全 文 ：大孔树脂吸附纯化中药复方特性研究
王高森 o侯世祥 3 o朱 浩 o毛声俊 o毕岳琦
k四川大学 华西药学院 o四川 成都 ytsswtl
≈摘要  目的 }研究复方中药吸附纯化的特性 ∀方法 }以一个含有生物碱 !蒽醌 !皂苷等由黄连 !大黄 !知母等药
材组成的中药复方为样品 o采用大孔树脂进行吸附纯化工艺和特性研究 ∀结果 }定性 !定量研究证实 o混煎复方中药
中的主要有效成分或部位经过优化的工艺吸附纯化后 o均可大部分保留 ∀结论 }若纯化工艺条件得当 o同一型号的
大孔吸附树脂能有效吸附纯化不同母核结构的复方中药有效成分或有效部位 ∀
≈关键词  大孔树脂 ~吸附纯化 ~中药复方
≈中图分类号  • u{w1u ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltx2tuvz2sw
≈收稿日期  ussy2su2tu
≈通讯作者  3 侯世祥 oר¯ }ksu{l{xxsu{s| o∞2°¤¬¯}«²∏¶¬¬ ƒ
uyv1±¨ ·
已有研究表明 o复方中各味药材分煎液分别上
同一大孔吸附树脂柱纯化 o其不同有效部位均可不
同程度地被同一树脂吸附纯化≈t  ∀能否用同一种树
脂吸附纯化中药复方的混煎液为人们所关注 o为此
作者选用了一个含有生物碱 !蒽醌 !皂苷等由黄连 !
大黄 !知母等药材组成的中药复方为样品 o进行吸附
纯化工艺和特性研究 o以探索树脂纯化中药复方的
可行性与规律 ∀
1 仪器和材料
⁄ysx oƒ|x p vw oƒ|x p vy oƒ|x p vz型树脂k化工
部成都有机硅研究中心l ~黄连 • «¬½²°¤ ≤²³·¬§¬¶!大
黄 •¤§¬¬ ·¨•«¬½²°¤ • «¨¬!知母 • «¬½²°¤ „±¨ °¤µµ«¨ ±¤¨
均为市售 o经本校生药教研室王曙副教授鉴定符合
5中国药典6usss年版一部的要求 ~小檗碱 !大黄素 !
菝葜皂苷元对照品k中国药品生物制品检定所 o批号
分别为 usswsxsu oussws{tw oussws|uyl ~所用试剂均
为分析纯 ∀岛津 ˜∂ p uust 型紫外分光光度计
k¤³¤±l ~岛津 ≤≥ p |ts型薄层扫描仪k¤³¤±l ~≥¤µ·²2
µ¬∏¶tztu型 trts万电子天平kŠ¨ µ°¤±¼l ~„ª¬¯¨ ±·ttss
高效液相色谱仪k˜≥„l等 ∀
2 方法与结果
211 评价指标及方法
21111 有效部位定量指标及测定方法 以黄连小
檗碱为代表进行生物碱吸附纯化特性研究 o含量测
定参照5中国药典6采用薄层色谱扫描法进行测定 ~
以大黄总蒽醌为代表进行蒽醌吸附纯化特性研究 o
含量测定参照5中国药典6采用高效液相色谱法进行
测定 ~以知母中菝葜皂苷元为指标成分 o研究皂苷的
吸附纯化特性 o含量测定参照5中国药典6采用薄层
色谱扫描法进行测定≈u  ∀
21112 定性指标及检测方法 薄层色谱检查及方
法 本实验选择了复方中的黄连 !大黄 !知母 v味药
材中的有关成分进行薄层色谱检查 ∀通过吸附纯化
前后 ׏≤ 斑点数目的对比 o了解指标成分在纯化过
程中有无丢失 ~通过对比斑点大小和颜色深浅 o可以
从半定量的角度了解成分的损失率 ∀中药薄层检查
法补充了定量指标数量的不足 o同时也更准确地反
映指标成分在纯化过程中的变化 ∀
212 供试浸出液样品的制备
取药材适量混合煎煮 o每次加水 ts倍 o煎煮 wx
°¬±o共煎煮 v次 ∀每毫升药液合药材 zu °ªo据前述
