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Effects and mechanisms of Shidi capsule on adjuvant arthritis model

湿迪胶囊对大鼠佐剂性关节炎作用机制的研究



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¬± ¶¨µ∏° ¤±§·«¨ ¦²±·¨±·²©³µ²¶·¤ª¯¤±§¬± ∞u ¬± ª¤¶·µ¬¦·¬¶¶∏¨ q Χονχλυσιον: ׫¨ ¥¬¶°∏·« ª¯¼¦¼µµ«¬½¤·¨ «¤¶¤±·¬∏¯¦¨µ ©¨©¨¦·¬± µ¤·¶q
[ Κεψ ωορδσ] ª¯¼¦¼µµ«¬½¬±~ ¥¬¶°∏·«~ ª¤¶·µ¬¦∏¯¦¨µ
≈责任编辑 古云侠  
湿迪胶囊对大鼠佐剂性关节炎作用机制的研究
张 鸽 o吴玉林 3 o沈 磊 o王 玫 o吉 蕊
k中国药科大学 药学院 生理教研室 o江苏 南京 utsss|l
≈摘要   目的 }观察湿迪胶囊对大鼠佐剂性关节炎 k„„ l的作用并初步探讨其作用机制 ∀方法 }≥⁄大鼠 o雄
性 o随机分为正常组 ks1xh ≤ ≤ 2‘¤溶液 l!模型组 ks1xh ≤ ≤ 2‘¤溶液 l!地塞米松组 ks1wx °ª# ®ªpt l!白芍总苷
组 ktxs °ª# ®ªpt l以及湿迪胶囊 k以生药计 l高 kx wss °ª# ®ªpt l!中 ku zss °ª# ®ªpt l!低 kt vxs °ª# ®ªpt l剂量
组 ~除正常组外 o其余各组采用大鼠右后足跖皮内注射氟氏完全佐剂建立 „„模型 o并分别给予灌胃治疗 o观察各组
的足跖肿胀度 o测定炎性肿胀足前列腺素 ∞u k°Š∞u l含量及血清中丙二醛 k ⁄„l!超氧化物歧化酶 k≥’⁄l含量 o测
定脾及胸腺指数 o并观察踝关节的病理组织学变化 ∀结果 }湿迪胶囊高 !中 !低剂量组可剂量依赖性显著抑制大鼠
右后足跖的原发性肿胀和左后足跖的继发性肿胀 ~与模型组比较 o湿迪胶囊高 !中 !低剂量组 ≥’⁄总活力明显升高 o
 ⁄„含量明显下降 o°Š∞u含量降低 ~与模型组比较湿迪 v个剂量组的胸腺和脾脏指数均有所提高 o差异有显著意
义 ~湿迪高 !中 !低剂量组均可明显减轻 „„大鼠的病理变化 ∀结论 }湿迪胶囊能明显抑制滑膜组织的炎症 o减轻细
胞的损伤程度 o因而对 „„大鼠具有一定的治疗效果 ∀
≈关键词   湿迪胶囊 ~佐剂性关节炎 ~超氧化物歧化酶 ~丙二醛 ~前列腺素 ∞u
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszltw2twvu2sw
≈收稿日期   ussy2s{2ts
≈基金项目   江苏省新药创制发展资金资助 ksxttsvxl
≈通讯作者   3 吴玉林 oר¯}ksuxl{xuvs{zvo∞2°¤¬¯}º¼¯¦³∏ƒ
¼¤«²²q¦²°q¦±
类风湿关节炎 kµ«¨ ∏°¤·²¬§¤µ·«µ¬·¬¶o• „l病因迄
今未明 o尽管抗风湿药物很多 o但一直因不良反应严
重或因控制早期症状能力差而无重大突破 ∀中医药
在 • „治疗中已取得积极进展 o开发标本兼治 !安全
有效的药物有着重要的实用价值 ≈t  ∀传统医药对
类风湿关节炎的治疗积累了一定的经验 o湿迪胶囊
为独特的民间验方 o具有清热利湿 !通络止痛的功
用 o民间治疗类风湿关节炎疗效较好 o且价廉易得 ∀
本次实验首次观察湿迪胶囊对大鼠佐剂性关节炎
k¤§­∏√¤±·¤µ·«µ¬·¬¶o„„l的治疗作用 o并探讨其部分
作用机制 o为其治疗 • „的临床应用提供可靠的实
验依据 ∀
1 材料
1q1 动物
≥⁄大鼠 o体重 tys ∗ t{s ªo雄性 o由南京安立默科
技有限公司提供 o合格证号 }≥≤Ž÷k苏 loussu2sssu∀
1q2 药物与试剂
湿迪胶囊 }中国药科大学生理室自制 o由壁虎
kŠ ¦¨®²l!全蝎 k≥¦²µ³¬²l!蜈蚣 k≥¦²¯²³¨ ±§µ¤l!黄芩
k• ¤§¬¬≥¦∏·¨¯ ¤¯µ¬¤¨ l!黄连 k• «¬½²°¤ ≤²³·¬§¬¶l和黄柏
