全 文 ：°≤控制参附注射液及附子中 v种双酯型生物碱
刘秀秀 o晁若冰 3
k四川大学 华西药学院 o四川 成都 ytsswtl
≈收稿日期 ussy2sw2ts
≈通讯作者 3 晁若冰 o ר¯ rƒ¤¬}ksu{l{xxstwxwo∞2°¤¬¯}¦«¤2
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参附注射液是古方参附汤经剂型改变而来 o由
人参 !附子 u味药组成 o具有回阳救逆 o益气固脱的
作用 ~主要用于阳气暴脱的厥脱证 k感染性 !失血
性 !失液性休克等 lo也可用于阳虚 k气虚 l所致的惊
悸 !怔忡 !喘咳 !胃疼 !泄泻 !痹证等 ∀虽然附子是由
乌头加工炮制并经过了减毒处理 o但是附子中仍含
有双酯型剧毒生物碱 o即乌头碱 !新乌头碱和次乌头
碱 o所以在参附注射液的生产过程中对其又进行了
减毒处理 o双酯型乌头碱水解成毒性较小的单酯型
乌头碱 o后又继续水解成毒性更小的不带酯键的乌
头原碱 ≈t ∀
目前参附注射液采用分光光度法控制乌头类生
物碱 o该方法影响因素多 o干扰大 ∀另外有采用 ×≤
检查参附注射液中乌头碱 ≈u 的报道 ∀本研究建立
的 °≤可以同时分离上述 v种生物碱 o可用于控
制参附注射液和附子药材中的 v种双酯型生物碱 o
达到限量检查的目的 o对附子及其制剂中双酯型生
物碱的控制具有重要的意义 ∀
1 仪器和试药
日本岛津 ≤ p ts×高效液相色谱仪 o≥°⁄ p
ts紫外检测器 o≤ ¤¯¶¶p ∂ °色谱工作站 ∀十二烷基
硫酸钠 k以下简称 ≥⁄≥o东京化成工业株式会社 lo
乙腈为色谱级 k≥¦«¤µ¯¤∏ ≤«¨ °¬¨ ≥q qlo水为超纯
水 o其他试剂均为分析纯 ∀乌头碱 k ttszus2
ussws|l!新乌头碱 kttsz||2|wsvl!次乌头碱 ksz|{2
|wsvl购于中国药品生物制品检定所 ∀参附注射液
由雅安三九药业公司生产 ∀附子药材为市售 o经本
院王天志教授鉴定为毛茛科植物乌头 Α. χαρµ ιχηαελι
的子根的加工品 ∀
2 方法和结果
2q1 色谱条件
∏±¤x ∏ ≤t{ kul色谱柱 kw1y °° ≅ txs °°ox
Λ°l~流动相乙腈 2us °°²¯ # pt ¤u °w溶液 k磷
酸调 ³ wlkxsΒxslk内含 ts °°²¯ # pt ≥⁄≥l~检
测波长 uvx ±°~流速 t1s °# °¬±pt ~柱温 ux ε ∀
2q2 对照品溶液的配制
称取新乌头碱 !乌头碱 !次乌头碱各 u1s °ªo置
ts °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至刻度 o摇匀 o精
密量取 t °o置 ts °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o
摇匀 o得 s1su °ª# °pt的混合对照品溶液 to再精
密量取混合对照品溶液 tks1su °ª# °pt lt °o
置 ts °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 o得
s1ssu °ª# °pt的混合对照品溶液 u∀
2q3 测定方法
2q3q1 参附注射液的测定方法 在选定的色谱条
件下 o分别吸取混合对照品溶液 u和参附注射液
kts °包装 o含红参生药 s1t ª# °pt !附子生药
s1u ª# °pt lts Λo注入液相色谱仪 o记录色谱图 o
供试品色谱图中与对照品保留时间相同的色谱峰面
积不得大于对照品相应色谱峰的面积 k总量 [
s1ssy °ª# °pt l∀
2q3q2 附子的测定方法 将附子药材粉碎 o过 v号
筛 o取药材粉末 x ªo加浓氨试液 t °润湿 o密塞放
置 s1x «∀加乙醚 xs °o超声处理 u °¬±o放置 u «∀
过滤 o并用乙醚洗涤 v次 o每次 ts °o收集 !合并所
