全 文 ：ＨＰＬＣ测定荭叶心通软胶囊中异荭草素、荭草素的含量
万先伦，马 琳，王永林，王爱民，兰燕宇，李勇军，何 迅
（贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳 ５５０００４）
［收稿日期］ ２００６１２０６
［基金项目］ 贵州省中药现代化科技产业研究开发基金项目
（黔科合中药专字［２００３］１２，［２００６］５０４２号）
［通讯地址］ 王永林，Ｔｅｌ：（０８５１）６９０８８９９，Ｅｍａｉｌ：ｇｙｗｙＬ＠
ｍｃ．ｅｄｕ．ｃｎ
荭叶心通软胶囊是在贵州民族用药的基础上研
制的中药新药，采用现代制备工艺研制而成，具有活
血化瘀，通脉止痛等功能，可用于冠心病心绞痛心血
瘀阻证，症见胸闷、胸部刺痛，固定不移，心悸不宁。
本品由荭草、三七、山楂叶等制备而成，以荭草为君
药，主要有效成分为异荭草素（ｉｓｏｒｉｅｎｔｉｎ）、荭草素
（ｏｒｉｅｎｔｉｎ）、三七皂苷、金丝桃苷等［１３］，其中异荭草
素、荭草素具有清热解毒，抗凝血，抗菌等作用［４６］。
为控制产品质量，保证临床疗效，本研究对荭叶心通
软胶囊中的异荭草素、荭草素含量进行了测定，为制
剂质量评价提供依据。
１ 仪器及试药
岛津ＬＣ－１０Ａｖｐ高效液相色谱仪系列，ＬＣ－
１０ＡＴｖｐ输液泵，ＳＰＤ－１０Ａｖｐ紫外检测器；７７２５ｉ手
动进样阀；ＷＭＬ色谱工作站（广西威玛龙色谱科技
公司）；ＴＣＱ－２５０超声波清洗器（北京医疗设备二
厂，功率２５０Ｗ；频率２９～３３ｋＨｚ）；荭叶心通软胶囊
（贵阳医学院药物研究所提供，批号２００４０５２５）。乙
腈为色谱纯，乙醇、甲醇、磷酸等均为分析纯，水为重
蒸水。异荭草素和荭草素对照品是作者从荭草 Ｐｏ
ＬｙｇｏｎｕｍｏｒｉｅｎｔａＬｅＬ．（采自贵州省惠水县阜康堂药
用植物生态农庄有限公司，贵州省中药研究所陈德
媛研究员鉴定）中分离、纯化而得，经ＮＭＲ，ＭＳ鉴定
为异荭草素、荭草素，ＨＰＬＣ归一化法测定其纯度分
别为９８９２％，９９０８％［７］。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＤｉａｍｏｎｓｉＬ迪马公司 Ｃ１８色谱柱
（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相乙腈０１％磷酸
（１５∶８５），检测波长３５０ｎｍ，柱温４０℃，流速１０ｍＬ
·ｍｉｎ－１，进样量１０μＬ。
２．２ 对照品溶液的制备 分别精密称取异荭草素
２２１０ｍｇ、荭草素２１６５ｍｇ，置１００ｍＬ量瓶中，加甲
醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制得每１ｍＬ含异荭草
素０２２１０ｍｇ、荭草素０２１６５ｍｇ的对照品储备液。
２．３ 供试品溶液的制备 取本品０３ｇ，精密称定，
加乙醚３ｍＬ，置离心试管中，于漩涡混合器上混匀，
置离心机中离心５ｍｉｎ（３０００ｒ·ｍｉｎ－１），弃乙醚液，
再加乙醚３ｍＬ，同法操作，沉淀加５０％乙醇适量超
声处理溶解后转移至５０ｍＬ量瓶中，用５０％乙醇稀
释至刻度，摇匀，即得。
２．４ 系统适用性实验 取缺荭草药材的阴性样品，
按供试品溶液的制备方法制备不含荭草药材的阴性
对照溶液。分别取异荭草素和荭草素对照品混合溶
液和供试品溶液、阴性对照溶液注入液相色谱仪，记
录色谱图（图１）。从图中可见，异荭草素和荭草素保
留时间分别约为１７２，１９３ｍｉｎ，缺荭草药材的阴性
图谱在异荭草素和荭草素峰位置处无假阳性峰，本试
验条件下异荭草素和荭草素分离良好，异荭草素和荭
草素及其与其他组分峰的分离度均大于１５。理论板
数以异荭草素、荭草素峰计分别为８０００，８４００。
图１ 对照品和样品的ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．样品；Ｃ．阴性；１．异荭草素；２．荭草素
２．５ 线性关系考察 分别精密吸取上述对照品储
备液０５，１，２，３，４ｍＬ于１０ｍＬ量瓶中，加甲醇至刻
·２２７１·
第３２卷第１６期
２００７年８月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １６
Ａｕｇｕｓｔ，２００７
度，摇匀，分别进样１０μＬ，记录色谱图。以峰面积Ｙ
为纵坐标，进样量Ｘ（ｕｇ）为横坐标进行线性回归，异
荭草素回归方程为Ｙ＝２３５×１０７Ｘ－５７１×１０３（ｒ＝
０９９９９），线性范围００１１～００８８ｍｇ·ｍＬ－１；荭草
素回归方程为 Ｙ＝２１９×１０７Ｘ＋２１９×１０３（ｒ＝
０９９９７），线性范围００１１～００８７ｍｇ·ｍＬ－１。
２．６ 稳定性考察 取供试品溶液，分别于０，１，２，
４，８ｈ进样１０μＬ，测定峰面积，结果异荭草素和荭
