全 文 ：茅莓总皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿
及血 2脑脊液屏障变化的影响
王继生 o邱宗荫 3 o李惠芝 o夏永鹏 o周成林
k重庆医科大学 药学院 o重庆 wssstyl
≈摘要   目的 }研究茅莓总皂苷 k×≥• °l对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血脑屏障通透性的影响 ∀方法 }
采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 o在大鼠脑缺血 u «再灌注 youwow{ozu «分别测定脑含水量和伊文
思蓝含量的变化及茅莓总皂苷各剂量组的影响 ∀结果 }与模型组比较茅莓总皂苷各剂量组均能不同程度降低脑含
水量和伊文思蓝含量 ∀结论 }茅莓总皂苷各剂量组显著降低缺血 u«再灌注 youwow{ozu «脑水肿和其对血脑屏障
通透性 o这可能是其减轻 Œr• 时脑水肿的机制之一 ∀
≈关键词   茅莓总皂苷 ~脑缺血 r再灌注 ~脑水肿 ~血脑屏障
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlus2utyy2sw
≈收稿日期   ussz2sx2s{
≈基金项目   重庆市重大科技攻关项目 ≈渝科发计字 kusswluz
号  
≈通讯作者   3 邱宗荫 oר¯}ksuvly{w{xzuzo∞2°¤¬¯}½²±ª¼¬±ƒ
¶²«∏q¦²°
茅莓为蔷薇科植物茅莓 Ρυβυσ παρϖιφλολιυσq的
茎叶 ∀民间用其根治疗女性月经过多 ≈t  ∀已有研
究表明茅莓提取物对脑缺血有很好的保护作用 ≈u  ∀
作者实验室对茅莓水提物抗脑缺血的有效部位进行
筛选 o发现茅莓水提物抗脑缺血的有效部位为茅莓
总皂苷 k·²·¤¯ ¶¤³²±¬±¶²©Ρυβυσ παρϖιφλολιυσo×≥• °lo
×≥• °tsous °ª# ®ªpt可改善大鼠异常神经症状 o使
 „≤’大鼠的 ≥’⁄oŠ≥‹ 2°¬活力提高 o ⁄„生成减
少 o减少脑皮层细胞凋亡数 ∀ ×≥• °对脑梗死有保护
作用 o其作用机制可能与抗自由基 !抑制细胞凋亡有
关 ≈v  ∀ ×≥• °对脑缺血 r再灌注动物脑含水量和血
脑屏障通透性是否有影响作用未见文献报道 ∀本实
验采用大脑中动脉阻塞法 k „≤’l建立大鼠局灶性
脑缺血 r再灌注模型 o观察 ×≥• °对脑缺血 r再灌注
大鼠脑含水量和血脑屏障通透性的影响 o并对其机
制作初步探讨 ∀
1 材料与方法
1q1 动物 雄性 ≥⁄大鼠 o体重 kvss ? usl ªo购于
第三军医大学大坪医院实验动物中心 o合格证号
≥≤÷Žk渝 lusstssvo清洁级 ∀
1q2 药品和试剂 北京塞多利斯有限公司产万级
电子天平 ~Š…vsv基本型电子天平 o ·¨¯ µ¨2ײ·¤§²公
司生产 ~紫外 2可见分光光度计 ˜∂ p utsso日本岛津
公司生产 ~电热恒温干燥箱 o上海医用设备厂生产 ~
伊文思蓝 k∞√¤±¶… ∏¯¨ o∞…l购自美国 ≥¬ª°¤公司 ~其
他试剂均为国产 „• 纯试剂 ∀
1q3 大鼠局灶性脑缺血再灌注模型制备 按  ¤¨¯2
²±ª¤≈v 略有改进 ov1xh水合氯醛 ts °# ®ªpt腹腔
注射麻醉大鼠 o仰位固定 ∀颈正中切口 o锐钝结合分
离颈部筋膜 o暴露右侧颈总动脉 k≤≤„ l!颈内动脉
kŒ≤„l!颈外动脉 k∞≤„l~由 ≤≤„分叉处向头端依
次游离 o电凝 ∞≤„所有分支 o在甲状腺上动脉远端
结扎 !切断 ∞≤„o使其主干游离备用 ~用蛙心夹暂时