k≤²µ·¨¬°«¨ ¯¯²§¨ ±§µ¬ly味中药材组成 k比例为 uΒuΒuΒ
tΒtΒtl∀制备工艺 }药材经水提 o醇沉 o浸膏加适量辅
助料 o装入胶囊 ∀质量控制 }进行黄芩 !黄连和黄柏的
薄层色谱 k׏≤ l鉴别 o黄芩苷的高效液相色谱
k‹°≤l的含量测定 ~每克成药相当于原药材 ts ªo用
前用 s1xh羧甲基纤维素钠 k≤ ≤2‘¤l配成混悬液 o
批号 sysust~地塞米松 }金陵药业股份有限公司南京
金陵制药厂 o批号 swsyu|~白芍总苷胶囊 }三九医药股
份有限公司 o批号 sxswtxt~氟氏完全佐剂 kƒ≤„l}美
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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∏¯¼o ussz
国 ≥¬ª°¤公司产品 o批号 svvŽ{|vv~丙二醛 k ⁄„l试
剂盒 }南京建成生物工程研究所 o批号 ussysxts~超氧
化物歧化酶 k≥’⁄l试剂盒 }南京建成生物工程研究
所 o批号 ussysxty~其余试剂均为市售分析纯 ∀
1q3 仪器
自制足容积测量仪 ~×y新世纪紫外 2可见分光光
度计 k北京普析通用仪器有限责任公司 l~Šus全自
动高速冷冻离心机 k湘西仪器仪表总厂 l~⁄Žp{⁄型
电热恒温水槽 k上海精密设备有限公司生产 l~„vssv
上皿电子天平 k上海精科天平仪器厂 l∀
1q4 数据处理
计量资料用 cξ ? σ表示 o组间比较用单因素方差
分析和 θ检验 ∀
2 方法
2q1 动物分组 !模型制备及给药 ≈u 
取 ≥⁄大鼠 o雄性 o随机分为正常组 ks1xh
≤ ≤ 2‘¤溶液 l!模型组 ks1xh ≤ ≤ 2‘¤溶液 l!地塞
米松组 ks1wx °ª# ®ªpt l!白芍总苷组 ktxs °ª#
®ªpt l以及湿迪胶囊 k以生药计 l高 kx wss °ª#
®ªpt l!中 ku zss °ª# ®ªpt l!低 kt vxs °ª# ®ªpt l
剂量组 o每组 ts只 ~除正常组外 o其余各组采用大鼠
右后足跖皮内注射 ƒµ¨∏±§. ¶完全佐剂致炎 k即在大
鼠右后脚足趾部皮内注射 s1t °ƒ≤„o注射前先用
强力碘消毒 lo建立 „„模型 ∀给药方案 }≠ 从致炎
前 u §开始灌胃给药 o连续给药 u §o观察对原发病
变的影响 ~致炎 z §后 o连续给药 z §o观察对继发
性病变的预防作用 ~≈ 致炎 t| §后 o连续给药 z §o
观察对继发病变的治疗作用 ∀给药途径均为灌胃 o
各组以等容积不同浓度给药 kts °# ®ªpt l∀
2q2 观察指标和测定方法
2q2q1 足肿胀度 ≈uov  采用容积法 o量取致炎前足
容积 o并分别量取致炎后 t{ «ovoxo z §原发性肿胀
足容积 ~致炎 tt §后大鼠继发性关节炎出现 o分别
量取 tsotwot{ouuo uy §继发性肿胀足容积 o并计算
其肿胀度 o肿胀度 k°l €致炎后足容积 p致炎前足
容积 o以观察原发及继发肿胀的变化情况 ∀
2q2q2 血清 ≥’⁄o ⁄„含量测定 上述大鼠于末
次给药 t «后 o每只大鼠股动脉取血 o离心法 kv sss
µ# °¬±pt o共 ts °¬±l制备血清进行测定 ∀  ⁄„测
定采用硫酸巴比妥比色法 o≥’⁄测定采用黄嘌呤氧
化酶法 o均按照试剂盒说明进行测定 ∀
2q2q3 炎性肿胀足 °Š∞u含量测定 ≈wox  从上述每
只大鼠的左后踝关节上 s1x ¦°处剪下炎性肿胀足 o
去皮 !称重 !剪碎 o生理盐水 x °浸泡 t «o取出鼠
爪 o离心浸泡液 o吸取上清液 s1t °∀加 s1x °²¯#
pt的氢氧化钾 2甲醇溶液 u °o在 xs ε 水浴中异
构化 us °¬±o用甲醇稀释至 us °o于波长 uzs ±°
处测定吸光度值 kΑlo以每克组织相当的 Α值表示
°Š∞u的含量 ∀
2q2q4 胸腺及脾脏器指数 ≈yoz  解剖大鼠 o摘取胸
腺和脾脏 o称湿重 o按以下公式计算脏器指数 ∀
脏器指数 €脏器质量 k°ªl ≅ tssr体重 kªl
