全 文 :黄芩苷体内抗流感病毒作用
初正云 t3 o初 明 u o滕 宇 t
ktq辽宁中医药大学 药学院 o辽宁 大连 ttyyss~
uq北京大学 医学部 o北京 tsss{vl
≈摘要 目的 }研究黄芩苷体内抗流感病毒 k¬±©¯∏¨ ±½¤ √¬µ∏¶o∂ l作用 ∀方法 }采用体内实验方法 o对小鼠先预
防给药 ku §l后感染流感病毒 k rƒ rtrwzl或先感染流感病毒 kt §l后治疗给药的方法观察黄芩苷的抗流感病毒
作用 ∀结果 }黄芩苷可明显延长流感病毒感染小鼠的存活时间 kΠ s1stl~对小鼠肺内的流感病毒有一定的清除作
用 o能降低肺内流感病毒的血凝滴度和感染力 ~减轻小鼠肺内的炎性病变 ∀结论 }黄芩苷具有明显的抗流感病毒作
用 ∀
≈关键词 黄芩苷 ~流感病毒 ~肺指数
≈中图分类号 u{xqx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszluu2uwtv2sv
≈收稿日期 ussz2sw2us
≈通讯作者 3 初正云 oר¯}kswttl{tyvst{xo∞2°¤¬¯}¦«∏½«¨ ±ª¼∏±
tyvq¦²°
黄芩苷是唇形科植物黄芩 Σχυτελλαρια βαιχαλενσισ
的主要活性成分之一 ∀黄芩性寒 ! 味苦 o归肺 !
胆 ! 脾 ! 大肠 ! 小肠经 o具有清热燥湿 ! 泻火解
毒 ! 止血安胎的功能 ∀临床多用于治疗肺热咳嗽 o
高热烦渴等证 ∀近年来随着对黄芩苷研究的不断深
入 o认为黄芩苷在清除氧自由基 ! 减轻组织的缺血
再灌注损伤 ! 调节免疫 ! 促进细胞凋亡以及抗肿瘤
和抗 ∂等多方面均有作用 ≈t o而对黄芩苷抗流
感病毒作用的研究报道则较少 o本实验根据黄芩的
临床应用 o对黄芩苷体内抗流感病毒作用进行了研
究 ∀
1 材料
1q1 药物
黄芩苷 k{th lo由辽宁中医药大学药药学院提
供 ~病毒唑 k利巴韦林 lo四川百利药业有限责任公
司 o批号 svtssx∀
1q2 动物
尼克白种 ts §龄鸡胚 o由沈阳市种鸡繁育中心
提供 ∀昆明种小白鼠 ou ∗ v周龄 otv ∗ tx ªo雌雄各
半 o由沈阳医学院动物室提供 o辽实动质字 ≈usss
suu号 ∀ th鸡血球悬液由鸡血混悬于生理盐水中
制备 ∀
1q3 病毒株
流感病毒鼠肺适应株 rƒ rtrwzkt t lo由
中国微生物菌种保藏管理委员会医学病毒中心提
供 o使用前接种 ts日龄鸡胚 o常规培养 w{ «收集尿
囊液 o测定血凝滴度为 tΒt u{s∀测定其对小鼠的半
数致死量 k⁄xs l≈u 为 tspy1zx并确定造模浓度 ≈v 为 {
倍 ⁄xs ∀
1q4 仪器
⁄ƒv{s∞ 冰 箱 k p {sε o日 本 ≥≠ lo
ƒtssw型电子分析天平 k上海牧晨电子技术有限
公司 lo
÷xs pvu∞显微镜 k ¼¯°³∏¶l∀
1q5 实验条件
≥°ƒ级实验室 o小鼠分笼饲养 o喂颗粒饲料 o自
由饮水 o室温 kus ? ul ε o湿度 xxh ∗ ysh ∀
2 方法和结果
2q1 黄芩苷对流感病毒所致小鼠死亡的保护作用
取 u ∗ v周龄昆明种小鼠 zu只 o体重 tv ∗ tx ªo
雌雄各半 o随机分为 y组 o每组 tu只 ∀第 t组为正
常对照组 !第 u组为病毒对照组 o第 v ∗ x组分别为
黄芩苷高 !中 !低 v个剂量组 o第 y组为利巴韦林对
照组 ∀各组动物于感染前两天开始灌胃给药 o每天
t次 o直至感染后 x §o共给药 z §o第 tou组灌胃等
容量的生理盐水 o第 v ∗ x组分别灌胃黄芩苷 t1xs o
t1usos1|y ª# ®ªpt o第 y组灌胃利巴韦林 k病毒唑 l
s1us ª# ®ªpt ∀于给药后第 v天 o将小鼠 k第 t组除
外 l在乙醚轻度麻醉下接种 {倍 ⁄xs的流感病毒
s1t °r只 o第 t组同法接种生理盐水 s1t °∀从
感染之日起 o连续观察 tw §o记录小鼠死亡数 k接种
#vtwu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uu