夹闭 ≤≤„和 Œ≤„o用剪刀在 ∞≤„残端剪一小口 o将
预先制备好的头端涂有聚氨酯的尼龙线插入 Œ≤„
k涂有肝素 lo缚紧 ∞≤„残端丝线以防线栓滑出和
出血 o移去蛙心夹将线栓缓慢沿 Œ≤„入颅方向推
进 o推进约 t1z ∗ u1s ¦°时感到阻力 o表明线栓已经
通过大脑中动脉的起始部 o完成一侧大脑中动脉的
阻塞 ~松开夹闭 ≤≤„的蛙心夹 o清理术野 o全层缝
合 o关闭切口 ~大脑中动脉阻塞 u «后打开手术切
口 o轻轻拔出线栓 o微感阻力时停止 o实现再灌注 o清
理术野 o关闭切口 ∀假手术组插入尼龙线推进约
v ∗ w °°o即拔出 o其余操作相同 ∀再灌注到各时间
点 ∀
1q4 分组及给药方法 ≥⁄雄性大鼠 tvu只 o实验
动物随机分为 x组 o除假手术组每个观察时间点每
#yytu#
第 vu卷第 us期
ussz年 ts月
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ us
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组 v只外 o其余组为 y只 ∀缺血再灌注组 o缺血再灌
注 n ×≥• ° xotsous °ª# ®ªpt组及尼莫地平 ts °ª#
®ªpt组 o各给药组均于  „≤’前 v §灌胃给药 o每天
t次 ∀共 v §o最后 t次给药后 t «制备模型 ∀缺血
再灌注组 o假手术组灌等量的生理盐水 ∀
1q5 脑组织含水量的测定 在复灌后 youwow{ozu
«o动物断头后取右侧大脑缺血组织 o采用 • ²¶¨±¥¨ µª
建立的称重法进行梗塞区脑组织含水量的测定 ≈w  ∀
取单位体积梗塞区 k自 ¥µ¨ª°¤点 o向前取 x °°大
小 l脑组织 o分别称其湿重后 o放入烤箱内以 tts ε
干燥 uw «o再分别称干重 ∀脑组织含水量按以下公
式计算 }脑组织含水量 kh l € k湿重 p干重 l r湿
重 ≅ tssh ∀
1q6 脑组织中 ∞…含量的测定 大鼠  „≤’后 ts
°¬±尾静脉注射 uh ∞… u °# ®ªpt o几秒钟大鼠眼
球结膜 !四肢等显示蓝色 o表示注入成功 ∀动物于
 „≤’后 uw «处死 o用生理盐水心室灌流 ∀然后迅
速取左半球缺血区脑组织 o称取湿重后置于已加有
x °甲酰胺的试管中 oxw ε 孵育 uw «o让组织中的
∞…充分溶解在甲酰胺溶液中 ∀将溶有 ∞…的甲酰
胺溶液过滤 o用分光光度计 kyvu ±°l测定吸光度 ∀
根据线性回归方程计算出溶液中 ∞…的浓度 o最后
以每克组织中所含 ∞…微克数表示 ∀
1q7 统计分析 各组数据用实验数据用 ≥°≥≥ts1s
统计分析软件进行分析 o根据方差齐性与否分别采
用参数检验和非参数检验 o即齐性资料用单因素方
差分析 k„‘’∂ „lo两两比较用 ≥⁄检验 ~非齐性资
料用秩和检验 o选择 Π s1sx为差异显著 ∀
2 结果
2q1 ×≥• °对  „≤’大鼠脑含水量的影响 从表 t
可以看出 o假手术组脑组织含水量随时间延长 o没有
明显变化 ∀ ≤Œ• 组大鼠脑组织含水量明显增加 o与
≥«¤°组比较有极显著性差异 o说明造模成功 ∀与
≥«¤°组比较 o≤Œ• 组脑含水量 uw «即开始升高 o
uw ∗ w{ «升高迅速 o在 w{ «达高峰 ow{ «之后升高
趋势减缓 ∀ ×≥• °各剂量组与 ≤Œ• 组比较 o脑含水
量有不同程度下降 o其中绝大部分时间点有显著下
降 kΠ s1sx或 Π s1stl∀
表 t ×≥• °对脑缺血 u «再灌注不同时间点大鼠脑含水量的影响 kcξ ? σl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
