全 文 ：细辛挥发油 Β2环糊精包结工艺的研究
程黎晖t 3 o荣立新u
kt1浙江省温岭市第一人民医院 o浙江温岭 vtzxss~
u1中国中医科学院广安门医院药剂科 o北京 tsssxvl
≈收稿日期 ussy2st2sw
≈通讯作者 3程黎晖 oר ¯ }ksxzylyusytvx
细辛为马兜铃科植物 o具有祛风散寒 o通窍止痛 o
温肺化饮的功能 o其主要活性成分为挥发油 o油中主要
含细辛醚k¤¶¤µ²±¨ l∀为了提高细辛挥发油在制剂过程
中的稳定性 o本研究以正交实验的方法考察了其挥发
油与 Β2≤⁄包含物的制备工艺参数 o确定了最佳工艺 o
并以紫外分光光度法作为包结率的检测方法 ∀
1 材料与仪器
细辛药材购于中国药材公司 o经本院中药鉴定室
鉴定 o为马兜铃科植物北细辛 Ασαρυµ ηετεροτροποιδεσ
ƒµ1≥¦«°¬§·√¤µ1 µανδσηυριχυµ k¤¬¬°1l ¬·¤ª1的根及根
茎 ∀ Β2≤⁄k上海化学试剂厂l~甲醇k分析纯 o北京化工
厂l ~无水 ¤u≥wk分析纯 o北京化工厂l∀挥发油提取
器k重油lk北京玻璃仪器厂l~zxu紫外分光光度仪k上
海精密科学仪器厂l~±ss⁄
超声波清洗器k昆山市
超声波仪器厂l~
usw p 电子分析天平k梅特勒托力
多仪器上海有限公司l~⁄pz|ws电动搅拌器k北京分析
仪器厂l~×sv型乳化均质机k北京丰华机械厂l∀
2 方法与结果
211 细辛挥发油的提取 取适量细辛药材饮片 o加蒸
馏水 ts倍量 o浸泡 u «o连接比重大于 t的挥发油测定
装置 o加热回流 tu «o至提取完全 o收集挥发油 o用无水
¤u≥w脱水干燥 o备用 ∀其挥发油为淡黄色液体 o香味
刺鼻 ∀出油率约为 v1uh ∀
212 包合物制备工艺试验
21211 包合物的制备方法的选择 ≠超声法 }精密称
取 Β2≤⁄k经ys ε o干燥u «lts ªo置uss °烧杯中 o加
入 tss °蒸馏水 o加热使溶解 o置超声波清洗器中 o
冷却至 vx ε o保温 o超声 o功率 uxs • ∀另取细辛挥发
油 t °o精密称重 o加 |x h甲醇稀释至 x °o混溶后
用滴管缓慢滴加至烧杯中 o滴速 t °#°¬±pt o边滴边
搅拌 o滴完后再继续超声处理 vs °¬±o取出 o冰箱中放
置过夜 o抽滤 o用水和乙醇分别洗涤 v次 o滤饼于 ws
ε 真空ks1t °¤l干燥 x «o即得 ∀ 搅拌法 }精密称
取 Β2≤⁄k经ys ε o干燥u «lts ªo置uss °烧杯中 o加
入 tss °蒸馏水 o加热使溶解 o置水浴中冷却至 vx
ε o保温 o用电动搅拌器搅拌 o同时滴入上述甲醇稀释
的挥发油 o滴完后继续搅拌 vs °¬±o取出 o冰箱中放置
过夜 o抽滤 o用水和乙醇分别洗涤 v次 o滤饼于 ws ε o
真空ks1t °¤l干燥 x «o即得 ∀ ≈研磨法 }精密称取
Β2≤⁄k经 ys ε o干燥 u «lts ªo置 tss °烧杯中 o加入
vs °蒸馏水 o以高速乳化均质机k转速保持约 t xssµ
#°¬±ptl研磨混匀 u °¬±o滴入上述甲醇稀释的挥发
油 o滴完后继续研磨 vs °¬±o取出 o冰箱中放置过夜 o
抽滤 o用水和乙醇分别洗涤 v次 o滤饼于 ws ε 真空
ks1t °¤l干燥 x «o即得 ∀
采用紫外分光光度法 o按照包合物含量测定方
法测定其吸光度 o计算挥发油利用率 ∀试验结果见
表 t ∀
表 t v种包结方法的比较 h
方法 包结物得率 挥发油利用率
超声 z|1vx v|1zt
搅拌 {s1vw w|1yw
研磨 {v1wx y{1w{
结论 }超声法和搅拌法挥发油利用率低 o研磨法
明显优于超声法和搅拌法 ∀故选择研磨法 ∀
21212 研磨法工艺参数的选择 采用正交试验
法≈t o对提取工艺参数k挥发油与 Β2≤⁄的比例 !Β2
≤⁄与 us h乙醇的比例和研磨时间l进行优选 ∀采
用紫外分光光度法 o按照 21317 项下方法测定其吸
光度 o计算挥发油利用率 ∀见表 u ∗ x ∀
根据方差分析 o各因素对包合物得率的影响
Χ Β Αo各因素对挥发油利用率的影响 Χ Α
Β o根据极差分析 o最佳包合工艺为 Αu Βu Χt o即研磨
vs °¬±oΒ2≤⁄Βus h乙醇为 tΒv o挥发油ΒΒ2≤⁄为 tΒy ∀
21213 包合工艺验证试验 按照优选工艺 Αu Βu Χt o
进行工艺验证 ∀精密称取 Β2≤⁄k经 ys ε o干燥 u «l
#yv|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tt
∏±¨ oussy
表 u 因素水平
水平
Α
研磨时间
r°¬±
Β
Β2≤⁄Βus h乙醇
Χ
挥发油Β
Β2≤⁄
t us tΒu tΒy
u vs tΒv tΒ|
v ws tΒw tΒtu
表 v |kvwl正交试验结果
试验号
包合物得率
r h
挥发油利用率
r h
t {w qtv zu qxz
u zz quz zs qvv
v yt q|t x| q{u
w {s qxw zy quz
x zx qvu y| q{u
y {s qt| zz quv
z zv qxs y{ quw
{ {z qtz zz q|z
| zx qvt zu qxz
