全 文 ：大孔吸附树脂分离纯化土茯苓总黄酮
黄少伟，池汝安，张越非，吴元欣，巨修炼，郭 嘉，黄齐茂
（武汉工程大学 化工与制药学院 湖北省新型反应器与绿色化学工艺重点实验室，湖北 武汉 ４３００７３）
［摘要］ 目的：研究大孔吸附树脂分离纯化土茯苓总黄酮的工艺条件。方法：以土茯苓总黄酮收率为指标，通
过考察静态和动态吸附实验，筛选了大孔吸附树脂分离纯化土茯苓总黄酮的最佳工艺条件。结果：Ｄ１０１大孔树脂
对土茯苓总黄酮的静态饱和吸附容量为４５６ｍｇ·ｇ－１（干树脂）；最佳动态吸附、洗脱条件为土茯苓总黄酮提取液
ｐＨ６００±０２０，质量浓度４２ｍｇ·ｍＬ－１，吸附流速２ｍＬ·ｍｉｎ－１，上样量１５ｍＬ；吸附后的树脂柱先以１００ｍＬ纯化
水洗脱后，再用１００ｍＬｐＨ８００±０２０的６０％乙醇以３ｍＬ·ｍｉｎ－１流速洗脱。结论：Ｄ１０１型大孔树脂在所确定的
工艺条件下，可较好的分离纯化土茯苓总黄酮，其回收率达到９０％以上，且纯化后土茯苓总黄酮含量达到６２６％，
是纯化前的近２倍。
［关键词］ 土茯苓；总黄酮；大孔吸附树脂
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１０１１３３０６
［收稿日期］ ２００７０９２５
［基金 项 目］ 湖 北 省 自 然 科 学 基 金 创 新 群 体 项 目
（２００６ＡＢＣ０１４）
［通讯作者］ 池汝安，Ｔｅｌ：（０２７）８７１９４５００，Ｅｍａｉｌ：ｒａｃ＠ｍａｉｌ．
ｗｉｔ．ｅｄｕ．ｃｎ
土茯苓为百合植物光叶菝葜ＳｍｉｌａｘｇｌａｂｒａＲｏｘｂ
的干燥根，又名红土苓，主要产于广东、湖南、湖北等
地。甘、淡、平，归肝、胃经，是传统的清热解毒常用
中药，具有调中止泻、健脾胃、强筋骨、除湿、利关节
等功效，临床上用于治疗湿热淋浊、带下病、痛肿、瘰
疠、疥癣、梅毒及汞中毒所致肢体拘挛，筋骨疼痛等
症［１］。近年来临床和药理试验表明，土茯苓在抗
癌、抗动脉硬化和治疗冠心病、心绞痛等方面效果良
好；土茯苓对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、绿脓
杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、福氏痢疾杆菌、白喉杆
菌、炭疽杆菌等细菌有一定抑制作用［２，３］。大孔吸
附树脂是２０世纪 ７０年代发展起来的吸附分离材
料，其吸附分离原理是机械筛分和化学吸附的综合。
它具有物理化学稳定性高，吸附选择性强，富集效果
好，解吸条件温和，再生简便，使用周期长等优点而
广泛应用于天然产物的分离和纯化［４６］。作者通过
对土茯苓总黄酮的吸附分离研究，发现 Ｄ１０１大孔
吸附树脂是一种对土茯苓总黄酮具有优良吸附性能
的吸附树脂，并得出优化的吸附分离工艺条件，其结
果可为土茯苓总黄酮的提取分离提供参考。
１ 仪器与试药
土茯苓购于三九中药房，经湖北中药研究院王
克勤研究员鉴定；芦丁对照品购于中国药品生物制
品检定所（批号００８０９７０５）；Ｄ１０１大孔树脂（天津
制胶厂）；ＡＢ－８，Ｓ－８大孔树脂（南开大学）；聚酰
胺（１４～３０目，国药集团化学试剂有限公司），其他
试剂均为国产分析纯。
ＵＶ－７５０４紫外可见分光光度计（上海欣茂仪
器有限公司）；玻璃色谱柱（３０ｍｍ×５００ｍｍ，１０
ｍｍ×１５０ｍｍ）。
２ 方法
２．１ 标准曲线制备
总黄酮的分析采用分光光度法，以芦丁为对照
品，试样中加入铝离子试剂，同时控制适宜ｐＨ，使黄
酮化合物与铝盐形成络合物，在可见区能获得稳定
的特征吸收峰，可直接进行分光光度测定。
标准曲线的绘制［１］：精密称取１０５℃干燥至恒
重的芦丁对照品２０００ｍｇ，置于１００ｍＬ量瓶中，加