²√ °¨¥¨ µo ussz
病毒 uw «内死亡的小鼠不记入死亡数中 lo计算死
亡率 !死亡保护率 ≈w !平均存活时间 ∀结果正常组
无小鼠死亡 o其余各组均有小鼠死亡 ~模型组小鼠死
亡最多 o与其他 x组比较差异显著 kΠ s1sxl~黄芩
苷 v个剂量组小鼠死亡率明显低于模型组 kΠ
s1sxl~模型组小鼠的平均存活时间最短 o与其他各
组比较均有显著差异 k表 tl∀
表 t 黄芩苷对流感病毒感染小鼠的保护作用
kcξ ? σ, ν tul
组别
剂量
rª# ®ªpt
死亡数
r只
死亡率
rh
死亡保护
率 rh
存活时间
r§
正常 p s s1ss tss1s tw1ss ? s1ss
模型 p ts {v1vv ty1yz y1sx ? u1vs
黄芩苷 t1xs w vv1vvtl yy1yz tt1y{ ? v1utul
t1us w vv1vvtl yy1yz ts1{{ ? w1tsul
s1|y x wt1yztl x{1vv |1zx ? w1usul
利巴韦林 s1us u ty1yztl {v1vv tv1uv ? u1tyul
注 }与模型组比较 tl Π s1sxoul Π s1st
2q2 黄芩苷对流感病毒所致小鼠病毒性肺炎的防
治作用
2q2q1 对流感病毒感染小鼠肺指数的影响 取
u ∗ v周龄昆明种小鼠 zu只 o体重 tv ∗ tx ªo雌雄各
半 o随机分为 y组 o每组 tu只 ∀第 t组为正常组 !第
u组为病毒模型组 o第 v ∗ x组分别为黄芩苷 t1xso
t1usos1|y ª# ®ªpt v个剂量组 o第 y组为利巴韦林
组 ∀除第 t组外 o其余各组小鼠在乙醚轻度麻醉下
接种 {倍 ⁄xs的流感病毒 os1t °r只 o第 t组按同
法接种生理盐水 s1t °∀于感染后 uw «开始给药 o
第 tou组灌胃给予等容量生理盐水 o第 v ∗ x分别灌
胃黄芩苷 t1xsot1usos1|y ª# ®ªpt o第 y组灌胃利
巴韦林 s1us ª# ®ªpt o连续给药 w §o第 x天禁食禁
水 { «o小鼠称重 o切断颈动脉放血致死 o取出全肺 o
用生理盐水洗净 o并用干净滤纸吸掉残余盐水 o称
重 o计算肺指数及肺指数抑制率 o并对鼠肺做病理组
织学检查 ∀结果各给药组及正常组与病毒模型组比
较肺指数有显著差异 kΠ s1stl~黄芩苷各剂量组
肺指数与利巴韦林组无明显差 k表 ul∀
2q2q2 对流感病毒感染小鼠肺内病毒血凝滴及半
数感染量 k∞⁄xs l的影响 如上方法取出小鼠肺后 o
制备 tsh的鼠肺悬液 ∀每组取悬液 s1t °o测定其
血凝滴度 ≈w o其余以生理盐水 ts倍系列稀释 {个稀
释度 o接种 ts日龄鸡胚 o测定 ∞⁄xs ∀结果正常组的
∞⁄xs为 so流感病毒感染小鼠 ∞⁄xs最大 o利巴韦林
表 u 黄芩苷对流感病毒感染小鼠肺指数的影响
kcξ ? σ, ν tul
分组
剂量
rª# ®ªpt
肺指数
抑制率
rh
正常 p s1zy ? s1uztl p
模型 p t1w{ ? s1uw p
黄芩苷 t1xs s1{{ ? s1vstl ws1xw
t1us s1|{ ? s1vvtl vv1z{
s1|y t1sv ? s1uztl vs1wt
利巴韦林 s1us s1|z ? s1uttl vw1wy
注 }与模型组比较 tl Π s1st
及黄芩苷不同剂量组的肺悬液 ∞⁄xs均比流感病毒
感染组低 o降低至少 u个数量级以上 o其中黄芩苷低
剂量组和利巴韦林组 ∞⁄xs降低最多 o超过 v个数量
级 ∀表明黄芩苷对流感病毒感染小鼠有较好的治疗
作用和抗流感病毒感染的作用 k表 vl∀
表 v 各组肺悬液 ∞⁄xs kcξ ? σ, ν tul
分组 剂量 rª# ®ªpt ∞⁄xs
正常 p s
模型 p y1w
黄芩苷 t1xs v1w
t1us v1y
s1|y w1x
利巴韦林 s1us v1w
注 }接种鸡胚数为 vu枚
tsh肺悬液血凝滴度测定结果 }病毒对照组的
血凝滴度为 tΒywso黄芩苷 v个剂量组的血凝滴度