表 w 包合物得率方差分析表
变异来源 ≥≥ 自由度 ≥ Φ Π
Α vx1{zt u tz1|vy z1xy| s1ttz
Β tsv1yzs u xt1{vx ut1{zw s1sww
Χ uzz1z|w u tv{1{|z x{1ytv s1stz
表 x 挥发油利用率方差分析表
变异来源 ≥≥ 自由度 ≥ Φ Π
Α z{1s|| u v|1sxs txw1ztw s1ssy
Β tw1vvt u z1tyy u{1v|s s1svw
Χ txz1{w{ u z{1|uw vtu1y|x s1ssv
tu ªo置 tss °烧杯中 o加入 vy °蒸馏水 o以高速
乳化均质机k转速保持约 t xss µ#°¬±ptl研磨混匀 u
°¬±o另取细辛挥发油 u °o精密称重 o加 |x h甲醇
稀释至 ts °o混溶后用滴管缓慢滴加至烧杯中 o滴
速t °# °¬±p t o边滴边搅拌 o滴完后继续研磨 vs
°¬±o取出 o冰箱中放置过夜 o抽滤 o用水和乙醇分别
洗涤 v次 o滤饼于 ws ε 真空ks1t °¤l干燥 x «o即
得 o结果见表 y ∀
表 y 包合工艺验证试验
序号 包合物得率r h 挥发油包合率r h
t {x qs| {t qtv
u {w qz| z| q{{
v {z quv {u qtx
平均值 {x qzs {t qsx
结果表明 v批包合物得率 !挥发油包合率经统
计学处理无显著性差异 o工艺比较稳定 ∀
213 Β2≤⁄包含物中细辛挥发油的含量测定
21311 测定波长的选择 细辛挥发油的甲醇溶液
经紫外吸收光谱扫描于 kuxy1u ? tl ±°和kvww1w ?
tl ±°波长处有强烈而稳定的吸收峰 oΒ2≤⁄的甲醇
提取液无吸收 o包合物与挥发油的甲醇提取液的吸
收光谱完全一致 o鉴于kuxy1u ? tl ±°处的吸收峰相
对于kvww1w ? tl ±°处的吸收峰吸光度更大 o故选择
kuxy1u ? tl ±°处波长为含量测定最佳波长 ∀
21312 对照品溶液的制备 吸取细辛挥发油约 uss
Λo精密称定 o置 tss °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释
至刻度 o摇匀 ∀
21313 供试品溶液制备方法的考察 精密称取包
含物细粉 s1t ªo置 xs °量瓶中 o分别用甲醇 !醋酸
乙脂 !石油醚稀释至刻度 o塞紧 o超声波提取 vs °¬±o
滤过 ∀精密吸取滤液 t °置 ts °量瓶中 o分别加
甲醇 !醋酸乙脂 !石油醚稀释至刻度 o摇匀 ∀分别以
甲醇 !醋酸乙脂 !石油醚为空白 o测定其吸光度 ∀结
果表明 o以甲醇提取的包含物吸光度最大 o故选择甲
醇为提取溶剂 ∀
21314 标准曲线的制备 分别精密吸取上述溶液
t ou ov ow ox °置 xs °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o
摇匀 ∀分别精密吸取上述溶液 t ou ov ow ox °置 xs
°量瓶中 o甲醇稀释至刻度 o摇匀 ∀加以甲醇作空
白于kvsw ? tl±°波长处测其吸光度 o其含量对吸光
度的直线回归方程为 ψ tz1{wyξ n s1utv , ( ρ
s1||| { , ν xl ∀
21315 精密度试验 将上述细辛挥发油对照品溶
液按标准曲线项下方法测定对照品吸光度 o平行测
定 x次 o测定其误差 o结果 ≥⁄t1v h k ν xl ∀
21316 加样回收试验 分别精密称取同批包合物 x
份 o每份精密加入一定量挥发油甲醇溶液 o依包合
物含量测定项下方法测定其吸光度 o求得其加样回
收率为 ||1u h o ≥⁄t1s h k ν xl ∀
21317 包合物含量测定 精密称取包含物细粉 s1u
ªo置 xs °量瓶中 o用甲醇稀释至刻度 o塞紧 o超声
波提取 vs °¬±o滤过 ∀精密吸取滤液 t °置 ts °
量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 ∀以甲醇作空白 o
测定其吸光度 o由标准曲线回归方程求得其包合物
样品含量 Χo然后按下列公式计算其包合物中挥发
油的含量 o结果见表 t ∀
包合物得率k h l 包合物实际重rk环糊精量 n 挥发油
加入量l ≅ tss h
包合物含油率k h l Χ样品 ≅ xsr包合物重量 ≅ tss h
#zv|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tt
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挥发油利用率 k h l 实际包结量r加入挥发油量 ≅
tss h
3 讨论
细辛挥发油 Β2≤⁄包结物的包结率测定 o曾采
用药典 ussx 年版附录 ÷ ⁄挥发油测定法项下乙
法≈u o以挥发油为空白对照 o测定过程中误差较大 o
不能准确测得包结率 ∀经观察分析 o细辛挥发油在
水中溶解度较大 o测定时不能全部溶于二甲苯 o部分
溶于水 o蒸馏一段时间后二甲苯体积不再增加 o增加
二甲苯用量亦不能完全溶解全部挥发油 ∀故采用分
光光度法测定挥发油的包结率 o此方法灵敏 !准确 !
