全 文 ：ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔａｎｓｈｉｎｏｎｅⅡＡｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆ
ｒａｔａｏｒｔｉｃｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ
ＬＩＸｉｎ１，２，ＤＵＪｕｎｒｏｎｇ２，ＢＡＩＢｏ２，ＹＵＹａｎ２，ＺＨＥＮＧＸｉａｏｙｕａｎ２，ＹＡＮＧＦａｎｇ２，ＺＨＥＮＧＨｕ２
（１ＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＳｃｈｏｏｌ，ＴｉａｎｊｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ３０００７０，Ｃｈｉｎａ；
２ＳｃｈｏｏｌｏｆＨｕａｘｉＰｈａｒｍａｃｙ，ＳｉｃｈｕａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００４１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｔａｎｓｈｉｎｏｎｅⅡＡ（ＴＡ，ｏｎｅｏｆｔｈｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ
Ｂｇｅ），ｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｃｕｌｔｕｒｅｄｒａｔｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ（ＶＳＭＣ），ａｎｄｔｏｃｌａｒｉｔｙｔｈｅｐｒｏｂａｂｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍＭｅｔｈｏｄ：
Ｃｅｌｃｕｌｔｕｒｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗａｓｕｓｅｄｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｏｒｗｉｔｈｏｕｔ１０％ ＦＢＳＴｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｏｆＴＡｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＶＳＭＣｗａｓ
ｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｃｅｌｃｏｕｎｔ，ＭＴＴｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｍｅａｓｕｒｉｎｇａｎｄＢｒｄＵｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎａｓｓａｙＦｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｔｒａｃｋｃｅｌｃｙｃｌｅ
ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎＷｅｓｔｅｒｎｂｏｌｔｓｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｅｖａｌｕａｔｅＥＲＫ１／２ａｃｔｉｖｉｔｙＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｆｏｓｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｂｙＲＴＰＣＲＲｅｓｕｌｔ：
Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｃｅｌｎｕｍｂｅｒ，ＭＴＴａｓｓａｙａｎｄＢｒｄＵｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＴＡｃｏｕｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔ１０％ ＦＢＳｉｎｄｕｃｅｄｐｒｏｌｉｆｅｒａ
ｔｉｏｎｉｎａｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒＦｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ（ＦＣＭ）ａｎａｌｙｓｉｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅＧ０／Ｇ１ｐｈａｓｅｆｒａｃｔｉｏｎｒａｔｉｏｏｆＴＡｇｒｏｕｐｗａｓｈｉｇｈｅｒ
