全 文 ：表 u 制山茱萸样品中马钱苷含量 h
编号 含量 编号 含量
tk河南 l sqzvw t{k浙江 l sqzwz
uk河南 l sq{x{ t|k浙江 l sqyuy
vk河南 l sqzuu usk浙江 l sq{s{
wk河南 l sqyzu utk河南 l sq{v{
xk河南 l sqzss uuk河南 l sq{ys
yk河南 l sqzxu uvk河南 l sq|tt
zk河南 l sqzuv uwk浙江 l sqys|
{k河南 l sqz|w uxk桐庐 l sqxys
|k河南 l sqzy| uyk慈溪 l sqzyx
tsk河南 l sqy|s uzk广西 l sqtus
ttk浙江 l sqzsw u{k广西 l sq{zv
tuk浙江 l sq{wu u|k广西 l sqxzw
tvk浙江 l sqyxy vsk湖南 l sqywt
twk浙江 l sqyvv vtk湖南 l sqyz{
txk浙江 l sqytw vuk湖南 l sqyus
tyk浙江 l sqz|w vvk天津 l sq|tz
tzk浙江 l sqy|x
试验中又收集到不同批次的生品山茱萸 o依法
测定 o测定结果见表 v∀
3 讨论
311 根据本实验测定结果 o可以看出各地制山茱萸
的马钱苷含量比较稳定 o在 s1xsyh ∗ s1|tzh k仅 t
批含量为 s1tush lo该结果可以作为评价制山茱萸
质量及含制山茱萸中成药质量的参考 ∀
312 同时还发现 o各地炮制工艺不同 o造成其性状
差异较大 ∀大体上可以分为两类 }一类为紫黑色 o微
有光泽 o质滋润柔软 o微有酒香气 ∀另一类为黑色 o
表 v 生山茱萸样品中马钱苷含量
编号 含量 编号 含量
tk河南 l tqss ttk浙江 l sqyut
uk河南 l tqsu tuk浙江 l sq{|z
vk河南 l tqsu tvk浙江 l sqzvu
wk河南 l sq{zx twk浙江 l sq|uu
xk河南 l tqsv txk浙江 l sq{x|
yk河南 l sqy|w tyk浙江 l sqywx
zk河南 l sqzux tzk陕西 l sqtzs
{k河南 l tqsu t{k陕西 l sqzu{
|k河南 l sqzsw t|k陕西 l sqxww
tsk河南 l sq|xu usk陕西 l sq{xx
有光泽 o质脆 ∀前者含量较高 o品质较好 o例如 uzo
vv号样品 ∀后者虽占市场份额的 ysh以上 o但含量
相对偏低 o例如产地为河南的样品 ∀
313 根据的马钱苷含量可以看出 o制山茱萸中马钱
苷含量较生品有所损失 ∀但含量差异不大 ∀
314 实验曾用 xsh 甲醇 !{sh 甲醇 !甲醇回流提
取 o结果表明 o用 {sh甲醇加热回流 t «即可将马钱
苷提取完全 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 ≈≥ 1一部 1usss}uu1
≈u 贾泰元 1六味地黄丸的免疫调节作用 ≈ 1中成药 ot||woty
k|l}vw1
≈v 顾世海 o谢 忱 o张 丹 o等 1 °≤法直接测定山茱萸中马
钱素的含量 ≈ 1中国中药杂志 o t||youtkzl}wu|1
≈责任编辑 张宁宁
≈收稿日期 ussx2tt2sw
≈通讯作者 3 张素芹 oר¯}ksxvtl{u|w|{uv
莱菔子及其伪品的蛋白电泳鉴别
张素芹 t3 o刘 娟 u o冉 玫 t o刘 瑾 t
kt1山东省中医药研究院 o山东 济南 uxsstw~ u1山东商业职业技术学院 o山东 济南 uxssssl
莱菔子为十字花科植物萝卜 Ραπηανυσ σατιϖυσ
1的种子 o具有消食除胀 !降气化痰之功效 ≈t ∀药
材菟丝子和决明子与莱菔子性状相近 o易混淆 ∀目
前 o聚丙烯酰胺凝胶电泳技术已广泛应用于生理生
化的研究中 o但在鉴定中药方面应用较少 ∀本研究
为凝胶电泳技术在莱菔子药材的质量及混乱品种鉴
定提供理论依据 ∀
1 材料与仪器
111 材料 莱菔子等购于济南市药材市场 o经本研
究室鉴定为萝卜 Ρ . σατιϖυσk青萝卜 !红萝卜 !白萝
卜 l的种子 ∀菟丝子为旋花科植物菟丝子 Χυσχυτα
χηινενσισ¤°1的干燥种子 ∀决明子为豆科植物小
决明 Χασσια τορα 1的种子 ∀取 w份莱菔子 o菟丝子
和小决明子各 t份 o粉碎 o过 ys目筛备用 ∀
分离胶缓冲液 !贮液 o浓缩液胶缓冲液 !贮液 o电
#zywt#
第 vt卷第 tz期
