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丝毛飞廉总黄酮对小鼠免疫性肝损伤的保护作用



全 文 :华西药学杂志
W C J·P S 2012,27(3)∶292 ~ 294
作者简介:郭凤霞(1970—) ,女,硕士,副主任药师,从事药用植物资源的开发和研究。Email:winddown_gfx72@ 163. com
* 通信作者(Correspondent author) ,Email:zy - 3@ 263. net
丝毛飞廉总黄酮对小鼠免疫性肝损伤的保护作用
郭凤霞1,2,曾 阳1,2* ,陈振宁1,马继雄1,徐 萌3
(1.青海师范大学生命与地理科学学院,青海 西宁 810008;2. 青藏高原环境与资源教育部重点实验室,青海 西宁 810008;
3.青海大学附属医院临床药学科,青海 西宁 810007)
摘要:目的 研究丝毛飞廉总黄酮对卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)致小鼠急性免疫性肝损伤的保护作用。方法 小鼠尾静
脉注射 BCG + LPS造模后,ig给予丝毛飞廉总黄酮,测定小鼠脏器指数、血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转
移酶(AST)的含量及小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果 模型组脏器指数及 ALT、
AST与空白组均有显著性差异,表明模型建立成功;给药组与造模组比较,小鼠脏器指数、AST、ALT 的含量、SOD 的活性及
MDA的含量均有显著性差异。结论 丝毛飞廉总黄酮对 BCG + LPS致小鼠免疫性肝损伤具有保护作用。
关键词:丝毛飞廉总黄酮;丙氨酸氨基转移酶;天门冬氨酸氨基转移酶;超氧化物歧化酶;丙二醛;卡介苗;脂多糖
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 - 0103(2012)03 - 0292 - 03
Protective effect of total flavonoids from Garduus crispus on immunological livery injury in
mice induced by BCG + LPS replication
GUO Feng - xia1,2,ZENG Yang1,2* ,CHEN Zhen - ning1,MA Ji - xiong1,XU Meng3
(1. Biological and Geographical Science College,Qinghai Normal University,Xining,Qinghai,810008 P. R. China;2. Key Laboratory
of Environment and Resources of Qinghai - Tibet Plateau of the National Education Ministry,Xining,Qinghai,810008 P. R. China;3.
Clinical Pharmacy of the Medical College,Qinghai University,Xining,Qinghai,810007 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To investigate the protective effect of total flavonoids from Garduus crispus on the acute immunological liver
injury in mice induced by BCG + LPS replication.METHODS The liver injury model was established by injecting BCG + LPS through
tail vein in mice. After ig administration of total flavonoids from Garduus crispus the organ index,the contents of ALT,and AST in the
blood serum and the activity of SOD and the level of MDA in the liver organs of mice were measured. RESULTS The sharp contrast
in organ index,ALT and AST level were observed between modeling group and blank group,indicating the experimental model of the
acute immunological livery injury in mice induced by BCG + LPS replication was successfully established. Significant difference in organ
index,the contents of ALT,and AST,the activity of SOD and the level of MDA were observed between treated group and model group.
CONCLUSION The total flavonoids from Garduus crispus shows a good protective effect on the acute immunological liver injury in
mice induced by BCG + LPS replication.
