全 文 ：化合物 ∀牡荆子也具有一定的抗 ‹Œ∂ 2t的作用 o活
细胞数约占 ≤≤组细胞总数的 ysh o但作用强度不
如前 w种 ∀杏仁的抗病毒作用最弱 o没有统计学意
义 ∀
4 讨论
研究结果表明 o„×的抑制率与临床用药的结
果比较接近 o说明显微照相法评判结果比较符合临
床情况 o在基础实验中也能够反映疗效评定的真实
结果 o可信度较高 ∀在筛选抗病毒药物时体现出了
定量 !节约 !省时 !直接 !客观可信等特点 o具有很好
的推广价值 ∀本法在以往细胞病变效应 k≤°∞l的方
法基础上 o经过数码照相或显微照相对结果进行留
影记录 o对结果的保存和分析都具有很好的帮助 o应
用前景较广 ∀
本实验说明中药里也有很好的抗病毒成分 o值
得深入研究 o抗病毒成分可能不仅局限于逆转录酶
抑制剂 o也许还有蛋白酶抑制剂或整合酶抑制剂类
有效化合物 o其他作用方式可能也发挥重要作用 o如
抑制病毒黏附 !融合 !逆转录 !整合 !复制 !表达等 o否
则这些药物的抗 ‹Œ∂作用不可能超过 „×的效果 o
应该深入研究 ∀
实验中发现温度对有效成分的分离提取具有很
大影响 o青龙爪等中草药 tss ε 水煎处理基本无效 o
ys ε 浸泡后旋转干燥有效 o但不如冷浸效果好 o冷
浸加旋干效果最好 o说明高温把一些生物活性物质
破坏了 o有些物质在温度较高时容易变性 o实验中应
该严格控制温度 ∀按照国家药审中心的规定 ≈v  o治
疗指数超过 ts的药物被认为具有研究价值 o本研究
中有 w种中药的治疗指数都超过了 tso表明具有很
好的研究价值 ∀
≈参考文献  
≈t  °¤¯ º¯¨¯¶• o⁄ ¦¨¯ µ¨¦´ ∞o⁄ ¶¨°√·¨µo ·¨¤¯1≥ ±¨¶¬·¬√¨¤±§µ¤³¬§¤¶¶¤¼
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≈u  Ž¤±¤°²·²×oŽ¤¶«¬º¤§¤≠ oŽ¤±¥¤µ¤Žo ·¨¤¯1 „±·¬2«∏°¤± ¬°°∏±²2
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„ª¨ ±·¶≤«¨ °²·«¨ µo usstowxkwl}tuuxq
≈v  抗 ‹Œ∂药物非临床药效学研究技术指导原则 q第 u稿 q国家药
审中心 1
≈责任编辑 古云侠  
薄层扫描法测定威灵仙中齐墩果酸的含量
熊慧林 t3 o郑茂鑫 u
kt1贵州省药品检验所 o贵州 贵阳 xxsssw~
u1贵州益佰制药股份有限公司 o贵州 贵阳 xxsss{l
≈收稿日期   ussy2tu2ux
≈通讯作者   3 熊慧林 oר¯}ks{xtly{szsys
威灵仙为毛茛科植物威灵仙 Χλεµ ατισ χηινενσισ
’¶¥¨ ¦®o棉团铁线莲 Χ1 ηεξαπεταλα °¤¯ 或¯东北铁线
莲 Χ1 µ ανσηυριχα • ∏³µ的干燥根及根茎 ≈t  ∀威灵仙
中主要含有白头翁素 !齐墩果酸等成分 ≈u  ∀作者通
过实验比较 o建立了测定威灵仙中齐墩果酸的薄层
扫描定量方法 o为威灵仙药材的质量控制提供了一
个可借鉴的方法 ∀
1 仪器与试药
≤≥ p |vst°≤薄层扫描仪 k日本 ≥‹Œ „⁄˜公
司 lo微量进样器 kts ˏo上海飞鸽科学仪器公司 l∀
威灵仙收集自各地药品检验所 o由本所林开忠副主
任药师 !熊慧林副主任药师鉴定均为 usss年版药典
收载的威灵仙 ∀齐墩果酸对照品 k中国药品生物制
品检定所 o批号 szs|2|{svlo高效硅胶 Š预制板
ktss °° ≅ uss °°o青岛海洋化工厂 lo所用试剂均
为分析纯 ∀
2 方法与结果
211 薄层色谱条件 高效硅胶 Š预制板 ~展开方
式 }上行展开 o展距 {1x ¦°~展开剂甲苯 2醋酸乙酯 2
甲酸 kusΒwΒs1xl~预饱和时间 vs °¬±~显色剂 tsh
硫酸乙醇溶液 ~显色方式 }在 tsx ε 加热至斑点显色
#zxv#
第 vu卷第 w期
ussz年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ w
ƒ ¥¨µ∏¤µ¼o ussz
清晰 o用洁净玻璃板覆盖 o齐墩果酸斑点为紫色 o• ©
值约为 s1vv∀
212 对照品溶液的制备 取齐墩果酸对照品适量 o
精密称定 o加无水乙醇制成每 t °含 s1wwy z °ª
的对照品溶液 ∀
213 供试品溶液的制备 取本品粉末约 t ªo精密
称定 o加入乙醇 xs °o加热回流 u «o趁热滤过 o用
