全 文 ：川芎内酯 „预处理对心肌微血管内皮细胞缺氧 r
复氧损伤保护作用及机制研究
高 伟 o梁日欣 3 o肖永庆 o李 丽 o王 岚 o杨 庆
k中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要   目的 }探讨川芎内酯 „预处理对心脏微血管内皮细胞缺氧 r复氧 k‹ r• l损伤的保护作用及作用机
制 ∀方法 }采用体外培养的大鼠乳鼠心脏微血管内皮细胞 o空白组不加任何处理 ~单纯 ‹ r• 组缺氧 w «r复氧 u «~单
纯预处理组低氧 ux °¬±r复氧 vs °¬±o然后缺氧 w «r复氧 u «o各给药组分别加 t ≅ tspz ot ≅ tsp| ot ≅ tsptt °²¯# pt
的川芎内酯 „孵育 xx °¬±o然后缺氧 w «r复氧 u «~实验结束后取细胞上清液测一氧化氮 k‘’ lo一氧化氮合酶
k‘’≥lo内皮素 k∞×lo取造模后的且固定在盖玻片的细胞 o用原位杂交法检测 ¬‘’≥°• ‘„和 ∞×°• ‘„的基因表达 ∀
结果 }‹ r• 组细胞存活数降低明显 o细胞培养液中 ‘’和 ‘’≥活性显著降低 o∞×的活性明显升高 o¬‘’≥°• ‘„表达
量减少 o∞×°• ‘„表达量增加 ~川芎内酯 „ v个剂量组与 ‹ r• 组比较 o细胞存活数均明显增加 o细胞培养液中 ‘’
和 ‘’≥活性增加 o∞×活性降低 o¬‘’≥°• ‘„表达量增加而 ∞×°• ‘„表达量则减少 ∀结论 }川芎内酯 „预处理能减
轻内皮细胞损伤 o对心脏微血管内皮细胞缺氧 r复氧损伤可能具有保护作用 o其作用机制可能与上调内皮细胞中
¬‘’≥°• ‘„的表达和下调 ∞×°• ‘„的表达有关 ∀
≈关键词   川芎内酯 „~心脏微血管内皮细胞 ~缺氧 r复氧损伤 ~基因表达
≈中图分类号   • u{x1x ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsu2stvv2sw
≈收稿日期   ussy2sv2uv
≈基金项目   国家自然科学基金资助项目 kvsuztx{ul
≈通讯作者   3 梁日欣 oר¯}kstslywstwwtt2u|w{o∞2°¤¬¯}• ÷ 2
¬¤±ªƒ ¼¤«²²1¦²°
血管内皮细胞不仅是血液与血管平滑肌之间的
生理屏障 o而且承担至关重要的血管生理功能 o是高
度活跃的代谢库 o能合成多种血管活性物质 o其中包
括小分子气体的一氧化氮 k‘’l和肽类大分子内皮
素 k∞×l∀当血管内皮细胞功能受损时 o‘’合成和
释放减少 o∞×生成和释放增加 o导致血管舒张与收
缩平衡失调 o从而导致心血管系统障碍 ≈t  ∀笔者以
往的研究表明 o川芎内酯 „预处理对心肌缺血性损
伤和心肌细胞缺氧性损伤均具有保护作用 ≈uov  o但
其作用机制并不十分清楚 ∀新近研究表明 }预处理
对心肌缺血的保护作用与血管内皮细胞的保护作用
密切相关 ∀因此 o本项研究从 ¬‘’≥°• ‘„o∞×°• ‘„
基因表达入手 o探讨川芎内酯 „预处理对心肌微血
管内皮细胞缺氧 r复氧的保护作用及作用机制 ∀
1 材料
111 药物
川芎内酯 „k¦«∏¤±¬¬²±ª2³¤·«¤¯¬§¨ „lo中国中医
科学院中药研究所化学室提供 o用 ⁄ ≥’助溶 o
⁄ ∞培养基稀释所需浓度 ∀
112 动物
出生 x ∗ z §≥⁄乳鼠 o由北京维通利华实验动
物技术有限公司提供 o合格证号 }≥≤÷Žk京 lussu2
sssv∀
113 试剂
11311 用于心脏微血管内皮细胞的培养 ⁄ ∞
培养基 }包括 ush 小牛血清 ⁄ ∞ 培养基 k内含
tsx ˜# pt青霉素 otss °ª# pt链霉素 ou °°²¯ #