ν
…• ≤ rh
y « uw « w{ « zu «
假手术 p v zy1{y ? s1zu zz1wv ? s1{v z{1vu ? s1yt z{1x{ ? s1x{
≤Œ• p y z|1xw ? s1z|tl {u1wx ? s1|wul {v1yt ? s1yxul {u1s{ ? s1zyul
×≥• ° x y z|1su ? s1z{ {t1vt ? s1{zvl {u1vy ? s1y|vl {t1u{ ? t1sxvl
ts y z{1yx ? s1{v {t1sy ? s1yvvl {u1t| ? s1{wvl {t1sy ? s1yxvl
us y z{1v{ ? s1xv z|1|x ? s1yxwl {s1wx ? s1vywl {t1uv ? s1y|wl
‘¬° ts y z{1y{ ? s1|u z|1ux ? s1{vwl {t1s| ? s1|twl {t1xv ? s1y|wl
注 }与 ¶«¤°组比较 tl Π  s1sxoul Π  s1st~与模型组比较 vl Π  s1sxowl Π  s1st~k表 u同 l
2q2 ×≥• °对  „≤’大鼠 ∞…含量的影响 对血脑屏
障损害程度的影响从表 u可以看出 o假手术组 ∞…随时
间延长 o没有明显变化 o≤Œ•组大鼠由于 ………通透性增
强 o导致脑组织伊文氏蓝含量明显增加 o与假手术对照
组比较有极显著性差异 o说明造模成功 ∀与 ≥«¤°组比
较 o≤Œ•组缺血侧脑组织 ∞…即开始升高 ouw ∗ w{ «升
高迅速 o在 w{ «达高峰 ow{ «之后升高趋势减缓 ∀
×≥• °各剂量组与 ≤Œ•组比较 o∞…有下降 o与模型组比
较 o治疗组的 ∞…含量有下降 o其中绝大部分时间点有
显著下降 kΠ s1sx或 Πsqstl∀
表 u ×≥• °对脑缺血 u «再灌注不同时间点大鼠脑含水量的影响 kcξ ? σl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
ν
¦²±·¨±·²©∞…rΛª# ªpt
y « uw « w{ « zu «
假手术 p v t1|v ? s1zv u1vt ? s1vz u1wy ? s1wy u1uv ? s1yz
≤Œ• p y x1ux ? t1vvul y1|x ? t1zzul z1ty ? t1uzul y1vu ? s1{vul
×≥• ° x y v1{| ? s1u|vl x1wv ? t1vv x1wz ? t1ts w1z{ ? s1zswl
ts y v1zz ? s1ytvl w1|{ ? s1|uvl x1vs ? s1yywl w1{x ? s1yswl
us y v1xs ? s1xtwl w1ws ? s1zywl w1xv ? s1|wwl w1uz ? s1{twl
‘¬° ts y v1{x ? s1xwwl w1y ? s1xywl w1yu ? s1vwwl w1vs ? s1wywl
3 讨论 脑水肿是缺血性损伤的主要病理变化之一 ∀由
#zytu#
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ us
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于脑缺血后造成相应区域的脑细胞缺血缺氧 o„×°含
量迅速下降 o造成脑组织能量代谢障碍及自由基连锁
反应 o使生物膜的运输功能发生障碍 o引起水和电解
质代谢紊乱 o最终导致所有脑的细胞成分 k包括神经
元胶质细胞 !血管内皮细胞 l均出现肿胀 o形成脑水
