全 文 :要药用菊花类型间的亲缘关系 o并得到了它们之间
的相似系数 o构建了药用菊花类型间的关系图 o为药
用菊花的系统分类 !资源合理保护利用和新品种选
育提供理论依据 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qussx qut{ q
≈u 戴思兰 o钟 杨 1 中国菊属植物部分种的数量分类研究 1 北京
林业大学学报 ot||x otzkwl }|1
≈v 戴思兰 o陈俊愉 1 中国菊属一些种的分支分类学研究 1 武汉植
物研究 ot||z otxktl }uz1
≈w 邹喻苹 o葛 颂 o王晓东 o等 q系统与进化植物学中的分子标
记 q北京 }科学出版社 ousst1 ty ovs owt q
≈x 郭巧生 o何先元 o刘 丽 o等 q药用白菊花新品种选育研究 q
中国中药杂志 oussv ou{ktsl }u{ q
≈x 王德群 o梁益敏 o刘守金 q中国药用菊花的品种演变 q中国中
药杂志 ot||| ouwktsl }x{w q
≈y 戴思兰 o陈俊愉 o李文彬 q菊花起源的 °⁄分析 q植物学报 o
t||{ owskttl }tsxv q
Ρ ΑΠ∆ αναλψσισφορ γενετιχ διϖερσιτψ οφ Χηρψσαντηεµυµ µοριφολιυµ
÷ • ±¨2¥¬±o ±¬¤²2¶«¨ ±ªo • ≤«¤±ª2¯¬±
(Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Μεδιχιναλ Ματεριαλσ, Νανϕινγ Αγριχυλτυραλ Υνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utss|x , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ª¨ ±¨ ·¬¦§¬√ µ¨¶¬·¼ ²© Χηρψσαντηεµυµ µοριφολιυµ ¤··«¨ ¯¨ √¨¯ ²© °²¯ ¦¨∏¯¤µ¥¬²¯²ª¼q Μετηοδ :
׫¨ ·²·¤¯ ª¨ ±²°¬¦⁄ º¤¶ ¬¨·µ¤¦·¨§©µ²° ° §¨¬¦¬±¤¯ ¦«µ¼¶¤±·«¨ °∏°¶¥¼ u h ≤×
° ·¨«²§q ±§·«¨ ª¨ ±¨ ·¬¦§¬√ µ¨¶¬·¼ ²©uu Χ. µοριφολιυµ
¤¦¦¨¶¶¬²±¶º¤¶·¨¶·¨§¥¼ °⁄ °¤µ®¶q׫¨ ×≥≠≥ ¶²©·º¤µ¨ º¤¶∏¶¨§·²¤±¤¯¼½¨ ·«¨ °¤µ®¶qΡεσυλτ : uy ts2° µ¨¤µ¥¬·µ¤µ¼ ³µ¬° µ¨¶º µ¨¨ ©²∏±§·²
¤¦´∏¬µ¨ ³²¯¼°²³«¬¦µ¨¶∏¯·¶q·²·¤¯ ²©uvv ¥¤±§¶º µ¨¨ ¤°³¯¬©¬¨§o²©º«¬¦«{|1z h ¥¤±§¶º µ¨¨ ©²∏±§·²¥¨ ³²¯¼°²³«¬¦q{1sw ³²¯¼°²³«¬¦¥¤±§¶
