全 文 ：表 t 小麦黄素加样回收率
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
rh
平均值
rh
• ≥⁄
rh
s1twz s1szx s s1uu{ ts{1s
s1tvy s1szx s s1uts |{1z
s1twu s1szx s s1ut{ tst1v tsu1| v1vs1tv| s1tus s s1uyx tsx1s
s1twx s1tus s s1uyy tss1{
s1tv| s1tus s s1uyv tsv1v
2q9 样品测定 分别精密称取毛茛 !石龙芮 !禺毛
茛和猫爪草样品 u1s ªo按 2q3项下方法制备溶液后
进样分析 o按标准曲线计算小麦黄素的含量 o所得结
果见表 u∀
表 u 样品中小麦黄素的质量分数 kν € vl
样品 来源 部位 质量分数 r°ª# ªpt
毛茛 贵阳 全草 s1twy s
毛茛 开阳 全草 s1szt x
石龙芮 贵阳 全草 s1sus w
禺毛茛 贵阳 全草 s1sxt z
禺毛茛 开阳 全草 s1swz x
猫爪草 未知 块根 p
毛茛 贵阳 根 s1sxw s
毛茛 贵阳 茎 s1txv s
毛茛 贵阳 果 s1tzu s
禺毛茛 贵阳 根 p
禺毛茛 贵阳 茎 s1sxz {
禺毛茛 贵阳 果 s1sxt |
3 讨论
本实验分别考察了索氏提取 o水浴回流提取和
超声波提取 ∀超声提取法干扰峰较多 o影响小麦黄
素的测定 o索氏提取和水浴回流提取 o提取效率相
当 o但索氏提取耗时长 o故采用水浴回流提取 o并分
别用甲醇 o|xh乙醇 ozsh乙醇 owsh乙醇为提取溶
媒 o结果 zsh乙醇提取率最高 ∀同时比较了不同的
提取时间 uovoy «o虽然提取时间的延长小麦黄素的
含量会有所增加但会出现杂质峰的干扰 ∀因此确定
以 zsh乙醇回流提取 v次 o每次 t «∀
石油醚萃取层和水层的高效液相色谱分析不含
小麦黄素 o说明提取方法是可行的 ∀
结果表明 o不同种间小麦黄素含量差异明显 o其
中以毛茛的含量为高 o石龙芮含量很低 o猫爪草在本
实验方法中未检出小麦黄素 ∀对药材中不同部位的
检测表明小麦黄素主要集中在茎和果实中 ∀
≈参考文献  
≈t  王旭红 o秦民坚 o邓 霞 q毛茛属药用植物研究概况 ≈ q现代
中药研究与实践 oussvotzkyl}xzq
≈u  潘云雪 o周长新 o张水利 q扬子毛茛中的化学成分研究 ≈  q
≤«¬± °«¤µ°¤¦≥¦¬o usswotvkul}|uq
≈v  国家医药管理局中草药情报中心 q植物药有效成分手册 ≈   1
北京 }人民卫生出版社 ot|{y}tszvq
≈w  李兰芳 o张文彦 o张 魁 q不同生长期白羊草中总黄酮及小麦
黄素的含量测定 ≈ q中国中药杂志 ousssouxkxl}uzuq
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussz2sz2tu
≈通讯作者   3 吴桂芳 oר¯}ks{xtlyvtzz{z
‹°≤测定康复灵中儿茶素与原儿茶素的含量
吴桂芳 t3 o章 欣 u o赵大江 u o葛文波 u
ktq贵州省药品检验所 o贵州 贵阳 xxsssw~
uq贵阳新天药业股份有限公司 o贵州 贵阳 xxsst{l
康复灵凝胶具有清热解毒 o燥湿杀虫 o收敛止
痒 ∀用于各种病因所致的阴道炎症 ∀由大黄 !儿茶 !
紫草 !冰片四味中药组成 o其中儿茶为豆科金合欢属
植物儿茶树 Αχαχια χατεχηυ kql• ¬¯¯§q的干枝加水
煎汁浓缩而成的干浸膏 ∀具有收湿敛疮 o生肌止血
等功效 ∀ ussx年版药典采用 ‹°≤对儿茶中儿茶
素 !原儿茶素的含量进行测定 o经方法学考察 o表明
该方法简捷快速 o稳定可靠 o专属性强 o可作为控制
康复灵凝胶质量的含量检测方法 ∀
1 仪器与试药
„ª¬¯¨ ±·ttss系列高效液相色谱仪 }包括 „ª¬¯¨ ±·
#{uwu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uu
‘²√ °¨¥¨ µo ussz
Štvts„单元泵 o„ª¬¯¨ ±·Štvtw„ ∂ • ⁄检测器以及
汉邦 ‹≤… p vys柱温箱 ∀甲醇为色谱纯 o柠檬酸 !
