免费文献传递   相关文献

Comparative Study on in vitro drug-release between Tuizhang ophthalmic gel and Tuizhang oculentum

退障凝胶与退障眼膏的体外释药比较



全 文 :样2种制备方法进行了考察,从色谱图上看,水稀释
液得到的色谱峰较多,又因急支糖浆有效成分以水
溶性酚酸类成分为主,故选择水稀释方法。
比较了磷酸甲醇系统、冰醋酸甲醇系统、磷酸
乙腈系统和冰醋酸乙腈等系统,实验结果表明在冰
醋酸乙腈系统条件下加入02%三乙胺,主要峰分
离度较好,在此条件下比较了30个不同的含02%
三乙胺的冰醋酸乙腈梯度比例,最后选择了本试验
流动相条件。作者采用二极管阵列检测器在200~
400nm检测,结果表明280nm下色谱峰的表观丰
度较高,并能充分反映样品组分全貌,基线也较为平
稳,故选择280nm为测定波长。
[参考文献]
[1] 中国药典[S].一部.2000:534.
[2] 中国药典[S].一部.2005:541.
[3] 杨修齐,卢 红.急支糖浆的鉴别探讨[J].中国药事,1998,12
(3):175.
[4] 杨水新,严建民,叶 勇.RPHPLC法测定急支糖浆中阿魏酸
的含量[J].中国中药杂志,2000,25(1):54.
[5] 邓开英,秦 剑,周祥敏.高效液相色谱法测定急支糖浆中盐
酸麻黄碱的含量[J].中国中药杂志,2002,27(1):32.
IdentificationofJizhisyrupusingHPLCfingerprint
QUQiaoling1,4,YANGBin1,WANGQianpeng2,YIChongqin2,XIAOYongqing1,WANGYongyan3
(1.InstistuteofChineseMateriaMedical,ChinaAcademyofTraditionalChineseMedicine,Beijing100700,China;
2.TaijiGroup.BeijingR&Dcenter,Beijing100054,China;
3.ChinaAcademyofTraditionalChineseMedicine,Beijing100700,China;
4.ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine,Chengdu610075,China)
[Abstract] Objective:ToestablishaHPLCfingerprintforquantitativeanalysisoftheactiveconstituentsofJizhisyrup.Meth
od:HPLCanalysiswasperformedonaZorbaxSbC18column(46mm×250mm,5μm),themobilephaseingradientelutionwas
composedofA:1% aceticacidsolution(including02% triethylamine)andB:acetonitrile,ataflowrateof10mL·min-1.The
columntemperaturewas30℃ andthewavelengthwas280nm.Result:21commonpeaksweretestedin10batchesofsamples.Com
paredwiththestandardfingerprint,thesimilarityofeachsamplewasgreaterthan099.Atthesametime,protocatechuicacid,proto
catechualdehyde,chlorogenicacid,cafeicacid,naringinandneohesperidinwerefoundinalsamples.Conclusion:Theestablished
methodcanbeusedforthequalitycontrolofJizhisyrup.
[Keywords] Jizhisyrup;HPLC;fingerprint
[责任编辑 鲍 雷]
[收稿日期] 20061008
[通讯作者] 张保献,Tel:(010)84014127
退障凝胶与退障眼膏的体外释药比较
王国华,聂其霞,李 慧,臧 琛,张保献,赵小妹
(中国中医科学院 中药研究所,北京 100700)
[摘要] 目的:比较退障凝胶与退障眼膏的体外释药特性,为研制退障凝胶提供依据。方法:以高效液相色谱
法测定释放介质中大黄素、大黄酚的含量,并以此为指标,采用透析法研究退障凝胶与退障眼膏的体外释放特性。
·386·
第32卷第8期
2007年4月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.32,Issue 8
April,2007
结果:退障凝胶中大黄素、大黄酚 24h的累积释放度分别为(983±11)%,(958±18)%,而眼膏剂仅为
