全 文 ：中药材中有机氯农药多残留分析中前处理方法比较研究
吴加伦，隋晓斐，韩秀玲，占绣萍
（浙江大学 农药与环境毒理研究所，浙江 杭州 ３１００２９）
［收稿日期］ ２００７１２１９
［通讯作者］ 吴加伦，Ｔｅｌ：（０５７１）８６９７１２２１，Ｅｍａｉｌ：ｊｌｗｕ＠
ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
中药材中农药残留超标，不仅影响到中药材进
入国际市场，也危害到人的身体健康。建立一套简
单、快速、经济、有效的农药多残留检测方法对保障
人们用药安全，促进中药材出口具有重要意义。目
前，对中药材中有机氯农药的提取常用的方法有超
声波提取法［１］，加速溶剂萃取法［２］，索氏抽提法［３］
和振荡法［４］等，本研究的目的是通过振荡法、索氏
抽提法、超声波法和快速溶剂提取法这４种不同的
前处理方法在提取效率、耗时、消耗溶剂量和所需设
备的价格等方面进行比较，从中筛选出操作步骤简
单、溶剂用量少、耗时短，所需设备价廉。并且能达
到添加回收率要求，适合用于中药材中有机氯农药
多残留提取的前处理方法。
１ 材料与方法
１．１ 试剂
石油醚（６０～９０℃，分析纯）经全玻璃仪器重
蒸；浓硫酸（分析纯）、无水硫酸钠（分析纯）；助滤剂
Ｃｅｌｉｔｅ５４５农药对照品：甲体六氯化苯（αＢＨＣ）１００
ｍｇ·Ｌ－１；乙体六氯化苯（βＢＨＣ）１００ｍｇ·Ｌ－１；丙
体六氯化苯（γＢＨＣ）１００ｍｇ·Ｌ－１；丁体六氯化苯
（δＢＨＣ）１００ｍｇ·Ｌ－１；对对位滴滴涕（Ｐ，Ｐ′ＤＤＴ）
１００ｍｇ·Ｌ－１；邻对位滴滴涕（Ｏ，Ｐ′ＤＤＴ）１００ｍｇ·
Ｌ－１；对对位滴滴滴（Ｐ，Ｐ′ＤＤＤ）１００ｍｇ·Ｌ－１；对对
位滴滴依（Ｐ，Ｐ′ＤＤＥ）１００ｍｇ·Ｌ－１；五氯硝基苯
（ＰＣＮＢ）１００ｍｇ·Ｌ－１；艾氏剂１００ｍｇ·Ｌ－１（纯度≥
９９％）；均购于中国标准技术开发公司标样部。
１２ 对照品溶液的配置
将各种对照样品用石油醚稀释到２ｍＬ，用移
液管分别移取 αＢＨＣ０１ｍＬ，βＢＨＣ０１ｍＬ，γ
ＢＨＣ０３ｍＬ，δＢＨＣ０１ｍＬ，艾氏剂０１ｍＬ，五氯硝
基苯０１ｍＬ，Ｐ，Ｐ′ＤＤＴ０１ｍＬ，Ｏ，Ｐ′ＤＤＴ０３ｍＬ，
Ｐ，Ｐ′ＤＤＤ０３ｍＬ，Ｐ，Ｐ′ＤＤＥ０３ｍＬ于５０ｍＬ的
量瓶中，加石油醚定容至刻度，摇匀；中药材干样品
（由上海养和堂饮片厂提供）。
１．３ 仪器和设备
带６３Ｎｉ的ＥＣＤ检测器的气相色谱仪（ＧＣ－９２０
气相色谱仪，上海海欣色谱仪器有限公司）；ＡＴ，
ＲＰＡⅡ 农残分析专用柱０５３ｍｍ×３０ｍ，０２５μｍ
（中国科学院兰州化学物理研究所色谱技术研究开
发中心）；Ｎ２０００色谱工作站（由浙江大学智能信息
研究所制造）；旋转蒸发仪（Ｒ－２０１型，上海申顺生
物科技有限公司）；中药粉碎机（ＤＤ０１型，浙江温岭
市大海药材器材机械厂）；分析天平（ＢＬ３１０型，北
京赛多利斯仪器系统有限公司）；水浴锅（ＤＫＳ－１６
型，上海嘉兴中新医疗仪器有限公司）；真空泵
（ＳＨＢ－ⅢＡ型，河南太康仪器教材厂）；国际型电动
振荡机；索氏抽提器；加速溶剂萃取机（ＵＳＡＤＩ
ＯＮＥＸＡＳＥ３００）；ＫＤ浓缩器；ＫＱ５２００ＤＥ数控超声
波发生器（昆山市超声仪器有限公司）以及其他必
备的实验室装置和器皿。
１．４ 方法
１．４．１ 样品处理及制备 白芍、黄连先经中药切片
机切片后，用中药粉碎机粉碎，过２０目筛。
１．４．２ 超声波法 称取５ｇ样品于样品瓶中，将１，
０１ｍＬ有机氯混合标样分别加入不同的样品瓶中，
每个质量浓度重复３次，摇匀并静置１ｈ，加入１００
ｍＬ的石油醚，称其质量，超声６０ｍｉｎ，冷却到室温重
新称量样品瓶的质量，将质量减少的样品瓶用石油
醚补足到原来的量，过滤，取５０ｍＬ提取液转移到平