肿 q脑缺血本身可产生脑水肿 o而水肿的脑组织又可
能加重原来的脑缺血损害 q在脑梗塞产生数分钟后 o
梗塞区的毛细血管内皮细胞与血管周围的胶质细胞
即开始肿胀 o如果脑血液循环能很快代偿或重建 o这
个改变可以逆转 ∀但如果缺血状态持续发展 o毛细血
管腔缩小甚至闭塞 o此时即使血流重建 o这些小血管
仍不能流通 ∀一旦构成不流通 o就会加重缺血引起坏
死 o脑水肿亦随之加重 ∀因而减轻脑水肿是改善缺血
性脑损伤的重要标志之一 ≈x  ∀
研究证实 o×≥• °通过减轻缺血区脑组织水肿而
明显降低脑含水量 o与模型对照组比较有显著性差
异 o从而对缺血性脑损伤具有一定的保护作用 ∀由
于脑水肿是缺血性脑损伤不可避免的后果 o可以进
一步导致颅压升高 o脑疝形成 o直接影响患者的死亡
率和致残率 o因而控制脑水肿是临床治疗脑缺血性
疾病中必须解决的关键问题之一 ∀
………是维持脑内微环境稳定 !保障大脑正常功
能的重要生理屏障 ∀脑缺血后再灌注损伤可以导致
………的损害 o使得 ………通透性增加 ∀ ∞…为一种经
典的 ………通透性受损跟踪剂 o与血清蛋白结合形成
的伊文思蓝 2白蛋白复合物 k∞≥„l不能透过正常的
………∀当缺血 !缺氧导致 ………通透性增加时 o∞≥„
可进入脑组织 o局部蓝染 ∀通过肉眼观察和定量测
定 ∞…渗到脑组织的含量 o可精确地测定蛋白渗出
的多少 o从而推测 ………的损害程度 ≈yoz  ∀大鼠在局
灶性脑缺血 k „≤’l时 o………的通透性增强 o蛋白漏
出增多 o导致脑细胞水肿 ∀但给予 ×≥• °后 ………通
透性降低 o与模型对照组比较有显著性差异 o与假手
术对照组比较无显著性差异 ∀ ×≥• °能够减轻缺血 !
缺氧造成的 ………通透性改变 o减少蛋白漏出 o从根
本上降低脑细胞的水肿程度 o遏制脑缺血病程的发
展 o从而发挥对脑缺血的保护作用 ∀
≈参考文献  
≈t  朱志华 o张惠勤 o袁永军 q茅莓的药理研究 ≈ q中国中药杂志 o
t||sotxkzl}wvq
≈u  郑永玲 o胡常林 q茅莓提取物对局灶性脑缺血的实验研究 ≈ q
中医药研究 oussuot{kulqvzq
≈v  王继生 o邱宗荫 o夏永鹏 q茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血的
保护作用 ≈ q中国中药杂志 oussyovtkul}tv{q
≈w  ‘²²µ• o • ¤±ª ≤ ÷ o ≥«∏¤¬¥ „o ·¨¤¯q ‹ ¼³¨ µ·«¨ µ°¬¤ °¤¶®¶·«¨
± ∏¨µ²³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶²©·¬¶¶∏¨ ³¯¤°¬±²ª¨ ± ¤¦·¬√¤·²µ≈ q ≥·µ²®¨ o
ussxovykvl}yyxq
≈x  ² „ ≤o ≤«¨ ± „ ≠ o ‹∏±ª∂ Žo ·¨¤¯q ∞±§²·«¨ ¬¯±2t ²√ µ¨¨¬³µ¨¶2
¶¬²± ¯¨ ¤§¶·²©∏µ·«¨ µº¤·¨µ¤¦¦∏°∏¯¤·¬²± ¤±§¥µ¤¬± §¨¨ °¤¤©·¨µ°¬§2
§¯¨¦¨µ¨¥µ¤¯ ¤µ·¨µ¼ ²¦¦¯∏¶¬²± √¬¤¤´ ∏¤³²µ¬± w ¬¨³µ¨¶¶¬²± ¬± ¤¶·µ²¦¼·2
¬¦ ±¨§2©¨ ·¨≈ q ≤ µ¨¨¥… ²¯²§ƒ ²¯º  ·¨¤¥o ussxoux}||{q
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º¤√ ¶¨¬± µ¤·¶≈ q … «¨¤√ …µ¤¬± • ¶¨o ussxotyt}uu|q