(1062±07)%,(1046±04)%,退障凝胶释药较眼膏剂快且完全,提高了生物利用度。结论:退障凝胶具有良
好的缓释特性,作为眼部给药具有良好的开发前景。
[关键词] 退障凝胶;透析法;释放度;相似因子;大黄素;大黄酚
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)08068304
  退障眼膏原载于部颁标准中药成方制剂第12
册,主要有决明子、何首乌、木贼、谷精草等19味药
组成,具有明目退翳之功效,可用于治疗初发白内障
和角膜斑翳。现代研究表明,退障眼膏通过提高睫
关肌舒缩能力,增强晶状体弹性,抑制晶状体混浊发
展以及兴奋视网膜感光细胞的新陈代谢作用,进而
达到提高视力目的。原剂型为油膏剂,有油腻感、易
糊视且存在生物利用度低、患者依从性差的缺
点[1],为改善眼膏剂的不足,本试验以卡波姆等为
基质,制备了无油腻感、透明度好、黏附性好与眼粘
膜具有良好生物相容性凝胶剂,并对其体外释放特
性与眼膏剂进行了比较。
1 仪器与试药
ToyamaNTR553型溶出仪(富山产业株氏会
社);Waters2690高效液相色谱仪,Waters2487紫
外检测器(美国Waters公司);MD44(DM36)透析袋
(北京麒麟宏伟科技有限公司)。
卡波姆(美国卡乐康公司);大黄素对照品(批
号07569707,中国药品生物制品检定所);大黄酚
对照品(批号110796200412,中国药品生物制品检
定所);甲醇(色谱纯);凡士林;羊毛脂;液体石蜡;
磷酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠均为分析纯。
等渗磷酸缓冲盐溶液(PBS,1000mL溶液中含
NaH2PO4160g,Na2HPO4758g,NaCl432g)。
2 方法与结果
2.1 退障凝胶的制备 取卡波姆加适量蒸馏水溶
胀过夜,再加入适量保湿剂、防腐剂、抗氧剂及 pH
调节剂,搅匀,得凝胶基质;取处方量的中药提取物
与以上基质混匀,得退障凝胶。
2.2 退障眼膏的制备 将适量的凡士林、羊毛脂、
液体石蜡在60℃ 水浴中融化搅匀,得油膏基质,再
加入处方量的中药提取物,混匀,即得退障眼膏。
2.3 大黄素、大黄酚的测定方法
2.3.1 对照品溶液的制备 精密称取大黄素、大黄
酚对照品适量,加甲醇制成每1mL含大黄素1218
μg,大黄酚1920μg的混合标准溶液。
2.3.2 供试品溶液的制备 取“体外释药试验”项下
的释放液,加入12mL盐酸,50mL三氯甲烷,水浴回
流1h,取出,立即冷却,分取三氯甲烷层,酸水液用三
氯甲烷萃取3次,每次30mL,合并三氯甲烷液,水浴
蒸干,残渣加甲醇使溶解,转移至5mL量瓶中,加甲
醇至刻度。
2.3.3 空白对照溶液的制备 按处方比例称取不
含决明子、何首乌的药材,水提醇沉后,得缺决明子、
何首乌的中药提取物,按2.2方法制成缺决明子、何
首乌阴性凝胶样品,按“体外释药试验”方法进行试
验,再按2.3.2方法处理释放液,得空白对照溶液。
2.3.4 色谱条件及系统适用性试验 色谱柱 Kro
masilC18(46mm×250mm,5μm);流动相甲醇
01%磷酸溶液(82∶18);流速1mL·min-1;检测波
长254nm;柱温30℃。在上述色谱条件下,精密吸
取大黄素、大黄酚混合对照品10μL,空白对照溶液
和供试品溶液各20μL注入色谱仪,测定,得到大黄
素、大黄酚对照品,空白对照与供试品的色谱图,见
图1。在该色谱条件下,大黄素、大黄酚与其他组分
能达到基线分离,其他药味及凝胶辅料对大黄素、大
黄酚的测定无干扰。
图1 退障凝胶HPLC图
A.大黄素、大黄酚混合对照品;B.空白对照;C.供试品;
1.大黄素;2.大黄酚
2.3.5 标准曲线的制备 分别精密量取2.3.1的
混合对照品溶液4,8,10,12,16,20μL注入液相色
谱仪,按2.3.4的色谱条件测定,分别以色谱峰面积
为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线,计算回
归方程。大黄素Y1=463×10
6X1-281×10
3(r=
09999,n=6),线性范围4872~2436ng;大黄酚
Y2=570×10
6X2-622×10
3(r=09999,n=6),
·486·
第32卷第8期
2007年4月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.32,Issue 8
April,2007
线性范围7680~3840ng。
2.3.6 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液,在
所确定的色谱条件下,进样20μL,重复进样6次,
分别测定大黄素、大黄酚的峰面积,并计算相对标准
偏差,结果RSD分别为074%,029%。
2.3.7 加样回收率试验 采用加样回收法,精密量
取已知含量的释放液6份,分别加入一定量的大黄
