全 文 :#研究报告 #
°≤测定滇白珠药材中槲皮素的含量
张萌萌 o杜守颖 3
k北京中医药大学 中药学院 o北京 tsstsul
≈收稿日期 ussx2tt2sw
≈通讯作者 3 杜守颖 oר¯}kstsl{wzv{ywxo∞2°¤¬¯}§∏¶«²∏¼¬±ª
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滇白珠为杜鹃花科植物滇白珠 Γαυλτηερια ψυν2
νανενσισkƒµ¤±¦«ql «¨§的根 o其植物亦称满山香 !
透骨草 !老鸦泡 !透骨香 ≈tou o产于我国云南 !四川 !
贵州 !湖北 !湖南 !广东 !广西 !江西等地区 o质量标准
在 5贵州省中药材 !民族药材质量标准 6 !5中药大辞
典 6和 5中国民族药志 6中均有记载 ∀它具有祛风除
湿 !活血化瘀 !通络止痛 !清热解毒等功效 o用于治疗
风湿性关节炎 !关节肿痛 !跌打损伤 !慢性气管炎和
风寒感冒等 ≈vow ∀曾从滇白珠植物中提取并鉴定了
近 ws个化合物 ≈x o并以 °≤测得滇白珠木脂素苷
的含量 ≈y o但滇白珠苷的对照品不易得到 o不能作
为常规质量检验的含量测定 ∀也曾以比色法测定总
黄酮含量 k以芦丁计 l≈z o但专属性不强 ∀本实验以
槲皮素作为含量测定的指标 o该方法简便 !准确 o重
复性好 o可用作滇白珠药材中槲皮素的测定方法 ∀
1 仪器与试药
° p ttss系列高效液相色谱仪 o∂ • ⁄紫外检
测器 oª¬¯¨ ±·化学工作站 ~∂ p usss紫外可见分光
光度计 ~trts万电子天平 ∀
槲皮素对照品 k中国药品生物制品检定所 o批
号 s{t2|ssvlo乙腈 k µ¨¦®试剂公司 o色谱纯 lo盐酸
k北京益利精细化工品有限公司 o化学纯 l∀滇白珠
药材由贵州同济堂药业公司提供 o经本院阎玉凝教
授鉴定为杜鹃花科植物滇白珠的根 ∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件及系统适用性 ⁄¬¤°²±¶¬¯× ≤t{柱
kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l~流动相乙腈 2s1wh磷酸
kvyΒywl~流速 t °# °¬±pt ~检测波长 vyx ±°~柱温
室温 ∀
2q2 对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对照品
适量 o加甲醇制成 ut1{ Λª# °pt的溶液 o即得 ∀
2q3 供试品溶液制备 取滇白珠粉末 k过 ws目
筛 l约 t ªo精密称定 o至具塞锥形瓶中 o加入 tss °
甲醇 o水浴回流 t «o回收甲醇 o残渣精密加入甲醇 2
xh盐酸 kwΒtl的混合液 ts °o称定重量 o水回流
tx °¬±o放冷 o再称定重量 o用甲醇补足减失的重量 o
摇匀 o滤过 o取续滤液 o过 s1wx Λ°滤膜 o即得 ∀
2q4 线性关系考察 精密吸取槲皮素对照品溶液
towo{otuotyous Λ注入液相色谱仪 o测定峰面积 o
以槲皮素进样量 kΛªl为横坐标 o峰面积为纵坐标 o
绘制标准曲线 o其回归方程为 Ψ v ssy1zΞ p
tt1tt|oρ s1||| zo结果表明槲皮素在 s1suu ∗
s1wvy Λª线性关系良好 ∀
2q5 精密度试验 取供试品溶液 o连续进样 x次 o
结果精密度良好 o ≥⁄为 s1||h ∀
2q6 重复性试验 取滇白珠粉末 k过 ws目筛 lt ª
共 y份 o精密称定 o按供试品溶液制备方法制成供试
品溶液 o进样 o结果重复性良好 o ≥⁄为 t1vh ∀
2q7 稳定性试验 取供试品溶液 o分别在 souowo
tuouwow{ «进样 o结果稳定性良好 o ≥⁄为 t1|h ∀
2q8 加样回收率试验 取滇白珠粉末 k槲皮素含
量为 {t1| Λª# ªpt ls1x ª共 y份 o精密称定 o精密加
入槲皮素对照品溶液 u °o按供试品溶液制备方法
制成供试品溶液 o分别进样 !测定 o结果回收率良好 ∀
结果见表 t∀
表 t 槲皮素加样回收率
称样量
rª
样品中含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
rh
平均值
rh
≥⁄
rh
s1xs{ { s1swt z s1s{x y tss1z
s1xsy y s1swt x s1s{w u |{1s
s1xsy u s1swt x s1s{v { |z1t |{1x t1z
s1xsz u s1swt x s1s{w x |{1y
s1xsx y s1swt w s1s{v w |y1v
s1xsy u s1swt x s1s{x t tss1u