适量８０％乙醇溶液使其溶解，并稀释至刻度，摇匀，
为２０ｍｇ·ｍＬ－１。吸取该标准溶液 ０，０１，０２，
０４，０６，０８，１０，１２，１４ｍＬ分别置于１０ｍＬ量
瓶中，各加０１ｍｏｌ·Ｌ－１三氯化铝溶液２ｍＬ，１ｍｏｌ
·Ｌ－１醋酸钾溶液３ｍＬ，用６０％乙醇溶液稀释至刻
度，摇匀后超声除气泡５ｍｉｎ，再放置３０ｍｉｎ，同时作
空白，用ＵＶ－７５０４紫外可见分光光度计在４２０ｎｍ
波长处测定吸光度，质量浓度 Ｃ（２０～２８０μｇ·
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ｍＬ－１）与吸光度（Ａ）有良好的线性关系。用最小二
乘法线性回归，以测定结果计算，得回归方程 Ｃ＝
－０５１９７６＋３１３４６７９６Ａ（ｒ＝０９９９９）。
２．２ 土茯苓总黄酮浓缩液的制备
将土茯苓饮片（１ｋｇ）粉碎，石油醚（６０～９０℃）
回流脱脂后，再用８０％乙醇回流提取多次，抽滤，合
并滤液，减压回收乙醇至无醇味，再加适量热水稀
释，抽滤（或离心），滤液（或上清夜）定容至 １０００
ｍＬ（１ｇ·ｍＬ－１）即得样品液，测得总黄酮质量浓度
为８４ｍｇ·ｍＬ－１。
２３ 树脂的预处理
用无水乙醇浸泡并充分溶胀 Ｄ１０１树脂，然后
将树脂置于玻璃色谱柱（３０ｍｍ×５００ｍｍ）中用无
水乙醇淋洗，检测流出液，直至淋洗后流出液与水混
合（１∶５）后不再出现白色混浊，用大量重蒸水洗去
乙醇至无醇味，然后分别用体积分数为５％的 ＨＣｌ
溶液、２％的ＮａＯＨ溶液淋洗树脂，再用纯化水洗至
中性，密封存放，待用［７］。
２４ 树脂的静态吸附与解吸
准确称取经真空干燥的预处理树脂装入具塞磨
口三角瓶中，加入土茯苓总黄酮提取液，置恒温震荡
器上震荡，充分吸附后，过滤，测定滤液中平衡总黄
酮浓度。分别取已吸附饱和的树脂于具塞磨口三角
瓶中，加入解吸液振荡，充分解吸，然后取其过滤清
液测定其平衡浓度。通过比较不同树脂的吸附量及
解吸率，筛选出较优的吸附树脂，并研究了静态吸附
动力学曲线，考察提取液及解吸液 ｐＨ对树脂吸附
性能的影响。
ｑ＝
（Ｐ０－Ｐ１）×Ｖ
ｍ ；Ｅ＝
Ｐ０－Ｐ１
Ｐ０
×１００％；Ｄ＝
Ｐ２Ｖ
ｍｑ×１００％
其中ｑ为树脂的吸附容量（ｍｇ·ｇ－１干树脂）；
Ｅ，Ｄ分别为吸附率和解吸率；ρ０为土茯苓总黄酮提
取液质量浓度（ｍｇ·ｍＬ－１）；ρ１，ρ２分别为吸附后和
解吸后的滤液质量浓度（ｍｇ·ｍＬ－１）；ｍ为树脂质
量（ｇ）；Ｖ为解吸液体积（ｍＬ）。
２５ 树脂的动态吸附与解吸
由大孔吸附树脂对土茯苓总黄酮的静态吸附、
解吸试验，对筛选出的一种理想树脂，考察上样液的
流速、浓度以及洗脱剂的流速、浓度对树脂吸附和解
吸性能的影响，进行动态吸附与解吸试验。把预处
理好的树脂装入１０ｍｍ×１５０ｍｍ玻璃色谱柱中（柱
床体积约为９ｍＬ），将土茯苓总黄酮提取液上柱，洗
脱，分步收集洗脱液，检测洗脱液中土茯苓总黄酮浓
度。
３ 结果与分析
３．１ 树脂的静态吸附与解吸结果
３．１．１ 树脂的静态吸附动力学曲线 在３０℃恒温
振荡器中，考察了Ｄ１０１，ＡＢ－８，Ｓ－８和聚酰胺４种
树脂对土茯苓总黄酮吸附率和吸附时间的关系，绘
出了静态吸附动力学曲线，其结果如图１所示。由
图１可见，聚酰胺对土茯苓总黄酮的吸附最快，在
１０ｈ内基本达到平衡；Ｄ１０１，ＡＢ－８和 Ｓ－８吸附
速率相当，基本上在３０ｈ后达到平衡。
图１ 各树脂的静态吸附动力学曲线
３．１．２ 树脂的筛选 分别称取１００ｇ（干重）经预
处理的 Ｄ１０１，Ｓ－８，ＡＢ－８和聚酰胺树脂于５０ｍＬ
具塞磨口三角瓶中，加入３０ｍＬ（２１ｍｇ·ｍＬ－１）土
茯苓总黄酮提取液，置于３０℃恒温振荡器上振荡８
