浓度，增加肝脏组织中ＳＯＤ，ＧＲ的活性，降低ＮＯＳ的活性及ＭＤＡ，ＮＯ
的浓度。结论：酸枣仁汤可减轻ＤＧａｌＮ／ＬＰＳ所致的急性肝衰竭，提高小鼠的存活率，其作用机制可能与它影响睡
眠从而影响炎性细胞因子（如ＴＮＦα，ＩＬ１）的释放和机体氧化能力的改变有关。
［关键词］ 酸枣仁汤；肝衰竭；睡眠
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）０８０７１８０４
［收稿日期］ ２００６０５２４
［通讯作者］ 谭德明，Ｔｅｌ：（０７３１）４３２７０１２，Ｅｍａｉｌ：ｄｍｔ２００８＠
ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
临床上发现，有一部分急慢性肝病患者存在睡
眠障碍的现象，有的甚至出现长期失眠，在重症、重
型肝炎患者中尤为明显。又因为睡眠与细胞因子、
激素、机体氧化反应及免疫机制有着密切的关系，基
于这些原因，笔者观察了养心安神药酸枣仁汤对试
验性急性肝衰竭小鼠的影响。
１ 材料
１．１ 试剂 ＤＧａｌＮ由重庆医科大学化学教研室
提供。ＬＰＳ：Ｓｉｇｍａ公司。ＴＮＦα及 ＩＬ１β放免检测
试剂盒：北京北免东雅生物制品研究所。ＳＯＤ，
ＭＤＡ，ＧＳＨ，ＧＲ，ＮＯ，ＮＯＳ试剂盒：南京建成生物工
程研究所。
１．２ 药物 酸枣仁、川芎、茯苓、知母、甘草从湘雅
医院中药药剂科购得，经湖南中医药大学第一附属
医院药剂科鉴定为地道药材。酸枣仁汤按原方剂量
为：酸枣仁１８ｇ，甘草５ｇ，知母１０ｇ，茯苓１０ｇ，川芎
１０ｇ，折算成小鼠每克剂量为酸枣仁２７ｍｇ·ｇ－１，
甘草０７５ｍｇ·ｇ－１，知母１５ｍｇ·ｇ－１，茯苓１５ｍｇ
·ｇ－１，川芎 １５ｍｇ·ｇ－１。将酸枣仁汤（酸枣仁
１６２ｇ，知母９ｇ，茯苓９ｇ，川芎９ｇ，甘草４５ｇ）加相
当于药材量７倍的冷水浸泡１～２ｈ，煮沸３０ｍｉｎ，过
滤，药渣加３倍水煮沸２０ｍｉｎ，过滤，合并两次滤液，
·８１７·
第３２卷第８期
２００７年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ８
Ａｐｒｉｌ，２００７