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Technique of macroporous resin for tartary buckwheat total flavonoids

大孔树脂精制苦荞总黄酮工艺



全 文 :大孔树脂精制苦荞总黄酮工艺
于智峰 o王 敏 3
k西北农林科技大学 食品科学与工程学院 o陕西 杨凌 ztutssl
≈摘要   目的 }筛选分离苦荞总黄酮精制的最佳树脂型号及最佳工艺 ∀方法 }通过静态 !动态吸附 2解吸相结
合的方法 o以黄酮吸附率 !解吸率为评价指标 o综合评判确定最优工艺 ∀结果 }⁄ p u树脂分离效果较好 o其最佳吸
附工艺为 }澄清的粗提物浸膏水溶液 k黄酮质量分数 ush lo树脂柱径高比以 tΒtso上样液 ³‹ v ∗ wo吸附流速 v1s
°# °¬±pt ∀最佳洗脱条件为 }x …∂ o³‹ {oxsh 的乙醇溶液 o洗脱流速 v °# °¬±pt o精制后黄酮质量分数超过
ysh ∀结论 }采用 ⁄ p u树脂精制苦荞黄酮 o操作简单 o生产周期短 o成本低廉 o精制效果突出 o有较高的工业生产
应用价值 ∀
≈关键词   苦荞黄酮 ~大孔树脂 ~吸附 ~解吸 ~工艺
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsz2sx{x2sx
≈收稿日期   ussy2sx2tu
≈基金项目   科技部攻关计划重大项目 kussv…„|st„t|l
≈通讯作者   3 王敏 o∞2°¤¬¯}««¨ ¤·«¨ µƒ ·¨¤±ªq¦²°
苦荞 Φαγοπψρυµ ταταριυµ Š¤¨ µ·±q也称鞑靼荞
麦 o属于蓼科 °²¯¼ª²±¤¦¨¤¨荞麦属 Φαγοπψρυµ ≈t 药食
两用植物 ∀苦荞含有大量黄酮类成分 o其中芦丁含
量是甜荞的 | ∗ vss倍 ≈uov  ∀现代医学研究表
明 ≈wox  o黄酮类化合物具有降血糖 !降血脂 !防癌 !抗
突变 !增强免疫力 !杀菌 !抗动脉粥样硬化 !抗衰老等
功能 ∀因此 o从苦荞叶 !茎 !花 !麸皮中提取黄酮物
质 o作为保健食品和药品的生产原料 o成为苦荞开发
利用的方向之一 ∀目前 o国内学者对苦荞黄酮的提
取工艺研究居多 o但对其精制工艺的研究还比较少
见 ∀本实验以苦荞麸皮为原料 o在静态工艺筛选的
基础上 o采用大孔树脂吸附分离技术 o选取 ⁄ p u
型大孔吸附树脂为吸附剂 o对苦荞黄酮的精制工艺
进行动态研究 o旨在确定大孔吸附树脂精制苦荞黄
酮的最佳工艺 o为苦荞黄酮在工业生产中的分离提
纯提供依据 ∀
1 仪器与试剂
≥‹… p ¶循环水式真空泵 k郑州长城科工贸有
限公司 l~˜∂ p tzss分光光度计 k日本岛津公司 l~
‹ • ≠utt可控温摇床 k上海智能分析仪器有限公
司 l~ƒ„tssw电子天平 k上海天平仪器厂 l~Ž± p
yss⁄…型超声波清洗器 k昆山超声仪器有限公司 l~
…w|s旋转蒸发仪 k瑞士 …|≤‹Œl~°≥≤ p v≤精密 ³‹
计 k上海雷磁 l∀
‹ p {sto‹ p {tyo‹ p {t{树脂 k华东理工
大学华昌聚合物有限公司 l~≥„ p ts树脂 k西安蓝
深交换吸附材料有限责任公司 l~‹°⁄ p wxsk„ lo
‹°⁄ pwxsk…lo‹°⁄ pyss树脂 k沧州宝恩化工有限
公司 l~⁄ p tvso⁄ p u树脂 k山东鲁抗医药股份
有限公司树脂分厂 l~⁄ p tst树脂 k天津农药厂 l~
„… p{o≥ p {o⁄ p vxuso‘Ž„ p |树脂 k天津南开大
学化工厂 l∀聚酰胺 k中国医药上海化学试剂公
司 l~芦丁 k国药集团化学试剂有限公司 l~
