全 文 ：生地注射液对脂多糖诱导大鼠肺部炎症的影响
刘 力 t3 o唐 岚 u o徐德生 t o夏卉莉 t o谢强敏 v
ktq上海中医药大学 附属曙光医院 o上海 usssut~
uq浙江工业大学 药学院 o浙江 杭州 vtssvu~
vq浙江大学 医学院 o浙江 杭州 vtssvtl
≈摘要   目的 }研究生地注射液对大鼠肺部炎症的影响 ∀方法 }气道滴入大肠杆菌脂多糖 k°≥l建立大鼠肺
部炎症模型 ~随机分正常对照组 !模型组 !药物组 o各组均采用静脉注射给药方式 ou次给药 o模型组给生理盐水 o药
物组每次给生地注射液 v{s °ª# ®ªpt k以生地注射液中固形物量计 lo进行支气管肺泡灌洗液 k…„ƒl中细胞分类
计数 ~测定 …„ƒ中肿瘤坏死因子 kבƒ2Αlo超氧阴离子自由基 k’ pu lo中性粒细胞髓过氧化酶 k °’ l水平 ~进行肺
组织病理检查 ∀结果 }生地注射液静脉给药可明显抑制 °≥诱导的白细胞总数和中性粒细胞数目升高 o对淋巴单
核细胞数目无明显影响 ~明显抑制 בƒ2Αo’ pu o °’水平升高 ~明显抑制 °≥诱导的肺组织中性粒细胞浸润 !气管
黏膜水肿 o对肺组织损伤无影响 ∀结论 }生地注射液有一定的抗 °≥致大鼠肺部炎症的作用 o初步推断抗炎 !抑制
细胞因子释放 !抑制炎症介质释放和抗氧化是其治疗慢性阻塞性肺疾病的作用机制之一 ∀
≈关键词   生地注射液 ~脂多糖 ~肺部炎症 ~慢性阻塞性肺疾病
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsy2sxuy2sv
≈收稿日期   ussx2tt2us
≈通讯作者   3 刘力 }ר¯}ksutlxv{utyxs2zutoƒ¤¬}ksutlxv{u2
xzyto∞2°¤¬¯} ¬¯∏¯¬uzxsƒ «²·°¤¬¯q¦²°
生地味甘 !苦 o性寒 o归心 !肝 !肾经 o功能清热凉
血 !养阴生津 ∀用单味生地制成的生地注射液在临
床应用中 o对慢性阻塞性肺疾病患者 k≤’°⁄l症状
有一定的改善 o本研究观察了生地注射液对大肠杆
菌脂多糖 k°≥l诱导大鼠肺部炎症的影响 o以研究
生地注射液治疗 ≤’°⁄的作用机制 ∀
1 材料
1q1 主要试剂及仪器 生地注射液 k上海中医药
大学附属曙光医院制剂室 o批号 sxstusl~ ¬¯³²³²2
¼¯¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¶©µ²° Εσχηεριχηαια χολιsxx}…xk°≥lk美
国 ≥¬ª°¤公司 l~抗超氧阴离子自由基及产生超氧阴
离子自由基 k’ pu l测试盒 ~髓过氧化物酶 k °’ l测
试盒 k南京建成生物工程研究所 l~大鼠肿瘤坏死因
子 Α∞Œ≥„k• ¤·×‘ƒ2Α∞Œ≥„ l测试盒 k美国 …¬²¶¦¬2
±¨¦¨l~∞³³¨ ±§²µ©x{sw• 冷冻离心机 k德国 l~…Œ’ p
×∞Ž∞÷{ss酶标仪 k美国 l~• ¤·¨µ³µ² °¶|sssz p
su纯水仪 k美国 l∀
1q2 动物 ≥⁄大鼠 okuvs ? usl ªo清洁级 o雄性 o
购于上海斯莱克实验动物有限责任公司 o许可证号 }
≥≤÷Žk沪 lussv2sssv∀
2 方法
2q1 大鼠肺部炎症模型的建立 称重后 o用 tsh
的水合氯醛麻醉大鼠 o按 v1x °# ®ªpt腹腔注射给
药 ∀麻醉后的大鼠立即手术 o暴露气管 o用微量注射
器直接从气道滴入 °≥kv °ª# ®ªpt lo滴入 °≥ y «
后处死大鼠 o收集支气管肺泡灌洗液 k…„ƒlo取肺
组织做病理切片 ∀
2q2 分组及给药 随机分组 o每组 { ∗ ts只大鼠 o