pt Λ2谷氨酰胺 k≥¬ª°¤l和含 xs °ª# pt肝素 k≥¬ª2
°¤lots °ª# pt内皮细胞生长因子 k¥²¨ «µ¬±ª¨µl的
⁄ ∞完全培养基 ~无钙镁离子的 °…≥~s1uh µ型
胶原酶 k≥¬ª°¤l~s1suh和 s1uxh胰蛋白酶 k§¬©¦²l~
s1uh明胶 k≥¬ª°¤l∀
11312 用于  ××试验及细胞上清液中 ‘’o‘’≥和
∞×的检测  ××k≥¬ª°¤o 2utu{l~‘’检测试剂盒 o
批号 ussxs{st~‘’≥检测试剂盒 o批号 ussxs{ty~均
购自南京建成生物工程研究所 ~用放免法测定 ∞×
活性 o北京东亚免疫研究所检测 ∀
11313 用于 ¬‘’≥ °• ‘„o∞× °• ‘„基因表达 原
#vvt#
第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
位杂交检测试剂盒 kw ε 保存 l}°Žk蛋白酶 ŽotΒts
°…≥稀释 lo‹¼¥„液 o‹¼¥ …液 k地高辛标记的 ¬‘2
’≥ °• ‘„ 和 ∞× °• ‘„ 探针 lo马血清 ktΒtssl
k pus ε 保存 lo≥°2„° kt Βxsslo ‘…× kt Βtsslo
…≤Œ°ktΒtssl∀自备溶液有 }二甲苯 o系列乙醇 o
°…≥os1t °²¯# pt ‹ ≤ o¯us ≅ ≥≥≤kt }tzv1x ª‘¤≤ o¯
{{1u ª柠檬酸钠 o³‹ z1slo甲酰胺 o…∏©©¨µ´ k×µ¬¶2
‹≤ }¯ ³‹ z1xotss °°²¯ # pt o ‘¤≤ }¯txs °°²¯ #
pt lo…∏©©¨µ¶ k×µ¬¶2‹≤ }¯ ³‹ |1xotss °°²¯ # pt o
‘¤≤ }¯tss °°²¯# pt o ª≤ u¯ }us °°²¯# pt l等 ∀
114 仪器
超净工作台 k北京半导体设备一厂 lo ≤’ p
tx„≤型 ≤’u培养箱 k日本 ≥„‘≠’公司 lo Ž型倒
置显微镜 k’≠ °˜≥公司 lo‹u≥ p ‹型恒温水浴
振荡器 k哈尔滨东联电子技术开发有限公司 lo
⁄w ps1{型离心机 k北京医用离心机厂 loxxs型
酶联免疫检测仪 k日本 …Œ’ 2• „⁄产品 lo紫外分光
光度计 k˜±¬¦²zusslo恒温水浴箱 k天津市泰斯特仪
器有限公司 lo微孔滤器 k日本 ≥¤µ·²µ¬²∏¶o批号 tyxvw
svsvvxl∀
2 方法
211 心脏微血管内皮细胞的培养及其鉴定
参照 ‘¬¶«¬§¤等 ≈w 的方法略加改动 ∀取 tu只出
生 x ∗ z §≥⁄大鼠心脏 o用无钙镁的 °…≥液洗除血
液 ku ∗ v遍 o洗净血迹 lo去除瓣膜 !大血管及结缔组
织等 ~剪开左心室 o将心脏放于 zxh乙醇中浸泡 vs
¶o以灭活心外膜和心内膜内皮细胞 ~°…≥液冲洗后 o
剪碎心肌组织 o用适量 s1uh胶原酶在 vz ε 摇摆水
浴孵育消化 vs °¬±~加入适量 s1suh胰蛋白酶 o用
ts °的移液管轻轻吹打组织 ts次 ovz ε 水浴消化
ts ∗ vs °¬±~分离下的细胞过 uss目筛网 o过滤液用
ush小牛血清 ⁄ ∞ 培养基混悬离心 ktss µ#
°¬±pt ox °¬±l~未过网的沉淀弃之 ~所得细胞悬于
ush小牛血清 ⁄ ∞ 培养基 ∀并调整细胞数到
tsw ∗ tsx个 r°o接种于 s1uh明胶处理的培养瓶中
vz ε 培养 w «o以去除未黏附细胞 o更换含 xs °ª#
pt肝素 !ts °ª# pt内皮细胞生长因子的 ⁄ ∞
完全培养液培养 ~每 v ∗ w §换液 t次 o待内皮细胞
长成单层 !成鹅卵石状铺满培养瓶 o即进行细胞传