素、大黄酚对照品,按2.3.2方法制备成供试品溶
液,按2.3.4的色谱条件测定,结果平均回收率分别
为9965%,9847%,RSD分别为096%,117%。
2.4 体外释药试验 精密称取样品5g,置透析袋
中(每只袋长 6cm),两头用线在一定距离处扎紧
(除去袋内气泡),剪去两端,置于转篮,并放入溶出
杯中。释放介质为PBS500mL,PBS的温度控制在
(34±1)℃,转篮速度为100r·min-1,每隔一定时
间取样 50mL,然后补加相同温度,相同体积的
PBS。
取50mL释放液,按2.3.2方法制备供试品,20
μL进样,测定大黄素、大黄酚的峰面积,计算大黄
素、大黄酚浓度。按照以下公式计算累积释药量:
Qn=500Cn+50∑
n-1
i=1
Ci(Q1=500C1,n=1,2,3…,i=n-1)
  式中Ci为释放液中药物浓度,Qn为药物累积释
放量,Cn为第 n次所取的样品浓度,i,n分别为取样
次数。
2.5 退障凝胶与退障眼膏的体外释药比较
2.5.1 2种剂型中大黄素的释放比较 测定退障凝
胶与退障眼膏24h内大黄素的累积释放率,见图2。
图2 凝胶、眼膏中大黄素的累积释放曲线
由图2可知,凝胶剂与眼膏剂中大黄素在 PBS
中的体外释药有明显差异,释药速率凝胶剂远大于
眼膏剂;24h时,凝胶剂中大黄素的累积释放度达
(983±11)%,而眼膏剂仅为(1062±07)%,凝
胶剂的释放度约是眼膏剂的10倍。
2.5.2 2种剂型大黄酚的释放比较 测定退障凝
胶与退障眼膏24h内大黄酚的累积释放率见图3。
图3 凝胶、眼膏中大黄酚的累积释放曲线
  由图3可知,凝胶剂与眼膏剂中大黄酚在 PBS
中的体外释药有明显差异,释药速率凝胶剂远大于
眼膏剂;24h时,凝胶剂中大黄酚累积释放度达
(958±18)%,而眼膏剂仅为(1046±04)%,凝
胶剂的释放度约是眼膏剂的10倍。
2.5.3 凝胶中大黄素与大黄酚的释放比较 测定
退障凝胶24h内大黄素、大黄酚的累积释放率,见
图4。
图4 凝胶中大黄素、大黄酚的累积释放曲线
由图4可知,大黄素、大黄酚在凝胶剂中的释放
没有明显差异。
2.6 数据拟合处理
2.6.1 释放模型及释放机制拟合 利用 Statistica
60软件,对退障凝胶和眼膏的释放数据进行零级、
一级、Higuchi[2],RitgerPeppas[3]方程拟合,零级方
程:P=a+bt;一级方程:P=a+bt1/2;Higuchi方程:
P=a+bt1/2;RitgerPeppas方程:LnP=a+nlnt。
各式中P是 t时刻的累积释放度;r为相关系
数,a为常数,b为零级、一级、Higuchi拟合方程的释
放参数,n为 RitgerPeppas方程拟合的释放参数,
Peppas认为,当 045<n<089时,药物释放为非
Fick扩散(即扩散和骨架溶蚀协同作用);当 n<
045时,为Fick扩散;当n>089时,为骨架溶蚀作
用,各方程拟合结果见表2。
2.6.2 相似因子拟合 拟合因子(fitfactor)包括差
异因子f1(diferencefactor)和相似因子 f2(similarity
factor),其中相似因子f2被 FDA推荐为比较2条释
放曲线相似性的首选方法[4],f2愈接近100,相似程
度越高。当f2在50~100时,表明2种制剂的体外
释放度相似或者等同。因此f2在缓控释制剂处方优
·586·
第32卷第8期
2007年4月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.32,Issue 8
April,2007
   表2 不同方程释放数据的拟合结果
组别 模式 方程 r n
大黄素(凝胶) zeroorder P=03449+00301t 09285  
  Higuchi P=00941+01924t1/2 09858  
  1storder ln(1-P)=00278-01628t 09872  
  Peppas ln(P)=-13936+04636lnt 09894 04636
大黄素(眼膏) zeroorder P=00530+00026t 09109  
  Higuchi P=00317+00164t1/2 09766  
  1storder ln(1-P)=00544-00028t 09266  
  Peppas ln(P)=-31198+02861lnt 09773 02861
大黄酚(凝胶) zeroorder P=03227+00303t 09232  
  Higuchi P=00661+01950t1/2 09819  
  1storder ln(1-P)=-01143-01242t 09266  
  Peppas lnP=-15449+05149lnt 09941 05149
大黄酚(眼膏) zeroorder P=00529+00027t 08279  
  Higuchi P=00282+001801t1/2 09260  