均为 tΒ{so利巴韦林组未出现血凝现象 ∀说明黄芩
苷对流感病毒在感染小鼠肺内的生长有抑制作用 ∀
2q2q3 对流感病毒感染小鼠肺脏组织学检查 ≠
正常组小鼠肺 y例 o仅 t例有轻度支气管周围炎 o其
余无明显炎性病变 ~流感病毒模型组小鼠肺 y例 o
w例有肺组织炎 ov例为中度 ot例为轻度 o炎性细胞
壁增厚 !充血和中性粒细胞浸润 !部分胞腔消失 ∀ u
例有较多的肺脓肿形成 ∀ x例有支气管周围炎 ot例
为轻度 ov例为中度 ot例为重度 ∀部分肺内支气管
腔内有急性炎性渗出物并有中度充血 o有 t例出血 ~
≈利巴韦林组小鼠肺 y例 ox例基本正常 o仅 t例中
度肺炎 o无肺脓肿形成 ow例轻度支气管周围炎 ot例
中度支气管周围炎 o均有轻度或中度充血 ~…黄芩苷
高剂量组小鼠肺 y例中有 t例中度肺炎 o无脓肿形
成 ox例轻度支气管周围炎 ou例中度充血 o但无出
血 ~ 黄芩苷中剂量组小鼠肺 y例中有 u例中度肺
炎 o无脓肿形成 ou例中度充血 ot例中度出血 ow例
轻度支气管周围炎 ~¡黄芩苷低剂量组组小鼠肺 y
例中有 v例肺炎 o其中 u例为轻度 ot例为重度肺
#wtwu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uu
²√ °¨¥¨ µo ussz
炎 ou例中度充血 ot例有轻度出血 ov例有轻度或中
度支气管周围炎 ∀
3 讨论
黄芩为中医治疗肺热咳嗽 o高热烦渴的首选药 o
黄芩苷是黄芩的主要活性成分之一 o现代科学研究
结果证明黄芩苷有抑菌 ≈x !抗炎 ≈y !抗氧化 ≈zo{ !解
热 ≈|ots !调节免疫功能 ≈tt !抗 ∂ ≈tu !抗肿瘤 ≈tv 等
活性 ∀通过黄芩苷对流感病毒鼠肺适应株 rƒ r
trwzktt l感染小鼠致死的保护作用及对流感病
毒所致小鼠肺炎防治作用的实验研究 o结果表明黄
芩苷 ks1|y ∗ t1x ª# ®ªpt l对流感病毒感染导致的
小鼠死亡有很好的保护作用 kΠ s1sxlo并能明显
延长流感病毒感染小鼠的平均存活时间 kΠ
s1stl~抑制流感病毒在小鼠肺内的繁殖 o降低肺内
流感病毒的血凝滴度和感染力 o对流感病毒感染所
致小鼠肺组织炎性病变有一定的防治作用 ∀结合文
献与黄芩的临床应用 o黄芩苷在防治流感方面具有
较好的应用前景 o有待于进一步开发利用 ∀
流感是第一个实行全球监测的传染病 o但至今
对它的危害尚无法完全加以控制 o它每年所造成的
危害仍很大 ≈tw ∀由于流感病毒抗原变异变幻莫测 o
新变异株 o尤其大流行株出现非常突然 o流感病毒疫
苗制备至少需数月时间 o近来禽 x t和 | u流感
病例的出现 o使人们深刻体会到研制抗流感药物的
必要性和迫切性 ≈tx ∀黄芩苷的抗病毒谱较广 o而且
资源丰富 o在黄芩中含量超过 |h o易于提取分离 o
是一种颇具开发潜力的抗病毒药物资源 ∀
≈参考文献
≈t 张喜平 o田 华 o程琪辉 q黄芩苷的药理作用研究现状 ≈ q中
国药理学通报 oussvot|kttltutuq
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中国三峡出版社 ot||z}ttuq
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北京 }科学出版社 ot||s}twvq
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研究 ≈ q中华临床与实验病毒学杂志 ot||yotskwl}v{tq
≈x 程国强 o冯年平 q唐琦文 o等 q黄芩苷对眼科常见病原菌的体外抗
菌作用 ≈ q中国医院药学杂志 ousstoutkyl}vwzq
≈y 侯艳宁 o朱秀媛 q程桂芳 q黄芩苷的抗炎机理 ≈ q药学学报 o
usssovxkvl}tytq
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影响 ≈ q中国中医药科技 oussuo|kxl}u{wq
