全 文 ：Εξπεριµ ενταλστυδιεσ ον χοµ πουνδ ∆υζηονγ ϑιανγψα πρεσχριπτιον βψ
σεµ ι2βιονιχ εξτραχτιον
‹„’ ÷ ∏¨ 2° ¬¨o ≥˜‘ ÷¬∏2° ¬¨o ‹ „‘Š «¤²2º¤±ªo ‹˜Œ¬¤±2ª∏²
(t. Σηανγδονγ προϖινχιαλΗοσπιταλ, ϑιναν uxssut, Χηινα;
u. ΣχηοολοφΠηαρµ αχψ, Σηανδονγ Υνιϖερξιτψ οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινε, ϑιναν uxsstw, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ’³·¬°¬½¨ ·«¨ ·¨¦«±¬¦¦²±§¬·¬²± ²©⁄∏½«²±ª¬¤±ª¼¤³µ¨¶¦µ¬³·¬²± º¬·« ≥ °¨¬2¥¬²±¬¦∞¬·µ¤¦·¬²±q Μετηοδ :
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«q Χονχλυσιον: ≤²±¶¬§¨ µ¬±ª·«¨ ©¤¦·²©°¤±∏©¤¦·∏µ¨o ·«¨ ≥…∞ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¦²±§¬·¬²±¶¤µ¨ ·«¨ ©²¯ ²¯º¬±ª} ³‹ √¤¯∏¨ ¶²©·«¨ º¤·¨µ©²µ·«¨
·«µ¬¦¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¬¶y1so z1xo {1so ¤±§·«¨ ·«µ¬¦¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ·¬°¨¬¶t1xo t1so t1s «q
[ Κεψ ωορδσ] ⁄∏½«²±ª¬¤±ª¼¤³µ¨¶¦µ¬³·¬²±~ ¶¨°¬2¥¬²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²± ° ·¨«²§~ «²°²ª¨ ± ²¨∏¶§¨ ¶¬ª±~ ·¨¦«±¬¦¦²±§¬·¬²±
≈责任编辑 鲍 雷  
≈收稿日期   ussz2st2ts
≈通讯作者   3 王建新 oר¯}ksutlxwuvzu|xo∞2°¤¬¯}­¬º¤±ªƒ
¶«°∏q §¨∏q¦±
丁香降气颗粒的提取工艺研究
张丽红 tou o付 艳 tou o张志荣 u o王建新 t3 o马淑颖 v o朱生樑 v
ktq复旦大学 药学院 药剂学教研室 o上海 usssvu~
uq四川大学 华西药学院 药剂教研室 o四川 成都 ytsswt~
vq上海中医药大学 附属岳阳中西医结合医院 o上海 usswvzl
≈摘要   目的 }筛选并优化丁香降气颗粒的提取工艺 ∀方法 }通过药效学实验比较和确定提取工艺路线 o正交
设计多指标优化提取工艺条件 ∀结果 }水提法工艺提取物改善大鼠食管炎症的疗效优于其他 v种工艺提取物 ~通
过正交试验优化确定的提取条件为 }加水提取 v次 o每次 tu倍量水 o提取 s1x «∀结论 }优化得到的提取工艺合理 !