注 }对照品加入量为 s1swv y °ª
2q9 样品测定 吸取 w批供试品溶液各 ts Λo注
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第 vu卷第 t期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼o ussz
入液相色谱仪中 o依法测定 o另进对照品溶液 o以外
标法计算含量 o结果见表 uo色谱图见图 t∀
表 u 样品中槲皮素含量
药材批次 产地 槲皮素 r°ª# ªpt
ussvsutx 贵州省贵定县 s1sv{ t
ussws|sx 贵州省龙里县 s1sxy u
ussxsztx 贵阳市花溪区 s1tv| z
ussxswvs 贵阳市花溪区 s1s{t |
图 t 对照品及样品 °≤图
q对照品 ~
q滇白珠供试品 ~ tq槲皮素
3 讨论
流动相组成曾考察过 ≤v 2u ≈{ kxxΒwxlo
≤v 2s1wh v °w ≈| kxx Βwxlokxs Βxslokw{ Β
xulo≤v ≤2s1wh v °w kwsΒyslo分离效果均不如
≤v ≤2s1wh v °w kvyΒywl∀滇白珠药材含有以
槲皮素为苷元的苷 o实验中曾考察过以 u1xh 硫
酸水解后再用醋酸乙酯萃取 o测得槲皮素的含量比
用甲醇 2xh盐酸 kwΒtl水解时少 o最后确定用甲醇 2
xh盐酸水解 ∀曾考察过提取时间分别为 uotos1x
«o盐酸分别为 th oxh otsh ouxh o水解时间分别
为 wxovsotx °¬±o从而确定了供试品溶液制备方法 ∀
≈参考文献
≈t 朱亮锋 q芳香植物及其化学成分 ≈ q海口 }海南人民出版社 o
t|{{}{{q
≈u 芮和恺 o王正坤 q中国精油植物及其利用 ≈ q北京 }科学出版
社 ot|{z}vuyq
≈v 丁景和 q药用植物学 ≈ q上海 }上海科学技术出版社 ot||yq
≈w 江苏新中医学院 q中药大辞典 ≈ q上海 }上海科学技术出版
社 ot|zz}t{z|q
≈x 张治针 o果德安 o李长龄 o等 q滇白珠化学成分的研究 k´ l≈ q
中草药 ot||{ou|k{l}xs{q
≈y 马小军 o赵 玲 o赵玉娟 o等 q不同来源滇白珠中木脂素苷的含
量测定 ≈ q中国中药杂志 oussuouzktl}uxq
≈z 何 迅 q紫外分光光度法测定滇白珠药材中总黄酮的含量
≈ q贵阳医学院学报 ousstouykul}twvq
≈{ 苏流坤 o胡英杰 q反相 °≤法测定鱼腥草及其制剂中槲皮苷
的含量 ≈ q中药新药与临床药理 ot|||otskwl}uvuq
≈| 袁铁流 q°≤法测定银杏叶中槲皮素含量的研究 ≈ q湖南中
医杂志 ousssotykvl}zvq
≈责任编辑 张宁宁
≈收稿日期 ussy2sv2su
≈通讯作者 3 黄璐琦 oר¯}kstslywstwwtt2u|xy
苍术不定根诱导培养的研究
袁 媛 o吕冬梅 o黄璐琦 3 o郭兰萍
k中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszssl
苍术源于菊科苍术属植物苍术 Ατραχτψλοδεσ λαν2
χεαk׫∏±¥ql ⁄≤的根茎 o其功效为燥湿健脾 !驱风
散寒 !明目 ≈t ∀近年来 o随着国际市场对苍术的需
求量日益增加 o茅苍术被掠夺性采挖 o加之对茅苍术
生态环境的人为破坏 o造成茅苍术资源的枯竭 o使其
濒临灭绝 ≈u ∀目前利用生物技术进行中药资源繁
殖并大规模生产其有效成分已成为一条新的发展途
径 o但药用植物细胞培养的弊端之一是有效成分的
含量不稳定 o这主要是由于大多数有效成分均为次
生代谢产物 o其合成在细胞阶段表现不强造成的 o而
不定根培养可以解决这一问题 ≈v ∀本实验旨在利
用组织培养技术快速获得苍术的不定根 o为进一步
大规模生产其有效成分和研究苍术有效成分的代谢
途径建立技术平台 ∀
1 材料和方法
1q1 材料 苍术 Α. λανχεα种子由湖北中医学院詹
亚华教授鉴定并提供 ∀
1q2 苍术无菌苗的培养 将苍术种子用自来水浸
泡过夜后 o冲洗 v遍 ∀将种子放置于湿润滤纸上 o待
子叶展开后 o用 s1th的升汞浸泡 ts °¬±后 o再用无
菌水冲洗 u ∗ v遍 o备用 ∀将消毒好的苍术材料接种
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第 vu卷第 t期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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