ｈ，然后取其过滤滤液检测其浓度，计算树脂的单位
饱和吸附容量ｑ和吸附率Ｅ。分别将已吸附饱和的
不同树脂置于５０ｍＬ的具塞磨口三角瓶中，分别加
入３０ｍＬ６０％乙醇振荡８ｈ进行静态解吸，测定解
吸液中土茯苓总黄酮浓度，计算解吸率Ｄ，结果见表
１。
表１ 不同类型树脂对土茯苓总黄酮的静态吸附、解吸能力
树脂 ｑ／ｍｇ·ｇ－１ Ｅ／％ Ｄ／％
Ｄ１０１ ４５６ ７２４ ９１３
ＡＢ－８ ３８４ ６１０ ９０７
Ｓ－８ ３０８ ４８９ ８１５
聚酰胺 ５７２ ９０８ ６６２
在相同条件下，吸附树脂的种类不同，不但吸附
能力不同，其解吸能力也是不同的。实验表明，聚酰
胺吸附容量最大，达到７０３ｍｇ·ｇ－１干树脂，但是
其解吸率只有６６２％；非极性大孔树脂 Ｄ１０１吸附
容量为５６８ｍｇ·ｇ－１，解吸率也达到９０％以上。综
合吸附和解吸效果以及静态吸附动力学试验，选择
Ｄ１０１大孔树脂做后续实验。
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３．１．３ ｐＨ对树脂性能的影响 称取 １００ｇ（干
重）经预处理的 Ｄ１０１树脂若干份置于５０ｍＬ具塞
磨口三角瓶中，分别加入３０ｍＬ（质量浓度为２１ｍｇ
·ｍＬ－１）不同 ｐＨ的土茯苓总黄酮提取液，置于３０
℃恒温振荡器上振荡８ｈ，然后取其过滤滤液检测其
浓度，考察土茯苓总黄酮提取液ｐＨ对Ｄ１０１树脂吸
附性能的影响；选择吸附效果最优的饱和树脂进行
解吸实验，考察不同 ｐＨ的６０％乙醇解吸液对解吸
性能的影响，结果见图２。
图２ ｐＨ对树脂性能的影响
由图２可看出，吸附前提取液的 ｐＨ小于７即
偏酸性时，Ｄ１０１大孔树脂对土茯苓总黄酮的吸附效
果优于碱性条件；解吸剂的 ｐＨ大于７即偏碱性时，
６０％乙醇对土茯苓总黄酮在 Ｄ１０１树脂上解吸效果
优于酸性条件。这可能是因为土茯苓总黄酮类成分
含有较多酚羟基，显弱酸性，在酸性条件下不易解
离［８］，以分子形式存在，而有利于总黄酮在大孔树
脂上的吸附；在碱性条件下容易解离，以离子形式存
在，从而易于总黄酮在树脂上的解吸。故选择吸附
前提取液的ｐＨ在４～６、吸附后解吸液的 ｐＨ８～１０
为佳。
３．２ 树脂的动态吸附与解吸结果
３．２．１ 上样液浓度的考察 称取２０ｇ（干重）预
处理后的Ｄ１０１树脂湿法装于（１０ｍｍ×１５０ｍｍ）色
谱柱中，将１０５，２１，３１５，４２，５２５，６３，８４ｍｇ·
ｍＬ－１的土茯苓总黄酮提取液（ｐＨ均调至 ６００±
０２０）各１００ｍＬ分别以２０ｍＬ·ｍｉｎ－１的流速通过
树脂柱，室温下进行动态吸附，检测流出液中土茯苓
总黄酮浓度，计算树脂的吸附容量，结果见图３。
由图３可以看出，在一定浓度范围内，随上样液
质量浓度增加，树脂对土茯苓总黄酮的吸附容量先
增加后减少。显然，在总黄酮低浓度区间，随着上样
液质量浓度的提高，单位量树脂可吸附的总黄酮量
增加，因而树脂吸附容量提高。但是，由于流速恒
图３ 上样液质量浓度对吸附容量的影响
２ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｐＨ６１２，室温
定，随总黄酮浓度的进一步提高，土茯苓总黄酮分
子在树脂内部扩散能力可能降低，且浓度增加后，与
总黄酮竞争树脂吸附位点的杂质量也会增加，因而
树脂的目标吸附量反而会下降。故选择上样液质量
浓度在４２ｍｇ·ｍＬ－１左右为宜。
３．２．２ 上样液流速的考察 称取２０ｇ（干重）预
处理后的Ｄ１０１树脂湿法装于（１０ｍｍ×１５０ｍｍ）色
谱柱中，将４２ｍｇ·ｍＬ－１的土茯苓总黄酮提取液
（ｐＨ６０５）１００ｍＬ分别以 １０，２０，３０，４０，５０
ｍＬ·ｍｉｎ－１的流速通过树脂柱，室温下进行动态吸