稳定 !可行 o保证了原处方的疗效 ∀
≈关键词   丁香降气颗粒 ~提取工艺 ~药效学评价 ~正交设计
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlut2uuxu2sw
胃食管反流病是指胃 !十二指肠内容物返流入
食管引起的反酸 !烧心等症状 o可伴食管黏膜和 r或
食管外组织损害 ∀据欧洲和美国报道该病发病率约
为 zh ∗ txh o我国的发病率约为 zh ∗ {h ≈tou  ∀目
前主要的治疗药物包括抑酸药 !促动力药 !黏膜保护
剂等 o这些药物虽然都能较好的缓解患者的症状 o但
都难以从根本上治愈胃食管反流病 o同时也都具有
一定的副作用 ∀据了解 o目前尚未有治疗胃食管返
流病的中药制剂被批准上市 ∀丁香降气颗粒是来源
于临床的经验方 o由丁香 !枳壳 !栀子 !延胡索等 tv
味中药组成 o既可镇逆降气 o使胃气下行 o又能疏肝
理气 o调整食管 !胃 !十二指肠之动力协调 o而且具有
清泻肝胃之火 o抑酸和胃之功 o用于肝胃郁热 o胃失
和降所致的烧心 !泛酸 !胸痛 !夜间咳呛 ! 咽部不适
等胃食管反流病诸症 o疗效确切 o对反流性食管炎的
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第 vu卷第 ut期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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‘²√ °¨¥¨ µo ussz
治疗有效率达 |uh ≈v  ∀为方便更多患者的服用 o拟
将丁香降气颗粒开发成为中药新药 o作者对其提取
工艺进行了研究 ∀
1 仪器与试药
高效液相色谱仪 k日本岛津 ≤ p us„…l~
≥Žxuss‹超声波清洗器 k上海科导超声仪器有限公
司 l~⁄ƒ真空干燥箱 k上海华连医疗器械有限公司 l∀
≥⁄大鼠 k中国科学院动物实验中心提供 lo健
康雄性 !体重 ktws ? usl ª~二甲苯 !伊红 k上海中医
药大学附属岳阳中西医结合医院病理科提供 l~w种
不同工艺丁香降气颗粒浸膏 k自制 lo含生药 t1{zx
ª# °pt ~柚皮苷 k批号 ttszuu2ussvs|l!延胡索乙
素对照品 k批号 szuy2ussus{l均购自中国药品生物
制品检定所 o药材购自上海华宇药业有限公司 ∀
2 方法与结果
2q1 提取工艺路线的设计
根据临床应用经验和处方中各味药材所含有效
成份的性质 o设计了 w条提取工艺路线 ∀
2q1q1 水提法 取处方药材 o加水浸泡 t «后 o加 {倍
量水煎煮 u次 o每次 t «o滤过 o合并滤液 o浓缩 o备用 ∀
2q1q2 双提法 由于处方中丁香 !柴胡 !没药等药
材中均含有挥发油成分 o所以 o首先进行提取 ∀取处
方中含挥发油成分的药材 o加 {倍量水 o水蒸馏法提
取 !收集挥发油 o药渣过滤后 o加入其余药材 o分别加
{倍 !y倍水 o煎煮 u次 o每次 t «o合并滤液 o滤过 o浓
缩 o备用 ∀临用前加入挥发油搅拌均匀 ∀
2q1q3 水提醇沉法 由于本方剂量较大 o拟通过水
提醇沉法去除部分杂质 o降低服用剂量 ∀取处方药
材 o按水提法提取后 o浓缩至药材 Β浸膏 € tΒtkªΒ
°lo加入乙醇至含醇量为 ysh o静置过夜 o离心 o
取上清液 o浓缩后备用 ∀
2q1q4 综合提取法 根据处方中各成分的理化性质 o
分别用水和 zsh乙醇进行提取 ∀取柴胡 !延胡索 !川
连 !枳壳 !没药等主要含醇溶性成分的药材 o加入 zsh
乙醇回流提取 u次 o每次 t «o加乙醇量分别为药材的 {
倍 !y倍 o过滤 o合并滤液 o减压回收乙醇 ~其余药材加水