分正常组 !模型组 !药物组 o各组均采用静脉注射给
药方式 ou次给药 o第 t次给药于气道滴入 °≥前 x
°¬±o第 u次给药于气道滴入 °≥ v «后 ∀模型组给
生理盐水 o药物组每次给生地注射液 v{s °ª# ®ªpt
k以生地注射液中固形物量计 l∀
2q3 收集支气管肺泡灌洗液 滴入 °≥ y «后 o股
动脉放血处死大鼠 o暴露气管及胸腔 o气管插管 o结
扎右侧肺 ∀左侧肺行支气管肺泡灌洗 o…„ƒ置冰
浴中 ∀灌洗后 o取下被结扎的右侧肺组织 o以 tsh
甲醛液固定 z §∀
2q4 …„ƒ细胞总数计数和分类计数 取置冰浴
中的 …„ƒ充分混匀后 o取 s1t °加入 s1u °白
细胞计数稀释液 o混匀后用计数板计数白细胞总数 ∀
其他 …„ƒ置冷冻离心机 u sss µ# °¬±pt离心 ts
#yux#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ y
 ¤µ¦«o ussz
°¬±o取上清液置 p {s ε 冰箱保存 ∀沉淀物涂片 o
• µ¬ª«·2Š¬¨°¶¤染色 o分类计数中性粒细胞和淋巴单
核细胞 ∀
2q5 …„ƒ中 בƒ2Αo’ pu和  °’测定 置 p{s ε 冰
箱保存的 …„ƒ解冻后 o置冷冻离心机 ts sss µ# °¬±pt
离心 ts °¬±o取上清液 o测定 בƒ2Αo’ pu和  °’∀
2q6 肺组织病理检查 肺组织经 tsh甲醛固定 z
§后 o取下肺叶 o用石蜡包埋 o切成 x Λ°组织片 o经
脱蜡 !逐级乙醇脱水 o‹∞染色 ~上镜观察病理组织
学变化并摄影 ∀每只大鼠的样本拍摄 x张照片 o参
考文献描述加以改进 ≈t  o按表 t分级评分 o综合评价
中性粒细胞浸润 !黏膜水肿和上皮细胞损伤程度 ∀
表 t 肺组织病理变化评分参考表 k‹∞染色 l
病理分级 中性粒细胞浸润 黏膜水肿 上皮细胞损伤
s 正常 正常 正常
t 零星中性粒细胞浸润 轻度零星细支气管水肿 零星细胞损伤
u 散在中性粒细胞浸润 轻度肺泡和细支气管水肿 轻度细胞损伤
v 片状中性粒细胞浸润 病灶性水肿 中度细胞损伤
w 区域性中性粒细胞浸润 区域性水肿 细胞变性
x 全肺弥散性中性粒细胞浸润 全肺弥散性水肿 全肺弥散性
3 结果
3q1 对炎症细胞聚集的影响 模型组气管内滴入
°≥ y «后 o白细胞总数 !中性粒细胞和淋巴单核细
胞数目与正常组比较明显升高 ∀生地注射液可明显
抑制 °≥诱导的白细胞总数和中性粒细胞数目升
高 o对淋巴单核细胞数目无明显影响 o见表 u∀
表 u 对 °≥诱导的大鼠肺 …„ƒ炎症细胞聚集的影响 kcξ ? σ, ν € {l
组别
剂量
r°ª# ®ªpt # §pt
白细胞总数
r≅ ts| # pt
中性粒细胞
r≅ ts| # pt
淋巴单核细胞
r≅ ts| # pt
正常 p s1ts ? s1su s1ssw ? s1ssu s1ts ? s1su
模型 p s1|y ? s1vvwl s1{ ? s1vtwl s1ty ? s1sxvl
生地注射液 zys s1xs ? s1tutl s1vt ? s1ttul s1ut ? s1s|
注 }与模型组比较 tl Π  s1stoul Π  s1sst~与正常组比较 vl Π  s1stowl Π  s1sst
3q2 对 בƒ2Αo’ pu o °’水平的影响 模型组气管
内滴入 °≥ y «后 o…„ƒ中 בƒ2Αo’ pu o °’水平
与正常组比较明显升高 ∀生地注射液可明显抑制
°≥诱导的 בƒ2Αo’ pu o °’水平升高 o见表 v∀
表 v 对 °≥诱导的大鼠肺 …„ƒ中 בƒ2Αo’ pu和  °’水平的影响 kcξ ? σ, ν € {l