  1storder ln(1-P)=-00544+00029t 08325  
  Peppas lnP=-32535+03604lnt 09688 03604
化的评价指标中应用较多。f2的数学表达式为:
f2=50log{[1+

n∑
n-1
i=1
(Rt-Tt)2]-05×100}
式中Rt和Tt分别为 t时间点参比制剂和实验
制剂的累积释药率;n为取点数目。本试验将所得
凝胶组与眼膏组中的大黄素、大黄酚的释放数据按
上述公式进行计算,求得相似因子,见表3。
表3 各组相似因子
编号 Rt组 Tt组 f2
1 凝胶大黄素 眼膏大黄素 1257
2 凝胶大黄酚 眼膏大黄酚 1333
3 凝胶大黄素 凝胶大黄酚 7900
3 讨论
3.1 由图2,3可知,凝胶在释放介质中的释放分2
个阶段,第一阶段是前2h,这一阶段释药较快,大黄
素、大黄酚的累积释放度均在20%左右;第二阶段
为稳定的释药阶段,24h后大黄素、大黄酚的累积
释药均达90%以上,而眼膏剂释药度仅在 10%左
右,凝胶剂体外释药较眼膏剂完全,提高了生物利用
度。在相同剂量下,可以减少给药次数,能显著提高
患者的依从性。
3.2 由表2各方程拟合结果的相关系数可知,Rit
gerPeppas方程拟合较佳,由释放参数 n值可知,24
h内退障凝胶中大黄素、大黄酚的体外释放,均为非
Fick扩散,其释药机制主要由2个过程控制:①水的
渗透和扩散;②基质的水化和溶蚀。制剂中有效成
分之间不同的释放特性,影响制剂质量的稳定性和
可靠性,进而影响药效,所以在辅料筛选中应注意不
同有效成分的释放特性,不能仅以一种成份为指
标[5]。本试验以大黄素、大黄酚的累积释放率为指
标,由表3可知凝胶与眼膏的体外释药行为有差异,
大黄素与大黄酚在凝胶中的释放行为没有差异。
3.3 退障凝胶的基质选用卡波姆,以其为基质制成
的凝胶剂呈透明或半透明状,与眼黏膜耦合性好,对
眼黏膜无刺激作用,还可以增加药物在眼部的停留
时间,减少全身吸收,增加局部用药物的生物利用
度[6],是眼用制剂的发展方向。
3.4 凝胶在眼部的释药是一个复杂的过程,受多种
因素的影响,包括泪液的侵蚀、眨眼时的剪切等,本
试验旨在比较退障凝胶与退障眼膏的体外释药特
性,尚未对体外释药的条件进行全面考察,包括释放
介质的选择,释放介质的 pH、温度、用量,转篮的转
速等。凝胶的体外释药能否反映体内情况,有待于
进一步的研究。
[参考文献]
[1] 吕慧侠,周建平.眼部给药系统的研究进展[J].药学进展,
2004,28(3):104.
[2] HiguchiT.Rateofreleaseofmedicarnentfromointmentbasecon
tainingdruginsuspention[J].PharmSci,1961,50:847.
[3] RitigerPL,PeppasWA.Asimpleequationfordescriptionofsol
utereleaseⅡ.Fickianandanomalousreleasefromswelablede
vices[J].ControlRel,1987,5:37.
[4] 洪燕龙,冯 怡,徐德生.关于缓控释制剂的处方优化指标
[J].中国中药杂志,2006,31(1):15.
[5] 吴 清,陈贤春,杜守颖.缓释辅料对三七总皂苷缓释片中人
参皂苷Rg1,Rb1释药特性的影响[J].中国中药杂志,2004,29
(10):944.
[6] 陆肇曾,孙兴怀.眼部缓释制剂的应用研究进展[J].眼视光学
杂志,2005,7(1):71.
·686·
第32卷第8期
2007年4月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.32,Issue 8
April,2007
ComparativeStudyoninvitrodrugreleasebetween
TuizhangophthalmicgelandTuizhangoculentum
WANGGuohua,NIEQixia,LIHui,ZANGChen,ZHANGBaoxian,ZHAOXiaomei
(InstituteofChineseMateriaMedica,ChinaAcademyofCMS,Beijing100700,China)
[Abstract] Objective:ToprepareTuizhanggeltocurecataract,thecharacteristicsofTuizhanggelonthedrugreleasingin
vitrowereevaluatedbycomparedwithTuizhangoculentum.Method:Theemodinandchrysophanolinthereleasingmediatorwerede
terminedbyHPLC,andthedrugreleasingcharacteristicsofTuizhanggelandTuizhangoculentumwerestudiedbybagfiltermethod.