ｔｈａｎｔｈａｔｏｆ１０％ ＦＢＳｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｌｅｔｈｅＳｐｈａｓｅｆｒａｃｔｉｏｎｒａｔｉｏｗａｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆ１０％ ＦＢＳｇｒｏｕｐＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ＇ｓｒｅｓｕｌｔｓｄｉｓｐｌａｙｅｄ
ｔｈａｔＴＡｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｏｆＥＲＫ１／２，ａｎｄｉｎａｃｃｏｒｄａｎｃｅｗｉｔｈｔｈｉｓｆｉｎｄｉｎｇｓＴＡｃｏｕｌｄｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅｅａｒｌｙｅｌｅｖａｔｉｏｎｏｆｃｆｏｓ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｓｕｇｇｅｓｔｔｈａｔＴＡｃａｎｉｎｈｉｂｉｔ１０％ ＦＢＳｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＶＳＭＣＴｈｉｓｅｆｅｃｔｍａｙｂｅｒｅ
ｌａｔｅｄｔｏｉｔｓｂｌｏｃｋｉｎｇＶＳＭＣｓｃｅｌｃｙｃｌｅｉｎＧ０／Ｇ１ｐｈａｓｅ，ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｏｆｔｈｅＥＲＫ１／２ａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｆｏｓ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｔａｎｓｈｉｎｏｎｅⅡＡ；ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ；ｃｅｌｃｙｃｌｅ；ＭＡＰＫ；ｃｆｏｓ ［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００７０９２０
［通讯作者］ 夏之柏，Ｔｅｌ：（０２０）８７７５５７６６８２１５，Ｅｍａｉｌ：
ｘｚｂ１２３４３２１＠ｓｏｈｕｃｏｍ
三氧化二砷治疗大鼠 Ｃ６脑胶质瘤的研究
夏之柏，吴新建，齐铁伟，黄正松
（中山大学 附属第一医院 神经外科，广东 广州 ５１００８０）
［摘要］ 目的：研究三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）体内外抑制脑胶质瘤生长的作用。方法：将不同浓度 Ａｓ２Ｏ３（１，２，４，
６，８μｍｏｌ·Ｌ－１）加入体外培养的Ｃ６脑胶质瘤，ＭＴＴ法检测体外细胞增殖率，ＰＣＮＡ染色检测细胞增殖活性、ＴＵＮＥＬ
法检测原位细胞凋亡和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测Ｂｃ１２蛋白表达水平。另将大鼠 Ｃ６胶质瘤细胞（５×１０５个／１５μＬ）种植
于雄性ＳＤ大鼠右侧尾状核（模型组、治疗组各１０只），治疗组荷载 Ｃ６脑胶质瘤鼠用前面筛选的浓度（１ｍｍｏｌ·
Ｌ－１）实施肿瘤原位治疗，对照组仅注入生理盐水，观察动物一般情况、生存期、ＭＲＩ动态变化及病理改变。结果：与
模型组和低浓度组相比，中、高浓度治疗组 Ｃ６细胞增殖明显下降（Ｐ＜００１），ＴＵＮＥＬ法表明细胞凋亡指数上升
（Ｐ＜００１）；Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹显示凋亡相关基因Ｂｃｌ２蛋白表达水平呈下降趋势。模型组动物均于３周内死亡（１７８±
０９２）ｄ；治疗组８只动物死于２４～３６（３２１±１３５）ｄ；余２只第１２０天时处死。治疗组ＭＲＩ检查：４周时扫描的４
只动物，１只瘤体有缩小，另３只瘤体变化不大；８～１２周时，残存２只动物，１只瘤灶基本消失，１只残存小瘤灶。结
论：Ａｓ２Ｏ３具有体内外抑制脑恶性胶质瘤生长的作用，有可能成为临床治疗胶质瘤的候选化疗药物之一。
［关键词］ 三氧化二砷；Ｃ６鼠脑胶质瘤；细胞凋亡；Ｂｃｌ２蛋白
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１７２１５００４
２０世纪９０年代，我国学者应用以三氧化二砷
（ａｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅ，Ａｓ２Ｏ３）为主要成分的“癌灵１号”
治疗急性早幼粒细胞性白血病（ａｃｕｔｅｐｒｏｍｙｌｏｃｙｔｉｃ
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第３３卷第１７期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８
ｌｒｕｋｅｍｉａ，ＡＰＬ），取得了显著的临床疗效［１］。业已
发现Ａｓ２Ｏ３不仅对急性早幼粒细胞性白血病治疗有
效，而且对多种实体性肿瘤如胃癌、食管癌和头颈恶
性肿瘤等也有良好的效果［２４］。笔者先前的研究证
明，Ａｓ２Ｏ３可体外抑制人胶质瘤细胞生长
［５］，现进一
步研究了 Ａｓ２Ｏ３对 Ｃ６细胞体外生长及荷载脑胶质
瘤鼠的直接治疗作用，为临床应用奠定基础。
１ 材料
１１ 动物 二级雄性 ＳＤ大鼠 ２０只，体重 ２５０～
３００ｇ，由中国药品生物制品检定所繁育场提供，其
特征已经鉴定。
１２ 药物和试剂 纯Ａｓ２Ｏ３试剂购自美国Ｓｉｇｍａ公
司，配成１ｍｍｏｌ·Ｌ－１，溶于ＰＢＳ液，冻存；氮蓝四唑
盐 （ＭＴＴ，美国 Ｓｉｇｍａ公司）；１０％胎牛血清 ＤＭＥＭ
（ＧＩＢＣＯ，美国）。原位细胞凋亡检测试剂盒（Ｂｏｅ
ｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ，德国）。
２ 方法
２１ 细胞培养及体外治疗 大鼠 Ｃ６胶质瘤细胞
接种于３５ｍｍ培养皿，加入含１０％胎牛血清ＤＭＥＭ
培养液，在５％ＣＯ２，３７℃条件下培养至细胞接近长
满，进行体外抑瘤实验。实验分６组，即对照组和５
个治疗组。５个治疗组的Ａｓ２Ｏ３液浓度分别为１，２，
４，６，８μｍｏｌ·Ｌ－１［６］。
２２ 动物模型建立 模型建立参阅文献［７］进行，
大鼠经１０％水合氯醛（３００ｍｇ·ｋｇ－１体重）腹腔注
射麻醉后，固定于江湾Ⅰ型脑立体定向仪上，在前囟
位置，右矢状缝旁开３０～３５ｍｍ处用牙钻钻孔，
孔径１２ｍｍ，用微量注射器将细胞悬液缓慢注入大
鼠右侧尾状核，缝合皮肤。每只动物注入的 Ｃ６胶
质瘤细胞数５×１０５个／１５μＬ。
２３ 分组及给药 将动物分为模型组和治疗组，每
组１０只，接种Ｃ６鼠胶质瘤细胞５ｄ后，经核磁共振
成像（ＭＲＩ）证实有肿瘤形成，于第６天按２２项下
方法麻醉、固定动物，在接种相同部位（大鼠右侧尾
状核）注入２０μＬ生理盐水（模型组）或１ｍｍｏｌ·
Ｌ－１Ａｓ２Ｏ３（治疗组），仅用１次。
２４ 细胞生长率测定 细胞接种于９６孔板，按细
胞密度４０００个／孔，分别于接种后１，２，３，４，５，６ｄ
用噻唑蓝比色分析（ＭＴＴ）法检测。每孔中加入５ｇ
·Ｌ－１ＭＴＴ２０μＬ（１／１０培养液），３７℃条件下再培
养４ｈ，弃上清，每孔加二甲基亚砜２００μＬ，振摇１０
ｍｉｎ，紫外分光光度计５７０ｎｍ波长测定各孔吸光度
（Ａ），取每组６孔吸光度的均值。肿瘤细胞存活率
（％）＝实验组Ａ／对照组Ａ×１００％。
２５ Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测Ｂｃｌ２蛋白表达 Ｂｃｌ２单克
隆抗体（抗体稀释液）的Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交具体步骤参阅
文献［８］进行，以鼠肌动蛋白单抗检测作为各自的
内对照。
结果判定以不同的蛋白相对分子质量标准电泳
带依其距点样孔的距离作一标准曲线，再以杂交条
带距点样孔的距离与之相对照确定检测蛋白的相对
分子质量大小。用图像分析仪扫描所检测的杂交图
像，得出杂交图像的峰面积值，同时扫描 βａｃｔｉｎ。
Ｂｃｌ２和其自身 βａｃｔｉｎ峰面积值比值代表 Ｂｃｌ２蛋
白的表达量。
２６ 免疫组化染色 免疫组化染色参阅文献［８］
进行，即已固定的组织和细胞盖玻片加入稀释的
ＰＣＮＡ（１∶５０）单抗，进行免疫组化染色，以细胞膜
和／或细胞浆出现棕黄染色者为 ＰＣＮＡ表达阳性细
胞，计算ＰＣＮＡ标记指数。
２７ 细胞凋亡检测 按原位细胞凋亡检测试剂盒
说明书进行，将生长有细胞的盖玻片用新鲜配制的
４％多聚甲醛室温固定２０ｍｉｎ，浸浴后标记再浸浴；
加ＴＵＮＥＬ标记反应混合物２０～２５μＬ，３７℃孵育，
轻摇洗；信号显示和分析：加５０μＬｃｏｎｖｅｒｔｅｒＡＰ，３７
℃孵育，最后加底物显色液１００μＬ，显微镜下控制
显色至满意。光镜下观察细胞核染色情况，阳性凋
亡细胞核显蓝色，阴性细胞不着色。
２８ 一般观察 各组动物一般状况与生存期，观察