º µ¨¨ ¤°³¯¬©¬¨§¥¼ ¤¨¦«³µ¬° µ¨²±·«¨ ¤√ µ¨¤ª¨ q׫¨ µ¨¶∏¯·¶²©¦¯∏¶·¨µ¤±¤¯¼¶¬¶¥¼ ∏¶¬±ª ° ° ·¨«²§¶«²º §¨·«¤·¤¯¯·«¨ ·¨¶·¨§¤¦¦¨¶¶¬²±¶
¦²∏¯§¥¨ §¬©©¨µ¨±·¬¤·¨§¥¼ °⁄ °¤µ®¶qΧονχλυσιον : ׫¨ µ¨ ¤¦·∏¤¯ ¼¯ ¬¨¬¶·¨§°∏¦«ª¨ ±¨ ·¬¦§¬√ µ¨¶¬·¼¤··«¨ °²¯ ¦¨∏¯¤µ¯ √¨¨¯ ¤°²±ª·«¨ ª¨µ°³¯¤¶°
µ¨¶²∏µ¦¨¶²© Χ. µοριφολιυµ . °⁄ °¤µ®¶¦²∏¯§¥¨ ©¨©¨ ¦·¬√¨·²²¯¶·²¦²±¶·µ∏¦·⁄ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ª¶²© Χ. µοριφολιυµ . ׫¨ §¬©©¨µ¨±¦¨¶¥¨·º¨¨ ±
·«¨ ·¨¶·¨§¦«µ¼¶¤±·«¨ °∏°¶¤µ¨ µ¨ ¤¯·¨§·²·«¨ ±¨√¬µ²±° ±¨·¶q ²º √¨ µ¨o¬·º¤¶¤©©¨¦·¨§¥¼ ª¨ ±¨ ·¬¦©¤¦·¨µ¶°²µ¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ q
[ Κεψ ωορδσ] Χηρψσαντηεµυµ µοριφολιυµ ; °⁄~ª¨ ±¨ ·¬¦§¬√ µ¨¶¬·¼~¦¯∏¶·¨µ¤±¤¯¼¶¬¶ ≈责任编辑 张宁宁
≈收稿日期 ussx2st2ux
≈通讯作者 3朱平 oר¯ }kstsl yvtyxt|z o∞2°¤¬¯}½«∏³¬±ª¬°° q
¤¦q¦±
灵芝菌丝营养生长特征与子实体形成相关性研究
王淑芳 o何秀峰 o何惠霞 o朱 平 3
k中国医学科学院 中国协和医科大学 药物研究所 o北京 tsssxsl
≈摘要 目的 }选择适于代料栽培的灵芝菌种 ∀方法 }利用培养皿及三角瓶进行固体及液体培养 o后期以瓶栽
结果验证 ∀结果 }易出多孔组织的菌株瓶栽时子实体形成快 o孢子产量高 ∀结论 }菌丝阶段出现多孔组织的难易可
作为代料栽培菌种选择的特性与依据 ∀
≈关键词 灵芝 ~多孔组织 ~子实体 ~培养
≈中图分类号 ≥ xyz ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylst2ssut2sv
灵芝 Γανοδερµα λυχιδερµk¨¼¶¶1 ∞¬ ƒµ1l¤µ¶·是
担子菌纲多孔菌目多孔菌科灵芝属真菌≈t o是祖国
医药学宝库中的珍品 ∀有大量研究结果证明 o灵芝
子实体及其孢子粉具有广泛的药理作用 o且毒性极
低≈u o有些制剂已应用于临床多年 o而更多的制剂则
是作为保健品投放市场 ∀灵芝产品多由其子实体 !