煎煮 u次 o每次加水量为 {倍 o煎煮 t «o过滤 o合并滤
液 o浓缩 o合并醇提与水提浓缩液 o备用 ∀
2q2 药效学筛选不同提取工艺路线
参考相关文献 ≈w o建立 u种大鼠反流性食管
炎模型 o比较不同提取工艺样品对大鼠食管炎的修
复作用 ∀
取 ≥⁄大鼠 zs只 o健康雄性 ∀随机分为中药´ ∗
·组 o每组 z只 o模型组 y只 o正常组 u只 ∀各中药组
及模型组大鼠分别进行两种反流性食管炎造模 }酸反
流 k贲门肌切开加幽门结扎术 l!混合反流 k贲门肌切
开加十二指肠结扎术 l∀正常组行假手术 ∀中药´ ∗
·组分别予丁香降气颗粒水提 k´ l!双提 kµl!水提醇
沉 k¶ l!综合提取 k·l浸膏 o每次 t °每 tss ª体重 o
每日 u次 o连续 tw §∀模型组及正常组给予等量生理
盐水灌胃 ∀末次给药后 uw «处理动物 o禁食不禁水 o
取食管下段组织 otsh甲醛溶液中固定 o脱水 o石蜡包
埋 o切片 o苏木精 2伊红染色 o树脂封片 ∀光镜下随机
观察 x个高倍视野内食管组织鳞状上皮层数 !黏膜固
有层乳头节个数 !黏膜下层中性粒细胞侵润数 ∀结果
见表 tou∀
表 t 酸反流性食管炎各组大鼠食管组织形态学比较 kcξ ? σl
分组 ν 鳞状上皮层数 黏膜固有层乳头节个数 黏膜下层中性粒细胞数
正常组 u v1{s ? s1z|tl u1ts ? t1ustl s1ws ? s1zstl
模型组 x |1{s ? t1{vul y1ww ? t1|uul tw1y{ ? z1ztul
中药 ´组 y w1vz ? t1vxtl u1uz ? t1yutl u1zv ? w1uztl
中药 µ组 x y1vy ? t1|{toul v1y{ ? t1vxtoul z1{s ? v1xytoul
中药 ¶组 y z1zv ? u1y{toul w1tv ? t1z{toul tv1vs ? tu1tyul
中药 ·组 x x1uw ? t1sttl v1|u ? t1tutoul x1|u ? u1v{tl
注 }tl与模型组相比 Π  s1stoul与中药 ´组相比 Π  s1stk表 u同 l
表 u 混合反流性食管炎各组大鼠食管组织形态学比较
分组 ν 鳞状上皮层数 黏膜固有层乳头节个数 黏膜下层中性粒细胞数
正常组 u v1{s ? s1z|tl u1ts ? t1ustl s1ws ? s1zstl
模型组 x |1|u ? u1tsul z1xu ? u1vtul ty1ws ? tt1vvul
中药 ´组 y w1xz ? t1twtl u1{v ? t1|vtl u1zv ? y1tytl
中药 µ组 y {1ss ? u1vutoul y1uv ? t1|utoul tt1zv ? tu1xwul
中药 ¶组 y z1vv ? t1{vtoul w1wv ? t1vytoul |1yz ? ts1w{toul
中药 ·组 y x1ws ? t1vstl v1xz ? u1svtl |1ws ? tt1wxtoul
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ ut
‘²√ °¨¥¨ µo ussz
上述试验结果表明 o对于两种胃食管反流病模
型 o丁香降气颗粒水提浸膏在改善食管炎症 o减轻上
皮增厚 !乳头节增生及中性粒细胞浸润方面的疗效
优于其他 v种提取工艺路线 ∀所以 o确定水提取法
为丁香降气颗粒的提取工艺路线 o在此基础上进一
步对提取工艺条件进行优化 ∀
2q3 提取工艺的优化
2q3q1 试验设计 根据预试验结果 o影响水煎煮提
取效果的因素有加水量 !提取时间与提取次数等 o采
用 | kvw l正交试验对这 v个因素的不同水平进行
优化 ∀因素水平见表 vo试验设计见表 w∀