有滤液 o于水浴上挥干溶剂 ∀加入甲醇 ts °溶解
残渣 o过滤 o取续滤液作为供试品溶液 ∀在选定的色
谱条件下 o分别吸取混合对照品溶液 t和附子供试
品溶液 ts Λo注入液相色谱仪 o记录色谱图 o供试
品色谱图中在与对照品保留时间相同的色谱峰面积
不得大于对照品相应色谱峰的面积 k总量 [ s1tu °ª
# ªpt l∀
2q4 色谱系统适用性试验
以乌头碱的峰计算 o色谱系统的理论塔板数
kνl为 |1| ≅ tsv ~新乌头碱与乌头碱峰的分离度为
w1vo乌头碱与次乌头碱峰的分离度为 t1zo可以完
全分离 ~新乌头碱 !乌头碱与次乌头碱的拖尾因子均
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第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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为 t1to峰形基本对称 ∀
2q5 专属性的考察
2q5q1 参附注射液测定方法的专属性考察 在选
定的色谱条件下 o混合对照品溶液 u!参附注射液和
阴性对照液的色谱图如图 to该方法分离好且不受
红参的干扰 ∀
图 t 参附注射液 °≤图
q对照品 ~
q样品 ~ ≤q阴性 ~ tq新乌头碱 ~ uq乌头碱 ~ vq次乌头碱
2q5q2 附子测定方法的专属性考察 在选定的色
谱条件下 o混合对照品溶液 t! 附子供试品溶液和
空白对照液的色谱图如图 uo该方法分离好且不受
干扰 ∀
图 u 附子供试品溶液 °≤图
q对照品 ~
q样品 ~ ≤q空白对照 ~ tq新乌头碱 ~ uq乌头碱 ~ vq次乌头碱
2q6 检测限的测定
按信噪比为 vΒt计算 o本实验条件下测定新乌
头碱 !乌头碱和次乌头碱的检测限按进样量计分别
是 s1xot1sos1x ±ª∀可以满足限量检查要求 ∀
2q7 参附注射液和附子药材样品的检查
检查了 u批参附注射液中 v种双酯型生物碱 o
均未检出 o符合要求 ~检查了 x批市售附子中 v种双
酯型生物碱 o结果黑顺片和白附片均符合要求 ∀
3 讨论
参附注射液的标准中 o限度为含乌头类生物碱
以乌头碱计 o不得高于 s1t °ª# °pt o本方法将参
附注射液中 v种双酯型生物碱的总量暂控制在
s1ssy °ª# °pt以下 ∀药典收载附子药材的质量
标准中 o乌头碱的限度为 s1tz °ª# ªpt o本方法将
附子药材中的 v种生物碱总量暂控制在 s1tu °ª#
ªpt以下 o能更全面的控制附子中的毒性成分 o可保
证用药的安全 ∀在实际运用时可根据生产情况和临
床运用情况对限量的标准作适当调整 ∀
检查了几批市售附子 o其中黑顺片 !白附片为药
典收载 o均符合要求 o而黄附片中生物碱含量高 o若按
外标一点法计算 o其中含新乌头碱 !乌头碱和次乌头
碱分别为 s1s|os1uvos1s| °ª# ªpt ∀原因是由于不
同品种的附子炮制方法不同 o黄附片应慎用 ∀
本法可以同时检查 v种双酯型生物碱 o可控制
其总量 ∀由于这 v种双酯型生物碱含量差异大 o但
新乌头碱 !乌头碱和次乌头碱的小鼠 ⁄xs分别为
s1ts ∗ s1tvos1tuos1wz °ª# ®ªpt k¬√l≈v o毒性相
近 o所以在实际运用本方法时 o可比较 v种生物碱峰
面积之和不大于对照品峰面积之和 o来控制其总量 ∀
≈参考文献
≈t 续海训 o徐康雅 q参附注射液中附子成分分析 ≈ q中医杂志 o
ussvowwk|l}yzzq
≈u 杨华元 o熊天琦 q参附注射液质量控制方法的研究 ≈ q中草
药 ot|{yotzkwl}txxq
≈v 黄泰康 q常用中药成分与药理手册 ≈ q北京 }中国医药科技
出版社 ot||w}|uzq
≈责任编辑 鲍 雷
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