Key words:Total flavonoids from Garduus crispus L.;ALT;AST;SOD;MDA;BCG;LPS
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 - 0103(2012)03 - 0292 - 03
丝毛飞廉 Carduus nutans L. 为菊科飞廉属植
物,一般全草或根入药,分布于中国各地,其性平味
苦,主要用于治疗风热感冒、头风晕眩、皮肤瘙痒、尿
路感染、跌打瘀肿、疗疮肿毒、烫火伤等症。丝毛飞
廉含有的飞廉碱和去氢飞廉碱具有降压和抗炎作
用[1 - 2]。飞廉属植物中黄酮类的研究较少。黄酮类
有效成分在治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经
系统疾病和消除自由基、抑菌、抗癌等方面有显著效
果[3]。现提取丝毛飞廉总黄酮,观察其对卡介苗加
脂多糖复制免疫性肝损伤的保护作用,初步探讨其
保肝降酶的作用机制。
1 实验部分
1. 1 试药与动物
丝毛飞廉总黄酮(自制)[4],给药剂量相当于
56、28、14 g·kg -1总黄酮,于 4 ℃保存;联苯双酯滴
丸(德州德药制药有限公司,批号:090505,每丸 1. 5
mg) ;卡介苗(BCG,卫生部上海生物制品研究所,批
号:200902001) ;脂多糖(LPS,美国 Sigma) ;超氧化
物歧化酶(SOD,批号:20090526)、丙二醛(MDA,批
号:20090526)、丙氨酸氨基转移酶(ALT,批号:
20090526)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST,批号:
20090526)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.03.009
6 ~ 8 周龄昆明种小鼠(青海省地方病研究所,批号:
青医动字第 01 号)60 只,♀♂兼用,体重 20 ± 2 g,
实验前正常分笼喂养一周。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 小鼠免疫性肝损伤模型的制备及给药方案
将 60 只健康昆明种小鼠随机均分为空白组、模型
组、联苯双酯阳性组及丝毛飞廉总黄酮高、中、低剂
量组。全部小鼠均正常饮水、饮食。实验开始的第
1 天,除空白组每只 iv 0. 1 mL 生理盐水外,其余各
组尾 iv BCG(含 5. 0 × 107 个活菌)0. 1 mL,于 BCG
致敏的第 1 天 ig给药,qd,连续 10 d[5];空白组和模
型组给予同体积的生理盐水。第 10 天给药后 1 h,
空白组尾 iv生理盐水 0. 005 mL·g -1,其他各组尾 iv
LPS 0. 375 μg·g -1,注射 12 h后,称重,眼眶采血,脱
颈处死小鼠,并摘取肝脏、脾脏、胸腺,快速称重,计
算脏器指数。分离血清进行 ALT、AST指标的测定。
取部分肝组织,用冷生理盐水漂洗后制成 1% 和
10%的肝匀浆,离心,取上清液,检测 SOD、MDA 各
项指标。ALT、AST、MDA、SOD 的测定均按试剂盒
说明书进行。
1. 2. 2 统计处理 所有数据均采用 珋x ± s 表示,
Anova法进行单因素方差分析处理,组间比较采用 t
检验,P < 0. 05 认为有显著性差异。
1. 2. 3 丝毛飞廉总黄酮对脏器指数的影响 表 1
结果表明:与空白对照组相比,模型组小鼠的肝脏、
脾脏指数均显著升高(P < 0. 05) ;与模型组比较,丝
毛飞廉总黄酮高剂量组能显著降低肝脏、脾脏指数
(P < 0. 05) ,而中、低剂量组与模型组无显著性差异
(P > 0. 05) ;对于胸腺指数和脾脏指数,丝毛飞廉总
黄酮各剂量组与模型组无显著性差异(P > 0. 05)。
1. 2. 4 丝毛飞廉总黄酮对血清指数的影响 表 2
结果表明:模型组小鼠 ALT、AST的活性较空白组明
显升高(P < 0. 05) ,说明造模成功。丝毛飞廉高、
中、低剂量组血清中 ALT、AST的含量均明显低于模
型组(P < 0. 05) ,其中,高、中剂量组 AST 的含量有
极显著性差异(P < 0. 01) ,中剂量组 ALT 的含量有
极显著差异(P < 0. 01) ,说明丝毛飞廉高、中、低剂
量组对小鼠的免疫性肝损伤有一定的影响,起到了
保肝、降酶的作用。
表 1 药物对 BCG + LPS 所致免疫性肝损伤小鼠脏器指数的影响
(mg·g -1,珔x ± s,n =10)
Table 1 The effects of drug on visceral index of acute liver injured