表 v 因素水平
水平 Α加水量 r倍
Β
提取时间 r«
Χ
提取次数 r次
t tu s1x t
u ts t1s u
v { t1x v
表 w 正交试验结果
‘²q 浸膏得率rh
柚皮苷
r°ª# ªpt
延胡索乙素
rΛª# ªpt
t z1wy t1{{ tw1vt
u ts1yu u1s{ ty1|{
v tu1zz u1xt tz1xt
w |1{u u1s{ t|1{u
x tt1xy u1tv tz1{z
y {1yu t1{{ tw1tv
z ts1{v u1vx uu1yz
{ y1|t t1ws tz1wu
| ts1yv t1{v t|1{u
2q3q2 考察指标 分别以浸膏得率 !柚皮苷提取量
和延胡索乙素提取量为指标 o对实验结果进行优化 ∀
2q3q2q1 干浸膏得率的计算 将各试验条件提取
液置蒸发皿中水浴蒸干 oys ε 真空干燥至恒重 o测
定浸膏重量 o计算浸膏得率 ∀
2q3q2q2 柚皮苷的含量测定 ≈x  取各试验条件部
分提取液 o减压干燥 ∀取干浸膏 s1t ªo精密称定 o置
tss °锥形瓶中 o加甲醇 xs °o密塞 o称定重量 o超
声处理 k功率 uss • o频率 xs ®‹½lvs °¬±o放冷 o再
称定重量 o用甲醇补足减失的重量 o摇匀 o滤过 o取续
滤液 o进样测定 o计算柚皮苷的含量 ∀
色谱条件 }Žµ²°¤¶¬¯ ≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°lo流动相乙腈 2水 kut1tΒz{1|o磷酸调节
³‹至 v1sslo柱温 vs ε o流速 t °# °¬±pt o检测波
长 u{v ±°∀柚皮苷在 u1y{ ∗ tss1x Λª# °pt线性
关系良好 o回归方程为 Ψ € us v|xΞ p wyv1sxoρ€
s1||| |o加样回收率为 k||1w| ? u1wtlh ∀
2q3q2q3 延胡索乙素的含量测定 ≈y  取 2q3q2q2
项下浸膏 u ªo精密称定 o置于 tss °锥形瓶中 o超
声处理 k功率 uss • o频率 xs ®‹½lv次 o每次加浓
氨 2甲醇 ktΒuslus °o超声 us °¬±o合并 v次滤液 o
挥去甲醇至近干 o残渣加水 vs °使溶解 o移入分液
漏斗中 o用盐酸调节 ³‹ t ∗ uo用石油醚 kys ∗ |s
ε l提取 u次 o每次 us °o弃去石油醚 o水液用氨水
调节 ³‹约 tso用石油醚提取 v次 o每次 vs °o合并
提取液 o水洗 u次 o每次 tx °o弃去水液 o分取石油
醚 o置水浴上挥干 o残渣用甲醇溶解定容于 u °量
瓶中 o摇匀 o滤过 o取续滤液 o进样测定 o计算延胡索
乙的含量 ∀
色谱条件 }Žµ²°¤¶¬¯ ≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°lo流动相甲醇 2s1sxh 磷酸溶液 kysΒwso
三乙胺调节 ³‹ y1tslo柱温 vs ε o流速 t °#
°¬±pt o检测波长 u{s ±°∀ 延胡索乙素在 x1sx ∗
tss1{ Λª# °pt 线性关系良好 o回归方程为
Ψ €ts vuvΞ pt {zv1uoρ€ s1||| |o方法的加样回收
率为 tst1sth ∀
2q3q3 正交试验结果 各次试验的测定结果见表
wo其中柚皮苷和延胡索乙素的含量以投料的药材
计 ∀试验结果的方差分析见表 x∀
表 x 方差分析
指标
方差
来源
离均差
平方和
自由度 均方 Φ Π
浸膏得率 „ t1sy u s1xv tz1x{
Β u1zx u t1vz wx1wv  s1sx
Χ ux1x u tu1zy wuu1v{  s1st
∆ s1sy u s1sv