附，检测流出液中土茯苓总黄酮浓度，计算树脂的吸
附容量，结果见图４。
图４ 上样液流速对吸附容量的影响
４２ｍｇ·ｍＬ－１，ｐＨ６０５，室温
由图４可以看出，树脂的吸附容量随流速的增大
而下降。原因可能要考虑到树脂的内扩散效应，当吸
附流速过快，则溶液通过树脂床的速度大于传质速
度，总黄酮分子来不及扩散到树脂的内孔就已经流出
柱子，传质未进行彻底，从而使得树脂的吸附容量减
少。因此，在相同条件下，上样流速慢有利于土茯苓
总黄酮的吸附，即当吸附流速为１ｍＬ·ｍｉｎ－１时吸附
效果最好，但当吸附流速为２ｍＬ·ｍｉｎ－１时总黄酮的
解吸率与流速为１ｍＬ·ｍｉｎ－１时相差不大，考虑工作
效率，选择２ｍＬ·ｍｉｎ－１的流速进行上柱。
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３．２．３ 上样量的考察 取质量浓度为 ４２ｍｇ·
ｍＬ－１的土茯苓总黄酮提取液（ｐＨ６０２），室温下以
流速２ｍＬ·ｍｉｎ－１加于Ｄ１０１树脂柱上，每１０ｍＬ收
集一管流出液，检测流出液中土茯苓总黄酮浓度，绘
制动态吸附透过曲线，结果见图５。
图５ 动态吸附透过曲线
４２ｍｇ·ｍＬ－１，流速２ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｐＨ６０２，室温
由图５可见，流出液中土茯苓总黄酮的含量随
上样量增加而增加。上样量在１０～２０ｍＬ吸附透过
曲线上升缓慢，此阶段为吸附过程；上样量超过２０
ｍＬ后，吸附透过曲线陡然上升，饱和点为４０ｍＬ，此
时树脂柱完全吸附饱和。因此，为了减少泄漏，在提
高土茯苓总黄酮的回收率的同时增大上样量，合适
的上样量选择在１５ｍＬ左右（此时动态吸附容量约
为２９３ｍｇ·ｇ－１）。
３．２．４ 洗脱剂浓度的考察 取７份１５ｍＬ质量浓
度为４２ｍｇ·ｍＬ－１（ｐＨ６０７）土茯苓总黄酮提取液
以２ｍＬ·ｍｉｎ－１流速在室温下分２批上４根 Ｄ１０１
树脂柱（１０ｍｍ×１５０ｍｍ），收集泄漏液，检测土茯
苓总黄酮含量，从而计算出树脂柱的吸附量。树脂
柱分别用１００ｍＬ纯化水洗脱（实验发现用１００ｍＬ
水即可洗去水溶性杂质糖和蛋白质等），再分别用
３０％，４０％，５０％，６０％，７０％，８０％，９０％乙醇（调节
ｐＨ８００±０２０）以３ｍＬ·ｍｉｎ－１流速洗脱，直至收
集的洗脱液紫外检测不出土茯苓总黄酮为止。分别
浓缩洗脱液回收乙醇，检测洗脱液中土茯苓总黄酮
含量，计算洗脱率，结果见表２。由表２可见，６０％
乙醇洗脱率最高，且洗脱剂用量较小，故确定６０％
乙醇液为最佳洗脱剂。
３．２．５ 洗脱剂流速的考察 取５份１５ｍＬ质量浓
度为４２ｍｇ·ｍＬ－１（ｐＨ６０７）土茯苓提取液以 ２
ｍＬ·ｍｉｎ－１流速在室温下分２批上３根 Ｄ１０１树脂
柱（１０ｍｍ×１５０ｍｍ），收集泄漏液，检测土茯苓总
黄酮含量，从而计算出树脂柱的吸附量。树脂柱分
表２ 洗脱剂浓度对土茯苓总黄酮洗脱率的影响
乙醇体积分数／％ 乙醇用量／ｍＬ 洗脱率／％
３０ ２００ ５３４
４０ １８０ ７０６
５０ １６０ ８８５
６０ １２０ ９４３
７０ １４０ ８５２
８０ １２０ ７０３
９０ １００ ６５４
别用１００ｍＬ纯化水洗脱，再用６０％乙醇（调节 ｐＨ
８００±０２０）分别以１，２，３，４，５ｍＬ·ｍｉｎ－１的速度
洗脱，直至收集的洗脱液紫外检测不出土茯苓总黄
酮为止。分别浓缩洗脱液回收乙醇，检测洗脱液中
土茯苓总黄酮含量，计算洗脱率，结果见表３。
表３ 洗脱剂流速对土茯苓总黄酮洗脱率的影响
洗脱剂流速／ｍＬ·ｍｉｎ－１ 洗脱剂用量／ｍＬ 洗脱率／％
１ １４０ ９６３
２ １２０ ９５１