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¥¯²²§2¥µ¤¬± ¥¤µµ¬¨µ³¨ µ° ¤¨¥¬¯¬·¼ ¬± ¼²∏±ª ¤±§ ¤ª¬±ª ©¨°¤¯¨ µ¤·¶
≈ q ∞±§²¦µ¬±²¯²ª¼o usswotwxktul}xwztq
Εφφεχτ οφ τοταλσαπονινσ οφ Ρυβυσ παρϖιφλολιυσ(ΤΣΡ Π) ον χηανγε οφ
ηψδρατεδ αµ ουντ ανδ βλοοδ2βραιν βαρριερ ιν ρατσ δυρινγ φοχαλχερεβραλ
ισχηεµ ιχ/ρεπερφυσιον
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(∆επαρτµ εντ οφ Πηαρµ αχψ, Χηονγθινγ Υνιϖερσιτψ οφΜεδιχαλΣχιενχε, Χηονγθινγ wsssty, Χηινα)
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¥¤µµ¬¨µ¬± µ¤·¶q Μετηοδ : ׫¨ °²§¨ ¯²© ²¯¦¤¯ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §¬± µ¤·¶¥¼ µ¨√ µ¨¶¬¥¯¨¬±¶¨µ·¬±ª¤±¼¯ ²± ·«µ¨¤§¬±·²·«¨ ¤±2
·¨µ¬²µ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¤µ·¨µ¼ ·«µ²∏ª«·«¨ ¬±·¨µ±¤¯ ¦¤µ²·¬§¤µ·¨µ¼ ¥µ¤¬± «¼§µ¤·¨§¤°²∏±·¤±§¦²±·¨±·¦«¤±ª¨ ²©∞√¤±. ¶¥¯∏¨ k∞…l¬± ¦²µ·¨¬¶∏¥2
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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zu «²©µ¨³¨ µ©∏¶¬²± ¤©·¨µu «²∏µ²©¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¬±§∏¦¨§¥¼  „≤’ °²§¨ tq Χονχλυσιον: ×≥• ° ¦²∏¯§ §¨ ¦µ¨¤¶¨ ¥µ¤¬± «¼§µ¤·¨§¤2
°²∏±·¤±§°¤µ®¨ §¯¼ ²¯º µ¨³¨ µ° ¤¨¥¬¯¬·¼ ²©¥¯²²§2¥µ¤¬± ¥¤µµ¬¨µ¶∏¥­¨¦·¨§·²u « „≤’ ©²¯ ²¯º §¨¥¼ uw « µ¨³¨ µ©∏¶¬²±o ¤±§·«¬¶°¤¼ ¥¨ ¤
° ¦¨«¤±¬¶° ²©×≥• ° ¤¯¯¨ √¬¤·¬±ª¥µ¤¬± §¨¨ °¤§∏µ¬±ªŒr• q
[ Κεψ ωορδσ] ×≥• °~ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¦¤rµ¨³¨ µ©∏¶¬²±kŒr• l~ ¥µ¤¬± §¨¨ °¤~ ¥¯²²§¥µ¤¬± ¥¤µµ¬¨µ
≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussz2st2sv
≈基金项目   山东省医药卫生科研项目 k‹ • txvl
≈通讯作者   3 邱曙东 oר¯}tv||tt{zstvo∞2°¤¬¯} ¬¯±ª¶«¤±ª©¨¬ƒ
tyvq¦²°
黄芪多糖对 t型糖尿病小鼠胰腺 Β细胞总质量的影响