孢子粉或灵芝发酵物加工而成 o灵芝菌种的优劣不
#tu#
第 vt卷第 t期
ussy年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼oussy
仅影响灵芝的栽培与发酵生产 o更直接关系到产品
的质量 ∀当人们收集到一些无编号 o不了解其生物
学特性 o或经长久保存不知其有否发生变异退化的
灵芝菌种时 o很难决定选择哪个菌种 o必须通过栽培
观察比较才能选出目的菌株 ∀但如果时间紧迫 o或
无栽培条件及环境 o该如何对不同菌种进行选择呢
作者通过对 {个不同来源灵芝菌种的器皿内培养试
验 o并结合后期栽培结果 o了解到其某些特征与形成
子实体和产孢之间具有相关性 o可为栽培前菌种选
择提供依据 ∀
1 材料和方法
111 供试菌种 见表 t ∀
表 t 供试菌株
代号 来源 保存方法 保存日期 保存温度
江西 石蜡油 t|{y2sv 室温
山东 胶塞 t||x2sw 室温
≤ 浙江 冰箱 ussu2tu w ∗ { ε
⁄ 北京 冰箱 ussu2tu w ∗ { ε
∞ 北京 冰箱 ussu2tu w ∗ { ε
ƒ 韩国 胶塞 t||{2ts 室温
韩国 胶塞 t||{2ts 室温
日本 胶塞 t||{2ts 室温
112 平板固体培养基培养
麦麸汁综合培养基 }取 xs ª麦麸煮沸 s1x «o取
汁去渣 o加蔗糖 !葡萄糖各 ts ªo硫酸镁 t1x ªo磷酸
二氢钾 v ªo琼脂粉 t{ ªo补水至 t sss °∀
11211 对峙反应鉴别≈v 共有 {个菌株 o每 v个菌
株构成 t个组合 o等距离接种在固体平板k δ | ¦°l
上 o重复 v次 oux ε 培养 ∀
11212 生长比较 经转管复活的 {菌株分别单菌
株接种于固体平板中央 o重复 v次 oux ε 培养 ∀接
种点萌发定植入基质后划线 o然后每 u §再于菌丝
先端划线 o测量生长距离 o除以 u得每天生长速度 ∀
113 三角瓶内固体及液体培养
≠麦麸木屑固体培养基k h l }麦麸 v o柞木屑 y o
白糖 u o琼脂粉 s1v o自来水配制 ∀ 麦麸木屑液体
培养基 }以 u h麦麸及 w h柞木屑的浸煮液为基础 o
添加 u h 白糖 os1szx h 硫酸镁 os1t h 磷酸二氢钾 ∀
≈豆饼粉液体培养基k h l }豆饼粉 t o蔗糖 t o葡萄糖
t o硫酸镁 s1t o磷酸二氢钾 s1t ∀ …土豆综合液体培
养基 }以 us h 土豆汁为基础 o加蔗糖及葡萄糖各
t h o硫酸镁 s1tx h o磷酸二氢钾 s1v h o∂
t微量 ∀加
t1{ h琼脂为固体培养基 ∀
用 xss °三角瓶装 uss °液体培养基 ~用 uxs
°三角瓶装 tss °固体培养基 ∀常规高压灭菌 vs
°¬±∀液体培养基接种后先摇培 t周ku{ ε ot{s µ#
°¬±ptl o然后 u{ ε 静置培养 ∀
114 棕色广口瓶栽培比较
培养基组成k h l }柞木屑 zu o麦麸 us o玉米粉 y o
白糖 t o石膏粉 t ∀常规高压灭菌 ws °¬±∀选择生长
快易出多孔组织代号为 ƒ o⁄u菌株及不易出多孔组
织的 o u株接种 o在自然气候条件下培养kuu ∗ vu
ε l o进行比较研究 ∀
2 结果与讨论
211 对峙反应
所用 {个菌株相互间均有拮抗反应 o拮抗带明
显 ∀提示这些菌株的遗传背景有差异 o彼此独立 ∀
另外它们的生长速度也有差异 ∀
212 各菌株生长情况
从表 u可知 o菌丝生长有粉层出现者 o后期均有
多孔组织出现 o且它们的生长速度一般较快k如 ƒ o
≤ o⁄o的生长速度分别排在第 t ov ow ox的位置l ∀
无粉层出现者后期没有见到多孔组织 o且除了 以
外 o一般生长相对较慢k如 o
o∞的生长速度分别
排在第 y oz o{的位置l ∀后一种类型可能与多次传
代和r或保存不当引起菌种变异退化有关 ∀
表 u 各菌株菌丝生长速度及主要特征
代号
生长速度
r°°#§pt
排次 菌丝主要特征