重复性好 ∀
≈参考文献
≈t 金丕焕 1 医用统计方法 1上海 }上海医科大学出版社 ot||v1|s1
≈u 中国药典 1 一部 1ussx1 附录 xz1
≈责任编辑 鲍 雷
≈收稿日期 ussy2st2t{
≈通讯作者 李毓群 oר¯ }ksxzylwsty|ys
反相 °≤测定五味丸中五味子醇甲的含量
李毓群
k浙江台州市第一人民医院 o浙江 台州 vt{susl
五味丸是由熟地黄 !五味子 !山药 !泽泻 !牡丹
皮 !茯苓 y味中药加工制成的浓缩丸 o具有滋补肝肾
的功效 o临床用于治疗神经衰弱 o头晕心悸 o耳鸣目
眩 o夜尿频数等症 ∀其中 o五味子为方中君药 o其化
学成分主要为五味子甲素 o五味子乙素 o五味子醇甲
等木脂素类成分≈t ∀为了有效地控制五味丸的内在
质量 o本研究选用反相高效液相色谱法对方中五味
子中五味子醇甲进行了含量测定≈u ov ∀该方法简
便 !准确 !可靠 o重复性好 o可有效地控制五味丸的内
在质量 ∀
1 仪器与试药
° ttss高效液相色谱仪k° ttss二级管阵列
检测器 ~° ttss色谱工作站l ∀甲醇为色谱纯 o水
为超纯水 o其他试剂均为分析纯 ∀五味子醇甲对照
品购自中国药品生物制品检定所 o供含量测定用 o批
号 tts{xz2usswsw ∀
2 方法与结果
211 色谱条件 ⁄¬¤°²±¶¬¯2≤t{色谱柱kw1y °° ≅ uxs
°° ots Λ°l o流动相甲醇2水ky{Βvul o流速 t °#
°¬±pt o检测波长 uxs ±° o柱温 ux ε ∀
212 对照品溶液的制备 精密称取五味子醇甲对
照品适量 o加甲醇制成每 t °含 s1v °ª的溶液 o即
得 ∀
213 供试品溶液的制备 取本品粉末 u ªo精密称
定 o加氯仿索氏回流提取 v «o挥干溶液 o残渣用甲醇
溶解并定容至 ux °o摇匀 o即得 ∀
214 空白试验 按方中药味比例自配不含五味子
的群药阴性样品 o按 212方法制成空白溶液 o依法测
定 o结果空白溶液色谱中 o在与五味子醇甲对照品相
应位置上 o未见明显色谱峰 o认为无干扰 ∀
215 线性关系的考察 精密吸取五味子醇甲对照
溶液ks1sy °ª# °ptlu1s ow1s oy1s o{1s ots1s otu1s
Λo依前述色谱条件进样分析 o以峰面积对进样量
进行线性回归 o得回归方程 Ψ u u|w1{| Ξ p vt1yv ,
ρ s1||| | ∀结果表明五味子醇甲在 s1tu ∗ s1zu Λª
进样量与峰面积线性关系良好 ∀
图 t 五味丸 °≤ 图
1对照品 ~
1样品 ~≤1 阴性 ~t1五味子醇甲
216 精密度试验 精密吸取五味子醇甲对照品溶
液ks1sy °ª#°ptl o进样 x Λo连续测定 y次 o记录
峰面积值 ≥⁄t1y h o表明该方法的精密度良好 ∀
217 稳定性试验 取本品适量 o精密称定 o依 213
法操作 o制备成供试品溶液 o分别于制备后 s ot ou o
#{v|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tt
∏±¨ oussy