„ k¯‘’v lv o‘¤‘’u o‘¤’‹均为市售分析纯 ∀
2 方法
2q1 树脂预处理
按文献 ≈y 方法进行 ∀
2q2 上柱液的制备
苦荞为 ussw年产于四川凉山彝族自治州川荞
t号种子 ∀用法国肖邦公司 ≤⁄2t仿工业实验磨制
粉 o除荞麦壳外的所有部位全部收集 o获荞麦全粉 o
将荞麦全粉在沸程为 vs ∗ ys ε 的工业石油醚中浸
提去脂 o后以 |xh工业乙醇提取 o经旋转薄膜蒸发
器浓缩 !真空干燥得 ׃ׅƒo然后在超声波辅助条件
下 o用水溶解 o抽滤得清液 o待用 ∀
2q3 苦荞总黄酮含量的测定 ≈z 
准确称取干燥至恒重的芦丁 s1sxs t ªo超声辅
助条件下用 ‹u ’溶解 o定容至 uxs °o分别取上述
芦丁对照品溶液 sotovoxozo|ott °于 z个 xs °
#x{x#
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ussz年 w月
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„³µ¬¯o ussz
量瓶中 o加入 xh ‘¤‘’u溶液 t1x °o溶解放置 y
°¬±o加入 tsh „ k¯‘’v lv溶液 t1x °oy °¬±后 o加
入 wh ‘¤’‹溶液 ts °o用 ‹u ’定容 o摇匀 ots °¬±
后 o以试剂空白为参比 o于 xts ±°测吸光度 Α∀用
最小二乘法线性回归 o得溶液吸光度 Α与芦丁质量
浓度 Ψk°ª# °pt l的回归方程为 Α € |1{xz {Ψ p
s1sst xoρ€s1||| |∀按照以上方法测定待测液中
总黄酮吸光度 Αo由回归方程即可求得质量浓度 ∀
2q4 静态吸附
准确称取 tx种预处理好的树脂 k用滤纸吸干
表面水分 ls1w ªo置于 uxs °具塞磨口三角瓶中 o
加入总黄酮质量浓度为 s1yy °ª# °pt的苦荞黄酮
提取液 {s °oux ε 恒温条件下 o置于摇床 k|s µ#
°¬±pt l振荡 uw «o测定此时溶液中的总黄酮的含
量 o按照下式计算吸附量 kΘl!吸附率 kΑl∀
吸附量 Θ € kΧs p Χρl ≅ ς/Ω
吸附率 Αkh l € kΧs p Χρl rΧs ≅ tssh
式中 }Θ为吸附量 k°ª# ªpt干树脂 l~Χs为起始
质量浓度 k°ª# °pt l~Χρ为吸附后溶液中总黄酮含
量 k°ª# °pt l~ς为溶液体积 k°l~Ω为树脂质量
kªl∀
2q5 静态解吸
将 1q5 中充分吸附后的树脂过滤 o然后置于
uxs °具塞三角瓶中 o加入 {s °zsh乙醇 o在 ux
ε 恒温条件下 o置于摇床 k|s µ# °¬±pt l振荡解吸 us
«o测定解吸液质量浓度 o按照下式计算解吸率 k∆l∀
解吸率 ∆kh l € k{s ≅ Χρl rkΩ ≅ Θl ≅ tssh
式中 }Θ为吸附量 k°ª# ªpt干树脂 l~Χρ为解吸
后溶液中总黄酮含量 k°ª# °pt l~Ω为树脂质量
kªl∀
2q6 吸附动力学曲线的制作 ≈ts 
根据吸附率 !解吸率筛选出纯化苦荞黄酮效果
较好的 w种树脂进行动力学研究 ∀具体操作为 }准
确称取一定量预处理好的 w种树脂 o置于 uxs °具
塞三角瓶中 o各加入 {s °吸附液 k总黄酮质量浓
度为 s1ys °ª# °pt loux ε 条件下恒温振摇 k|s µ
# °¬±pt ltv «o每隔 t «测 t次吸附液总黄酮的含
量 o绘制吸附动力学曲线 ∀
2q7 动态吸附
取静态吸附优选好并预处理过的树脂湿法装
柱 o量取一定量的苦荞黄酮吸附液 o在不同的条件下
通过树脂柱 o由下式计算吸附率 }
吸附率 Αkh l € kΧs p Χρl rΧs ≅ tssh
式中 }Χs为起始质量浓度 k°ª# °pt l~Χρ为过