Ν, Ν2二甲基甲酰胺 !四氢呋喃均为分析纯 o水为重
蒸馏水 o儿茶素对照品 k批号 {z{2usssstl和原儿茶
素对照品 k批号 {zz2usstsul均购于中国药品生物
制品检定所 ∀样品均由贵阳新天药业股份有限公司
提供 k批号 ussxsystoussxsysuoussxsysvl∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 k大连依利
特 ow1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l~以 s1sw °²¯# pt枸椽
酸溶液 2Ν, Ν二甲基甲酰胺 2四氢呋喃 kwxΒ{Βul为流
动相 ~检测波长为 u{s ±°~柱温 vx ε ~流速 t1s °
# °¬±pt ∀
2q2 溶液制备
2q2q1 对照品溶液的制备 精密称取儿茶素对照
品 !原儿茶素对照品适量 o加 xsh甲醇溶液制成每 t
°含儿茶素 {t Λª!原儿茶素 ys Λª的混合溶液 o即
得 ∀
2q2q2 样品溶液的制备 取本品约 u1x ªo精密称
定 o精密加入甲醇 ux °o称重 o超声处理 vs °¬±o放
冷 o再称重 o用甲醇补足减失的质量 o摇匀 o滤过 o取
续滤液 o离心 o取上清液 o用 s1wx Λ°微孔滤膜滤
过 o取续滤液 o作为供试品溶液 ∀
2q2q3 空白样品溶液的制备 另取缺儿茶的空白样品
u1x ªo按样品溶液的制备方法制得空白样品溶液 ∀
2q3 系统适用性试验 分别取空白溶液 !儿茶素对
照品溶液 !原儿茶素对照品溶液 !样品溶液按上述色
谱条件实验 o对供试品峰和对照品峰的系统适应性
参数进行考察 o儿茶素和原儿茶素的理论板数分别
为 z {zuo{ yvt~分离度为 y1ut∀图谱见图 t∀
2q4 线性关系考察 精密称取儿茶素与表儿茶素
对照品适量 o分别用 xsh 甲醇制成质量浓度为
s1twwos1szuos1swv uos1su{ {os1stw w °ª# °pt
的儿茶素对照品溶液与 s1twso s1szso s1swuo
s1su{os1stw °ª# °pt的原儿茶素对照品溶液 o按
上述色谱条件测定 o以峰面积对儿茶素与表儿茶素
质量浓度 k°ª# °pt l做线性回归曲线 ∀得其回归
方程分别为 }Ψ € x1y{Ξ n s1xyoρ € s1||| {~Ψ €
y1ywΞ n v1w|oρ€ s1||| |∀儿茶素对照品溶液在
s1stw w ∗ s1tww °ª# °pt线性关系良好 ∀原儿茶
素对照品溶液在 s1stw ∗ s1tw °ª# °pt线性关系
良好 ∀
图 t 对照品及样品色谱图
„q空白溶液 ~…q儿茶素对照品 ~
≤q原儿茶素对照品 ~⁄qussysyst样品 ~t1儿茶素 ~u1原儿茶素
2q5 精密度试验 取儿茶素对照品溶液与原儿茶
素对照品溶液重复进样 y次 o记录积分面积 o儿茶素
峰面积的 • ≥⁄为 t1vh o原儿茶素峰面积的 • ≥⁄为
t1sh ∀
2q6 稳定性试验 取供试品溶液 k批号 ussxsysul
t份 o分别于 souowo{otu «进样测定 o所测儿茶素 !
原儿茶素积分面积的 • ≥⁄均小于 uh o证明该法在
tu «内测定结果稳定 ∀
2q7 重复性试验 取同一批号的样品 k批号
ussxsysuly份 o每份约 u1x ªo精密称定 o平行制备
供试品溶液 o进样测定后 o计算各组分含量 o求得儿
茶素和原儿茶素含量的 • ≥⁄分别为 s1yh 和
t1xh ∀
2q8 加样回收率试验 精密称取已知儿茶素含量
ks1{s °ª# ªpt l!原儿茶素含量 ks1wy °ª# ªpt l的
康复灵凝胶 y份各约 t1u ªo精密加入儿茶素与原儿
茶素对照品的混合溶液 k每 t °含儿茶素 {t Λª!