方法 o测定药液中可溶性浸出物为 ut1uz °ª#°pt o
小檗碱质量浓度为 s1svy v °ª#°pt o大黄总蒽醌为
ty1x{{ Λª#°pt o菝葜皂苷元为 t1u Λª#°pt ∀
213 复方制剂吸附纯化工艺研究
21311 树脂种类的筛选 对 w 种大孔吸附树脂
⁄ysx oƒ|x p vw oƒ|x p vy和 ƒ|x p vz的吸附洗脱过
程进行综合比较 o并通过多指标评价筛选出适合于
本方的吸附树脂 ∀
取复方供试样品液加入 w种大孔吸附树脂柱 o
控制流出速度为 tss °#«pt o分段收集流出液 o以
生物碱k碘化铋钾l反应为指标 o判断树脂吸附终点 o
以上柱药材量和各指标成分的含量计算树脂的比上
#zvut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy
柱量≈t  o结果见表 t ∀
表 t 不同型号大孔吸附树脂比上柱量
型号 体积比tl
比上柱量r°ª#ªpt
可溶性浸出物 小檗碱 大黄蒽醌
⁄ysx ts qsΒt |t q|t s q{|z s qwts
ƒ|x p vw { qsuΒt {| q|{ s q{{u s qvvt
ƒ|x p vy { qtvΒt {x qzs s q{zx s qvzs
ƒ|x p vz { qzxΒt |u qtu s qz{z s qvyw
注 }tl体积比 }指达柱饱和时 o上柱药液与树脂体积比
由上表可知 o⁄ysx 型树脂吸附本药液中各指
标成分的能力较强 o为该复方进一步研究的较优选
择 ∀
21312 乙醇体积分数 将药液上柱饱和的 ⁄ysx
型树脂 o分别用 xs h ozx h和 |x h的乙醇洗脱至碘
化铋钾反应为阴性 o收集洗脱液 o按前述方法测定指
标成分的含量 o计算不同体积分数乙醇的比洗脱量 o
结果见表 u ∀
表 u 不同体积分数乙醇的比洗脱量
乙醇
r h
比洗脱量r°ª#ªpt
可溶性浸出物 小檗碱 大黄蒽醌
xs |t q| s q{z s qwt
zx xv qus s q{xv s qwtt
|x w| q{u s q{uy s qwtw
由上述结果可知 o随乙醇洗脱体积分数的增加 o
以可溶性浸出物和小檗碱计 o比洗脱量下降 ~以大黄
总蒽醌计 o比洗脱量略有增加 o但增加幅度不大 o没
超过 xs h乙醇洗脱量的 t1t h o所以 xs h的乙醇为
本复方较合适的洗脱剂 ∀
21313 水洗工艺的研究 将药液上柱饱和的
⁄ysx型树脂柱 o一个用 tu倍体积水洗至流出液几
乎无色 o弃去水洗液 o再用 xs h乙醇洗脱 o收集洗脱
液 o按前述方法计算树脂的比吸附量 ~另一个直接用
xs h乙醇洗脱 o根据洗脱液中各指标成分的含量 o推
算比上柱量 ∀比较比吸附量和比上柱量的变化 o结
果见表 v ∀
表 v 比上柱量与比吸附量对比
指标成分
比上柱量
r°ª#ªpt
比吸附量
r°ª#ªpt
损失率
r h
可溶性浸出物 |t q| wu qs xw qv
小檗碱 s q{zz s q{sz z q|{
大黄总蒽醌 s qwts s qvz{ z qs{
由表 v结果可知 o水洗药液饱和的大孔吸附树
脂柱会明显降低可溶性浸出物收率 o下降率大于
xs h ~同时 o水洗会造成有效部位或有效成分有所损
失 o但损失率小于 ts h ∀
21314 洗脱液用量的考察 将 ⁄ysx 型树脂用药
液上柱饱和 o水洗后用 xs h乙醇洗脱 o分段收集洗
脱液 o用碘化铋钾试剂判断洗脱终点 o并记录洗脱过