ussy年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ tz
≥ ³¨·¨°¥¨ µoussy
极缓冲液 o考马斯亮蓝 uxs染色液 owsh的蔗糖溶
液 o过硫酸铵溶液 o×∞ ∞⁄o溴酚蓝指示剂 ∀
112 仪器 ⁄≠≠ p稳流稳压电泳仪 ~⁄≠ ≠ p ¶ u{
型电泳仪槽 k北京六一仪器厂 l~∞⁄≥ p u|s凝胶成
像分析仪 k北京市新技术应用研究所 l~ ty p •
高速冷冻离心机 k北京医用离心机厂 l~ƒttsw型
电子天平 k上海天平仪器厂 l~旋片真空泵 kt wss µ
# °¬±pt o浙江黄岩求精真空泵厂 l∀
2 方法 ≈u
211 凝胶的制备 按比例配制 vh浓缩胶液 w °o
zh分离胶液 ty °∀为防止氧对聚合反应的抑制
作用 o将配好的胶液置真空干燥器内抽气 ts °¬±∀
配制蛋白质电泳凝胶 }浓缩胶缓冲液 k³ y1zls1x
°o浓缩胶贮液 t °os1xyh 过硫酸铵 s1x °o
wsh蔗糖溶液 u °o×∞ ∞⁄ts Λ~分离胶缓冲液
k³ {1|l u °o分离胶贮液 w °os1xyh过硫酸铵
u °o蒸馏水 { °o×∞ ∞⁄ vs Λ∀
分离胶液中加入 ×∞ ∞⁄ vs Λo混匀 o立即缓
缓注入已安装好的凝胶模子中 o注意防止气泡 ∀待
分离胶稍凝后 o在分离胶液上覆盖约 v °°厚的蒸
馏水 o静置 u ∗ v «o待分离胶与水层间界面清晰时 o
用滤纸小心吸净水层 ∀插上样品槽模板 o使其底部
距分离胶上层约 t ¦°∀向浓缩胶液中加入 ×∞ ∞⁄
ts ∗ tx Λo混匀后注入凝胶模子中 o静置 s1x ∗ t «o
静置浓缩胶变为乳白色 o垂直向上小心取出样品槽
模板 ∀向正负电极槽内加入电极缓冲液共约 {ss
°o两槽内液面介于高低玻璃板之间 o且大约相平 ∀
212 供试品溶液的制备 将以上粉碎样品各取
s1x ª粉末 o加稀释 w倍的浓缩胶缓冲液 k×µ¬¶2
≤ l¯o研磨成匀浆状 ow sss µ# °¬±pt离心 us °¬±o取
上清液置冰箱内冷藏备用 ∀
213 上样与电泳 用微量进样器吸取样品提取液
ws Λo缓缓注入样品槽底部 o在负极槽电极缓冲液
中加溴酚蓝指示剂 t ∗ u滴 o将正负极电泳槽分别与
电泳仪的正负极相连 o打开电源 o开始电泳 ∀电泳采
用稳流控制 o开始时电流 tx °o当样品达到分离胶
后 o电流 ux °∀为防止温度过高 o可将电泳槽放在
冰箱内 ∀当溴酚蓝前沿行至距凝胶底端约 t ¦°时 o
关闭电源 o停止电泳 o整个过程约需 v «o为保证有效
散热 o电泳在冰箱内进行 ∀
214 染色与脱色 电泳结束后 o打开电泳槽 o取出
胶板 o标记前沿 ∀将凝胶板浸于考马斯亮蓝染色液
内 o在恒温培养箱内 vz ε 染色 t ∗ u «o至谱带清晰 ∀
染色后用蒸馏水冲去凝胶表面附着的染料 o再用脱
色液脱色 ∀经常换胶色液 o直到背景清晰为止 ∀凝
胶板可用凝胶成像分析仪进行摄影和分析 o也可放
入 zh ∗ {h醋酸液中长期保存 ∀
3 结果
w种莱菔子与伪品决明子 !菟丝子的蛋白电泳
图谱明显不同 o菟丝子电泳谱带数量少于莱菔子和
决明子 ∀可作为莱菔子药材及其伪品的鉴别依据 ∀
电泳结果见图 t∀
图 t y种样品的电泳图谱
tou1莱菔子 k青 l~vow1莱菔子 k青 l~xoy1莱菔子 k红 l~zo{1莱
菔子 k白 l~|ots1菟丝子 k伪品 l~ttotu1决明子 k伪品 l
4 讨论
411 从种子的蛋白色带可以看出 o青 !白 !红 v种萝
卜的种子基本一致 o但与伪品菟丝子 !决明子的色带
明显不同 ∀因此 o蛋白质电泳谱带的不同 o可作为莱
菔子及其伪品菟丝子和决明子的鉴别依据 ∀
412 莱菔子种子类药材的蛋白质种类是稳定的 ∀这
可能与植物在长期的系统发育中是靠种子来保持植
物的遗传特性有关 ∀利用蛋白质的不同 o鉴别果实及
种子类药材 o在理论上是有根据的 ∀电泳鉴别 o操作
简便 o药材用量少 o便于推广应用 o利用它来鉴别种子
类药材的质量及混乱品种是行之有效的方法 ∀
≈致谢 电泳图谱由山东中医药大学石俊英教授帮助
完成 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 ≈≥ 1一部 1ussx}t|u1
≈u 袁晓华 1植物生理生化实验 ≈ 1北京 }高等教育出版社 o
t|{v}xz1
≈责任编辑 张宁宁
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