适量乙醇洗涤残渣及滤纸 o合并滤液及洗液 o浓缩至
约 us °o加盐酸 v °o加热回流 t «o放冷 o加水 ts
°o用石油醚 kys ∗ |s ε l提取 v次 k每次 ux °lo
合并石油醚层 o蒸干 o用无水乙醇定容至 x °刻度 o
摇匀 o作为供试品溶液备用 ∀
214 薄层扫描条件 双波长线性扫描 o光束狭缝
s1w °° ≅ ts °°o线性参数 ≥÷ € vo灵敏度中等 o测
定波长 Κ≥ xvs ±° o参比波长 Κ• zss ±°∀
215 线性范围考察 精密吸取齐墩果酸对照品溶
液 t1sou1sov1sow1sox1soy1s ˏk各体积点样 u
次 lo交叉点于同一高效硅胶 Š预制板上 o依法展
开 o显色 o用洁净玻璃板覆盖 o按拟定的扫描条件测
定各斑点的峰面积值 o以齐墩果酸对照品点样量
kΛªl为横坐标 o各点样量对应峰面积的平均值为纵
坐标进行线性回归 o回归方程为 Ψ € zz1ty Ξ n
ux1tu, ρ € s1||yo结果表明齐墩果酸在 s1wx ∗
u1y{ Λª具有良好的线性关系 ∀因标准曲线不通过
原点 o所以用外标两点法计算所测样品的含量 ∀
216 精密度试验 同板精密度试验 }精密吸取齐墩
果酸对照品溶液 u ˏ点于同一高效硅胶 Š预制板
上 o共点 x个点 o展开 o显色 o用洁净玻璃板覆盖 o扫
描测定 o• ≥⁄为 u1|h kν € xl~异板精密度试验 }精
密吸取同一齐墩果酸对照品 u ˏ点于 x块不同的
高效硅胶 Š预制板上 o展开 o显色 o用洁净玻璃板覆
盖 o依次扫描测定 o• ≥⁄为 v1th kν € xlo结果表明
有较好精密度 ∀
217 稳定性试验 精密吸取齐墩果酸对照品溶液
u ˏo点于高效硅胶 Š预制板上 o展开 o显色 o用洁
净玻璃板覆盖 o分别于 sousowsoysotus °¬±扫描 t
次 o扫描结果无明显变化 o• ≥⁄为 t1uh kν € xlo结
果表明对照品在 tus °¬±内稳定 ∀精密吸取样品溶
液 v ˏo点于高效硅胶 Š预制板上 o展开 o显色 o用
洁净玻璃板覆盖 o分别于 sousowsoysotus °¬±扫描
t次 o扫描结果无明显变化 o• ≥⁄为 v1uh kν € xlo
结果表明样品在 tus °¬±稳定 ∀
218 重复性试验 取同一批 k黔南 l样品 o按供试
品溶液制备方法制备供试品溶液 o共 x份 o精密吸取
v ˏ与对照品溶液 uox ˏ交叉点于薄层板上 o展
开 o显色 o用洁净玻璃板覆盖 o扫描测定 o结果平均含
量为 s1ytuh o• ≥⁄为 w1{h kν €xl∀
219 最低检测限 取对照品溶液 o依次稀释成一系
列质量浓度由高到低的溶液 o在上述色谱条件下点
样 u ˏo峰面积为噪音 v倍时的点样量为最低检测
点样量 o由此得检测下限为 s1ts Λª∀
2110 加样回收试验 取已测得齐墩果酸含量的威
灵仙样品 k贵州黔南 l样品共 x份 o精密称定 o置于
tss °锥形瓶中 ~分别精密加入 t °齐墩果酸对
照品溶液 k精密称取齐墩果酸对照品 uy1us °ªo置
ts °量瓶中 o加无水乙醇稀释至刻度 o摇匀 o得对
照品溶液 lo按供试品溶液制备方法制备加样回收
供试品溶液 ∀分别精密吸取加样回收供试品溶液 v
ˏ与前述对照品溶液 ks1wwy z °ª# °pt luox ˏ
交叉点于薄层板上 o展开 o显色 o用洁净玻璃板覆盖 o
扫描测定 o计算加样回收率 o平均回收率为 |{1xh o
• ≥⁄为 u1xh kν € xl∀
2111 样品含量测定 取不同产地样品按供试品溶
液制备方法操作 o制备所需溶液 ∀精密吸取样品溶
液 v ˏ与对照品溶液 uox ˏ交叉点于同一薄层板
上 o展开 o显色 o用洁净玻璃板覆盖 o扫描 o测得 tz批
样品中齐墩果酸的含量 o见表 t∀
表 t 样品中齐墩果酸含量 ƒ
来源 含量 来源 含量
黔南 s1yw 黑龙江 s1wz
辽宁 s1{s 青岛 s1v|
安顺 s1v| 江口 s1zs
甘肃 s1uw 宁夏 s1xw
天津 s1zu 湖北 s1xw
吉林 s1vv 广州 s1{z
江苏 s1t| 六盘水 s1y{
成都 s1xv 贵阳 s1v|
深圳 s1uu
3 讨论
311 在研究本测定方法前 o曾试图用高效液相色谱
法测定其中齐墩果酸的含量 o经反复比较和改变提
取 !分析方法 o其色谱峰与对照品峰的相对保留时间
均一致 o但经二极管阵列检测器作纯度检查时结果
不理想 o故改用本研究所叙方法 ∀
312 在供试品溶液制备条件探索中 o比较了甲醇 !