柚皮苷 „ s1tv u s1syy v1wy
Β s1ts u s1sw{ u1xu
Χ s1xy u s1u{ tw1xz
∆ s1sw u s1st|
延胡索乙素 „ x1wt u u1zt u1yx
Β ut1vy u ts1y{ ts1wx
Χ u|1ys u tw1{s tw1w|
∆ u1sw u t1su
注 }Φs1sx kuoul € t|1soΦs1st kuoul € ||1s
从正交试验结果的方差分析看 o在设置水平范
围内 o以浸膏得率为指标 o提取时间 Β和提取次数 Χ
有显著性影响 kΠ  s1sxlo以柚皮苷含量和延胡索
乙素含量为指标则差异不明显 ∀综合分析 o提取次
数 Χ为主要影响因素 o随着提取次数的增加 o无
论是浸膏得率还是指标成分含量均会增加 ~随着加
水量 Α的增加 o浸膏得率和指标成分的含量也会增
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加 ~而随着提取时间 Β的延长 o柚皮苷和延胡索乙
素的得率均有降低的趋势 o这可能是由于加热时间
过长导致有效成分分解引起的 ∀因此 o综合考虑 o结
合生产实际 o确定最佳提取工艺条件为 Αt Βt Χv o即
加 tu倍量水提取 v次 o每次 s1x «∀
2q3q4 验证试验 以优化所得工艺条件进行 v次
验证试验 o结果浸膏得率 ktt1s| ? s1sxlh o• ≥⁄
s1wxh o柚皮苷质量分数 ku1z{ ? s1ttl °ª# ªpt o
• ≥⁄ w1tsh o延胡索乙素质量分数 kut1zu ? s1w|l
Λª# ªpt o• ≥⁄ u1uzh ∀可见优化后的工艺柚皮苷
和延胡索乙素的含量均得到提高 o表明优化工艺较
为理想 ∀
3 讨论
对于药味较多 !成分复杂的中药复方制剂提取
工艺的优化 o是保证其疗效的关键环节 ∀以药效学
结果 !浸膏得率和指标成分得率为指标进行综合考
察与评价 o应该是一种比较合理 !可行的方法 ∀本研
究首先通过药效学试验确定了提取工艺路线 o再以
浸膏得率和指标成分含量优化提取工艺条件 o得到
了较为理想的提取工艺 ∀
目前 o根据处方药材中所含成分或部位的性质
采用不同的化学方法进行提取纯化 o然后再进行组
合的研究方法得到了广泛的应用 o这种方法对于药
味较少 !有效成分或有效部位清楚的小复方比较适
合 o而对于一些成分复杂的大复方 o采用这种方法就
难以保证原方的疗效 o这种情况采用传统的水提取
法可能更能保持处方中的各种成分和原有疗效 ∀
试验结果显示 o随着提取时间的延长 o柚皮苷和
延胡索乙素的含量反而降低 o说明这两种成分受热时
间过长可能会产生分解 ∀另取枳壳单味药材饮片 v
份 o分别加水煎煮 s1xotot1x «后测定柚皮苷含量 o以
考察加热时间对柚皮苷含量的影响 o结果显示柚皮苷
含量 s1x «t «t1x «o验证了柚皮苷受热易分解 o
故最终确定每次提取时间为 s1x «∀同时提醒我们在
后面的成型工艺中应避免浸膏的长时间受热 ∀
测定延胡索乙素含量时 o直接以甲醇为溶剂进
行提取测定 o干扰较大 ∀针对延胡索乙素酸性条件
下成盐 o水溶性增强 o碱性条件脂溶性较强的性质 o
采用调节 ³‹为酸性 o用石油醚除杂后再调节 ³‹为
碱性 o用石油醚提取延胡索乙素 o浓缩后测定的方
法 o‹°≤图显示测定无干扰 o回收率符合要求 ∀
≈参考文献  
≈t  王 睿 o贺 佳 q胃食管反流病的流行病学研究进展 ≈ q第二
军医大学学报 ousszouzkzl}zvvq
≈u  王宝印 o刘 聪 q胃食管返流病的临床研究新进展 ≈ q吉林医
学 ousswouxk{l}yzq
≈v  朱生樑 o马淑颖 o王晓素 o等 q丁香降气汤治疗反流性食管炎 xs