程中树脂柱颜色变化 o在加入 {倍柱体积 xs h的乙
醇后 o生物碱的碘化铋钾反应呈阴性 o可判断可将 {
倍柱体积 xs h的乙醇可将柱上以小檗碱为代表的
主要成分洗脱干净 ∀
综合上述研究的结果 o拟采用⁄ysx型树脂 o加
入 ts倍体积的药液 o用 tu倍体积水洗树脂 o弃去水
洗液 o加入 {倍柱体积 xs h乙醇洗脱 o再加入 u倍柱
体积乙醇 o合并洗脱液 o即为所得样品纯化液 ∀
214 验证实验
21411 样品的制备 按浸出工艺和吸附纯化工艺
确定的条件操作 o分别收集过柱前浸出液 !过柱后流
出液 !水提液和 xs h乙醇 !|x h乙醇洗脱液进行研
究 ∀
21412 中药成分 ׏≤ 检查 为了具体说明按确定
的纯化工艺处理 o药液中各指标成分有无丢失 o本实
验对处方中生物碱 !蒽醌 !皂苷的图谱进行研究 ∀
生物碱k黄连l样品制备 }将相当于 s1v ª药材
的样品 o挥尽溶剂 o用甲醇 v °加热提取 tx °¬±滤
过 o挥干 o再用甲醇定容至 t °∀薄层条件 }苯2醋酸
乙酯2甲醇2异丙醇2水kyΒvΒt1xΒt1xΒs1vl 置氨蒸气
中饱和 o于 vyx ±°下观察≈u  ∀
蒽醌k大黄l样品制备 }取相当于 s1v ª药材的
样品 o挥尽溶剂 o加入甲醇 us °o超声 tx °¬±过滤 o
挥尽滤液 o加水 ts °溶解 o盐酸 t °o水浴回流 vs
°¬±o冷却 ∀用 us °乙醚萃取 u次 o合并滤液挥干
后用氯仿定容至 t °∀薄层条件 }石油醚kvs ∗ ys
ε l2甲酸乙酯2甲酸ktxΒxΒtl上层液 o显色方式 }氨蒸
气 o日光下检视≈u  ∀
皂苷k知母l样品制备 }取相当于 s1v ª药材的
样品 o加乙醇 us °加热提取 ws °¬±o过滤滤液加
‹≤¯ t °o回流水解 t «o挥去乙醇至约 x °o加水 ts
°溶解 o用苯 us °萃取 u次 o合并萃取液并挥干 o
用苯溶解并定容至 t °∀薄层条件 }苯2丙酮k|Βtl
显色剂 { h香草醛浓硫酸无水乙醇溶液kzs ε 烘 ts
°¬±l≈u  ∀结果过柱洗脱前后 o浸出液和洗脱液中薄
层色谱斑点的数量 o斑点大小和颜色深浅大致相同 o
说明各指标成分在确定工艺条件下几无丢失 ∀
21413 中药成分定量研究 按前述方法测定收集
#{vut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy
样品 o测定指标成分的含量 o并计算其在不同样品中 的相对收率 o结果见表 w ∀
表 w 不同洗脱液中各指标成分的收率
有效部位 指标成分 收率r h浸出液 流出液 水洗液 xs h醇洗液 |x h醇洗液
生物碱 小檗碱 tss tu qyw y q|w {s qsx s qwu
蒽醌 大黄总蒽醌 tss w qsw z qt| {u q{s v q{x
皂苷 菝葜皂苷元 tss p p |{ qws p
由上表可知 o在以生物碱定性反应作为终点判
断的指标而确定的纯化工艺中 o尽管各指标成分在
上柱 !洗脱过程中有不同程度地损失 o但成分保留率
均大于 zx h ∀
3 结论与讨论
在本研究工艺下采用⁄ysx型大孔树脂能对中
药复方中的生物碱 !蒽醌 !皂苷等有效成分r有效部
位进行有效的吸附纯化 o且可通过生物碱的特征反
应作为终点判断的指标 ∀
311 关于大孔树脂种类的选择 研究结果表明 ow
种型号k⁄ysx oƒ|x p vw oƒ|x p vy oƒ|x p vz型l的大