草素的ＲＳＤ分别为１７％，１２％（ｎ＝５），表明供试
品溶液在８ｈ内稳定。
２．７ 精密度试验 取供试品，按２．３方法制得供试
液，重复进样５次，异荭草素与荭草素的 ＲＳＤ分别
为１５％，０６％（ｎ＝５）。
２．８ 重复性试验 取同一供试品，按２．３方法制备
５份供试液，分别进样，异荭草素与荭草素的平均含
量分别为 ０２８７２％和 ０１７８８％，ＲＳＤ分别为
１５％，１８％（ｎ＝５）。
２．９ 回收率试验 采用加样回收，精密称取已测定
含量的样品（异荭草素和荭草素分别为０２８７２％
和０１７８８％），分别精密加入异荭草素和荭草素对
照品适量，按２．３方法制得供试品溶液，按色谱条件
进样测定，计算回收率，结果见表１，２。
表１ 异荭草素回收率试验
取样量
／ｇ
样品中含量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
０１５０４ ０４３１９ ０３３８９ ０７５８３ ９６３
０１５５６ ０４４６９ ０３３８９ ０７８１６ ９８８
０１４６３ ０４２０２ ０３３８９ ０７５８９ ９９９
０１６１１ ０４６２７ ０４２３６ ０８６９８ ９６１
０１４２７ ０４０９８ ０４２３６ ０８４１４ １０１９ ９８３ １８
０１５３９ ０４４２０ ０４２３６ ０８５８７ ９８４
０１５３０ ０４３９４ ０５０８３ ０９３３２ ９７１
０１６０７ ０４６１５ ０５０８３ ０９５７６ ９７６
０１５５２ ０４４５７ ０５０８３ ０９４６８ ９８６
２．１０ 样品测定 分别取３个批号样品，按２．３方
法制备供试液，分别进样１０μＬ，按上述色谱条件测
定，结果 ３批样品中异荭草素含量分别为 １２８，
１４１，１３９ｍｇ／粒，荭草素含量分别为 ２４４，２６６，
２５７ｍｇ／粒。
３ 讨论
３．１ 供试品制备方法的选择 由于制剂样品中含
表２ 荭草素回收率试验
取样量
／ｇ
样品中含量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＤＳ
／％
０１５０４ ０２６８９ ０２０７００４７０６ ９７４
０１５５６ ０２７８２ ０２０７００４７５６ ９５４
０１４６３ ０２６１６ ０２０７００４６６７ ９９１
０１６１１ ０２８８０ ０２５８８０５５１３ １０１７
０１４２７ ０２５５１ ０２５８８０５１１０ ９８９ ９８１ ２０
０１５３９ ０２７５２ ０２５８８０５２４２ ９６２
０１５３０ ０２７３６ ０３１０６０５８０５ ９８８
０１６０７ ０２８７３ ０３１０６０５９５４ ９９２
０１５５２ ０２７７５ ０３１０６０５７６４ ９６２
有大豆油，直接溶解进样后污染色谱柱，应先除去。
异荭草素、荭草素为黄酮类化合物，溶于乙醇等有机
溶剂而不溶于石油醚、乙醚、氯仿等溶剂，试验分别
采用了石油醚、乙醚、氯仿等溶剂去除样品中油脂，
结果用乙醚除去油脂类物质效果较好，操作简便。
３．２ 色谱条件的选择 实验选用了 ＨｙｐｅｒｓｉＬＣ１８（
５０ｍｍ×２００ｍｍ，５μｍ，大连依利特），ＫｒｏｍａｓｉＬＣ１８
（５０ｍｍ×２００ｍｍ，５μｍ，大连依利特）和 Ｄｉａｍｏｎ
ｓｉＬＣ１８（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ，迪马公司）；流动相
以甲醇水、甲醇０２％磷酸溶液、乙腈０１％磷酸溶
液作比较［８］，结果以 ＤｉａｍｏｎｓｉＬＣ１８色谱柱，乙腈
０１％磷酸溶液（１５∶８５）对荭草中荭草素和异荭草
素分离最为理想。
［参考文献］
［１］ 贵州省药品监督管理局．贵州省中药材、民族药材质量标准
［Ｓ］．贵阳：贵州科技出版社，２００３：２６７．
［２］ 苗明三，李振国．现代实用中药质量控制技术［Ｍ］．北京：人民
卫生出版社，２０００：３６．
［３］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：２２．
［４］ 肖培根．新编中药志［Ｍ］．第２卷北京：化学工业出版社，
２００２：１７５．
［５］ 翟延君，张淑荣，郝 宁，等．水红花子研究概况［Ｊ］．辽宁中医
学院学报，２００５，７（３）：２２６．
［６］ 谢周涛，何再安，刘焱文．红蓼的化学成分及药理研究进展
［Ｊ］．时珍国医国药，２００５，１６（１０）：１０３４．
［７］ 李勇军，何 迅，刘丽娜，等．荭草化学成分的研究［Ｊ］．中国中
药杂志，２００５，３０（６）：４４４．
［８］ 兰燕宇，王爱民，何 迅，等．ＲＰＨＰＬＣ测定注射用复方荭草冻
干粉针中异荭草素、荭草素的含量［Ｊ］．中国药学杂志，２００５，
４０（１４）：１１００．
［责任编辑 鲍 雷］
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