2q2q5 病理组织学 ≈z  踝关节标本用 tsh甲醛固
定 o脱钙 o常规脱水 o石蜡包埋后切片 o‹∞染色后镜
下观察大鼠炎性肿胀足的病理变化 ∀
3 结果
3q1 对 „„大鼠原发性和继发性炎症的影响
大鼠右后足跖注射佐剂后数小时即发生持续肿
胀 ow ∗ y §后达到第一高峰 o随后开始消肿 ots §后
再次持续肿胀 ∀继发性病变出现于 ts §o至 t{ §较
为明显 ∀湿迪胶囊高 !中 !低剂量组给药后 o对大鼠
右后足跖原发性肿胀的影响见表 to可剂量依赖性
的抑制原发性肿胀 ~对大鼠左后足跖继发性肿胀的
影响见表 uo可剂量依赖性抑制继发性肿胀 ∀
表 t 湿迪胶囊对 „„大鼠原发性足肿胀的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
足肿胀度 r°
t{ « v § x § z §
正常 p p p p p
模型 p t1us ? s1vv s1{x ? s1uv s1zu ? s1us s1yz ? s1us
白芍总苷 txs t1ss ? s1wu s1ys ? s1tytl s1wx ? s1ttul s1v| ? s1tuul
地塞米松 s1wx s1zy ? s1t{ul s1yt ? s1s{ul s1w| ? s1tuul s1v{ ? s1tuul
湿迪胶囊 t vxs t1tu ? s1vv s1y{ ? s1tw s1xu ? s1sttl s1wy ? s1s|ul
u zss t1su ? s1vy s1yw ? s1uutl s1w{ ? s1ttul s1wt ? s1tvul
x wss t1s{ ? s1uz s1yt ? s1twtl s1wz ? s1ttul s1v| ? s1tsul
注 }与模型组比较 tl Π  s1sxoul Π  s1stk表 u同 l
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 u 湿迪胶囊对 „„大鼠继发性足肿胀的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
足肿胀度 r°
ts § tw § t{ § uu § uy §
正常 p p p p p p
模型 p s1tz ? s1s| s1ut ? s1s| s1u{ ? s1tu s1tz ? s1sz s1tu ? s1sv
白芍总苷 txs s1tw ? s1sw s1tx ? s1svtl s1t{ ? s1svtl s1tt ? s1svtl s1s{ ? s1swtl
地塞米松 s1wx s1tz ? s1sz s1tu ? s1sxtl s1s| ? s1swul s1sz ? s1suul s1sw ? s1suul
湿迪胶囊 t vxs s1ty ? s1sv s1ty ? s1su s1t{ ? s1swtl s1tt ? s1swtl s1s| ? s1sw
u zss s1tx ? s1su s1tx ? s1sutl s1tz ? s1swul s1s| ? s1svul s1s{ ? s1svul
x wss s1tx ? s1sv s1tv ? s1sutl s1tw ? s1svul s1s| ? s1sxul s1sz ? s1suul
3q2 对 ≥’⁄o ⁄„o°Š∞u的影响
与正常组相比 o模型组血清中 ≥’⁄活性明显降
低 o ⁄„含量显著升高 kΠ  s1stl见表 vo说明 „„
模型使动物自由基清除能力明显下降 ∀用湿迪胶囊
v个剂量组治疗后 o≥’⁄总活力明显升高 o ⁄„含
量明显下降 ∀与正常组相比 o模型组 °Š∞u的含量显
著升高 kΠ  s1stlo用湿迪胶囊 v个剂量治疗后 o
°Š∞u含量呈剂量依赖性降低 o见表 v∀
表 v 湿迪胶囊对血清 ≥’⁄活力 ! ⁄„含量及炎性肿胀足 °Š∞u含量的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别 剂量 r°ª# ®ªpt ≥’⁄r˜# °pt  ⁄„ r±°²¯# °pt °Š∞u kΑl
正常 p vty1v{ ? u{1wv u1su ? s1ty s1st{ ? s1ssw