分组
剂量
r°ª# ®ªpt # §pt
בƒ2Α
r³ª# °pt
抑制率
rh
’ pu
r∏# pt
抑制率
rh
 °’
r∏# pt
抑制率
rh
正常 p tv1t ? y1s p w{1x ? vw1s p uuu1s ? zv1w p
模型 p zzs1| ? wzt1vvl p tvs1s ? vt1vvl p v{|1u ? tyx1{yl p
生地注射液 zys txw1t ? uws1wxl {s1s {s1{ ? ty1wtl vz1{ uvt1y ? yz1|xl ws1x
注 }与模型组比较 tl Π  s1stoxl Π  s1sx~与正常组比较 vl Π  s1stoyl Π  s1sx
3q3 病理检查结果 模型组气管内滴入 °≥ y «后 o
中性粒细胞浸润 !气管黏膜水肿和肺组织损伤积分与
正常组比较明显增加 ∀生地注射液可明显抑制 °≥诱
导的肺组织中性粒细胞浸润 !气管黏膜水肿 o见表 w∀
表 w 对 °≥诱导的大鼠肺部炎症病理变化评分的影响 kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量 r°ª# ®ªpt # §pt 中性粒细胞浸润 黏膜水肿 肺组织损伤
正常 p s1t| ? s1vz s1vy ? s1vz s1ux ? s1wy
模型 p v1vw ? s1ytwl w1tw ? s1uywl w1xs ? s1x{wl
生地注射液 zys u1sz ? s1xuul u1zw ? s1u{ul w1s| ? s1v|
注 }与模型组比较 ul Π  s1sst~与正常组比较 wl Π  s1sst
4 讨论
≤’°⁄!急性呼吸窘迫综合征 k„• ⁄≥l和急性肺
损伤 k„Œl等多种肺部疾病的发病机制均与炎症细
胞浸润有关 ∀ ≤’°⁄o„• ⁄≥和 „Œ这 v种动物模型
均可被大肠杆菌脂多糖 k°≥l诱导产生 ≈u2w  o采用
°≥诱导的大鼠肺部炎症模型是国际公认的抗炎药
物筛选模型 ∀目前普遍认为 o≤’°⁄发病机制主要
为肺内慢性炎症 !蛋白酶与抗蛋白酶失衡 !氧化应激
失衡及黏液分泌亢进 ∀ ≤’°⁄以遍及气道 !肺实质
和肺血管的慢性炎症为特征 ≈x  o≤’°⁄气道炎症的
#zux#
第 vu卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ y
 ¤µ¦«o ussz
特征是中性粒细胞浸润 ≈y  ∀当吸烟及吸入有害物
质后 o炎症细胞在气道和肺泡内大量聚集 o激活的炎
症细胞释放一系列炎性介质包括 בƒ2ΑoŒ2{和其
他能破坏肺结构或维持中性粒细胞炎症的介质 ∀
בƒ2Α及 Œ2{共同参与 ≤’°⁄气道炎症反应及气道
结构的重塑 o是构成 ≤’°⁄气道炎症细胞因子网络
的重要组成成分 o能反映气道炎症的改变程度 o在
≤’°⁄发病过程中起着关键作用 ∀体内氧化 r抗氧
化平衡失调是造成 ≤’°⁄慢性损伤的重要原因 o缓
解期及发作期均存在两者作用失衡 o氧化应激增加 o
会造成肺实质的损害 ∀因此 o抗炎 !抑制细胞因子释
放 !抑制炎症介质释放和抗氧化在 ≤’°⁄的炎症治
疗中起着非常重要的作用 ∀
生地注射液临床用于 ≤’°⁄患者 o可改善患者
肺容量 !肺通气功能 ≈z  o明显提高 ≤’°⁄患者 ≤⁄w
数值和 ‘Ž细胞活性 o提高 ≤⁄wr≤⁄{比值 o使患者
的细胞免疫功能得到改善 ≈{  o并能改善血栓前状
态 ≈|  o降低血黏度和红血球压积 ≈ts  ∀本研究证明了
生地注射液有抗 °≥致大鼠肺部炎症的作用 o初步
推断抗炎 !抑制细胞因子释放 !抑制炎症介质释放和
抗氧化是其治疗 ≤’°⁄的作用机制之一 ∀
≈参考文献  