mice induced by BCG + LPS(mg·g -1,珔x ± s,n =10)
Groups Dose /g·kg -1 肝脏指数 脾脏指数 胸腺指数
Blank - 51. 20 ± 4. 15△ 4. 07 ± 1. 02△ 3. 17 ± 0. 64
Model - 72. 45 ± 5. 88* 5. 23 ± 0. 76* 3. 20 ± 0. 89
Bifendate 0. 15 51. 72 ± 16. 50△ 4. 21 ± 1. 17 3. 36 ± 1. 24
丝毛飞廉总黄酮 56 54. 81 ± 4. 81△ 3. 75 ± 0. 89△ 3. 21 ± 0. 93
28 58. 61 ± 3. 10△ 4. 22 ± 0. 64 3. 17 ± 0. 76
14 59. 06 ± 3. 36 4. 11 ± 0. 10 3. 11 ± 1. 01
Compared with blank group:* P < 0. 05;compared with model group:
△P < 0. 05
表 2 药物对 BCG + LPS所致免疫性肝损伤小鼠血清中 AST、ALT的变化及肝组织中 SOD活性及MDA含量的影响(珔x ± s)
Table 2 The effects of drug on activities of ALT and AST in serum and contents of SOD and MDA of acute liver injured mice induced by
BCG + LPS(珔x ± s)
Groups Dose /g·kg -1 n AST(OD) ALT(OD) SOD /U·mg -1 MDA /nmol·mg -1
Blank - 10 0. 401 ± 0. 080△ 0. 202 ± 0. 071△ 115. 1 ± 4. 4△ 0. 71 ± 0. 07△
Model - 8 0. 667 ± 0. 041* 0. 469 ± 0. 052* 72. 8 ± 5. 6* 1. 54 ± 0. 01*
Bifendate 0. 15 10 0. 433 ± 0. 042△ 0. 313 ± 0. 051△ 105. 2 ± 6. 1△ 1. 32 ± 0. 02*
丝毛飞廉总黄酮 56 10 0. 460 ± 0. 030△△ 0. 275 ± 0. 074△ 102. 7 ± 9. 8*△△ 1. 09 ± 0. 03*△△
28 10 0. 455 ± 0. 032△△ 0. 244 ± 0. 021△△ 97. 2 ± 4. 1*△△ 1. 19 ± 0. 02*△
14 10 0. 553 ± 0. 031△ 0. 302 ± 0. 071△ 89. 9 ± 5. 0*△ 1. 51 ± 0. 06*
Compared with blank group:* P < 0. 05;compared with model group:△P < 0. 05,△△P < 0. 01
1. 2. 5 丝毛飞廉总黄酮对肝组织中 SOD的活性及
MDA含量的影响 表 2 表明:模型组小鼠肝组织中
SOD的含量与空白组小鼠比较有显著降低(P <
0. 05) ,MDA的含量与空白组比较有显著升高(P <
0. 05) ,说明造模成功。与模型组比较,丝毛飞廉总
黄酮高、中、低剂量组 SOD 的含量均有显著升高
(P <0. 05) ,其中,高、中剂量组有极显著差异(P <
0. 01)。与模型组比较,高、中剂量组 MDA 的含量
均有显著降低(P < 0. 05) ,其中,高剂量组有极显著
性差异(P < 0. 01)。证明丝毛飞廉总黄酮对 BCG +
LPS所致免疫性肝损伤小鼠肝组织中 SOD 的活性
及 MDA的含量有显著的影响。
2 讨论
BCG + LPS诱发免疫性肝损伤的小鼠模型是目
前最常用的免疫性肝损伤造模法,与人类乙型病毒
性肝炎的肝损伤相似[6],已广泛应用于从免疫途径
筛选新药,并研究免疫与肝损伤的关系。血清中转
氨酶、SOD、MDA 的测定是反映肝细胞损害程度及
细胞氧化损伤的重要检测指标。模型组小鼠的脏器
指数及血清中 ALT、AST 的含量,肝组织中 SOD、
MDA的含量相对空白组都有显著差异,说明肝损伤
392第 3 期 郭凤霞,等。丝毛飞廉总黄酮对小鼠免疫性肝损伤的保护作用
华西药学杂志
W C J·P S 2012,27(3)∶294 ~ 295
造模成功;丝毛飞廉总黄酮给药组与模型组比较,
ALT、AST的含量显著降低,SOD、MDA 的含量也有
显著差异,说明丝毛飞廉总黄酮对 BCG + LPS 复制
的免疫性肝损伤有较好的保肝、降酶作用。
参考文献:
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23(4) :331.