底烧瓶中，经旋转蒸发仪浓缩到３０ｍＬ左右。
１．４．３ 索氏抽提法 称取５ｇ样品于样品瓶中，将
１，０１ｍＬ有机氯混合标样分别加入不同的样品瓶
中，每个质量浓度重复３次，混匀并静置１ｈ，然后将
样品用滤纸包好放入索氏抽提器中，加入１１０ｍＬ石
油醚（６０～９０℃）加热回流６ｈ，量取提取液５５ｍＬ
浓缩到３０ｍＬ左右。
１．４．４ 加速溶剂萃取 萃取池底部先放置抗溶剂
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第３３卷第２１期
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中 国 中 药 杂 志
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隔片，称量５ｇ样品，滴加１，０１ｍＬ有机氯混合标
样混匀并静置１ｈ，再加入５ｇ无水硫酸钠，混合均
匀后装入３３ｍＬ萃取池中，最后用助滤剂 Ｃｅｌｉｔｅ５４５
补足。出口处放置抗溶剂隔片，之后拧紧池盖。挑
选适宜条件用石油醚进行提取，量取一半提取液，加
入石油醚到３０ｍＬ左右。
１．４．５ 振荡提取 称取５ｇ样品于样品瓶中，将１，
０１ｍＬ有机氯混合标样分别加入不同的样品瓶中，
每个质量浓度重复３次，混匀并静置１ｈ，再加入５０
ｍＬ的石油醚振荡提取１ｈ，将提取液经布氏漏斗过
滤，再向残渣中加入５０ｍＬ的石油醚振荡１ｈ，过滤。
将２次滤液合并混匀，量取滤液 ５０ｍＬ浓缩到 ３０
ｍＬ左右。
１．５ 磺化法净化 分别将上述的浓缩液转入到
２５０ｍＬ的分液漏斗后，再加入（８×５～１５×５）ｍＬ
的浓硫酸磺化（具体根据样品色素和净化结果决
定），去除磺化层，加３×１００ｍＬ４％硫酸钠水溶液
洗石油醚层，去除硫酸钠水溶液层，石油醚层过１０ｇ
无水硫酸钠脱水，合并石油醚层，经旋转蒸发仪减压
浓缩至近干，改用氮气吹干，用石油醚定容至１ｍＬ
待测。
１．６ 色谱操作条件
ＡＴ．ＲＰＡⅡ农残分析专用柱，０３２ｍｍ×３０ｍ，
０３３μｍ；进样温度２８０℃；检测器温度３００℃；不
分流进样；气体流速高纯氮（纯度９９９９９％，杭州气
体公司提供）；柱头压１００ｍＬ·ｍｉｎ－１，尾吹３０ｍＬ
·ｍｉｎ－１；程序升温１６０℃保持４ｍｉｎ，以每分钟８℃
的速度升温到２４０℃保持８ｍｉｎ。
２ 结果与分析
在连续测定中药材样品农药残留的过程中，准
确吸取混合标样溶液１μＬ，重复进样８次，用峰面
积定量，得到 αＨＣＨ，ＰＣＮＢ，γＨＣＨ，艾氏剂，β
ＨＣＨ，δＨＣＨ，Ｐ，Ｐ′ＤＤＥ，Ｏ，Ｐ′ＤＤＴ，Ｐ，Ｐ′ＤＤＤ，Ｐ，
Ｐ′ＤＤＴ峰面积的相对标准偏差 ＲＳＤ％分别为
３４２，２１４，４５３，４７５，３２５，２６７，２８９，４６８，
５６４，１５１，符合国家标准要求，因此分析仪器具有
较好的精密度。
中药材样品中添加１０种有机氯农药的混合标
样，在净化和色谱分析方法完全相同的条件下，超声
波法、加速溶剂萃取法、索氏抽提法、振荡法提取中
药材中１０种有机氯农药的回收率结果见表１，２。４
种方法提取试验药材中１０种有机氯农药的回收率
分别为 ８０３％ ～１０５８％ （加速溶剂萃取），
８０５％～１０９４％ （索氏提取），６３５％ ～８９６％
（振荡提取）和８０８％～１１１３％ （超声波法提取），
相对标准偏差均小于１０％。经数据统计分析，超声
波法、加速溶剂萃取法和索氏抽提法３种方法提取
中药材中有机氯农药的效率并无显著性差异，而振
荡法与上述３种方法存在显著性差异，其回收率明
显低于加速溶剂萃取法、索氏抽提法和超声波法。
表１ 白芍中有机氯农药的回收率（珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