代 o选第 v代内皮细胞 os1uxh 胰蛋白酶消化 o以
t ≅ tsx密度接种到 y孔放置有处理好的盖玻片培养
板中 o直至长成细胞单层进行实验 ∀
取 u瓶融合细胞 o消化后按 t ≅ tsx # °pt分装
入放有盖玻片的培养板内继续培养 o直至盖玻片上
细胞接近长满 ∀然后倒掉培养基 o‹¤±®¶液洗 v次
后 o用丙酮固定 x °¬±o°…≥液洗涤 o按 ≥°法作 ¬因
子相关抗原免疫组织化学检查 ∀
212 ‹ r• 模型及低氧预处理 k‹°l方法
参照 ¤¶¶µ¶¨≈x 等的方法 ∀取培养有心脏微血
管内皮细胞的培养板 o去除培养基 o加入事先用
|xh ‘u nxh ≤’u饱和的无血清 ⁄ ∞培养基 o置于
一缺氧罐中 k以 t # °¬±pt的流量向盒内持续充入
|xh ‘u n xh ≤’u o氧浓度小于 s1th ovz ε lo作为
缺氧 ~从缺氧罐中取出培养板 o放回 ≤’u培养箱中 o
即复氧 ∀以低氧 ux °¬±r复氧 vs °¬±o作为 ‹°≈y  ∀
213 实验分组
经免疫组化检查鉴定为心脏微血管内皮细胞 o
消化后按 t ≅ tsx个 # °pt分装入放有盖玻片的 y
孔培养板内继续培养 o直至盖玻片上长成细胞单层 ∀
各孔细胞密度无明显差异的内皮细胞随机分为以下
各组 ≠空白对照组 }不做任何处理 o在 ≤’u培养箱中
正常孵育 ~模型组 k‹ r• l}换充满 ‘u的无血清的
不含糖 ⁄ ∞ 培养液放入持续充满 |xh ‘u n xh
≤’u平衡的缺氧孵育容器中 kvz ε lw «o再更换富氧
含糖 ⁄ ∞培养液以 |xh ’u n xh ≤’u进行复氧孵
育 u «~≈低氧预处理组 k‹°组 l}心脏微血管内皮
细胞先低氧 ux °¬±o复氧 vs °¬±o余同 ‹ r• 组处理 ∀
…川芎内酯 „预处理组 k分为 t ≅ tspz ot ≅ tsp| o
t ≅ tsptt °²¯# pt的高 !中 !低剂量 l}内皮细胞经川
芎内酯 „孵育后 o余同 ‹ r• 组处理 ∀
214 观察指标
21411 细胞存活数 取同一批内皮细胞 o以 t ≅ tsx
# ¦°pv密度另接种于 |y孔板 o融合形成单层后按
上述方法进行分组及造模 ~实验结束后 o用  ××法
测各组细胞的吸光度 kΑ) ,吸光度越高 ,相应活细胞
数量就越多 ,故以 Α值间接表示细胞存活数 ∀
21412 细胞培养液中 ‘’o‘’≥o∞×活性 取造模
实验后的细胞培养上清液 o使用相关试剂盒测定
‘’o‘’≥o∞×活性 ∀
21413 ¬‘’≥ °• ‘„和 ∞× °• ‘„基因表达 用原
位杂交法检测 ¬‘’≥ °• ‘„和 ∞× °• ‘„基因表达
率 ∀取造模实验后盖玻片上的细胞 o经 wh多聚甲
醛 k含 s1th ⁄∞°≤l固定 ts ∗ us °¬±后 ∀采用北京
大学医学部病理室提供的原位杂交检测试剂盒 k地
#wvt#
第 vu卷第 u期
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
高辛生物素标记探针 l}t ≅ °…≥洗 x ¶≅ u次 ~s1t
°²¯# pt ‹ ≤ 处¯理 o室温 ts °¬±~t ≅ °…≥洗 x ¶≅ u
次 ~擦干后 o滴加蛋白酶 ŽktΒts °…≥稀释 lovz ε o
ts ∗ us °¬±~t ≅ °…≥洗 x ¶≅ u次 ~wh多聚甲醛后固
定 o室温 ts °¬±~t ≅ °…≥洗 x ¶≅ v次 ~|sh乙醇脱水
tx ¶~滴加 us ˏr片杂交液 k‹¼¥„液 t{ ˏo‹¼¥…
液 u ˏo混匀后 o{s ε 加热 ts °¬±o稍微离心 tx ¶lo
