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Evaluation of targeting property for Kuikang colon targeted pelletsZHANG Ya-jun1, LI Jiang-ying2, XU Lian-ying3

溃康结肠靶向微丸靶向性评价研究



全 文 :溃康结肠靶向微丸靶向性评价研究
张亚军1,李江英2,徐莲英3
(1.西北大学 生命科学学院,陕西 西安 710069;
2.西安市中医医院,陕西 西安 710001;3.上海中医药大学,上海 201203)
[摘要] 目的:探索大鼠胃肠药物浓度测定评价溃康结肠靶向微丸的可行性。方法:HPLC测定黄芩苷和黄芩
素的含量,比较给药3h和6h后,靶向微丸和普通微丸在大鼠胃肠道中药物浓度差异。结果:给药3h后,靶向微丸
组大鼠胃肠道中黄芩苷原形的回收率约70%,明显高于普通微丸组(约20%),微丸形状完整,大部分集中于小肠下
段,表明其释药部位为小肠下段或结肠;6h后,药物以黄芩素形式分布于大肠,证明制剂释药完全。结论:在体测定
胃肠道中黄芩苷的残余量,适用于溃康结肠靶向微丸的靶向性评价。该制剂能使药物达到结肠靶向给药效果。
[关键词] 溃康结肠靶向微丸;黄芩苷;黄芩素
[中图分类号]R283 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)13155603
[收稿日期] 20071029
[通讯作者] 张亚军,Tel:(029)88302707,Email:zyjljy@
163com
  溃康结肠靶向微丸(KCP)处方由黄芩、白芍和
甘草组成,经提取纯化得到有效组分(其中黄芩提
取黄芩苷,纯度 >90%),加辅料微晶纤维素、交联
聚维酮等制成素丸,外包衣膜 Eudragit S制备而
成,用于治疗溃疡性结肠炎。KCP为 pH依赖型结
肠靶向制剂,释药部位为回盲部或结肠[1],在体靶
向性评价是项目研究的重要环节。目前,口服结肠
靶向制剂在体评价方法有血药浓度测定、γ闪烁扫
描法、医用X射线法等[2]。γ闪烁扫描法或医用X
射线法可使制剂崩解的时间和部位“可视化”,然而
对于微丸这种分散剂量型给药系统,丸粒在体内呈
弥散型分布,与放射活性物质从制剂中释放后的表
现并没有典型区别。文献多将丸粒直径增大,志愿
者服用后透射观察[34]。作者以方中成分黄芩苷为
指标,在前期血药浓度研究结果基础上,解剖观察大
鼠胃肠道中微丸转运状况,测定其中黄芩苷及其分
解产物黄芩素的浓度,探索KCP靶向性评价方法。
1 材料
Agilent1100系列高效液相色谱仪;LXJ-ⅡB
低速大容量多管离心机(上海安亭科学仪器厂);
SK5200H超声清洗仪(上海科导超声仪器有限公
司);KCP及溃康普通微丸(上海中医药大学制备);
黄芩苷(110715200514)和黄芩素(111595200301)
对照品(中国药品生物制品检定所)。
清洁级雄性Wistar大鼠,体重(250±20)g,由
中国科学院上海实验动物中心提供,合格证号中科
动管003号。
2 方法和结果
2.1 大鼠胃肠内容物中黄芩苷和黄芩素测定方法
学考察 ①色谱条件:KromasilC18色谱柱(46
mm×250mm,50μm);流动相 A02%磷酸水溶
液,B乙腈,梯度洗脱程序:0~7min,29% ~29%
B;7~10min,29% ~43%B;10~17min,43% ~
43%B,17~19min,43% ~29%B;流速 10mL·
min-1;检测波长280nm;进样量10μL。②对照品
溶液的制备:精密称取黄芩苷和黄芩素对照品,用甲
醇配制成浓度分别为1254,1274mg·L-1黄芩苷
和黄芩素对照品混合溶液。③方法专属性试验:大
鼠禁食8h,1%戊巴比妥腹腔注射麻醉,剪取胃肠
道,置50mL烧杯中,用5mL1mmol·L-1KH2PO4
冲洗肠管内容物,并纵向剪开,用玻璃棒捣碎内容
物,连同胃体和肠管碎片转移至锥形瓶中,加甲醇
40mL,超声50min,离心(5000r·min-1)。取上清
液置50mL量瓶中,定容,滤过,即得胃肠内容物空
白对照。另取大鼠给药4h后(普通微丸)胃肠样品
溶液,注入液相色谱仪中。结果大鼠胃肠内容物对
黄芩苷和黄芩素的测定无干扰。④线性关系考察:
取大鼠胃肠内容物约1mL,按“专属性试验”项下方
法,精密加入黄芩苷和黄芩素对照品储备液,制成不
同浓度的对照品混合溶液,其中黄芩苷质量浓度为
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第33卷第13期
2008年7月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 13
July,2008
3135,627,1254,3135,627,1254mg·L-1,黄
芩素为3185,637,1274,3185,637,1274mg·
L-1。精密量取10μL,注入液相色谱仪,记录色谱
峰。以峰面积平均值 Y对进样质量浓度 X(mg·
L-1)线性回归,黄芩苷和黄芩素的回归方程分别为
Y=3145X+2351,r=09991;Y=4724X+
2419,r=09991。结果表明,黄芩苷在 3135~