３ １００ ９４６
４ １５０ ８９７
５ １８０ ８５３
由表３可知，随着洗脱流速的增加，醇洗脱总黄
酮的量逐渐减少，且当洗脱剂流速较慢或较快时，洗
脱剂用量均较大。原因可能是洗脱流速过快，洗脱液
通过树脂床的速度大于传质速度，部分洗脱液可能未
起到解吸附作用而直接流出。因此，考虑到洗脱剂用
量和工作效率，选择洗脱剂流速为３ｍＬ·ｍｉｎ－１。
３．２．６ 洗脱终点的确定 按上述确定的吸附条件，
将４２ｍｇ·ｍＬ－１的土茯苓总黄酮提取液１５ｍＬ在室
温下上柱，吸附后，柱子先用１００ｍＬ纯化水洗脱，然
后用６０％乙醇（ｐＨ８１２），以３ｍＬ·ｍｉｎ－１的流速进
行洗脱，每１０ｍＬ收集１次洗脱液，检测洗脱液中土
茯苓总黄酮浓度，绘制动态洗脱曲线，结果见图６。
图６ 动态洗脱曲线
由图６可知，在乙醇用量为１０～２０ｍＬ时，随着
乙醇用量的加大，流出液中土茯苓总黄酮的含量逐
渐增加；当乙醇用量继续加大时，流出液中土茯苓总
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黄酮的浓度又逐渐的降低；当乙醇用量为８０～１００
ｍＬ时，已基本将土茯苓总黄酮洗净。
３．２．７ 树脂重复使用次数的考察 按上述确定的
吸附洗脱条件，取上述土茯苓总黄酮提取液过柱，在
同一根树脂柱上重复操作６次，分别计算６次的动
态吸附容量和土茯苓总黄酮回收率（过柱前土茯苓
总黄酮量／过柱后土茯苓总黄酮量 ×１００％），结果
见表４。
表４ Ｄ１０１树脂重复使用次数对土茯苓总黄酮的影响
次数 动态吸附容量／ｍｇ·ｇ－１ 回收率／％
１ ３１３ ９５６
２ ２９６ ８９２
３ ２７２ ８１５
４ ２５５ ７０４
５ １６６ ５１３
６ １０７ ３０１
可看出，Ｄ１０１树脂重复使用４次后，对土茯苓
总黄酮的吸附量已经明显下降，需要再生才可以继
续使用，故树脂可重复使用４次。
３．２．８ 分离纯化后土茯苓总黄酮含量和回收率的
考察 合并优化吸附、洗脱工艺下的洗脱液，减压浓
缩回收乙醇，低温真空烘干至恒重，得棕黄色粉末
（即土茯苓总黄酮）。精密称取５０ｍｇ经过 Ｄ１０１大
孔树脂纯化过和未经纯化的土茯苓总黄酮粉末（直
接浓缩提取液真空干燥得到）各１份，分别用８０％
乙醇使其溶解后定溶于５０ｍＬ量瓶中，摇匀。平行
取３份检测总黄酮含量，计算土茯苓总黄酮质量分
数（土茯苓总黄酮粉末中含所总黄酮量／土茯苓总
黄酮粉末量×１００％）和回收率，结果纯化后土茯苓
总黄酮达到６２６％，比纯化前提高了近１倍，且回
收率达到９５７％。
４ 结论
Ｄ１０１大孔吸附树脂对土茯苓总黄酮的静态饱
和吸附容量为４５６ｍｇ·ｇ－１（干树脂），静态解吸率
为９１３％；动态吸附容量约为 ３０ｍｇ·ｇ－１（干树
脂），动态洗脱率达９４％以上。
动态吸附实验表明 Ｄ１０１大孔吸附树脂对土茯
苓总黄酮具有良好的吸附性能。其工艺条件为：在
室温下，将浓度为４２ｍｇ·ｍＬ－１（ｐＨ６００±０２０）
的土茯苓总黄酮提取液以２ｍＬ·ｍｉｎ－１流速上样，
先以１００ｍＬ纯化水洗脱吸附后的树脂柱后，再用
６０％（ｐＨ８００±０２０）的乙醇 １００ｍＬ以 ３ｍＬ·
ｍｉｎ－１流速洗脱。在此工艺条件下，土茯苓总黄酮回
收率达到９０％以上，且纯化后土茯苓总黄酮含量达
到６２６％，是纯化前的近２倍。
Ｄ１０１大孔吸附树脂对土茯苓总黄酮具有吸附
快、吸附容量大、解吸率高等优点，在分离纯化土茯
苓总黄酮方法中具有一定的推广价值。
［参考文献］
［１］ 田 君，池汝安，高 洪，等．乙醇提取土茯苓黄酮甙的动力学
研究［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００５，１７（１）：１１．