孔吸附树脂上柱饱和 o其上柱药液与上柱体积比以
⁄ysx型最高 o可达 tsΒt o其余 v种树脂体积比仅为
⁄ysx型的 {s h ∗ |s h ∀对比 w种树脂的比上柱
量 }以可溶性浸出物计 o⁄ysx 型和 ƒ|x p vz 型最
高 ~以小檗碱计 o除 ƒ|x p vz的值较低外 o其余 v种
树脂均超过 { °ª#ªpt ~以大黄总蒽醌计 o⁄ysx型树
脂最高 ∀因此 o⁄ysx 型树脂吸附本药液中各指标
成分的能力较强 o为该复方进一步研究的较优选择 ∀
312 关于水洗工艺 水洗药液饱和的大孔吸附树
脂柱可明显降低可溶性浸出物收率 o下降率大于
xs h o同时会造成有效成分或有效部位的损失 o但损
失均小于 ts h o故水洗液可弃去 ∀因此 o采用水洗
工艺有利于去除水溶性杂质 o纯化样品 ∀
313 关于验证试验 吸附洗脱终点判定关系到吸
附纯化工艺筛选的合理性 ∀在吸附纯化工艺筛选
中 o本实验采用碘化铋钾试剂跟踪生物碱的变化 o并
判断上柱洗脱的终点 o在此基础上推算比上柱量 !比
洗脱量等大孔吸附树脂吸附特性参数 o具有操作简
便 !终点判断直观等特点 ∀但是由于复方中药含多
种母核与理化性质各异的有效部位和成分 o使用单
一有效部位的特征反应判断上柱洗脱终点确定的吸
附纯化工艺操作 o无法确定其他有效部位或成分有
无丢失或损失 ∀为此本实验对复方中药主要指标成
分在吸附纯化过程中的变化从定性 !定量的角度进
行研究 o来验证本纯化工艺的合理性 ∀通过定性 !定
量两方面 o结果表明在本处方中 o终点判定依据基本
可行 ∀
314 关于不同有效部位吸附纯化特性 研究证实 o
在同一型号大孔吸附树脂上 o不同中药有效部位的
吸附能力不同 o主要体现在以下几个方面 }≠不同成
分吸附能力的高低在同一型号树脂的比上柱量和比
吸附量上的大小上体现出来 ~ 在固定的纯化条件
下 o上柱洗脱成分保留率高 o说明在过柱后流出液和
水洗液中 o成分损失率较小 o因而成分吸附更牢固 ∀
本研究对实验中涉及的中药有效部位在同一型号树
脂上吸附能力的大小进行排序 o生物碱 !蒽醌和皂苷
的吸附能力大小依次为 }皂苷 蒽醌 生物碱 ∀
≈参考文献 
≈t  朱 浩 o侯世祥 o孙毅毅 o等 q大孔吸附树脂吸附纯化不同中
药有效部位特性研究 q中国中药杂志 ot||{ ouvktsl }ysz q
≈u  中国药典 q一部 qusss }uxs ot{ otzt q
Στυδιεσ ον χηαραχτεριστιχσ οφ αβσορπτιον ανδ σεπαρατιον οφ
τραδιτιοναλ Χηινεσε µεδιχινε χοµ πουνδ πρεσχριπτιον βψ µαχροπορουσ ρεσιν
• „‘Š Š¤²2¶¨± o ‹’˜ ≥«¬2¬¬¤±ªo‹˜ ‹¤²o  „’ ≥«¨ ±ª2­∏±o…Œ ≠∏¨2 ¬´
( Ωεστ Χηινα Σχηοολ οφ Πηαρµαχψ, Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytsswt , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ≥·∏§¼·«¨ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²©¤¥¶²µ³·¬²± ¤±§¶¨³¤µ¤·¬²± ²©·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¦²°³²∏±§³µ¨¶¦µ¬³·¬²± ∏¶2