1254mg·L-1,黄芩素在3185~1274mg·L-1线
性关系良好。⑤精密度和回收率考察:精密量取黄
芩苷和黄芩素对照品储备液,加至胃肠内容物中,依
法操作,计算黄芩苷高、中、低质量浓度(878,
4389,627mg·L-1)的精密度为286%,157%,
366%,回收率分别为 923%,902%,868%
(n=3);黄芩素高、中、低质量浓度(892,4459,
637mg· L-1)的 精 密 度 为 194%,139%,
198%,回收率分别为957%,935%,898%(n=
3)。由于甲醇加入后内容物有大量沉淀析出,致部
分成分损失,回收率稍低,但能满足实验要求。⑦稳
定性考察:于胃肠内容物中加入黄芩苷和黄芩素对
照品,制备供试品溶液。分别于0,3,6,9h进样,记
录峰面积。结果 RSD分别为085%,138%,表明
样品的稳定性良好。
2.2 给药后大鼠胃肠内容物中黄芩苷、黄芩素测定
血药浓度测定结果显示(另文报道),给予大鼠
KCP3h内,血浆中未测到黄芩苷,而普通微丸组从
给药10min开始,均有黄芩苷检出。故确定给药3
h后,观察微丸在大鼠肠道的位置和形态,测定指标
成分的含量。因为6h后药物全部进入结肠,通过
胃肠道黄芩苷的测定,反映制剂是否释放完全。
20只大鼠禁食 8h,插管灌胃 KCP111mg·
kg-1、普通微丸100mg·kg-1(相当于黄芩苷20mg·
kg-1,按黄芩素计为12mg·kg-1)。同2.1.3项下
方法操作,于给药3,6h后取大鼠胃,空肠、回肠上段
和下段(各为1/3小肠长度),大肠,测定黄芩苷和黄
芩素的含量,计算回收率,黄芩苷回收率=胃肠中黄
芩苷量/黄芩苷给药量×100%,黄芩素回收率=胃肠
中黄芩素量/黄芩苷给药量以黄芩素计的折算量 ×
100%,结果见表1。结果显示,普通微丸组大鼠给药
3h后,胃肠道内黄芩苷原形的回收率约20%,而6h
后,主要以黄芩素形式分布大肠中。KCP给药3h
后,观察到多数微丸完整分布于回肠下段,测定其中
黄芩苷的回收率约70%,表明此时药物尚未释放或
大部分未释放,参照血药浓度测定结果,推断KCP释
药部位为大鼠小肠下段和结肠。6h后胃肠道中看不
到完整的微丸,以大肠内容物中黄芩素的分布为主,
说明黄芩苷已释放完全,被大肠细菌酶解为黄芩素。
表1 溃康微丸在大鼠胃肠道黄芩苷和黄芩素回收率(n=5)
微丸 分布位置
黄芩苷/%
3h 6h
黄芩素/%
3h 6h
溃康普通 胃    376±124 <1 468±413 221±188
  空肠   134±113 0 0 <1
  回肠上段 429±231 <1 <1 0
  回肠下段 926±317 <1 <1 <1
  大肠   112±024 <1 163±125 121±291
溃康靶向 胃    <1 0 <1 <1
  空肠   <1 0 0 0
  回肠上段 1902±825 <1 0 0
  回肠下段 4826±918 123±053 43±127 <1
  大肠   178±046 378±133 197±168 3358±895
3 讨论
pH依赖型结肠靶向给药制剂的稳定性和重现
性好,虽然由于个体差异可能引起药物提前或滞后
释放,减少了释药系统的准确性,但经多年临床研究
证实具有结肠靶向制剂的治疗特点和优势,仍是当
前开发结肠靶向制剂最有效的方法[5]。本实验显
示,2种微丸在大肠中均有黄芩素检出,说明对于结
肠炎疾病,黄芩苷可能是通过局部作用途径发挥疗
效。另一方面,普通微丸给药后,黄芩苷在胃中有的
以原形存在,有的转变为黄芩素,部分被吸收入血;
进入小肠后,黄芩苷在小肠中有吸收、转化和代谢,
而KCP给药后,大鼠小肠中检测到比普通微丸组更
多黄芩苷原形。这些结果表明黄芩苷适于制成结肠
靶向制剂,本制剂剂型选择合理,具有结肠靶向给药
性能。
[参考文献]
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tivecolitis:relevancetomesalazinetherapy[J].AmJGastroen
terol,1993,33:1581. (下转第1604页)
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第33卷第13期
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tacellineestablishedfromatransgenicNOD/Ltmouse[J].Dia
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EfectofSupplementedTaorenChengqidecoctiononNIT1,
apancreaticβcelfromatransgenicNOD/Ltmouse
MENGFanmin1,ZHAOYuying1,WANGHong2,ZHANGYansong1,LIQingyan1,LILiying3,ZHANGQingying1
(1.DepartmentofNaturalMedicinesandtheStateKeyLaboratoryofNaturalandBiomimeticDrugs,
SchoolofPharmaceuticalSciences,PekingUniversityHealthScienceCenter,Beijing100083,China;
2.StemCelResearchCenter,PekingUniversityHealthScienceCenter,Beijing100083,China;
3.CelBiologyDepartment,CapitalMedicalUniversity,Beijing100069,China)
  [Abstract] Objective:TostudytheefectofSupplementedTaorenChengqidecoction(STCD)onthesecretionofinsulinand
proliferationofNIT1.Method:TheefectofSTCDandtheserumofratafteroralyadministratingofSTCDonthesecretionofinsulin
andproliferationofNIT1werestudied.TheproliferationofNIT1wasmeasuredby3HTdRincorporationandcelcountingmethods,
whilethesecretionofinsulinwasmeasuredfromtheculturedmediumbytheultrasensitiveratinsulinELISIAkit.Result:Boththe
STCDandtheserumofratafteroralyadministratingofSTCDsignificantlycouldincreasedthesecretionofinsulinandproliferationof
NIT1.Conclusion:ThetreatmentofthediabeticpatientsbySTCDmightbethroughwithitsimprovementofsecretionofinsulinand
proliferationonpancreaticβcel.
[Keywords] diabetesmelitus;SupplementedTaorenChengqidecoction;NIT1 [责任编辑 古云侠]
(上接第1557页)
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EvaluationoftargetingpropertyforKuikangcolontargetedpelets
ZHANGYajun1,LIJiangying2,XULianying3
(1.ColegeofLifeScience,NorthwestUniversity,Xi'an710069,China;
2.Xi'anHospitalofTraditionalChineseMedicine,Xi'an710001,China;
3.ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai201203,China)
  [Abstract] Objective:ToevaluatecolontargetingcharacteristicofKuikangcolontargetedpelets(KCP)withdeterminationofre
sidualbaicalinandbaicaleinconcentrationingastrointestinaltract(GIT).Method:ThebaicalinandbaicaleinwereassayedbyHPLC.The
recoverydiferencesofthedrugbetweenKCPandconventionalpeletsfromGITwereinvestigated,threeandsixhoursafteradministration.
Result:ThebaicalinrecoveryofKCP(70%)fromratGITwashigherthanthatofCP(about20%).MostofKCPwereintactat3hafter
oraladministration,anddistributedinlowerileum.ItindicatedthatreleasesiteofKCPwasinlowerileumandcolon.Sixhourslater,a
smalamountofbaicalinwasrecoveredinintestime,whichshowedthatthereleaseofbaicalinfromKCPwascomplete.Conclusion:Thede
terminationofresidualbaicalininratGITwasfeasibilityforevaluatingKCP.TheresultconfirmedKCPofcolontargetingproperty.
[Keywords] Kuikangcolontargetedpelets;baicalin;baicalein [责任编辑 鲍 雷]
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