动物觅食、饮水及肢体运动，计算平均生存期。
２９ 肿瘤ＭＲＩ动态监测及病理组织学检查 以动
物接种瘤细胞后５～７，１４，２８，５６，８４，１１２ｄ为时限，
用高分辨率 ＭＲＩ动态监测脑肿瘤体积变化。自然
死亡或处死动物均作肿瘤病理组织学检查。
２１０ 统计方法 采用 ＳＰＳＳ１００软件包进行，数
据以 珋ｘ±ｓ表示，多组间分析用 Ｆ检验，二组间分析
用ｔ检验。
３ 结果
３１ 体外细胞增殖率测定 与对照组比较，Ａｓ２Ｏ３
处理后，Ｃ６细胞存活率均明显下降，且不同浓度组
之间存活率也有明显差异（Ｐ＜００１），提示随着
Ａｓ２Ｏ３浓度增高及作用时间的延长，其抑制肿瘤细胞
增殖的作用渐强（表１）。
３２ ＰＣＮＡ染色 Ａｓ２Ｏ３处理组的 Ｃ６细胞增殖指
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表１ ５种浓度Ａｓ２Ｏ３治疗后不同时间Ｃ６鼠胶质瘤细胞生长率测定结果（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６） ％
组别 剂量／μｍｏｌ·Ｌ－１ １ｄ ２ｄ ３ｄ ４ｄ ５ｄ ６ｄ
对照 － １００００±１２９ １００００±３５１ １００００±２９５ １００００±４８１ １００００±２１９ １００００±４２１
Ａｓ２Ｏ３ １ ９８７５±３６８ ９６４７±３２５ ９４９９±２０８ ９４０８±３１３ ９１０１±５２１ ８９５５±４２８
２ ９７８８±１５６ ９６４１±２５３ ９４２８±１６６ ９３７７±４７８ ９００７±２７６ ８８０５±１２５
４ ９６３１±２６１１） ８９０２±１２１１，２）８４５１±９０８１） ８２５７±１０３５１） ７３４７±１１１１） ６９９４±１８０１）
６ ９６０８±２８４１） ９０９２±３５８１） ８４１１±１０１５１） ７２８１±２８６１，２） ６５６６±５３２１，２） ６３９８±２０７１，２）
８ ９５７９±３９９１） ９００１±２３６１） ７２６３±１８３１，２） ６７３６±３６９１，２） ６０３７±３９２１，２） ５８４５±２４２１，２）
注：与对照和１，２μｍｏｌ·Ｌ－１组相比１）Ｐ＜００１；与４μｍｏｌ·Ｌ－１组相比２）Ｐ＜００５
数随药物浓度升高而下降，即对照和低浓度 Ａｓ２Ｏ３
（１，２μｍｏｌ·Ｌ－１）与中、高浓度Ａｓ２Ｏ３（４～８μｍｏｌ·
Ｌ－１）相比Ｐ＜００１；中浓度Ａｓ２Ｏ３（４μｍｏｌ·Ｌ
－１）与
高浓度Ａｓ２Ｏ３（６，８μｍｏｌ·Ｌ
－１）相比Ｐ＜００５。
３３ 细胞凋亡检测 对照组大鼠 Ｃ６胶质瘤细胞
凋亡罕见；中、高浓度Ａｓ２Ｏ３（４～８μｍｏｌ·Ｌ
－１）治疗
的Ｃ６细胞凋亡指数明显高于对照和低浓度 Ａｓ２Ｏ３
组（１，２μｍｏｌ·Ｌ－１）（Ｐ＜００１）。
３４ Ａｓ２Ｏ３治疗前后 Ｃ６细胞 Ｂｃｌ２蛋白表达 Ａｓ２
Ｏ３处理组的 Ｃ６细胞 Ｂｃｌ２蛋白表达随药物浓度升
高而呈下降趋势（图１）。
Ａ对照组；Ｂ－ＦＡＳ２Ｏ３１～８μｍｏｌ·Ｌ－１浓度组
图１ 对照组和不同浓度Ａｓ２Ｏ３治疗后Ｂｃｌ２表达
３５ 动物一般状况和生存期 接种 Ｃ６胶质瘤细
胞１周后，对照组大鼠自行觅食水明显减少，继尔出
现进行性左侧偏瘫，３周内死亡（１７８±０９２）ｄ；治
疗组８只动物死于２４～３６（３２１±１３５）ｄ；余２只
第１２０天时处死。
３６ ＭＲＩ监测肿瘤大小及病理检查 对照组接种
细胞１周后有瘤灶形成，ＭＲＩ呈长 Ｔ１长 Ｔ２信号，均
匀强化或混杂密度。２周时肿瘤已显著生长，中线
结构移位，同侧侧脑室受压，２周时瘤灶体积为
（１８１６±８８６）ｍｍ３。治疗组１０只大鼠的肿瘤体
积在２周时病灶体积（１７７１３±７５７）ｍｍ３；４周时，
扫描的４只动物，１只瘤体有缩小，另３只瘤体变化
不大，病灶体积（１７２２８±８２２）ｍｍ３；８～１２周时，
残存２只动物，１只瘤灶基本消失，１只残存小瘤灶。
２组动物肿瘤组织中可见大量神经胶质来源的
肿瘤细胞，Ｓ１００与 ＧＦＡＰ呈阳性表达，提示成功地
建立了鼠胶质瘤动物模型。
治疗组观察期间死亡的８只动物瘤体与对照组
相当。
４ 讨论
恶性脑胶质瘤是临床上最难治性的肿瘤之一，
积极探索新的治疗方法具有明显的临床实际意义。
笔者先前的研究［５］结果以及 Ｚｈｕ等［９］和 Ｋａｎｚａｗａ
等［１０］的结果均不同程度地证实 Ａｓ２Ｏ３具有体外抑
制人脑胶质瘤作用，但尚缺乏动物体内进一步验证。
本研究结果显示 Ａｓ２Ｏ３处理后的大鼠 Ｃ６胶质
瘤细胞体外生长受到明显抑制，失去指数生长特性，
抑制程度不但随时间延长而加强，而且在一定范围
内也随使用剂量的加大而加强，呈现出剂量依赖关