用封口膜覆盖后 o放湿盒中 wu ε oty ∗ uu «保温
k阴性对照片杂交液中不滴加 ‹¼¥o即无地高辛标记
的 ¬‘’≥ °• ‘„和 ∞× °• ‘„探针 l~浸泡于 xs ε ox
≅ ≥≥≤中揭下封口膜 ~含 xsh甲酰胺 u ≅ ≥≥≤ vz ε
洗 vs °¬±~u ≅ ≥≥≤ vz ε 洗 tx °¬± ≅ u次 ~s1t ≅ ≥≥≤
vz ε 洗 tx °¬± ≅ t次 ~t ≅ °…≥洗 x ¶≅ t次 ~马血清
ktΒtss …∏©©¨µ´ 稀释 l封闭 o室温 vs ∗ ys °¬±~≥°2„°
ktΒxss …∏©©¨µ´ 稀释 loxs ˏ r片 o室温 t «~…∏©©¨µ
´洗 tx °¬± ≅ v次 ~…∏©©¨µ¶洗 t °¬± ≅ u次 ~‘…×2
…≤Œ°显色 ~tΒt蛋甘油闭片 ots ≅ us倍显微镜数字
成像 ∀采用 ¬°¤ª¨ 2³µ² ³¯∏¶w1x图像分析系统软件
对各组图像进行处理分析 o暗区像素与总像素的比
值得到相应的阳性表达率 ∀
215 统计学分析
使用 ≥°≥≥ tu1s统计软件 o实验数据以 cξ ? σ表
示 o两组间比较使用独立 τ检验 o多组间比较使用单
因素方差分析 ∀
3 结果
311 对大鼠心脏微血管内皮细胞 ‹ r°损伤的影响
31111 细胞存活数  ××实验结果表明 }‹ r• 组
内皮细胞损伤严重 o其细胞存活数较空白对照组降
低了 xw1xh oΠ  s1sst~川芎内酯 „高 !中 !低 v个
剂量组和 ‹°组的细胞存活数均较 ‹ r• 组均有明
显增加 o分别上升 wx1wh kΠ  s1sxlov|1|h kΠ 
s1sxlov1th和 vw1wh ∀结果见表 t∀
31112 细胞培养液中 ‘’o‘’≥o∞×活性 内皮细
胞缺氧 r复氧损伤后 o‹ r• 组细胞培养液中 ‘’o‘’≥
活性显著降低 kΠ  s1sstlo∞×的活性则明显升高
kΠ  s1sxlo与空白对照组比较均有统计学差异 ∀
川芎内酯 „高 !中 !低 v个剂量组和 ‹°组细胞培养
液中 ‘’o‘’≥活性较 ‹ r• 组均有不同程度的增加 o
其中高剂量组增加 uy1|h kΠ  s1sstl和 xt1wh
kΠ s1sstlo中剂量组增加 tw1xh kΠ  s1sxl和
u|1th kΠ  s1sxlo‹°组增加 tz1{h kΠ  s1stl和
vy1|h kΠ  s1stl~培养液中 ∞×活性较 ‹ r• 组均
有不同程度的降低 o其中高剂量组降低 ux1uh kΠ 
s1stl∀结果见表 t∀
表 t 川芎内酯 „对心肌微血管内皮细胞 ‹ r• 损伤的保护作用及 ‘’o‘’≥o∞×活性的影响 kcξ ? σ, ν € yl
组别 剂量 r°²¯# pt 细胞存活数 kΑl ‘’ rΛ°²¯# pt ‘’≥r˜# °pt ∞× r³ª# °pt
空白 p sqvx{ ? sqsw{ |vquy ? yq|t {1z| ? s1|t xuq|s ? yqxx
‹ r• p sqtyv ? sqsu|vl yvqzz ? wqxxvl w1vy ? s1vuvl ywqu| ? tsqyytl
‹ ° p squt| ? sqsuw zxqtx ? zqwwxl x1|z ? s1{{xl xwqy{ ? {q|s
川芎内酯 „ t ≅ tspz sqty{ ? sqsuy ywq{| ? yqt{ w1wzv ? s1zt xwqux ? xqsx
t ≅ tsp| squu{ ? sqsyswl zvqsv ? zqsswl x1yv ? t1szwl x{qxs ? twqv|
t ≅ tsptt squvz ? sqtsswl {sq|s ? {qxtyl y1ys ? s1zzyl w{qsy ? zqywxl