农药名称 添加浓度／ｍｇ·ｋｇ－１ 加速溶剂萃取法／％ 索氏抽提法／％ 振荡提取法／％ 超声波提取法／％
αＢＨＣ ０００２ ９６４±６１ａ ９９９±５４ａ ７５３±２３ｂ ９１５±３５ａ
００２ ９６５±１５ａ ８９２±３６ａ ８１０±２７ｂ ９２８±５６ａ
γＢＨＣ ０００２ ９１１±４６ａ ９３８±４５ａ ７５６±４３ｂ ９４５±２５ａ
００２ １００３±８６ａ １０９４±７８ａ ８１５±１７ｂ ９３６±６５ａ
βＢＨＣ ０００６ １０５８±４８ａ ９６２±２６ａ ７９２±３５ｂ ８８５±３４ａ
００６ ９４０±３５ａ ９９１±１６ａ ６４６±３６ｂ ８４８±７５ａ
δＢＨＣ ０００２ ９０６±２６ａ ８７７±３４ａ ７２４±２５ｂ ９０２±１１ａ
００２ １０２６±１６ａ ９８６±３７ａ ７５９±２９ｂ ９２３±３５ａ
艾氏剂 ０００２ ８７８±４５ａ ８９０±３８ａ ７５２±３０ｂ ９６５±２５ａ
００２ ９１２±２６ａ ９８４±５６ａ ６３５±２７ｂ ９６４±５４ａ
ＰＣＮＢ ０００６ ９３６±３６ａ ８９４±３５ａ ７８６±１８ｂ ８５５±１５ａ
００６ ８５５±４５ａ ８０５±６４ａ ７８８±３５ａ ８８５±３１ａ
Ｐ，Ｐ′ＤＤＥ ０００２ ８０３±６８ａ ８６２±６８ａ ７０１±３１ｂ ９８１±３３ａ
００２ １０１１±３５ａ ９７６±９２ａ ７２４±３０ｂ ９２２±４５ａ
Ｏ，Ｐ′ＤＤＴ ０００６ ９３３±５８ａ ９７０±３１ａ ６４３±２７ｂ １１１３±２２ａ
００６ ７９７±３５ａ ８８４±８８ａ ７２６±４３ｂ ９１３±３６ａ
Ｐ，Ｐ′ＤＤＤ ０００６ ９１６±２５ａ ８７１±５５ａ ７４２±３８ｂ ８９３±３５ａ
００６ ９０３±１６ａ ９７９±３４ａ ７５２±３０ｂ ９７５±２６ａ
Ｐ，Ｐ′ＤＤＴ ０００６ ９４５±６５ａ ９２５±２５ａ ７３５±２６ｂ ８２５±３９ａ
００６ ８３２±６０ａ ８９１±３８ａ ７６５±１７ｂ ９５１±４５ａ
注：同一行内相同字母差异不显著，不同字母差异显著，Ｐ＜００５（表２同）
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Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２１
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表２ 黄莲中有机氯农药的回收率（珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
农药名称 加入量／ｍｇ·ｋｇ－１ 加速溶剂萃取法／％ 索氏抽提法／％ 振荡提取法／％ 超声波提取法／％
αＢＨＣ ０００２ ８３３±２１ａ ９２０±５２ｂ ７８５±２１ａ ８４９±４３ａ
００２ ８９５±４３ａ ８８７±１２ａ ８０６±１１ｂ ８０８±４５ａ
γＢＨＣ ０００２ ９９９±１１ａ ９７１±１２ａ ８０２±３５ｂ ９０３±３５ａ
００２ ９９７±２６ａ ９９１±１３ａ ８１２±３６ｂ ９９０±３６ａ
βＢＨＣ ０００６ ９１１±６２ａ ９５３±１８ａ ８１２±５３ｂ ９０９±３１ａ
００６ ９８１±２２ａ ９７２±１９ａ ８０５±４５ｂ ９６１±４１ａ
δＢＨＣ ０００２ ９０２±１１ａ ９７４±１２ａ ７６５±２５ｂ ９６３±２４ａ
００２ ９１３±６２ａ ９３５±１５ａ ６８９±４５ｂ ９７４±５３ａ
艾氏剂 ０００２ ８７６±２４ａ ９３１±１５ａ ７４２±３８ｂ １０１８±１５ａ
００２ ８４６±４２ａ ８２５±３６ａ ７３２±３０ｂ ８７７±２５ａ