系，在第６天达最大，抑瘤率５８４５％。另一方面，
相对高浓度的 Ａｓ２Ｏ３治疗后，肿瘤细胞的增殖活性
明显下降，表明Ａｓ２Ｏ３可以抑制体外培养的大鼠 Ｃ６
胶质瘤细胞的生长。进一步证明三氧化二砷对不同
类型的恶性胶质瘤细胞的体外生长具有抑制作用。
目前研究认为，Ａｓ２Ｏ３抗肿瘤作用是多途径的、多靶
点的复杂过程。本组工作发现，与对照组细胞凋亡
罕见相比，Ａｓ２Ｏ３治疗组细胞凋亡明显增加，Ｗｅｓｔｅｒｎ
印迹进一步发现 Ａｓ２Ｏ３处理组细胞 Ｂｃ１２蛋白表达
水平也相应下降。Ａｓ２Ｏ３诱导人肝细胞 ＱＧＹ７７０１
和ＱＧＹ７７０３凋亡后，观察到 Ｂｃ１２基因表达下调，
同时Ｂａｘ和 Ｆａｓ基因上调［１１］。在诱导头颈部鳞状
细胞癌 ＰＣＩ１细胞的凋亡中，发现 Ｂａｘ基因表达上
调，而Ｂｃ１２基因表达无变化［３］，说明 Ａｓ２Ｏ３诱导某
些肿瘤细胞凋亡至少部分是通过改变Ｂｃ１２家族来
实现，但不同类型的肿瘤细胞，其表达方式改变不
同，相关机制尚待深入研究。
基于体外研究，笔者选择治疗效果最佳的一个
浓度进行体内实验。结果显示，原位注射 Ａｓ２Ｏ３的
１０只荷瘤鼠中，其生存时间均有不同程度的延长，
其中２只更获得较长时间的生存，并有１只瘤体在
影像学上消失。表明类似于临床治疗方法的肿瘤原
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位治疗也初步证实 Ａｓ２Ｏ３对脑胶质瘤的抑制作用。
孙鸿德等［１］曾报道用“癌灵Ⅰ号”治疗的３２例 ＡＰＬ
患者，长期生存者未出现脑膜白血病，认为Ａｓ２Ｏ３可
通过血脑屏障，至今相关验证研究不多。砷剂的毒
性作用主要是通过口服经肠道吸收后，在肝脏内经
酶作用后产生剧毒性，静脉等其他途径给药并无剧
毒性，因此，本组体内研究采用了先前相关研究中使
用、并证明是一种有效途径的瘤内直接注射法，但该
法也存在着瘤内药物分布不均和实施较繁琐等不
足［７］。因此，静脉和鞘内等常规途径给药后致
Ａｓ２Ｏ３体内分布状况有待进一步研究。
［参考文献］
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（１２）：１７０
［２］ ＪｉａｎｇＸＨ，ＷｏｎｇＢＣ，ＹｕｅｎＳＴ，ｅｔａｌＡｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅｉｎｄｕｃｅ
ａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｓｔｈｒｏｕｇｈｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆ
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［３］ ＳｅｏｌＪＧ，ＰａｒｋＷＨ，ＫｉｍＥＳ，ｅｔａｌＰｏｔｅｎｔｉａｌｒｏｌｅｏｆｃａｓｐａｓｅ３
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ｎｅｃｋｃａｎｃｅｒｃｅｌｓ［Ｊ］ＩｎｔＪＯｎｃｏｌ，２００１，１８：２４９
［４］ ＳｈｅｎＺＹ，ＳｈｅｎＪ，ＬｉＱＳ，ｅｔａｌＭｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ
ｃｈａｎｇｅｓｏｆｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｉｎａｐｏｐｔｏｔｉｃｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｓ
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［６］ ＳｈｅｎＺＸ，ＣｈｅｎＧＱ，ＴａｎｇＷ，ｅｔａｌＵｓｅｏｆａｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅｉｎ
ｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｃｕｔｅｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａ：Ⅱ ｅｆｉｃａｃｙａｎｄ
ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｉｎｒｅｌａｐｓｅｄｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］Ｂｌｏｏｄ，１９９７，８９：