注 :与空白组比较 t) Π  s. sx, u) Π  s. st, v) Π  s. sst~与 Œr• 组比较 wl Π  s. sx, x) Π  s. st, y) Π  s. sst(表 u同 )
312 对大鼠心脏微血管内皮细胞 ‹ r°损伤的 ¬‘’≥
°• ‘„o∞× °• ‘„基因表达的影响
内皮细胞胞浆中有蓝紫色颗粒状呈阳性表达 o
颜色愈深表示表达量愈高 o如图 t∀ ‹ r• 组细胞 ∞×
°• ‘„基因呈高表达 o川芎内酯 „预处理组表达次
之 o而空白组表达最低 ∀与 ∞× °• ‘„表达相反 o‹ r
• 组细胞 ¬‘’≥ °• ‘„基因呈低表达 o川芎内酯 „
预处理组略高 o空白组则呈高表达 o如图 u∀
图像分析及统计结果表明 o‹ r°组细胞较空白
对照组细胞 ¬‘’≥ °• ‘„基因表达水平显著降低
kΠ s1sstlo而 ∞× °• ‘„基因表达水平则显著升
高 kΠ s1sstl~川芎内酯 „预处理组和 ‹ r°组比
较 o大剂量组能显著提高 ¬‘’≥ °• ‘„基因表达水平
kΠ s1stlo显著降低 ∞× °• ‘„ 基因表达水平
kΠ s1sstlo中剂量组显著降低 ∞× °• ‘„基因表达
水平 kΠ s1sstl~‹°组和 ‹ r°组比较 o显著降低 ∞×
°• ‘„基因表达水平 kΠ s1stl∀结果见表 u∀
4 讨论
‘’是血管内皮细胞衍生的血管舒张因子 o具
有舒张血管 !抗血小板聚集 !阻止血细胞之间及其与
血管内皮细胞之间的黏附等生理作用 ∀ ‘’≥在生
理情况下 o存在于内皮细胞 !血小板及脑细胞中 o当
受到物理刺激或受体被激活 o其活性增加 o发挥信使
分子作用 ∀ ∞×是一种强烈的血管收缩因子 o主要由
#xvt#
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz

图 t 原位杂交法检测 ∞× °• ‘„表达图 k ≅ ussl
图 u 原位杂交法检测 ¬‘’≥ °• ‘„表达图 k ≅ ussl
表 u 川芎内脂 „对内皮细胞 ‹ r°损伤的 ¬‘’≥ °• ‘„o
∞× °• ‘„基因表达的影响 kcξ ? σ, ν € yl
组别 剂量 r°²¯# pt ¬‘’≥ °• ‘„ rh ∞× °• ‘„ rh
空白 p vuqv| ? zq{| t|q{| ? wqz
‹ r• p twqtv ? vqsvvl vzqtt ? tqvtvl
‹ ° p usqxw ? xqwu vtqtz ? wqwzxl
川芎内脂 „ t ≅ tspz t|quw ? xq{x vvqw{ ? wqz|
t ≅ tsp| utqyu ? yqz| uxqy ? uq|zyl
t ≅ tsptt uyqv{ ? {qt|xl uuqv| ? wqsvyl
内皮细胞产生 o具有收缩血管 !促进细胞黏附等功
能 ~正常情况下 o‘’ r∞×处于平衡状态 o当内皮细胞
损伤时 o‘’分泌减少 o而 ∞×则大量产生 ~‘’与 ∞×
浓度不平衡会造成细胞舒缩功能失调 o内皮细胞损
伤愈加严重 o从而产生一系列的病理变化 ≈z  ∀
血管内皮细胞在心肌预处理保护作用中的作用
已被许多研究所证实 ≈{o|  o笔者研究发现 o川芎内酯
„预处理能提高损伤的心肌微血管内皮细胞的存活

数 ~同时提高细胞培养液中 ‘’o‘’≥的活性 o减少
细胞培养液中 ∞×的活性 o上调内皮细胞中 ¬‘’≥
°• ‘„的表达 o下调内皮细胞中 ∞× °• ‘„的表达 o
这一结果提示川芎内脂 „预处理可以减轻内皮细
胞损伤 o对心肌的血管内皮细胞具有保护作用 ~其作
用机制可能与上调内皮细胞中 ¬‘’≥ °• ‘„的表达