柱液中总黄酮含量 k°ª# °pt l∀
2q8 动态解吸
大孔吸附树脂在一定条件下进行动态吸附 o待
树脂吸附饱和后 o选取一定的洗脱剂 o调节不同的工
艺条件对其进行洗脱 o黄酮解吸率由下式计算 }
解吸率 ∆kh l € kς ≅ Χρl rkΩ ≅ Θl ≅ tssh
式中 }Θ为吸附量 k°ª# ªpt干树脂 l~Χρ为解吸
液中总黄酮含量 k°ª# °pt l~Ω为树脂重量 kªl~ς
为解吸液体积 k°l∀
3 结果与讨论
3q1 树脂的筛选
在相同条件下 o按照 2q4o2q5方法测定 tx种树
脂的静态吸附量 !吸附率 !解吸率 ∀结果见表 t∀
表 t tx种吸附树脂对苦荞总黄酮的吸附 !解吸结果
树脂型号
吸附量
r°ª# ªpt
吸附率
rh
解吸率
rh
≥„ p ts ||1x{ zz1zv wz1s{
⁄ p tvs ||1|| zw1zx wt1{{
⁄ p u ts|1v {v1x{ xu1yu
⁄ p tst {|1vw yz1zu vz1yy
„… p { |z1xt zv1|v wt1yx
≥ p { tts1u {u1xy uz1{x
⁄ p vxus zz1xw xz1zy vs1|t
‘Ž„ p | zy1uw x|1us vs1ty
‹  p {st {w1ts yw1u{ wt1wv
‹  p {ty tsy1y {s1vx xt1|v
‹  p {t{ ts{1y {w1sx wx1ux
‹°⁄ p wxsk„l |w1s{ zu1w| wv1|y
‹°⁄ p wxsk…l |v1wu zs1ww v{1|{
‹°⁄ p yss {|1z| yz1wy ws1xx
聚酰胺 {u1x| yu1sz v|1xu
结果表明 o在 tx种吸附树脂中 o⁄ p uo‹ p
{tyo≥„ p tso‹ p {t{这 w种树脂吸附量都在 ||
°ª# ªpt以上 o吸附率都大于 zxh o解吸率都超过了
wxh o具有较好的吸附和解吸特性 ∀
3q2 静态吸附动力学曲线的制作
按照 2q6方法绘制吸附动力学曲线 ∀结果见图 t∀
由图 t静态吸附动力学曲线可以看出 oy «后 o
吸附液质量浓度随时间的增加变化很小 o即树脂已
基本达到吸附饱和 ∀说明这 w种树脂对苦荞黄酮的
吸附都属于快速平衡型 o快速吸附可缩短生产周期 o
这在工业上是很有利的 ∀但在 w种树脂中 o以 ⁄
pu型树脂效果最佳 ∀
#y{x#
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图 t w种树脂静态吸附动力学曲线
3q3 动态吸附
3q3q1 径高比 kδ /ηl对吸附率影响 分别取 v份上
样液 k总黄酮质量浓度为 s1ys °ª# °pt l|s °o以
v1s °# °¬±pt的流速通过径高比分别为 tΒvotΒxo
tΒtsotΒtxotΒux的树脂柱 o重吸附 t次 o先用 {s
°‹u ’洗脱 o分别收集过柱液与水洗液 o按照 2q3方
法测定总黄酮含量 o计算吸附率 ∀结果如图 u∀
图 u 径高比对吸附率影响
从图 u可以看出 o径高比对吸附率有较大的影
响 o如果径高比太小 o柱效应降低 o上样液未来得及
吸附就提早泄露 o如果径高比太大 o管壁效应相对增
大 o吸附率也不理想 ∀所以 o在实验中作者选择径高
比为 tΒts进行吸附 ∀
3q3q2 吸附速率对吸附率影响 各取上样液 k总
黄酮质量浓度为 s1wu °ª# °pt l|s °o分别以
t1xov1sox1xottoty °# °¬±pt的流速通过树脂柱 o
重吸附 t次 o先用 {s °‹u ’洗脱 o分别收集过柱液
与水洗液 o按照 2q3方法测定总黄酮含量 o计算吸附
率 ∀结果如图 v∀
图 v 吸附速率对吸附率影响