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［７］ 夏之柏，浦佩玉，黄 强，等连接蛋白４３基因治疗鼠Ｃ６脑
胶质瘤的体内实验研究［Ｊ］中华肿瘤杂志，２００２，２４（３）：
２１２
［８］ 夏之柏，浦佩玉，黄 强，等连接蛋白基因 Ｃｘ４３抑制胶质
瘤细胞增殖及其机理的初步探讨［Ｊ］中华肿瘤杂志，２００３，
２５（１）：４
［９］ ＺｈｕＪ，ＫｏｏｅｎＭ，Ｑｕｉｇｎｏｎ，ｅｔａｌＡｒｓｅｎｉｃｉｎｄｕｃｅｄＰＭＬｔａｒｇｅｔｉｎｇ
ｏｎｔｏｎｕｃｌｅａｒｂｏｄｉｅｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｃｕｔｅｐｒｏｍｙ
ｅｌｏｃｙｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａ［Ｊ］ＰｒｏｃＮａｔｌＣａｎｃｅｒＳｃｉ，１９９７，９４：３９７８
［１０］ ＫａｎｚａｗａＴ，ＫｏｎｄｏＹ，ＩｔｏＨ，ｅｔａｌＩｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆａｕｔｏｐｈａｇｉｃｃｅｌ
ｄｅａｔｈｉｎｍａｌｉｇｎａｎｔｇｌｉｏｍａｃｅｌｓｂｙａｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅ［Ｊ］Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ，２００３，６３：２１０３
［１１］ ＬｉａｎｇＹ，ＹａｎＣ，ＳｃｈｏｒＮＦ，ｅｔａｌＡｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｔｈｅａｂｓｅｎｃｅｏｆ
ｃａｓｐａｓｅ３［Ｊ］Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００１，２０：６５７０
Ｓｔｕｄｙｏｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｏｆａｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅｏｎｇｒｏｗｔｈｏｆ
ｒａｔＣ６ｇｌｉｏｍａｃｅｌｓ
ＸＩＡＺｈｉｂａｉ，ＷＵＸｉｎｊｉａｎ，ＱＩＴｉｅｗｅｉ，ＨＵＡＮＧＺｈｅｎｇｓｏｎｇ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ＦｉｒｓｔＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｕｎＹａｔｓｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１００８０，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｏｆａｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅ（Ａｓ２Ｏ３）ｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｒａｔＣ６ｇｌｉｏｍａｃｅｌｓ（Ｃ６
ｃｅｌｓ）ａｓｗｅｌａｓｆｉｎｄｉｎｇｏｕｔｔｈｅｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙｏｆｕｓｉｎｇＡｓ２Ｏ３ａｓｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｏｆｇｌｉｏｍａｓＭｅｔｈｏｄ：Ｃ６ｃｅｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｂｙｄｉｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅ
ｏｆＡｓ２Ｏ３（１，２，４，６ａｎｄ８μｍｏｌ·Ｌ
－１）ＭＴＴａｓｓａｙａｎｄｓｔａｉｎｉｎｇｆｏｒＰＣＮＡｗｅｒｅｕｓｅｄｆｏｒｃｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎＣｅｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｗａｓｄｅｔｅｒ
ｍｉｎｅｄｂｙＴＵＮＥＬｍｅｔｈｏｄａｎｄＢｃｌ２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔＰａｒｅｎｔａｌｒａｔＣ６ｃｅｌｓ（５×１０５／１５μＬ）ｗｅｒｅｉｍｐｌａｎｔｅｄｉｎ