¬±ª°¤¦µ²³²µ²∏¶µ¨¶¬±q Μετηοδ : ≥·∏§¼ ·«¨ ·¨¦«±¬´∏¨¦¶¤±§¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²©¤¥¶²µ³·¬²± ¤±§¶¨³¤µ¤·¬²± ²©¤¶¤°³¯¨ ¥¼ °¤¦µ²³²µ²∏¶µ¨¶¬±o
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第 vt卷第 tx期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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º«¬¦«¬¶¦²°³²¶¨§²©¦²³·¬¶µ²²·oµ«∏¥¤µ¥¤±§¦²°°²± ¤±¨ °¤µµ«¨ ±¤µ«¬½²°¨o¦²±·¤¬±¬±ª¤¯®¤¯²¬§o¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¤±§¶¤³²±¬±q Ρεσυλτ : Œ·¬¶
³µ²√ §¨¥¼ ∏´¤¯¬·¤·¬√¨¤±§ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨µ¨¶¨¤µ¦«¨¶¶·∏§¬¨¶·«¤·¤©·¨µ¤¥¶²µ¥¨§¤±§¶¨³¤µ¤·¨§¥¼ ²³·¬°¬½¨ §·¨¦«±¬¦¶³µ²¦¨¶¶o °²¶·³µ¬°¨ ©¨©¨¦·¬√¨
¦²°³²±¨ ±·¶²µ¶¨¦·¬²±©µ¤¦·¬²±¶¬±·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¦²°³²∏±§³µ¨¶¦µ¬³·¬²± ¦¤± ¥¨ µ¨¶¨µ√ §¨°¤¬±·¤¬±¨ §q Χονχλυσιον : Œ©·«¨ ·¨¦«2
±¬´∏¨¦¶²©¶¨³¤µ¤·¬²±¬¶³µ²³¨µ¯¼ §¨¶¬ª±¨ §o·«¨ ¶¤°¨®¬±§²© °¤¦µ²³²µ¨ µ¨¶¬± ¦¤± ¤¥¶²µ¥§¤±§¶¨³¤µ¤·¨ √¤µ¬²∏¶ ©¨©¨¦·¬√¨¦²°³²±¨ ±·¶²µ¶¨¦·¬²±
¬±·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¦²°³²∏±§³µ¨¶¦µ¬³·¬²± º«¬¦««¤√ º¨¬·«§¬©©¨µ¨±·¦«¨ °¬¦¤¯ ¶·µ∏¦·∏µ¨¶ ©¨©¬¦¬¨±·¯¼ q
[ Κεψ ωορδσ] °¤¦µ²³²µ²∏¶µ¨¶¬±~¤¥¶²µ³·¬²± ¤±§¶¨³¤µ¤·¬²±~·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¦²°³²∏±§³µ¨¶¦µ¬³·¬²±
≈责任编辑 鲍 雷 
≈收稿日期  ussx2sz2ut
≈通讯作者  3 刘本 oר¯ }ksxzwl{{uu|xtx o ∞2°¤¬¯ }¯¬∏¥¨ ± ƒ
±¬·1±¨ ·1¦±
超临界流体萃取牛蒡子中牛蒡子苷的实验研究
董文洪 o刘 本 3
k浙江大学 宁波理工学院 o浙江 宁波 vtxtssl
≈摘要  目的 }探讨超临界流体萃取牛蒡子中牛蒡子苷的可行性 ∀方法 }用 ‹°≤ 测定牛蒡子苷的含量 o采用
正交试验优化超临界流体萃取牛蒡子中牛蒡子苷的工艺条件 ∀结果 }超临界流体萃取牛蒡子苷的最佳工艺条件为