由图 v可以看出 o随着吸附速率的增大 o吸附率
明显减小 o以吸附流速 v1s °# °¬±pt时 o吸附率超
过了 {sh o与吸附速率为 t1x °# °¬±pt时的吸附
率相比相差不大 o考虑到生产效率 o以吸附速率为
v1s °# °¬±pt效果最佳 ∀
3q3q3 ³‹对吸附率影响 取不同梯度 ³‹的上样
液各 |s °o以 v1s °# °¬±pt的流速通过树脂柱 o
重吸附 t次 o用 {s °水洗脱 o分别收集过柱液与水
洗液 o测定吸光度 o按照 2q3方法测定总黄酮含量 o
计算吸附率 ∀结果如图 w∀
由图 w可知 o吸附率随 ³‹值的增加明显减小 o
而且在 ³‹ u ∗ w吸附率变化不大 o考虑到酸性太强 o
溶液中的部分黄酮会析出 o选 ³‹ v ∗ w为宜 ∀
图 w ³‹值对吸附率影响
3q3q4 上样液质量浓度对吸附率影响 各取五份
|s °上样液通过旋转蒸发仪浓缩 !加水稀释调成
不同质量浓度的上样液 s1vzos1w|os1{uot1uvo
u1wy °ª# °pt o以 v1s °# °¬±pt的流速通过树脂
柱 o重吸附 t次 o先用 {s °‹u ’洗脱 o分别收集过
柱液与水洗液 o按照 uqv方法测定总黄酮含量 o计算
吸附率 ∀结果如图 x∀
图 x 吸附液质量浓度对吸附率影响
由图 x可以看出 o在低质量浓度范围内 o随着上
样液质量浓度的增加 o吸附率增加不很明显 o当上样
液质量浓度达到 t °ª# °pt左右时 o吸附率显著增
加 o所以吸附操作中 o在保持上样液澄清的前提下 o
可选择较高质量浓度的溶液上柱 ∀
3q3q5 不同溶剂对吸附率影响 称取一定量的粗
提物浸膏 o分别用水 !ush 乙醇 !xsh 乙醇 !ush 甲
醇 !xsh甲醇在超声波辅助条件下将其溶解 o过滤 o
将上清液以 v1s °# °¬±pt的流速通过树脂柱 o重
吸附 t次 o先用 {s °‹u ’洗脱 o分别收集过柱液与
水洗液 o按照 2q3方法测定总黄酮含量 o计算吸附
#z{x#
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率 ∀结果如图 y∀
从图 y可以看出 o以水和低体积分数醇作溶剂
时 o吸附率较大 o尽管低体积分数醇更利于粗提物浸
膏的溶解 o但是考虑到吸附率 !安全性 !生产成本等
因素 o选择水作为溶解粗提物的溶剂 ∀
图 y 不同溶剂对吸附率影响
¤q乙醇 ~¥q甲醇3q4 动态解吸
3q4q1 水洗量的确定 用不同柱体积的水洗脱已
吸附苦荞黄酮饱和的树脂柱 o同时测定各部分水洗
液中总黄酮含量及固形物含量 o结果见下表 u∀
表 u 水洗量的确定
水洗量 r° 总黄酮含量 r°ª# °pt 固形物含量 r°ª
s ∗ us s1sst v ws1s
us ∗ ws s1sst { wv1{
ws ∗ ys s1ssu t wz1t
ys ∗ {s s1sst | vx1|
{s ∗ tss s1sst x |1v
由表 u结果可以看出 o当水洗量超过 {s °时 o
洗出的固形物含量已经很少 o但总黄酮的损失还比
较大 o所以确定水洗量为 {s °∀
3q4q2 洗脱剂用量的考察 将吸附饱和的树脂以
径高比为 tΒts装入树脂柱 ktx °° ≅ vss °°l中 o用
{s °‹u ’洗脱 o再用 xsh乙醇以 t1x °# °¬±pt
的流速洗脱 o分步收集 k每 ts °收集 t次 l乙醇洗
脱液 o按照 213方法测定总黄酮含量 o计算解吸率 ∀
结果如图 z∀
图 z 洗脱剂用量的考查
从图 z可以看出 o当洗脱剂用量达到 {s °kx
…∂左右 l时 o洗脱液中黄酮含量已经接近零 o可认
为树脂上的黄酮已基本洗脱完全 o可以停止洗脱 ∀
3q4q3 乙醇体积分数对洗脱率的影响 取 x份