收稿日期:2011 - 08 - 16
作者简介:沈黎明(1959—) ,女,副主任药师,从事药物研究工作。Email:Shenlm@ sohu. com
解脲支原体对中药有效部位的药敏试验研究
沈黎明,喻林冲
(四川省医学科学院 四川省人民医院皮肤病性病研究所,四川 成都 610031)
摘要:目的 探讨解脲支原体对中药有效部位体外的敏感性。方法 应用微量稀释培养法,检测 10 种中药有效组分体外抗
14 株解脲支原体的敏感性。结果 黄柏氯仿提取物最敏感,其 MIC50为 0. 0625 mg·mL
-1,MIC90为 0. 25 mg·mL
-1,其次为大黄
总蒽醌、栀子总苷和总甘草酸。结论 中药有效部位对解脲支原体的敏感性较原生药水煎剂平均提高 10 倍以上。
关键词:中药有效组分;解脲支原体;微量稀释法;MIC;非淋菌性尿道炎
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 - 0103(2012)03 - 0294 - 02
Susceptibility testing on the effective part of Chinese medicine of Ureaplasma urealyticum
SHEN Li - ming,YU Lin - chong
(Academy of Medical Sciences of Sichuan Institute of Dermatology Venereology,Sichuan Province Peoples Hospital,Chengdu,Sichuan,
610031 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To study the sensitivity in vitro of Ureaplasma urealyticum (UU)on the effective part of Chinese medicine.
METHODS The sensitivity of 10 kinds of the effective part of Chinese medicine on the anti - 14 UU standard strains by microdilution
culture methods. RESULTS The extractive of Cork chloroform is the most sensitive which MIC50 was 0. 0625 mg·mL
-1 and MIC90 was
0. 25 mg·mL -1 . Rhubarb,gardenia glycosides and total glycyrrhizic acid are consequently sensitive. CONCLUSION The sensitivity
of the effective part of Chinese medicine to UU standard strains were more 10 times than the native medicine decoction.
Key words:Effective parts of Chinese medicine;Ureaplasma urealyticum;Microdilution method;MIC;Non - gonococcal urethritis
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 - 0103(2012)03 - 0294 - 02
解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,UU)是引
起泌尿生殖道感染尤其是非淋菌性尿道炎(NGU)
的主要原因。NGU的持续性、复发性及耐药性已成
为常见的棘手问题。近年来,中医药取得了长足进
步,已筛查了 170 余种中药水煎液对 UU 的敏感
性[1 - 2],其中 20 余种的敏感性较高。现选取了 10
种中药有效组分,对 14 株 UU作药敏试验。
1 实验部分
1. 1 供试样品
选取黄芩、栀子、甘草、大黄、穿心莲、黄连、黄
柏、金银花、苦参,根据文献[3 - 4]略加改进,提取、分
离得黄芩总黄酮、栀子总苷、总甘草酸、大黄总蒽醌、
穿心莲总内脂、黄连总生物碱、黄柏总生物碱、金银
花总绿原酸、苦参总生物碱、黄柏氯仿提取物等 10
种有效组分,分别制成 10 mg·mL -1的水混悬剂,调
pH6. 0 ± 0. 5,于 121 ℃、15 min灭菌备用;14 株解脲