模型 p uxv1ux ? ux1u{ul v1xv ? s1y{ul s1sux ? s1ssxul
白芍总苷 txs u|x1zz ? vv1yuwl u1zw ? s1vtwl s1sut ? s1sswvl
地塞米松 s1wx u|{1tw ? v{1sswl u1tv ? s1t|wl s1sus ? s1swvl
湿迪胶囊 t vxs u{w1xx ? vy1vyvl u1|y ? s1vtvl s1sux ? s1ssw
u zss u|s1zs ? vt1xxwl u1xy ? s1wvwl s1suu ? s1ssvvl
x wss vsw1u| ? vv1{{wl u1u{ ? s1u|wl s1sut ? s1ssvvl
注 }与正常组比较 tl Π  s1sxoul Π  s1st~与模型组比较 vl Π  s1sxowl Π  s1st
3q3 对胸腺及脾脏器指数的变化
由表 w可见 o模型组的胸腺和脾脏指数明显低
于正常组 kΠ  s1stlo与模型组比较 o湿迪胶囊高 !
中 !低剂量组的胸腺和脾脏指数均有显著提高 ∀
表 w 湿迪胶囊对胸腺及脾脏指数的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
胸腺指数 脾脏指数
正常 p tw{1|y ? uv1xs u|z1yv ? vs1{z
模型 p tus1sx ? tx1tzul utv1st ? uy1xyul
白芍总苷 txs tvy1vy ? ts1{wvl uwz1tv ? t{1twwl
地塞米松 s1wx tux1wu ? t{1vw u{s1|w ? ut1t|wl
湿迪胶囊 t vxs tvs1zv ? tu1t| uwx1wv ? vy1w{vl
u zss tvy1xx ? tt1vwvl uws1wz ? t|1{|vl
x wss tv|1zy ? us1w|vl uxt1xu ? uz1zzwl
注 }与正常组比较 tl Π  s1sxoul Π  s1st~与模型组比较 vl Π 
s1sxowl Π  s1st
3q4 对 „„大鼠滑膜与关节病理改变的影响
病理切片结果显示 o模型组踝关节周围软组织
内见大量炎细胞浸润 o滑膜上皮细胞增生 !肿胀 o滑
膜组织不完整 ∀湿迪胶囊高 !中 !低剂量组均可明显
减轻上述病理变化 o见图 t∀
4 讨论
本方中以壁虎为君药 o壁虎味咸性寒 o归肝经 o
既可祛风止痛 o又可散结消肿 o为祛风之要药 ~臣以
全蝎 !蜈蚣 o全蝎味辛 !性平 o蜈蚣味辛 !性温 o同归肝
经 o性善走窜 o能引风药直达病所 o全蝎 !蜈蚣两药相
须 o有搜风通络止痛之功效 ∀黄芩 !黄连 !黄柏三药
均有清热燥湿之功效 o相须为用 o可共泻三焦之湿
热 o均为佐药 ∀综合全方 o具有清热利湿 !祛风通络
之效 o适用于类风湿性关节炎湿热阻络证 ∀
图 t 各组大鼠踝关节病理变化 k‹∞染色 o ≅ wsl
tq正常组 ~uq模型组 ~vq白芍总苷组 ~wq地塞米松组 ~xq湿迪胶囊 t vxs °ª# ®ªpt组 ~
yq湿迪胶囊 u zss °ª# ®ªpt组 ~zq湿迪胶囊 x wss °ª# ®ªpt组
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本研究结果显示 o湿迪胶囊高 !中 !低剂量组能
明显抑制 „„大鼠原发和继发性足肿胀 o较好缓解
其炎性症状 o还能有效对抗关节炎大鼠的脾和胸腺
指数变化 o对佐剂性关节炎大鼠病变关节的病理组
织结构也有明显的改善作用 ∀
°Š∞u既是炎症介质 o又是免疫调质 o与炎症反
应等症状密切相关 ∀对关节炎大鼠炎性肿胀足
°Š∞u含量测定结果显示 }湿迪胶囊高 !中 !低 v个剂
量组均可降低佐剂性关节炎大鼠炎性肿胀足 °Š∞u
的含量 o表明湿迪治疗类风湿关节炎的作用与抑制
°Š∞u有关 ∀
∏¬¶¤≤²µ√²  等 ≈{ 研究 ≥’⁄制成脂质体对佐
剂性关节炎能有效抑制炎症发展 ∀也有研究 ≈| 合
成 ≥’⁄用于治疗关节炎模型大鼠 o减轻其慢性炎症
发展 o组织损伤及骨损伤 ∀说明 ≥’⁄总活力在抑制