≈{ 张永钦 o周井炎 o徐辉碧 q黄芩苷的抗氧化作用 ≈ q华中理工
大学学报 ot|||ouzkwl}t s¯q
≈| 范书铎 o赵红艳 o王翠花 o等 q黄芩苷对发热大鼠解热作用的
实验研究 ≈ q中国医科大学学报 ot||xouwkwl}vx{q
≈ts 赵红艳 o张 o范书铎 o等 q黄芩苷对发热大鼠下丘脑 °∞u
和 ¦ °含量的影响 ≈ q中国应用生理学杂志 oussuot{
kul}tv|q
≈tt 蔡仙德 o谭剑萍 o穆维同 q黄芩苷对小鼠细胞免疫功能的影响
≈ q南京铁道医学院学报 ot||wotvkul}yxq
≈tu 赵 晶 o张致平 q陈鸿珊 o等 q黄芩苷衍生物的合成及抗人免
疫缺陷病毒活性研究 ≈ o药学学报 ot||{ovvktl}uuq
≈tv 袁榴娣 o徐 红 o杜肇宗 q黄芩苷对艾氏腹水瘤细胞影响的初
步探讨 ≈ q南京铁道医学院学报 ot||zotykwl}uvtq
≈tw 郭元吉 q加强流感研究 迎接流感新挑战 ≈ q中华实验和临
床病毒学杂志 ousswot{kvl}usxq
≈tx 郭元吉 q抗流感新药 }神经氨酸酶抑制物研究近况 ≈ q国外
医学 #病毒学分册 ousssozkvl}{tq
Εφφεχτ οφ βαιχαλιν ον ιν ϖιϖο αντι2ϖιρυσ
≤ «¨ ±ª2¼∏±t o ≤ ¬±ªu o ×∞ ≠∏t
(t. Πηαρµ αχψ δεπαρτµ εντ, Λιαονινγ Υνιϖερσιτψ οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινε, Σηενψανγ ttssvu, Χηινα;
u. ∆επαρτµ εντ οφ Ιµ µ υνολογψ, Σχηοολοφ Βασιχ Μεδιχινε, Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsss{v, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ׫¬¶¶·∏§¼ ¬¶¤¥²∏··«¨ ιν ϖιϖο ¤±·¬√¬µ∏¶ ©¨©¨¦·²©¥¤¬¦¤¯¬±q Μετηοδ : §²³·¬±ª ιν ϖιϖο ¬¨³¨ µ¬° ±¨·o º¨
¤§°¬±¬¶·¨µ¨§²±¨ªµ²∏³²©°¬¦¨ u §¤¼¶¥¨ ©²µ¨ ¬±©¨¦·¨§º¬·«¬±©¯∏¨ ±½¤√¬µ∏¶k rƒ rtrwzlo º«¬¯¨ ¤§°¬±¬¶·¨µ·«¨ ²·«¨ µªµ²∏³º¬·«¥¤¬¦¤2
¬¯± ²±¨§¤¼ ¤©·¨µ¬±©¨¦·¨§o ·² ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·²©¥¤¬¦¤¯¬± ¬± ³µ²·¨¦·¬±ª¤±§¦∏µ¬±ª°¬¦¨ ¤ª¤¬±¶·¬±©¯∏¨ ±½¤√¬µ∏¶q Ρ εσυλτ:
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∏¯±ªo µ¨§∏¦¨ ·«¨ «¨ °¤ªª¯∏·¬±¤·¬²± ·¬·¨¤±§¬±©¨¦·¬√¬·¼ ¬± ³∏¯°²o ¤±§µ¨√ µ¨¶¨ °¬¦¨ . ¶³± ∏¨°²±¬¦³¤·«²¯²ª¬¦¤¯ ¦«¤±ª¨ ¶q Χονχλυσιον:
¤2
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[ Κεψ ωορδσ] ¥¤¬¦¤¯¬±~ ¬±©¯∏¨ ±½¤√¬µ∏¶~ ³∏¯°² ¬±§¨ ¬
≈责任编辑 刘
#xtwu#
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中 国 中 药 杂 志
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∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uu
²√ °¨¥¨ µo ussz