ｔｏｒｉｇｈｔｃａｕｄａｔｅｎｕｃｌｅｕｓｏｆｍａｌｅＳＤｒａｔｓａｓｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐＲａｔｓｂｅａｒｉｎｇｃｅｒｅｂｒａｌＣ６ｇｌｉｏｍａｓａｓｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ１ｍｍｏｌ
·Ｌ－１Ａｓ２Ｏ３Ｔｈｅｇｅｎｅｒａｌｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎ，ｓｕｒｖｉｖａｌｔｉｍｅ，ＭＲＩｄｙｎａｍｉｃｓｃａｎｎｉｎｇａｎｄｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆａｌｒａｔｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄ
Ｒｅｓｕｌｔ：ＡｌｔｈｅｔｒｅａｔｅｄｃｅｌｓｓｈｏｗｅｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＭＴＴｍｅｔｈｏｄ（Ｐ＜００１）ａｎｄｓｔａｉｎｉｎｇｆｏｒＰＣＮＡＩｎ
ｓｉｔｕｌａｂｅｌｉｎｇａｐｏｐｔｏｔｉｃＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔｏｆｔｈｅｔｒｅａｔｅｄｃｅｌｓｄｅｍｏｎａｔｒａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｅｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｆｏｌｏｗｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ｗｉｔｈＡｓ２Ｏ３（Ｐ＜００１）ＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢｃｌ２ｐｒｏｔｅｉｎｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄＡｌｒａｔｓｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｄｉｅｄｏｆｃｅｒｅ
ｂｒａｌｇｌｉｏｍａｓｗｉｔｈｉｎ３ｗｅｅｋｓａｆｔｅｒｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆＣ６ｃｅｌｓ（１７８±０９２）ｄＥｉｇｈｔｏｕｔｏｆ１０ｒａｔｓｉｎｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐｄｉｅｄｗｉｔｈｉｎ２４－３６
ｄａｙｓ（３２１±１３５）ｄａｎｄｏｔｈｅｒ２ｏｎｅｓｋｅｐｔａｌｉｖｅｂｅｙｏｎｄ１２０ｄａｙｓｗｉｔｈｏｎｅｔｒｅａｔｅｄｒａｔｂｅｉｎｇｔｏｔａｌｙｄｉｓａｐｐｅａｒｏｆｔｈｅｔｕｍｏｒｆｏｃｉａｎｄａｎ
ｏｔｈｅｒｈａｖｉｎｇａｌｉｔｌｅｒｅｓｉｄｕｅｏｆｔｕｍｏｒＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｓｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｅｆｉｃａｃｙｏｆＡｓ２Ｏ３ｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｇｌｉｏｍａｓ
ＩｔａｌｓｏｓｕｇｇｅｓｔｓｔｈａｔＡｓ２Ｏ３ｍａｙｂｅａｇｏｏｄｃａｎｄｉｄａｔｅｆｏｒｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｏｆｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａｓ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ａｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅ；ｒａｔＣ６ｇｌｉｏｍａｃｅｌｓ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；Ｂｃｌ２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
［责任编辑 古云侠］
·３５１２·
第３３卷第１７期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８