原儿茶素 ys Λªlts °o按供试品溶液制备方法制
备 o得供试品溶液 ∀分别精密吸取对照品混合溶液
和上述 y份供试品溶液各 ts ˏ进样测定 o计算 ∀
儿茶素 o原儿茶素的平均加样回收率分别为
#|uwu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uu
‘²√ °¨¥¨ µo ussz
tst1xh otss1{h ~• ≥⁄分别为 u1sh ot1xh ∀
3 样品测定结果
按本方法测定 v批样品 ussysystoussysysuo
ussysysvo计算样品中儿茶素 !原儿茶素的含量 ∀上
述 v个样品溶液中儿茶素和原儿茶素的含量分别为
每支 v1zou1wov1{ou1vov1you1w °ª∀
4 讨论
本实验比较了以甲醇为溶剂 o回流提取法 kvs

°¬±l!超声提取法 kvsoys °¬±l提取的效果 o结果认
为超声 vs °¬±含量最高 o操作时间短 o故选择超声
vs °¬±为提取条件 ∀对于含儿茶的制剂 o本法同样
适用于其中儿茶素与原儿茶素含量的测定 o从而为
此类品种的质量控制提供了一种有效的方法 ∀
≈参考文献  
≈t  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}|q
≈u  中国药典 ≈≥ q一部 qusss}{q
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussy2s{2ts
≈通讯作者   3 黄璐琦 oר¯}kstslywstwwtt2u|xx
苍术毛状根的诱导及其化学成分组成分析
袁 媛 o黄璐琦 3 o闫 寒 o吕冬梅
k中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszssl
近年来 o人们在多种植物中建立了毛状根培养
系统 o与植物细胞培养相比 o毛状根培养具有生长速
度快 !激素自养 !分化程度较高以及遗传性状相对稳
定等优点 ∀苍术源于菊科苍术属植物苍术 Ατραχ2
τψλοδεσλανχεα k׫∏±¥ql ⁄≤1的根茎 o其功效为燥湿
健脾 !驱风散寒 !明目 o适用于脘腹胀满 !泄泻 !水肿 !
风湿痹痛 !风寒感冒 !雀目夜盲等 ≈t  ∀由于苍术的
生长周期长 o市场需求量日益增加 o加之对野生资源
的破坏等原因 o使得其原料药的供应不能满足临床
应用的需要 ≈u  ∀本研究用发根农杆菌侵染苍术无
菌苗叶片 o建立了苍术毛状根培养系统 o并利用 Š≤ 2
 ≥对生长 {周的毛状根挥发油成分进行了初步的
分析 ∀
1 材料和方法
1q1 材料
苍术 Α. λανχεα种子由湖北中医学院詹亚华教
授鉴定并提供 ∀无菌苗由本实验室培养 ≈u  ~发根农
杆菌 Αγροβαχτεριυµ ρηιζογενεσ„w菌株由中国科学院
植物研究所叶和春研究员赠送 ∀
1q2 方法
1q2q1 农杆菌的活化 挑取发根农杆菌 „w单菌
落于 ≠∞…培养基中 ou{ ε 下振荡过夜 o备用 ∀
1q2q2 发根农杆菌转化苍术 将苍术无菌苗叶片
切成小块 o放置到  ≥培养基上 v §后 o采用叶盘法
用发根农杆菌 „w侵染 ts °¬±∀放置于铺有无菌滤
纸的  ≥培养基上 v §后 o转到含有 xss °ª# pt ≤¥
的  ≥培养基上 ow周后可以观察到毛状根的形成 ∀
1q2q3 苍术毛状根的培养 切下侵染部位长出的
毛状根 o每条毛状根分别接种于含有 xss °ª# pt
≤¥的  ≥培养基上 o每隔 z §转接 t次 o经 v ∗ x次
继代培养获得除菌的毛根系 ∀毛根系在不含激素的
 ≥培养基中保存和繁殖 ∀
1q2q4 毛状根的 °≤• 检测 用 ≤ׄ…法提取抗性
毛状根的总 ⁄‘„o根据 µ²¯„已报道序列 kŠ ±¨ …¨¤±®}
÷tuxz|l设计 °≤• 检测引物 }„toxχ2„Š≤Š××≤ŠŠ„2
≤„Š≤≤„≤≤„2vχ~ „uo xχ2ŠŠ≤Š×ŠŠ„„„׊„„×≤Š„
„ Š„≤ 2vχ∀反应体系为 }us1s ˏ§§‹u ’ou1x ˏts
≅ …∏©©¨µos1x ˏ§‘×°kts °°²¯ # pt l os1x ˏvχ
³µ¬° µ¨ktss ±ª# ˏpt los1x ˏxχ³µ¬° µ¨ktss ±ª#
ˏpt los1x Λ×¤´ 酶 kx ˜# ˏpt los1x ˏ基因组
⁄‘„kt Λª# ˏpt l∀反应条件为 }|w ε 变性 vs ¶o
yu ε 退火 t °¬±ozu ε 延伸 u °¬±ovs个循环后 ozu
ε 保温 x °¬±∀
1q2q5 苍术毛状根挥发油的提取 取苍术毛状根
洗净 ovs ε 烤箱干燥后 o粉碎 o根据药典挥发油测定
方法 ≈u  o精密称取茅苍术细粉 s1t ªo用 s1x °醋酸
#svwu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uu
‘²√ °¨¥¨ µo ussz