李如江 t o邱曙东 t3 o陈红霞 u o田 宏 t o刘国强 t
ktq西安交通大学 医学院 o陕西 西安 ztssyt~
uq军事医学科学院 毒物药物研究所 o北京 tss{xsl
≈摘要   目的 }研究黄芪多糖对 t型糖尿病小鼠胰腺 Β细胞总质量的影响 ∀方法 }以低剂量链脲菌素 k≥םl
多次腹腔注射 o建立 t型糖尿病小鼠模型 o每天分别用黄芪多糖 k„°≥ltssoussowss °ª# ®ªpt或生理盐水腹腔注
射 otxovs §时将小鼠处死 ∀以免疫组织化学染色并复染观察胰岛炎性细胞浸润 o以间接荧光免疫双标法检测 Œ±¶∏2
¬¯±rŽ¬yzk‹ ²¨ ¦«¶·vvux{复染 l!Œ±¶∏¯¬±r≤ ¯¨ ¤√ §¨¦¤¶³¤¶¨2v的表达 o观察胰腺细胞 k包括 Β细胞 l增生 !Β细胞新生 !Β细
胞凋亡和 Β细胞总质量的变化 o以半定量 • ×2°≤• 检验胰腺再生蛋白 t °• ‘„的表达水平 o以 ∞Œ≥„法检测脾细胞
Œƒ‘2Χ和 Œ2w的分泌 ∀结果 }与对照组比较 o„°≥处理组胰岛炎症减轻 !Β细胞总质量增加 !新生胰岛增多 !Β细胞凋
亡减少 !׫tr׫u分泌因子比值下调 o所有这些均与 „°≥的剂量和使用持续时间密切相关 ∀但关于胰腺的细胞增
殖和 Β细胞增殖 o„°≥处理组与对照组没有明显差别 ∀结论 }„°≥通过改善 t型糖尿病小鼠的免疫功能增加胰腺 Β
细胞总质量 ∀
≈关键词   黄芪多糖 ~t型糖尿病 ~Β细胞凋亡 ~Β细胞新生 ~׫tr׫u~小鼠
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlus2uty|2sx
糖尿病在祖国医学中归 /消渴病 0范畴 o消渴的
病机主要在于阴津亏损 o燥热偏盛 ∀黄芪性微温 o味
甘 o归肺 !脾二经 o可 /补丈夫虚损 o五劳羸瘦 o止渴 o
腹痛泄痢 o益气 o利阴气 0o历代医家均用之治 /消
渴 0 ∀黄芪多糖 k¤¶·µ¤ª¤¯∏¶³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ o„°≥l提取
于黄芪 o可通过抑制骨骼肌酪氨酸蛋白磷酸化酶
t…!增加肾组织胰岛素受体 !胰岛素受体底物 2t和
磷脂酰肌醇 v激酶等的表达 o以改善胰岛素受体和
受体后信号转导 o降低 u型糖尿病大鼠的血糖水
平 ≈tou  ~同时 o„°≥可调节机体免疫 o阻止 ‘’⁄鼠 t
型糖尿病的发生 ≈v  ~不过 o到目前为止 o尚无 „°≥影
响糖尿病胰腺 Β细胞总质量的报道 ∀本实验利用小
鼠 t型糖尿病模型 o探求 „°≥对糖尿病胰腺 Β细胞
总质量的影响及其影响机制 ∀
1 材料与方法
1q1 动物
雄性 ≤xz…ry小鼠 ov月龄 o由西安交通大学
医学院动物中心提供 k动物合格证为陕医动字第
s{2sswlo室内常规饲养 ∀
1q2 药品与主要试剂
注射用 „°≥ks1ux ªr瓶 o美国泛华医药公司 !山西
省中医药研究所 o批号为 usstss|slo链脲菌素 !刀豆
蛋白 „o• ° Œtywso≤¼v2羊抗兔 ŒªŠ!ƒŒ×≤2羊抗小鼠 ŒªŠ
k≥¬ª°¤lo小鼠抗 ¬±¶∏¯¬±多克隆抗体 k博士德 lo兔抗
≤¯¨¤√ §¨¦¤¶³¤¶¨2v多克隆抗体 k≤¨¯¯ ≥¬ª±¤¯¬±ªlo兔抗
Ž¬yz多克隆抗体 k„… ∂ Œ≥Œ’‘lo抗小鼠链霉卵白素
k≥°l二抗试剂盒 k≥¤±·¤≤µ∏½lo‹²¨ ¦«¶·vvux{k欧洲 …∂
公司 loו Œ’kŠŒ…Œ≤’lo一步法 • ×2°≤• 试剂盒
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