tss °上样液 k总黄酮质量浓度为 t1u| °ª#
°pt lo将 ³‹调至 v1tv上柱 o重吸附 t次 o{s °
‹u ’洗脱 o用体积分数分别为 tsh ovsh oxsh o
zsh o|sh乙醇溶液 k调节 ³‹ {lo以 v1s °# °¬±pt
的流速进行洗脱 o收集各乙醇洗脱液 o按照 2q3方法
测定总黄酮含量 o计算解吸率 ∀结果如图 {∀
图 { 乙醇体积分数对洗脱率的影响
从图 {可以看出 o随着乙醇体积分数的增加 o洗
脱率逐渐增大 o当乙醇体积分数达到 xsh时 o洗脱
率已达到 {xh o随着乙醇体积分数的继续增加 o洗
脱率增加幅度明显减小 o综合考虑回收率及生产成
本 o选择 xsh乙醇溶液作为洗脱剂 ∀
3q4q4 洗脱剂 ³‹对洗脱率的影响 取 x份 tss
°上样液 k总黄酮质量浓度为 t1vv °ª# °pt lo
将 ³‹调至 v1tv上柱 o重吸附 t次 o{s °‹u ’洗
脱 o将 x份 {s °xsh 乙醇的 ³‹分别调至 y1uso
z1zwo{1{so|1{{ots1zwo以 v1s °# °¬±pt的流速洗
脱 o收集不同 ³‹值下的乙醇洗脱液 o按照 2q3方法
测定总黄酮含量 o计算解吸率 ∀如图 |∀
图 | 洗脱剂 ³‹对洗脱率的影响
从图 |可以看出 o苦荞黄酮适宜在弱碱性条件
下进行洗脱 o所以在洗脱过程中 o可将乙醇洗脱液
³‹值调至 {左右进行洗脱 ∀
3q4q5 洗脱速率对洗脱率的影响 取 x份 tss °
上样液 o将 ³‹值调至 v1tv上柱 o重吸附 t次 o{s
°‹u ’洗脱 o再用 xsh乙醇分别以 t1xov1sox1xo
ttoty °# °¬±pt的流速洗脱 o分步收集 k每 ts °
收集 t次 l乙醇洗脱液 tts °o按照 2q3方法测定
总黄酮含量 o计算解吸率 ∀同时 o收集前 {s °洗脱
液 o计算不同速率下的洗脱率 ∀动态洗脱曲线及洗
脱率如图 tsott∀
从图 ts可以看出 o洗脱速率为 t1xov1s °#
#{{x#
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„³µ¬¯o ussz

图 ts 不同速率下的动态洗脱曲线
图 tt 不同速率下的洗脱率比较
°¬±pt时 o洗脱曲线出峰快 o无明显拖尾现象 ∀同时 o
由图 tt可以看出 o在 t ∗ x °# °¬±pt o洗脱率随洗
脱速率的增加逐渐增大 o当洗脱速率继续增加时 o洗
脱率开始降低 o这可能是由于在洗脱体积一定的情
况下 o如果速率太大 o洗脱剂还没有来得及和黄酮充
分接触就已经通过了树脂柱 ∀所以结合图 tsotto
选择洗脱速率 v °# °¬±pt为宜 ∀
3 结论
通过分析 tx种树脂对苦荞黄酮的吸附 !解吸特
性 o综合考虑吸附量 !吸附率 !解吸率和吸附动力学
几方面因素 o可以看出 o⁄ p u树脂对苦荞黄酮吸

附量大 o而且解吸容易 o是一种性能良好的苦荞黄酮
吸附剂 ∀
对影响 ⁄ p u树脂分离纯化的各因素进行了
系统研究 o最终确定最佳吸附条件为 }粗提物浸膏用
水溶解后 o可选取较高质量浓度清液上样 o树脂柱径
高比以 tΒts为宜 o调节上样液 ³‹为 v ∗ wo吸附流
速控制在 v1s °# °¬±pt进行吸附 ∀最佳洗脱条件
为用 {s °kx …∂左右 lxsh乙醇溶液 o将 ³‹调至
{左右 o以 v °# °¬±pt的洗脱速率进行洗脱效果 ∀
≈参考文献  
≈t  陈庆富 q五个中国荞麦 kƒ¤±²³¼µ∏°l种的核型分析 ≈ q广西植
物 ousstoutkul}tszq
≈u   ¬±ª«¨ o± ƒ∏®¤±ªqפµ·¤µ¼ ©¯¤√²±²¬§¶¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶¤±§¬·¶¤³2