无水乙醇 !乙醇等不同提取溶剂及用量的提取效果 o
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第 vu卷第 w期
ussz年 u月
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ w
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比较了稀盐酸 !kv ∗ tsl盐酸 !盐酸及用量的水解效
果 o同时比较了氯仿 !甲苯 !石油醚 kys ∗ |s ε l等萃
取溶剂及用量的萃取效果 o并考察了提取回流 s1xo
t1sot1xou1s «和水解回流 s1xot1sot1x «及萃取
touovow次对测定结果的影响 o结果以本研究所叙
方法效果最好 ∀
313 经高效薄层色谱展开体系的反复摸索比较 o采用
甲苯 2醋酸乙酯系统时能使威灵仙中齐墩果酸斑点与
上下其他斑点分开 o但是齐墩果酸斑点有一点拖尾 o加
入少量甲酸后能明显改善拖尾 o使斑点圆整 ∀
314 本实验采用硅胶 Š高效薄层双波长扫描法对
威灵仙药材中齐墩果酸含量进行测定 o方法快速 o简
便 o有较好的稳定性和重复性 o板间误差小 o回收率
较好 o为威灵仙药材中齐墩果酸的含量分析和控制
提供了方便 !可靠的方法 ∀
≈参考文献  
≈t  中国药典 ≈≥ 1一部 1usss}usw1
≈u  郑占虎 o董则宏 o佘 靖 1中药现代研究与应用 ≈  1第 w卷 1
北京 }学苑出版社 ot||{}vuxx1
≈责任编辑 张宁宁  
#会议纪要 #
首届全国中医中药现代科研方法讨论会纪要
王 忠 o刘保延 o王永炎
k中国中医科学院 o北京 tsszssl
为适应中医中药科研发展新形势 o针对中医药
科学研究的重大需求 o统一认识以更好地完成 /十
一五 0中医药科研任务 oussz年 t月 v ∗ w日 o由王
永炎院士 !张伯礼院士倡导 o中国中医科学院主办 o
中国中医科学院中医临床基础医学研究所承办的首
届全国中医中药现代科研方法讨论会在北京召开 ∀
国家中医药管理局科教司高思华司长 !杨龙会处长 o
中国中医科学院 !北京中医药大学 !天津中医药大
学 !河南中医学院 !北京大学 !清华大学 !浙江大学 !
北京师范大学等多家科研机构和大学的 tss多位专
家参加了会议 ∀会议由张伯礼院士和刘保延教授主
持 ∀
王永炎院士首先以 /中医药学研究中系统论与
还原论的关联研究 0为题做了引导发言 ∀在分析了
目前中医药科研的良好形势后 o他指出中医药系统
内部应当自立 !自强 !自新 o弘扬中医药的原创思维 o
加强科研的顶层设计 ∀强调还原论与系统论的结
合 o要在整体论 !系统论指导下进行还原分析 ∀真正
的系统分析需要还原方法提供的信息积累以及对于
初始条件计算参数的有益提示 ~系统的研究策略 o则
在传统的以 /解构 0 /简约 0为特点的还原论研究中
注入真正的科学内涵 o面对高度复杂的非线性对象 o
求得广义的相对论效应 ∀组学研究推动了生命科学
的发展 o但系统生物学与有几千年文字记载的中医
药学的整体论是不一样的 o存在较大的差异性 ∀复
杂性疾病有回归不到线性上的状况和问题 o应让其
自然存在 o允许超越 /病 0的 /证 0而进行有效的干
预 ∀
会议邀请多位专家做了研究方法的专题报告 ∀
浙江大学程翼宇教授就美国 ƒ⁄„构建生物芯
片评价规则做了介绍 o他认为 ƒ⁄„国家毒理研究中
心目前所建立的生物芯片评价规则对于目前的中医
药研究规则和标准具有一定的借鉴意义 ~中医药在
科研思路与新药创制等方面存在原创的思路与方
法 o应与国际上的同行加强交流与合作 ~实验研究设
计中存在质量控制 !信息获取 !知识得到三个关键环
节 o其中数据的质量控制是首要的 ∀
北京中医药大学刘建平教授 /从循证医学角度
看中医药临床研究 0o认为目前临床研究的方法学
存在改进的必要性和紧迫性 o同时强调随机对照试
#|xv#
第 vu卷第 w期
ussz年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ w
ƒ ¥¨µ∏¤µ¼o ussz