ＰＣＮＢ ０００６ １０１９±３０ａ １０７４±２１ａ ９３８±３３ｂ ９６７±３５ａ
００６ ８６３±１４ａ ８４９±４１ａ ８２２±３７ａ ９２８±５６ａ
Ｐ，Ｐ′ＤＤＥ ０００２ ９０１±５３ａ ９５３±１８ａ ８１２±５１ｂ ９７８±１５ａ
００２ ９６２±３５ａ ９７９±１４ａ ７９５±５２ｂ ９０３±１６ａ
Ｏ，Ｐ′ＤＤＴ ０００６ ８７２±６３ａ ９０２±５１ａ ６８５±５４ｂ ９２９±５４ａ
００６ ９４５±３５ａ ９６８±２５ａ ７２６±４３ｂ ９０５±２５ａ
Ｐ，Ｐ′ＤＤＤ ０００６ ８０１±５６ａ ８４２±６２ａ ８０２±４５ａ ８８１±５５ａ
００６ ９７５±１２ａ ９６１±１９ａ ８９６±６３ａ ８７６±４１ａ
Ｐ，Ｐ′ＤＤＴ ０００６ ８１５±６３ａ ８５６±３１ａ ７９８±３５ａ ９１１±５４ａ
００６ ９２６±１８ａ ９５１±６１ａ ８０１±５３ｂ ８４３±２４ａ
３ 讨论
赵维佳、高巍等［８］报道用振荡提取和超声波２
种方法对青菜中残留的有机氯类农药进行提取，其
回收效率没有明显差异。但是与蔬菜相比，中药材
一般都已经过干燥，含水量少，采用常规的振荡法，
有机溶剂不能完全与磨成粉的中药材紧密接触，因
此在相对较短的时间内，不能将中药材中的有机氯
农药完全提取出来，与其他３种方法相比，提取效率
较低。
通过对超声波法、加速溶剂萃取法和索氏提取
法３种方法提取中药材白芍、黄连中１０种有机氯农
药的效果比较表明，这３种方法的提取效率不存在
显著差异，但３种方法在耗费时间，溶剂使用量和所
需设备的成本方面存在很大的差异。索氏抽提法所
用的有机溶剂是这几种前处理方法中最多的（１１０
ｍＬ），并且耗时最长（６ｈ左右），在实验过程中需要
加热。快速溶剂萃取法主要利用了有机溶剂在高
温、高压下，其黏度降低，能更好的浸润样品，从而能
提高溶剂提取的效果。一般有机溶剂用量少，１０ｇ
样品仅需１５ｍＬ溶剂，完成１次萃取全过程的时间
短，仅需１５ｍｉｎ，自动化程度高，但是快速溶剂萃取
仪器的价格目前还非常昂贵，一般的实验室还难以
普遍配置。超声提取技术的基本原理主要是利用超
声波的空化作用加速中草药中农药与溶剂的接触，
使得提取的效率提高。此外，超声波还有利于破坏
细胞的细胞壁，使细胞内含物更易释放。超声波形
成的微流效应也是其提高提取效率的一个重要原
因。与常规提取法相比，超声波提取法具有耗时短、
使用溶剂量少、无需加热、提取率高，所需设备价格
低廉等优点，从快速、经济、安全、环保和中药材的特
点等因素考虑，在这４种方法中，超声波提取法应该
是一种首选的、适合推广、普及的中药材中有机氯农
药残留分析的提取方法，在开发中药材中农药多残
留分析方法上具有广阔的应用前景。
［参考文献］
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［５］ 李丽青．中药材中农药残留分析研究［Ｄ］．杭州 ：浙江大学，
２００５：２３．
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法及限量标准研究［Ｊ］．中国药学杂志，２０００，３５（２）：７９，８０．
［７］ 张曙明，郭怀忠，陈建民．甘草中有机氯类农药残留量的毛细
管气相色谱测定［Ｊ］．药学学报，２０００，３５（８）：５９７．
［８］ 赵维佳，高 巍，陈如东，等．青菜中多种农药残留量的分析方
法［Ｊ］．南京农业大学学报，２００４，２７（１）：１０７．
［责任编辑 吕冬梅］
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第３３卷第２１期
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