和下调 ∞× °• ‘„的表达有关 ∀
≈参考文献  
≈t  陈 修 o陈维洲 o曾贵云 q心血管药理学 ≈   qv版 q北京 }人民
卫生出版社 oussu}t|uq
≈u  高 伟 o梁日欣 o肖永庆 q川芎内酯 „预处理对大鼠离体心脏
缺血再灌注所致血管内皮细胞损伤的保护作用 ≈ q中国中药
杂志 oussxovskt{l}tww{q
≈v  梁日欣 o肖永庆 o高 伟 q川芎内酯 „预处理对大鼠离体心脏
缺血再灌注损伤的保护作用 ≈ q中药药理与临床 o usswous
kyl}tq
≈w  ‘¬¶«¬§¤  o ≤¤µ¯¨ ¼ • • o Š µ¨µ¬·¶¨±  ∞o ·¨q¤¯q Œ¶²¯¤·¬²± ¤±§
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≈z  吴立玲 q心血管病理生理学 ≈   q北京 }北京医科大学出版
社 ousss}t|sq
≈{  侯文明 o赵 榕 o郭兰敏 q内皮细胞与预处理 ≈ q国外医学 #
心血管分册 ousssouzkwl}usuq
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶¤±§¬·¶° ¦¨«¤±¬¶°¶²©¦«∏¤±¬¬²±ª2³¤·«¤¯¬§¨ „ ²± ·«¨ ¬±­∏µ¼ ²©µ¤·
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第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
©µ²° «¼³²¬¬¤²©w «²∏µ¶¤±§µ¨²¬¼ª¨ ±¤·¨§²©u «²∏µ¶1 ׫¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©‘’o ‘’≥o ∞× ¤±§·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²±¶²©¬‘’≥ °• ‘„ ¤±§∞× °• ‘„
º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨1 Ρ εσυλτ: °µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ªº¬·«¦«∏¤±¬¬²±ª2³¤·«¤¯¬§¨ „ ³µ²§∏¦¨§¤± ¬±¦µ¨¤¶¨ ¬± ·«¨ ¶∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨ ²©¦¨¯¯¶¤±§·«¨ ¤¦·¬√¬·¼¶
²©‘’ ¤±§‘’≥o ¤±§¤§¨ ¦µ¨¤¶¨ ∞×1 ƒ∏µ·«¨ µo ³µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ªº¬·«¦«∏¤±¬¬²±ª2³¤·«¤¯¬§¨ „ ¬±§∏¦¨§¤«¬ª« ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©¬‘’≥ °• ‘„
¤±§ ²¯º ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©∞× °• ‘„1 Χονχλυσιον: ׫¨ µ¨¶∏¯·¶¶«²º §¨·«¤·¦«∏¤±¬¬²±ª2³¤·«¤¯¬§¨ „ ³µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ª¦¤± ³µ²·¨¦··«¨ ¦¤µ§¬¤¦