类风湿关节炎炎症发展过程中的重要作用 o它能清
除超氧化阴离子自由基保护细胞免受损伤 ∀在本研
究中对关节炎大鼠血清  ⁄„含量和总 ≥’⁄活力测
定结果显示 o湿迪胶囊 v个剂量组均可显著降低血
清中  ⁄„的含量并升高血清中总 ≥’⁄活力 o可见
湿迪胶囊不仅能降低机体攻击因子同时还能提高保
护因子活力 o达到治疗的目的 ∀
≈参考文献  
≈t  戴 敏 o魏 伟 q木瓜苷对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用 ≈ q
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人民卫生出版社 oussu}|usq
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用 ≈ q中药新药与临床药理 oussuotvkvl}tyvq
≈w  陈 奇 q中药药理研究方法学 ≈   q北京 }人民卫生出版社 o
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≈x  金祝秋 o郭建生 q大鼠风寒湿痹证模型的建立与前列腺素 ∞u关
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鼠迟发型超敏反应 ≈ q中国现代应用药学杂志 ot|||otyktl}tuq
≈z  陈冬志 o孟 明 o顾立刚 q加味木防己汤抗大鼠实验性关节炎
的研究 ≈ q中国中西医结合杂志 oussxouxk{l}zuzq
≈{  ∏¬¶¤≤  o ²µ´¨≤o ∂ ¤±. ·‹ • o ·¨¤¯q ≥∏³¨ µ²¬¬§¨ §¬¶°∏·¤¶¨
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Εφφεχτσανδ µ εχηανισµ σ οφ Σηιδι χαπσυλε ον αδϕυϖαντ αρτηριτισ µ οδελ
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(∆επαρτµ εντ οφ Πηψσιολογψ, Πηαρµ αχψ Χολλεγε, Χηινα Πηαρµ αχευτιχαλΥνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utsss|, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ³µ²¥¨ ¬±·²·«¨ ©¨©¨¦·¶¤±§° ¦¨«¤±¬¶°¶²©≥«¬§¬¦¤³¶∏¯¨²± ¤§­∏√¤±·¤µ·«µ¬·¬¶°²§¨ ¯k„„lq Μετηοδ :
≥⁄ µ¤·¶o °¤¯ ±¨ ¶¨¶o º µ¨¨ ¶·²¦«¤¶·¬¦¤¯ ¼¯ §¬√¬§¨ §¬±·²·«¨ ±²µ°¤¯ ¦²°³¤µ¬¶²±o ·«¨ °²§¨ o¯ ·«¨ §¨ ¬¤° ·¨«¤¶²±¨ks1wx °ª# ®ªpt lo ·²·¤¯
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vxs °ª# ®ªpt l §²¶¨ ªµ²∏³¶1∞¬¦¨³··«¨ ±²µ°¤¯ ¦²°³¤µ¬¶²± ªµ²∏³o µ¤·¶¬± ·«¨ ²·«¨ µªµ²∏³¶º µ¨¨ ¬±­¨¦·¨§ƒµ¨∏±§. ¶¦²°³¯ ·¨¨ ¤§­∏√¤±·
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°¤¯¯¨ ²¯∏¶­²¬±·q Χονχλυσιον: ≥«¬§¬¦¤³¶∏¯¨¦²∏¯§¬±«¬¥¬··«¨ ¬±©¯¤°°¤·¬²± ²©¶¼±²√¬¤¯ ° °¨¥µ¤±¨²¥√¬²∏¶¯¼o µ¨ ¬¯¨√¨·«¨ §¨ ªµ¨¨²©¬±­∏µ¼
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≈责任编辑 古云侠  
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