［２］ 刘 圣，沈爱宗．土茯苓研究进展［Ｊ］．中医药学报，１９９７，２２
（５）：５４．
［３］ 沙 飞，禹志领，王一涛．土茯苓品质与药理研究进展［Ｊ］．中
药材，２００６，２９（５）：５１７．
［４］ 李文霞，颜 彦，叶晓川，等．大孔吸附树脂分离纯化菝葜总黄
酮［Ｊ］．中国中药杂志，２００７，３２（１３）：１２９２．
［５］ 盛 萍，帕丽达·阿不力孜，刘 波，等．大孔树脂吸附法富集
野菊花总黄酮的工艺研究［Ｊ］．中草药，２００６，３７（８）：１１７０．
［６］ 曹群华，瞿伟菁，李家贵，等．大孔树脂吸附纯化沙棘籽渣总黄
酮的研究［Ｊ］．中国中药杂志，２００４，２９（５）：２２５．
［７］ 邓 亮，叶利明，侯世祥，等．苯乙烯型大孔树吸附脂预处理的
质量评价方法研究［Ｊ］．中国中药杂志，２００４，２９（１１）：１３０７．
［８］ 田 君，池汝安，张越非，等．从土茯苓浸取液萃取黄酮的研究
［Ｊ］．解放军药学学报，２００６，２２（５）：３４０．
ＳｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＳｍｉｌａｘｇｌａｂｒａ
ｂｙｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｒｅｓｉｎ
ＨＵＡＮＧＳｈａｏｗｅｉ，ＣＨＩＲｕａｎ，ＺＨＡＮＧＹｕｅｆｅｉ，ＷＵＹｕａｎｘｉｎ，ＪＵＸｉａｌｉａｎ，ＧＵＯＪｉａ，ＨＵＡＮＧＱｉｍａｏ
（ＨｕｂｅｉＫｅｙＬａｂｏｆＮｏｖｅｌＲｅａｃｔｏｒ＆ＧｒｅｅｎＣｈｅｍｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＷｕｈａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｓｅｐａｒａｔｉｎｇａｎｄｐｕｒｉｆｙｉｎｇｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＳｍｉｌａｘｇｌａｂｒａ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｗｉｔｈｔｈｅ
ｙｉｅｌｄｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｓｉｎｄｅｘ，ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｐｒｏｃｅｓｓｏｆｓｅｐａｒａｔｉｎｇａｎｄｐｕｒｉｆｙｉｎｇｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＳ．ｇｌａｂｒａＲｏｘｂｗａｓｓｃｒｅｅｎｅｄｂｙｓｔａｔｉｃａｎｄ
ｄｙｎａｍｉｃａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｔｅｓｔｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｓｔａｔｉｃｓａｔｕｒａｔｅｄａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｃａｐａｃｉｔｙｏｆＤ１０１ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓｒｅｓｉｎｔｏｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆＳ．ｇｌａｂｒａｗａｓ