例临床观察 ≈ q上海中医药杂志 oussxov|ktl}t|q
≈w  朱晓燕 o朱生樑 q疏肝和胃中药治疗两种返流性食管炎的药效
学研究 ≈ q内蒙古中医药 ousswow}v|q
≈x  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}tztq
≈y  杨天展 q高效液相色谱法测定胃得康散中延胡索乙素含量
≈ q时珍国医国药 ousssottktl}vtq
Οπτιµ αλεξτραχτιον οφ ∆ ινγξιανγ ϑιανγθι γρανυλεσ
‹„‘Š ¬2«²±ªtou o ƒ˜ ≠ ¤±tou o ‹ „‘Š «¬2µ²±ªu o • „‘Š ¬¤±2¬¬±t o  „ ≥«∏2¼¬±ªv o ‹˜ ≥«¨ ±ª2¯¬¤±ªv
(t. ∆επαρτµ εντ οφ Πηαρµ αχευτιχσ, Σχηοολοφ Πηαρµ αχψ, Φυδαν Υνιϖερσιτψ, Σηανγηαι usssvu, Χηινα;
u. ∆επαρτµ εντ οφ Πηαρµ αχευτιχσ, Ωεστ Χηινα Σχη: οολοφ Πηαρµ αχψ, Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytsswt, Χηινα;
v. Ψυεψανγ ΗοσπιταλΑτταχηεδ το Σηανγηαι Υνιϖερσιτψ οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινε, Σηανγηαι usswvz, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¦µ¨ ±¨ ¤±§²³·¬°¬½¨ ·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ²©⁄¬±ª¬¬¤±ª­¬¤±ª´ ¬ªµ¤±∏¯ ¶¨q Μετηοδ : ׫¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± µ²∏·¨ º¤¶
¶¦µ¨ ±¨ §¨¥¼ ∏¶¬±ª³«¤µ°¤¦²§¼±¤°¬¦ ¬¨³¨ µ¬° ±¨·¤±§·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¦²±§¬·¬²±¶º µ¨¨ ²³·¬°¬½¨ §¥¼ ²µ·«²ª²±¤¯ §¨ ¶¬ª± ¤±§·¤®¬±ª ¬¨·µ¤¦·
¼¬¨ §¯o ¦²±·¨±·²©±¤µ¬±ª¬± ¤±§·¨·µ¤«¼§µ²³¤¯°¤·¬±¨¤¶¬±§¨ ¬¨ ¶q Ρ εσυλτ: ׫¨ ³«¤µ°¤¦²§¼±¤°¬¦µ¨¶∏¯·¶«²º §¨·«¤·¤´ ∏¨ ²∏¶ ¬¨·µ¤¦·«¤§
·«¨ ¥¨ ¶·¨ ©©¨¦··²¦∏µ¨ ·«¨ ¶¨²³«¤ª¬·¬¶²©µ¤·¶¤±§·«¨ ²³·¬°¬½¨ § ¬¨·µ¤¦·¬²± ·¨¦«±¬´∏¨ º¤¶¤§§¬±ªtu ·¬° ¶¨º¤·¨µo ¬¨·µ¤¦·¬±ªs1x «²∏µ©²µ
v ·¬° ¶¨q Χονχλυσιον: ׫¨ ²³·¬°∏° ¬¨·µ¤¦·¬²± º¤¶¶¬°³¯ o¨ µ¨¤¶²±¤¥¯ o¨ ¶·¤¥¯¨¤±§∏¶¨©∏¯ ©²µ©∏µ·«¨ µ§¨ √¨¯²³° ±¨·q
[ Κεψ ωορδσ] ⁄¬±ª¬¬¤±ª­¬¤±ª´ ¬ªµ¤±∏¯ ¶¨~ ¬¨·µ¤¦·¬²±~ ³«¤µ°¤¦²§¼±¤°¬¦ √¨¤¯∏¤·¬²±~ ²µ·«²ª²±¤¯ §¨ ¶¬ª±
≈责任编辑 鲍 雷  
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