萃取压力 ws °¤o萃取温度 zs ε o采用甲醇作为夹带剂 o流量 s1xx °#°¬±p t o静态萃取 x °¬±o动态萃取 vs °¬± o≤’u
流量 u #°¬±p t ∀结论 }超临界流体具有极性可调的优势 o可有效萃取牛蒡子中牛蒡子苷 ∀
≈关键词  牛蒡子 ~牛蒡子苷 ~超临界萃取 ~正交试验 ~‹°≤
≈中图分类号  • u{w1u ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltx2tuws2sv
牛蒡 Αρχτιυµ λαππα 1 为菊科牛蒡属植物 o常用
药用部位为其果实 o称牛蒡子 ∀其主要化学成分为
牛蒡子苷 !挥发油和油脂类等 ∀文献≈t 报道牛蒡子
中牛蒡子苷的含量比牛蒡子苷元高数十倍 ∀文献
≈u 报道用超临界 ≤’u萃取对牛蒡子中牛蒡子油的
工艺条件进行了研究 ∀本研究将采用正交试验研究
超临界流体对牛蒡子中牛蒡子苷的萃取率 o评估超
临界流体萃取牛蒡子苷的可能性 o并与超声萃取法
相比较 ∀
1 仪器及试剂
≥³¨ p §¨≥ƒ∞ p uk美国 „³³¯¬¨§ ≥¨ ³¤µ¤·¬²±¶o萃取
釜容积 ts °l ~≥≠ p wsssŽ高效液相色谱仪k德国
Ž‘„˜∞• l o检测器k…ƒ•˜∂ ⁄∞×∞≤×∞• Žp uxstl o
超越 p usss色谱工作站 ~≥… p vuss⁄型超声清洗机
k宁波新芝生物科技有限公司l ~…≥uuw≥型电子分析
天平k北京塞多利斯仪器系统有限公司l ∀
甲醇k一级色谱纯 o天津市四友生物医学技术有
限公司l o甲醇k分析纯 o上海振兴化工一厂l o水k去
离子l o微孔滤膜ks1wx Λ°l ~牛蒡子苷对照品k批号
s{t|2ussusv o中国药品生物制品检定所l o牛蒡子k购
于宁波江北白沙药房 o经本院刘本副教授鉴定l ∀
2 方法与结果
211 牛蒡子苷的含量测定方法≈v 
21111 色谱条件 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{kw1y °° ≅ uxs °° o
x Λ°l ~流动相甲醇2水ktΒt1tl ~流速 t °#°¬±pt ~检
测波长 u{s ±° ~柱温 vs ε ~进样量 us ˏ∀
21112 标准曲线的绘制 精密称取牛蒡子苷对照
品 tv1ux °ª置 ux °量瓶中 o甲醇溶解并定容至刻
度 o作为对照品储备液 ∀精密吸取储备液 s1x ot1s o
u1s ov1s ow1s ox1s °o分别置 ts °量瓶中 o加甲醇
稀释至刻度 o摇匀 o得对照品溶液 o按上述色谱条件
进样 o以牛蒡子苷的含量为横坐标 o峰面积为纵坐
标 o得标准曲线 o并计算回归方 Ψ € tu wws Ξ n
uy uv{ , ρ€ s1||| y ∀在 uy1x ∗ uyx Λª#°pt呈良好
的线性关系 ∀
21113 精密度试验 取标准曲线项下对照品溶液
按上述色谱条件 o重复进样 x次 o对照品峰面积积分
值的 • ≥⁄为 u1s h k ν € xl ∀
#swut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
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∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy