全 文 ：直径不小于０３ｃｍ，间有破短节子，无根须、虫蛀、霉
变。
３９２ 质量监测 有效成分含量测定参照《中国
药典》２０００年版附录 ＶＩＤ高效液相色谱法测定，本
品含黄芪甲苷（Ｃ４２Ｈ６２Ｏ１６）不得少于００４０％。
农药残留含量测定参照国家外经贸部２００１年７
月颁布的《药用植物及制品进出口绿色行业标准》。
六六六≤０１ｍｇ·ｋｇ－１；ＤＤＴ≤０１ｍｇ·ｋｇ－１；五氯硝
基苯ＰＣＮＢ＜０１ｍｇ·ｋｇ－１；艾氏剂 Ａｌｄｒｉｎ≤００２ｍｇ·
ｋｇ－１。
重金属含量检测参照《中国药典》２０００年版附
录 ＩＸ重金属检查法。参照国家外贸部２００１年颁发
的《药用植物及制品进出口绿色行业标准》。重金属
总量≤２００ｍｇ·ｋｇ－１；铅（Ｐｂ）≤５０ｍｇ·ｋｇ－１；镉（Ｃｄ）
≤０３ｍｇ·ｋｇ－１；汞（Ｈｇ）≤０２ｍｇ·ｋｇ－１；砷（Ａｓ）≤２０
ｍｇ·ｋｇ－１。
４ 包装、贮藏、运输
黄芪晾干后捆把用麻袋打包，每件 ５０ｋｇ，要贮
藏于通风干燥处理，３０℃以下，相对温度 ６０％～
７５％，商品安全含水量１０％～１３％，本品易吸潮后发
霉，虫蛀，为害的仓库害虫有家茸天牛、咖啡豆象、印
度谷螟，贮藏期应定期检查、消毒，经常通风，必要时
可以密封氧气充氮养护，发现虫蛀可用磷化铝等薰
蒸。
ＳｔａｎｄａｒｄｏｐｅｒａｔｉｎｇｐｒｏｃｅｄｕｒｅｆｏｒＡｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ
ＹＡＮＧＣｈｕｎｑｉｎ，ＺＨＡＮＧＬｉｐｉｎ，ＳＵＮＭｉｎｇｓｈｕ，ＺＨＡＯＹｏｎｇｈｕａ
（１ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ
ａｎｄＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｅｎｓｕｒｅｔｈｅｓｕｐｅｒｉｏｒｑｕａｌｉｔｙａｎｄｓａｆｅｔｙｏｆｔｈｅｒａｗｍａｔｅｒｉａｌｓｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂａｌｍｅｄｉｃｉｎｅ，ａｓｔａｎｄａｒｄｏｐｅｒａｔｉｎｇ
ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｆｏｒａｓｔｒａｇａｌｕｓｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｏｎｔｈｅｂａｓｅｏｆｔｈｅＧＡＰｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂａｌｍｅｄｉｃｉｎｅａｓｗｅｌａｓｐｒａｃｔｉｃｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｅｒｉ
ｍｅｎｔｓＴｈｉｓｓｔａｎｄａｒｄｏｐｅｒａｔｉｎｇｐｒｏｃｅｄｕｒｅｐｒｏｖｉｄｅｓｔｈｅｔｅｃｈｎｉｃａｌｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒａｓｔｒａｇａｌｕｓ’ｓｇｒｏｗｉｎｇ，ｆｉｅｌｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔ，ｃｏｎｔｒｏｌｉｎｇｏｆｔｈｅ
ｄｉｓｅａｓｅｓａｎｄｐｅｓｔｓ，ｈａｒｖｅｓｔｉｎｇ，ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，ｐａｃｋｉｎｇ，ｓｔｏｒｉｎｇ，ｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇａｎｄｑｕａｌｉｔｙｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ；ＧＡＰ；ｓｔａｎｄａｒｄｏｐｅｒａｔｉｎｇｐｒｏｃｅｄｕｒｅ
［责任编辑 张宁宁］
［收稿日期］ ２００５０７１４
［基金项目］ 国家“十五”攻关项目（２００１ＢＡ７０１Ａ５５１４）
［通讯作者］ 肖永庆，Ｔｅｌ：（０１０）８４０４０２２１
ＨＰＬＣ梯度洗脱法测定防风中 ４种主要成分含量
李 丽，刘元艳，耿立冬，肖永庆
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：在原有防风ＨＰＬＣ含量测定方法基础上改进测定条件。方法：应用ＨＰＬＣ法，以防风中４种主要
成分为指标；采用ＡｌｔｉｍａＣ１８（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）色谱柱，以甲醇水梯度洗脱，流速１０ｍＬ·ｍｉｎ
－１。结果：运用
梯度洗脱，建立防风中防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷，防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷，防风色原酮Ⅰ，防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷的
ＨＰＬＣ含量测定方法，与前方法相比测定结果无显著性差异。结论：ＨＰＬＣ梯度洗脱法测定防风中４种主要成分含
量比原方法（两种流动相系统）简便、易于操作。
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第３１卷第３期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３１，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６
［关键词］ 防风；化学成分；含量测定；ＨＰＬＣ；梯度洗脱
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）０３０１９４０３
防风为伞形科植物防风 Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａｄｉｖａｒｉｃａｔａ
（Ｔｕｒｃｚ）Ｓｃｈｉｓｃｈｋ未抽花茎的干燥根。作者曾用两
种流动相系统分别测定防风中的 ４种主要成
分［１，２］，即甲醇水（４０∶６０）（测定防风色原酮Ⅰ葡萄
糖苷，防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷，防风色原酮Ⅰ）；甲醇
水（５０∶５０）（测定防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷）。原方法
虽能较好的测定上述４种成分，但须分别进行，操作
烦琐、费时。因此，拟改进色谱洗脱条件，可同时测
定４种成分，使操作简便快捷且测定结果与原方法
所测结果无显著性差异。
１ 仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００泵高效液相色谱仪，包括四元溶剂
泵，脱气机，柱温箱，光电二级管阵列检测器，自动进
样器及软件（美国），ＫＱ－１００型超声波清洗器（昆山
市超声仪器有限公司）。液相色谱流动相用甲醇（天
津市四友生物医学技术有限公司），水为纯水，其他
试剂均为分析纯。
对照品防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷、防风色原酮Ⅱ
葡萄糖苷、防风色原酮Ⅰ、防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷
（分别以ａ，ｂ，ｃ，ｄ表示）由本研究室从防风药材中分
离鉴定，纯度均为９８％以上。实验药材及饮片样品
购自各地药材公司或产地，经中国中医科学院中药
研究所谢宗万教授鉴定为 Ｓｄｉｖａｒｉｃａｔａ。
２ 含量测定方法学考察
２１ 色谱条件 ＡｌｔｉｍａＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×１５０
ｍｍ，５μｍ），ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ保护住，甲醇水梯度洗脱（见
表１），检测波长２５４ｎｍ，流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温３５
℃。在此条件下防风中对照品ａ，ｂ，ｃ，ｄ与其他组分
均能达到基线分离（见图１）。
图１ 防风样品ＨＰＬＣ色谱图
ａ防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷；ｂ防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷；
ｃ防风色原酮Ⅰ；ｄ防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷
表１ 流动相比例
时间／ｍｉｎ 水／％ 甲醇／％
０ ６５ ３５
１５ ６５ ３５
２５ ４５ ５５
３５ ４５ ５５
４０ ０ １００
２２ 线性关系的考察 精密称取 ａ，ｂ，ｃ，ｄ对照品
各适量，加甲醇分别配成００３８８，００３９６，００２９２，
００２７０ｍｇ·ｍＬ－１的对照品溶液。ｂ，ｃ，ｄ分别进样１，
３，５，７，９μＬ，ａ分别进样２，４，６，８，１０μＬ，每个样品进
样２次，以进样量（μｇ）为横坐标，峰面积为纵坐标绘
制标准曲线，并计算回归方程，见表 ２。结果表明，
防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷在００７７～０６９８μｇ，防风色
原酮Ⅱ葡萄糖苷在００３９６～０３５６μｇ，防风色原酮
Ⅲ葡萄糖苷在 ００１８～０１６２μｇ，防风色原酮Ⅰ在
００２９２～０２６３μｇ有较好的线性关系。
表２ 防风中４种主要成分回归方程
对照品名称 回归方程 ｒ
防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷 Ｙ＝－７４８２＋１６０４９０Ｘ ０９９９９
防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷 Ｙ＝－４２３＋１７７１３１Ｘ ０９９９９
防风色原酮Ⅰ Ｙ＝－６９７５＋３２３８１２Ｘ ０９９９９
防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷 Ｙ＝－１９４２５＋２８０８１６７Ｘ ０９９９８
２３ 精密度试验 精密吸取上述４种对照品溶液，
重复进样５次，结果对照品 ａ，ｂ，ｃ，ｄ峰面积积分值
的ＲＳＤ分别为０９５％，１５％，１１％，２２％。
２４ 稳定性试验 精密吸取供试液溶液４μＬ，分别
于０，２，４，６，１２ｈ重复进样共６次，由峰面积值 ＲＳＤ
结果均小于２０％，供试品溶液在１２ｈ内保持稳定。
２５ 重复性试验 取齐齐哈尔防风样品粉末５份，
各约０５ｇ，精密称定，制备成供试品溶液，并进行测
定，结果以对照品ａ，ｂ，ｃ，ｄ计算，５次测定值的 ＲＳＤ
分别为２２％，１４％，２４％，２２％。
２６ 加样回收试验 精密称定已知含量的大庆防
风样品粉末０２５ｇ，精密加入适量防风色原酮Ⅰ葡
萄糖苷，防风色原酮Ⅰ，防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷，防
风色原酮Ⅲ葡萄糖苷，按供试品溶液制备及测定法
操作，进行色谱分析，结果见表３。
２７ 样品测定 取防风药材、饮片各约０５ｇ，精密
称定，精密加入甲醇 ２５ｍＬ，称定重量，回流提取 ２
ｈ，取出，放至室温，称重，以甲醇补足减失的重量，摇
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第３１卷第３期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３１，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６
表３ 防风中４种成分的加样回收率
对照品
药材含量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
防风色原 ０７４４ ０７５２ １４８５ ９８５ ９９９ １６
酮Ⅰ葡萄糖 ０７３６ １４８１ ９９１
苷 ０７３５ １４９０ １００４
０７４９ １５２０ １０２５
０７５０ １４９４ ９８９
防风色原 ０７３２ ０７２６ １４６２ １００６ １０１２ １５
酮Ⅱ葡萄糖 ０７２４ １４４８ ９９７
苷 ０７２３ １４７２ １０３２
０７３６ １４６２ １０００
０７３７ １４８０ １０２３
防风色原 ０１９０ ０１８５ ０３７２ ９８４ １００１ １５
酮Ⅰ ０１８８ ０３７４ １００５
０１８８ ０３７１ ９８９
０１９２ ０３８１ １０２２
０１９２ ０３７８ １００５
防风色原 ０１１０ ０１１８ ０２３０ １０１７ １００２ １９
酮Ⅲ葡萄糖 ０１０９ ０２２５ ９８３
苷 ０１０９ ０２２５ ９８３
０１１１ ０２２９ １０００
０１１１ ０２３２ １０２５
匀，滤过，过微孔滤膜［３］。准确吸取对照品溶液各５
μＬ，供试品溶液４μＬ，注入液相色谱仪，按测定法进
行测定。结果见表４。
表４ 样品中４种主要成分的含量 ％
来源
防风色原酮
Ⅰ葡萄糖苷
防风色原酮
Ⅱ葡萄糖苷
防风色
原酮Ⅰ
防风色原酮
Ⅲ葡萄糖苷
齐齐哈尔 ０５６２ ０２８３ ００５９ ００５０
内蒙古 ０５４３ ０２５４ ００６２ ００４７
大庆 ０２９７ ０２９２ ００７６ ００４４
黑龙江 ０３９０ ０１６６ ００２４ ００２２
亳州 ０３８７ ０３５７ ００６９ ００３１
杜尔伯特 ０１９４ ０１５９ ００３４ ００２０
３ 与原含量测定方法［３］比较 结果见表５。
４ 结论
运用甲醇水梯度洗脱，可在３５ｍｉｎ内对防风中
的４种主要成分进行含量测定，且测定结果与原方
法（等度洗脱，２个溶剂系统）基本相同，表明 ＨＰＬＣ
梯度洗脱法测定防风中４种主要成分含量比原方法
简便、易于操作。
表５ ２种方法测定结果比较 ％
来源
防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷
新方法 原方法
防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷
新方法 原方法
防风色原酮Ⅰ
新方法 原方法
防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷
新方法 原方法
齐齐哈尔 ０５６２ ０５５６ ０２８３ ０２９０ ００５９ ００６４ ００５０ ００５８
内蒙古 ０５４３ ０５５１ ０２５４ ０２５３ ００６２ ００６７ ００４７ ００４３
大庆 ０２９７ ０２９４ ０２９２ ０３０３ ００７６ ００７５ ００４４ ００４８
［参考文献］
［１］ 肖永庆，杨 滨，姚三桃，等 防风质量标准的研究 中国中药
杂志，２００１，２６（３）：１８５
［２］ 肖永庆，李 丽，杨 滨，等 防风化学成分研究 中国中药杂
志，２００１，２６（２）：１１７
［３］ 李 丽，张 村，刘元艳，等 防风药材质量标准研究 北京中
医药大学学报，２００５，２８（３）：５８
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｆｏｕｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｒｏｏｔｏｆ
ＳａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａｄｉｖａｒｉｃａｔａｂｙＨＰＬＣｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ
ＬＩＬｉ，ＬＩＵＹｕａｎｙａｎ，ＧＥＮＧＬｉｄｏｎｇ，ＸＩＡＯＹｏｎｇｑｉｎｇ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｒｏｏｔｏｆＳａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａｄｉｖａｒｉｃａｔａＭｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ
ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｆｏｕｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗａｓａｃｈｉｅｖｅｄｏｎａｒｅｖｅｒｓｅｄｐｈａｓｅＡｌｔｉｍａＣ１８ｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈＭｅＯＨＨ２Ｏｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎａｔａｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１０ｍＬ
·ｍｉｎ－１Ｒｅｓｕｌｔ：Ｓｉｘｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄａｎｄｔｈｅｒｅｉｓｎｏｄｉｓｔｉｎｃｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｅｎｅｗａｎｄｏｌｄｍｅｔｈｏｄｓ．
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｎｅｗｍｅｔｈｏｄｉｓｍｏｒｅｓｉｍｐｌｅａｎｄｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔｔｈａｎｔｈｅｏｌｄｍｅｔｈｏｄ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａｄｉｖａｒｉｃａｔａ；ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ；ａｓｓａｙ；ＨＰＬＣ；ｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ
［责任编辑 张宁宁］
·６９１·
第３１卷第３期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３１，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６