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≥¦¬ƒ²²§„ªµ¬o ussto{t}ts|wq
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保护作用研究 ≈ q中国食品学报 qussyot}{zq
≈x  杨政水 q苦荞麦的功能特性及其开发利用 ≈ q食品研究与开
发 oussxouyktl}tssq
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中国中药杂志 ot||wot|ktl}vtq
≈z  肖诗明 o张 忠 o李 勇 o等 q苦荞麦麦皮粉中黄酮的提取工艺
条件研究 ≈ q食品科技 oussxoktl}{|q
Τεχηνιθυε οφ µ αχροπορουσ ρεσιν φορ ταρταρψ βυχκωηεατ τοταλφλαϖονοιδσ
≠˜ «¬2©¨±ªo • „‘Š  ¬±
(Χολλεγε οφΦοοδ Σχιενχε ανδ Ενγινεερινγ , Νορτηωεστ Σχι2Τεχη Υνιϖερσιτψ οφ Αγριχυλτυρε ανδ Φορεστρψ, Ψανγλινγ ztutss, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·µ¨ ¤³³µ²³µ¬¤·¨ °¤¦µ²³²µ²∏¶µ¨¶¬±¶¤±§·«¨ ²³·¬°¤¯ ·¨¦«±²¯²ª¬¦¤¯ ³¤µ¤° ·¨¨µ¶²©·«¨ ³∏µ¬©¬¦¤2
·¬²± ³µ²¦¨¶¶²©·¤µ·¤µ¼ ¥∏¦®º«¨ ¤··²·¤¯ ©¯¤√²±²¬§¶q Μετηοδ}≥·¤·¬¦¤±§§¼±¤°¬¦¤§¶²µ³·¬²±2§¨ ¶²µ³·¬²± ° ·¨«²§¶º µ¨¨ ¤§²³·¨§o ¤±§ √¨¤¯∏2
¤·¨§©²µ¶¨³¤µ¤·¬±ª ©¨©¬¦¬¨±¦¼ ¥¼ °¤¦µ²³²µ²∏¶µ¨¶¬±¶¤¥¶²µ³·¬²± µ¤·¨¶o §¨ ¶²µ³·¬²± µ¤·¨¶q Ρ εσυλτ: ׫¨ ⁄ p u °¤¦µ²³²µ²∏¶µ¨¶¬± «¤§·«¨
¥¨ ¶·¶¨³¤µ¤·¬±ª ©¨©¬¦¬¨±¦¼q ׫¨ ¥¨ ¶·¤¥¶²µ¥¨ §¦²±§¬·¬²± ¬¶‹u ’ ¤¶¶²¯√ ±¨·²© ¬¨·µ¤¦·¶o §¬¤° ·¨¨µ√¶«¨ ¬ª«·} tΒtso ³‹ v ∗ wo ¤¥¶²µ³·¬²±
³²º µ¨} v1s °# °¬±pt q ׫¨ ²³·¬°∏° ¤§¶²µ³·¬²± ¦²±§¬·¬²± ¬¶·«¨ √²¯∏°¨²©xsh ·¨«¤±²¯ {s°k¤³³µ²¬¬°¤·¨¯¼ x …∂ kµ¨¶¬± ¥¨ §√²¯2
∏° l¨ ¤¶¨¯∏·¬±ª¶²¯√ ±¨·o ³‹ {o ·«¨ §¨ ¶²µ³·¬²± ³²º µ¨}v1s °# °¬±pt q Χονχλυσιον: ׫¬¶·¨¦«±²¯²ª¼ ¬¶¶¬°³¯ o¨ ∏´¬¦® ¤±§¦²¶·2¨ ©©¨¦2
·¬√ o¨ º«¬¦«¬¶¶∏¬·¤¥¯¨©²µ¬±§∏¶·µ¬¤¯¬½¤·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] ·¤µ·¤µ¼ ¥∏¦®º«¨ ¤·~ ·²·¤¯ ©¯¤√²±²¬§¶~ °¤¦µ²³²µ²∏¶µ¨¶¬±~ ¤¥¶²µ³·¬²±~ §¨ ¶²µ³·¬²±~ ·¨¦«±¬´∏¨
≈责任编辑 鲍 雷  
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