≈t  ≥∏÷ o …¤¬≤o ‹²±ª± o ·¨¤¯q ∞©©¨¦·²©¦²±·¬±∏²∏¶«¨ °²©¬¯·µ¤·¬²±
²± «¨ °²§¼±¤°¬¦¶o ∏¯±ª¬±©¯¤°°¤·¬²± ¤±§³∏¯°²±¤µ¼ §¨¨ °¤¬± ¤
¦¤±¬±¨°²§¨ ¯²©¤¦∏·¨ ∏¯±ª¬±­∏µ¼≈ q Œ±·≤¤µ¨  §¨o ussvou|
kttl}usvwq
≈u  ≥³²±§o …¬¯¯¤«  o ≤«¤³°¤± • • o ·¨¤¯q ׫¨ µ²¯¨²©± ∏¨·µ²2
³«¬¯¶¬± °≥2¬±§∏¦¨§¦«¤±ª¨ ¶¬± ³∏¯°²±¤µ¼ ©∏±¦·¬²± ¬± ¦²±¶¦¬²∏¶
µ¤·¶≈ q °∏¯° °«¤µ°¤¦²¯ ׫¨ µo usswotzkvl}tvvq
≈v  …¬µµ¨¯¯  „o °¤·¨¯ ‹ o  ¦¦¯∏¶®¬¨ Žo ·¨¤¯q °°„• 2ª¤°°¤¤ª²2
±¬¶·¶¤¶·«¨ µ¤³¼ ©²µ§¬¶¨¤¶¨¶¬±√²¯√¬±ª ¤¬µº¤¼ ± ∏¨·µ²³«¬¯¬¤≈  q
∞∏µ• ¶¨³¬µo usswouwktl}t{q
≈w  钟小宁 o白 晶 o施焕中 o等 q慢性支气管炎与肺气肿大鼠气
道炎症与重塑的实验研究 ≈ q中华结核和呼吸杂志 oussvo
uyktul}zxsq
≈x  中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组 q慢性阻塞性
肺疾病诊治指南 ≈ q中华结核和呼吸杂志 oussuouxk{l}wxvq
≈y  ≥·²¦®¯ ¼¨ • „q ‘¨ ∏·µ²³«¬¯¶¤±§·«¨ ³¤·«²ª¨ ± ¶¨¬¶²©≤’°⁄≈ q
≤«¨ ¶·o ussuotutkxl}txtq
≈z  毕小利 o张 炜 q生地注射液对 ≤’°⁄患者肺功能的影响
≈ q辽宁中医杂志 ot|||ouykvl}ttsq
≈{  毕小利 o张 炜 q生地注射液对 ≤’°⁄患者免疫功能的影响
≈ q辽宁中医杂志 ot||{ouxktul}xytq
≈|  张 炜 o毕小利 q生地注射液对慢性阻塞性肺病血栓前状态
影响的研究 ≈ q实用中医药杂志 oussvotykvl}vq
≈ts  江淳娟 o毕小利 o王 跃 q生地注射液对慢性阻塞性肺疾病患
者血液流变学及肺功能的影响 ≈ q实用中医药杂志 oussuo
t{k{l}zq
Σηενγδι ινϕεχτιον ον ρατ µ οδελοφ λυνγ ινφλαµ µ ατιον ινδυχεδ βψ
λιποπολψσαχχηαριδεσ
Œ˜ ¬t o ׄ‘Š ¤±u o ÷ ˜ ⁄ 2¨¶«¨ ±ªt o ÷ Œ„ ‹∏¬2¯¬t o ÷ Œ∞ ±¬¤±ª2°¬±v
(t. Σηυγυανγ ΗοσπιταλΑφφιλιατεδ το Σηανγηαι Υνιϖερσιτψ οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινε, Σηανγηαι usssut, Χηινα;
u. Χολλεγε οφ Πηαρµ αχευτιχαλΣχιενχε, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ οφ Τεχηνολογψ, Ηανγζηου vtssvu, Χηινα;
v. Χολλεγε οφΜεδιχινε, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssvt, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨©¨¦·²©≥«¨ ±ª§¬¬±­¨¦·¬²± ²± µ¤·°²§¨ ¯²© ∏¯±ª¬±©¯¤°°¤·¬²±q Μετηοδ : ׫¨ µ¤·°²§2