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≈责任编辑 古云侠  
≈收稿日期   ussy2sy2us
≈基金项目   青海省重大科技攻关项目 kussw2‘2tsv2sul
≈通讯作者   3 格日力 oר¯}ks|ztlytwusyv
唐古特大黄提取物不同成分泻下作用的比较研究
李文渊 t o童 丽 t o热增才旦 t o王海洁 t o李永平 t o
金 伟 u o屠鹏飞 u o格日力 t3
ktq青海大学 医学院 中藏药研究中心 o青海 西宁 {tsss~
uq北京大学 中医药现代化研究中心 o北京 tsss{vl
≈摘要   目的 }研究唐古特大黄提取物不同成分的泻下作用 ∀方法 }采用炭末推进方法 !酚红排空方法进行肠
推进实验 o观察大黄提取物各成分 ktx ª# ®ªpt l对小鼠小肠推进和肠水分吸收 !大鼠大肠运动的影响 ∀结果 }唐古
特大黄提取物不同成分与对照组相比 o对小鼠小肠推进和肠水分吸收 !大肠推进作用均有显著性差异 kΠ  s1stl~
与大黄水煎液 !醇提液相比 o泻下活性存在一些差异 ∀结论 }唐古特大黄提取物不同成分均有显著的泻下作用 o但
与大黄水煎液和醇提液相比有一些差异 ∀
≈关键词   唐古特大黄 ~泻下作用 ~番泻苷 ~蒽醌苷 ~蒽醌苷元
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsu2stvz2sv
唐古特大黄 Ρηευµ τανγυτιχυµ  ¤¬¬°q ¬¨ …¤¯©q
为 5中国药典 6ussx年版收载的 v种正品大黄之一 o
主产于青海 !祁连山北麓 ≈t  ∀大黄具有 /泻下攻积 !
清热泻火 !止血 !解毒 !活血化瘀 0之功效 ≈u  o现代药
理学研究表明 o大黄有导泻 !利胆 !抗菌 !止血等多种
生理活性 ≈v  ∀本研究选择青海唐古特大黄 o对其提
取物不同成分 !水煎液和醇提液进行了泻下作用的
实验研究 o旨在为青藏高原道地药材的资源利用与
开发提供理论基础 ∀
1 材料
1q1 动物 昆明种小鼠 o雌雄各半 o体重 kus ? ul
ª~• ¬¶·¤µ大鼠 o雌雄各半 o体重 kuss ? usl ª~以上动
物均由兰州大学医学实验中心提供 o合格证号分别
为医动字第 tw2ssx和第 tw2ssy号 ∀
1q2 药品 唐古特大黄采自海拔 v xss °以上的
青海境内 o经青海大学医学院魏全嘉教授鉴定为
Ρηευµ τανγυτιχυµ  ¤¬¬°q ¬¨ …¤¯©q∀唐古特大黄提
取物不同成分由北京大学中药现代化研究中心提取
并提供 }取唐古特大黄药材根及根茎 u1s ®ªo粉碎
后 o分别用氯仿和 |xh乙醇各 ts 先后回流提取 v
次 o分别是 uotot «o过滤后合并滤液 o减压回收溶
剂 ∀氯仿部分得浸膏约 ux ªo|xh乙醇部分得浸膏
约 uus ª∀将 |xh 乙醇提取部分浸膏上大孔树脂
k‹°⁄ tsslo分别用水及不同含量的乙醇 ktsh ∗
|xh l进行洗脱 ∀最终得到蒽醌苷元类成分 uy1|u ª
k产率 t1vxh l!蒽醌苷类成分 ux1xu ªk产率
t1u{h l!番泻苷类成分 t|1sv ªk产率 s1|xh lo各
成分按得率折算生药量 o加生理盐水配置成含生药
t ª# °pt ∀唐古特大黄水煎液 }唐古特大黄粗粉
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第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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