Result:TheemodinandchrysophanolinTuizhanggelreleased(983,11)%,(958,18)% within24hours,respectively,while
thoseinTuizhangoculentumreleased(1062,07)%,(1046,04)%,respectively.TheemodinandchrysophanolinTuizhanggel
releasedmorequicklyandcompletelythaninTuizhangoculentum,soTuizhanggelhasenhancedthebioavailability.Conclusion:The
Tuizhanggelischaracterizedbyslowreleasetosomedegree,anditshowsapromisingfutureonophthalmicdrugdelivery.
[Keywords] Tuizhanggel;bagfiltermethod;dissolution;similarityfactor;emodin;chrysophanol
[责任编辑 鲍 雷]
世界针灸学会联合会成立20周年暨世界针灸学术大会征文通知
为了展示世界针灸学会联合会成立20年来世界范围内针灸学术的研究成果,展示当前针灸学发展状况,促进国际针灸组
织间的交流与合作,“世界针灸学会联合会成立20周年暨世界针灸学术大会”将于2007年10月在中国北京隆重召开。
主办单位:世界卫生组织,世界针灸学会联合会,中国中医科学院;承办单位:中国针灸学会;支持单位:中国科学技术协
会,中华人民共和国卫生部,国家中医药管理局,中华人民共和国民政部。
大会主题:针灸医学的回顾与展望;大会时间:2007年10月20~22日;大会语言:中文、英文。
大会学术交流:大会将邀请国内、国际著名传统医学专家就针灸学发展的热点问题进行大会主题演讲;大会将以编辑论
文集和会场张贴形式进行书面学术交流;大会将以学术论坛的形式分主题进行现场学术交流。
大会论文征集:①征文内容 针灸基本理论的基础研究;针灸治疗技术的理论与实践;针灸在心脑血管病、肿瘤、艾滋病
等重大疾病中的防治作用;针灸在养生保健方面的运用;在城市社区、农村卫生院推广普及针灸治疗技术的经验;如何发挥针
灸在突发公共卫生事件中的作用;现代信息技术在针灸领域里的应用;现代针灸教育的模式、内容与方法的探讨;针灸的临床
评价与标准化规范化;针灸学发展中的知识产权保护;针灸医疗器械的研究与开发;针灸史研究及古代针灸名家经验。②征
文要求 论文务必主题鲜明、论据充分、资料翔实。文章篇幅在3000字左右,另附800字以内的中、英文摘要(以目的、方法、
结果、结论形式撰写)。文章最好是未曾公开发表过,务必写清作者姓名、职称、工作单位、联系地址(邮政编码)、联系电话、电
子邮箱。请用Word文档打印论文,通过邮局寄送,同时附3.5寸软盘或以E-mail发送。研究类论文和临床报道必须附单位
证明,以表明资料来源可靠、署名无争议、无需要保密内容。请自留底稿,恕不退稿。③每篇论文请交纳审稿费150元,论文摘
要如需代为翻译成英文或中文,另交翻译费200元。国外投稿者审稿费和翻译费共计50美金。请在投稿时一并寄出,未交费
稿件,恕不审理。④征文及审稿费邮寄地址:中国北京东直门内南小街16号《中国针灸》杂志社,邮政编码:100700联系人:王
平 电话:01084046331,Email:wfas2007x@yahoo.com.cn。⑤征文截止日期:2007年6月30日。
会议注册费用:2007年6月30日以前交费:国外代表400美元,陪同200美元;2007年7月1日以后交费:国外代表500
美元,陪同250美元;中国内地代表注册费为1200人民币,代表旅费、食宿费自理。
大会将设有传统医药展览,凡有关传统医疗机构的医疗特色宣传、传统医学培训与教育、传统医药材料与药品、与传统医
学相关的文化产品、医疗器具与材料均可参加展览。大会展览部联系地址:北京东直门内南小街16号世界针联522室,邮政
编码100700。联系人:卫元斌 电话:01064064402,传真:01064018354Email:wfas2007zh@yahoo.com.cn。
大会秘书处设在世界针灸学会联合会秘书处。有关大会详情可咨询:北京东直门内南小街16号,邮政编码100700。联
系人:杨宇洋。电话:01064021210,传真:01064018354。Email:wfas2007m@yahoo.com.cn。
·786·
第32卷第8期
2007年4月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.32,Issue 8
April,2007