¨¯ º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §¥¼ ¬±·µ¤·µ¤¦«¨ ¤ ¬±¶·¬¯¯¤·¬²± ²© ¬¯³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¶k°≥lq ׫¨ ·²·¤¯ ¤±§§¬©©¨µ¨±·º«¬·¨ ¥¯²²§ ¦¨¯¯ ¦²∏±·¶¬± ¥µ²±2
¦«²¤¯√²¨ t¤µt¤√¤ª¨ ©¯∏¬§k…„ƒl º µ¨¨ ³¨ µ©²µ° §¨¤±§·«¨ ¯¨ √¨¯ ²©·∏°²µ± ¦¨µ²¶¬¶©¤¦·²µ2Α kבƒ2Αlo ¶∏³¨ µ²¬¬§¨ ¤±¬²± µ¤§¬¦¤¯ k’ pu l
¤±§°¼¨ ²¯³¨ µ²¬¬§¤¶¨ k °’l º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§o ¤¶º¨¯¯¤¶³¤·«²¯²ª¬¦¦«¤±ª¨ ²©³∏¯°²±¤µ¼ ·¬¶¶∏¨ º¤¶·¨¶·¨§q Ρ εσυλτ: ≥«¨ ±ª§¬¬±­¨¦·¬²±
¦²∏¯§§¨ ³µ¨¶¶·«¨ ¬±¦µ¨¤¶¬±ª²©·«¨ ¤°²∏±·²©·²·¤¯ º«¬·¨ ¥¯²²§ ¦¨¯¯¶¤±§± ∏¨·µ²³«¬¯¶¤±§¬±«¬¥¬··«¨ ¬±¦µ¨¤¶¬±ª²©×‘ƒ2Αo ’ pu o  °’
¦¤∏¶¨§¥¼ °≥o ¤¶º¨¯¯¤¶µ¨ ¬¯¨√¨·«¨ ³¤·«²¯²ª¬¦¦«¤±ª¨ ¬±¦¯∏§¬±ª‘¨ ∏·µ²³«¬¯¶¬±©¬¯·µ¤·¬±ª¤±§°∏¦²∏¶ §¨¨ °¤¬± ·µ¤¦«¨ ¤¨ ¤©·¨µ¬±·µ¤√ 2¨
±²∏¶¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²±q • «¬¯¨ ¬·§¬§±²·¶«²º ·«¨ ©¨©¨¦·²± °²±²¦¼·¨o ¤±§«¬¶·²¯²ª¬¦¤¯ ¯¨ ¶¬²± ²©·«¨ ∏¯±ª·¬¶¶∏¨ q Χονχλυσιον: ≥«¨ ±ª§¬¬±2
­¨¦·¬²± ¶«²º¶¶²°¨¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ©¨©¨¦·¬± µ¤·¯∏±ª¬±§∏¦¨§¥¼ °≥ ¤±§¬·¦¤± ¥¨ ¦²±¦¯∏§¨ §·¨±·¤·¬√¨¯¼ ·«¤·¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·²µ¼o ¬±2
«¬¥¬·¬±ª·«¨ µ¨¯¨ ¤¶¨ ²©¦¼·²®¬±¨¤±§¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ° §¨¬∏°o ¤±§¤±·¬²¬¬§¤·¬²± ¤µ¨ ¶²°¨²©·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²©¬·¶ ©¨©¨¦·²± ≤’°⁄q
[ Κεψ ωορδσ] ≥«¨ ±ª§¬¬±­¨¦·¬²±~ ¬¯³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¶~ ∏¯±ª¬±©¯¤°°¤·¬²±~ ¦«µ²±¬¦²¥¶·µ∏¦·¬√¨³∏¯°²±¤µ¼ §¬¶¨¤¶¨
≈责任编辑 古云侠  
#{ux#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ y
 ¤µ¦«o ussz