４５６ｍｇ·ｇ－１（ｄｒｙｒｅｓｉｎ）．ＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｄｙｎａｍｉｃａｄｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｅｌｕｔｉｏｎｗｅｒｅａｓｔｈａｔｔｈｅｐＨ，ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅａｄ
·７３１１·
第３３卷第１０期
２００８年５月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １０
Ｍａｙ，２００８
ｓｏｒｐｔｉｏｎｖｅｌｏｃｉｔｙｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｓｏｌｕｔｉｏｎ，ａｎｄｔｈｅａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｃａｐａｃｉｔｙｗｅｒｅ６００±０２０，４２ｍｇ·ｍＬ－１，２ｍＬ·ｍｉｎ－１ａｎｄ１５ｍＬ，
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅａｄｓｏｒｂｅｄｒｅｓｉｎｃｏｌｕｍｎｗａｓｗａｓｈｅｄｂｙ１００ｍＬ６０％ ｅｔｈａｎｏｌｗｉｔｈｐＨｖａｌｕｅｏｆ８００±０２０ａｔｔｈｅｅｌｕｔｉｎｇｖｅｌｏｃｉｔｙｏｆ３
ｍＬ·ｍｉｎ－１ａｆｔｅｒｗａｓｈｅｄｂｙ１００ｍＬｄｉｓｔｉｌｅｄｗａｔｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆＳ．ｇｌａｂｒａｗａｓａｂｌｅｔｏｂｅｅａｓｉｌｙｓｅｐａｒａｔｅｄａｎｄｐｕｒｉ
ｆｉｅｄｂｙＤ１０１ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓｒｅｓｉｎｕｎｄｅｒｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｂｏｖｅ，ａｎｄｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎ９０％．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｏｂ
ｔａｉｎｅｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｒｅａｃｈｅｄ６２６％，ｗｈｉｃｈｗａｓ２ｔｉｍｅｓｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｂｅｆｏｒｅｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｓｍｉｌａｘｇｌａｂｒａ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｒｅｓｉｎ
［责任编辑 鲍 雷］
栀子不同饮片环烯醚萜苷类成分比较研究
张 村，肖永庆，李 丽，逄 镇，李桂柳
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：对栀子不同饮片环烯醚萜苷类成分进行比较研究。方法：ＨＰＬＣ同时测定２个主要成分（京尼
平龙胆二糖苷，京尼平苷）含量，色谱条件为ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８柱，流动相乙腈０３％甲酸水（１２∶８８），检测波长２３８ｎｍ，
流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温３５℃。结果：２个成分在测定范围内线性关系较好（ｒ＞０９９９４），平均回收率分别为
１０１８％，９９１％。栀子不同饮片中２种环烯醚萜苷类成分含量有差异。结论：所建立的方法准确、可靠，栀子不同
饮片的含量变化呈现一定的规律性。
［关键词］ 栀子饮片；京尼平苷；京尼平龙胆二糖苷；ＨＰＬＣ；含量测定
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１０１１３８０３
［收稿日期］ ２００７１０２６
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３０６７２６６６）
［通讯作者］ 肖永庆，Ｔｅｌ：（０１０）８４０４０２２１，Ｅｍａｉｌ：ｘ．ｈｅｑｉ＠１６３．
ｃｏｍ
栀子为茜草科植物栀子ＧａｒｄｅｎｉａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓＥｌ
ｌｉｓ．的干燥成熟果实，具有泻火除烦、清热利尿、凉血
解毒的功效。现代研究表明栀子的主要成分及有效
成分为以京尼平苷（ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）为代表的环烯醚萜
类成分，该类成分具有解热、抗炎、保肝、利胆、镇痛、
镇静、抗菌等与栀子功能主治相关的生理活性。
栀子临床上常以不同炮制品入药，栀子生品苦
寒之性甚强，易伤中气；炒后可除此弊，炒焦后苦寒
之性得以缓和，且增加止血作用，栀子炭善于凉血止
血。栀子不同炮制品的功效差异，根源是其内在化
学成分发生了变化，因此作者在对栀子进行系统的
化学成分研究的基础上，对栀子常用的炮制品（生
品，炒黄品，炒焦品，炒炭品）中主要的环烯醚萜类
成分京尼平苷（ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ，Ｇ）及京尼平龙胆二糖苷
（ｇｅｎｉｐｉｎｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｉｄｅ，ＧＧ）以 ＨＰＬＣ同时测定，并进
行含量比较研究。
１ 仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ｓｅｒｉｅｓ，包括四元泵、自动进样器、
ＤＡＤ检测器、在线脱气机和柱温箱。水为重蒸馏
水，甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。对
照品 Ｇ，ＧＧ为本研究室从栀子中分离鉴定，经
ＨＰＬＣ面积归一化法测定纯度达９８％以上，可供含
量测定用。
栀子药材购自主产地江西金溪等地，经本所胡
世林研究员鉴定。不同炮制品包括生品、炒黄品、炒
焦品、炒炭品、碾碎炒黄品（简称碾黄品）、碾碎炒焦
品（简称碾焦品）等均由广东康美药业股份有限公
司提供，临用前分别粉碎过４０目筛后备用。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈０３％甲酸水（１２∶８８）；检
测波长２３８ｎｍ；流速 １０ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温 ３５℃。
在此条件下栀子样品中Ｇ，ＧＧ对照品与其他组分均
能达到基线分离，见图１。
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取 Ｇ，ＧＧ对照品
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第３３卷第１０期
２００８年５月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １０
Ｍａｙ，２００８