w q{ x 白 !密 !有粉层 o后期出多孔组织
u qv z 白 !微黄 !菌丝不均匀
≤ y qv v 白 !均匀 !有粉层 o后期出多孔组织
⁄ x qx w 白 !微黄 !有粉层 o后期出多孔组织
∞ t q{ { 纯白 !菌丝细 !绒状
ƒ z q{ t 白 !菌丝粗 !有粉层 o后期出多孔组织
z qv u 白兼黄 o平铺 !放射状
v q{ y 白兼深黄 o块状 !平铺
213 三角瓶培养结果
麦麸木屑培养基在成分上因有木屑加入而与栽
培培养基极为相似 o可以预期菌种在栽培培养基上
生长状况 ∀表 v显示 }在麦麸木屑固体培养基上各
菌株的生长势与其在麦麸汁综合培养基上的相一
致 o但在麦麸木屑液体培养基上 o菌株 ∞的生长速
度却异常地快 o只是菌丝并不粗壮 o也始终不见有多
孔组织形成 ∀同样地 o直到培养 u个月后也只有 ƒ o
⁄o≤ o 先后出现了多孔组织 ∀在培养 w个月时一
直未出现多孔组织的 o 在固体培养基上产生了
芝柄 ∀在无木屑培养基上形成多孔组织的情况见表
#uu#
第 vt卷第 t期
ussy年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼oussy
w ∀结果可见 oƒ o⁄o≤ o 在上述几种培养基上均能
产生多孔组织 o其中 oƒ在上述几种培养基上均能很
快地形成多孔组织 ~⁄在豆饼粉培养基和麦麸木屑
培养基k固体或液体l上能较快地产生多孔组织 ~≤
在土豆综合培养基k固体或液体l能较快地产生多孔
组织 ∀这些菌株在早期的固体平板上均有粉层出
现 ∀
表 v 三角瓶内固体及液体培养情况
代号
麦麸木屑固体培养基 麦麸木屑液体培养基
菌丝 u周
生长势
多孔组织
kw周l
菌丝 u周
生长量r h
多孔组织
kw周l
7 n {s n
n p xs p
≤ 8 n ys n
⁄ 8 6 ys 6
∞ n p |s p
ƒ 8 7 |s 8
8 p ys p
6 p ws p
注 }菌丝生长覆盖培养基表面 us h 为 n ows h 为 6 oys h 为 7 o
{s h以上为 8 ~多孔组织面积 t ¦°u 为 n ou ¦°u 为 6 ov ¦°u 为 7 ow
¦°u及以上为 8 o无多孔组织为 p k表 w同l
214 瓶栽比较
对上述 u种类型kƒ o⁄有多孔组织形成 o o无
多孔组织形成l做进一步比较研究 o在自然条件下
kuu ∗ vu ε l培养 ∀结果显示 }有多孔组织形成者 o
其芝柄分化 !芝盖分化和芝盖散发孢子粉所需时间
分别为 ux oxs oys §~而无多孔组织形成者 o其芝柄分
化 !芝盖分化和芝盖散发孢子粉所需时间则分别为
w{ oz{ otsv §∀另外 o二者在产孢量上也有明显差
表 w 在无木屑培养基上多孔组织产生情况
代号
土豆综合固体
培养基
土豆综合液体
培养基
豆饼粉液体
培养基
n n n
p p p
≤ 7 7 n
⁄ n n 7
∞ p p p
ƒ 7 7 7
p p p
p p p
异 o前者平均每株产孢 w ª以上 o而后者平均每株产
孢低于 t ª∀说明 ƒ o⁄无论在芝柄分化 !芝盖分化还
是在芝盖散发孢子粉方面都比 o大大缩短 o前者
属于早熟型株系 o且产孢量相对较多 o孢子质量好 o
适于代料栽培 ∀
3 小结
不同灵芝菌株在进行固体或液体培养时 o其菌
丝生长阶段可分为 u种类型 o有的菌株培养 u周后
就产生多孔组织 o有的菌株 u个月也不产生多孔组
织 ∀产生多孔组织的为生育期短的早熟株系 o产孢
多 !质量好 o适于代料栽培 ∀因此 o在选择代料栽培
的菌种时 o可简单地通过平板培养 !根据多孔组织的
有无加以确定 ∀
≈参考文献
≈t 刘 波 q中国药用真菌 q太原 }山西人民出版社 ot|z{ q|x q
≈u 林志彬 q灵芝的现代研究 q北京 }北京医科大学出版社 ousst q
ut| q
≈v 郭美英 q金针菇杂交育种研究 q食用菌 ot||v otukwl }w q
≈w 王淑芳 o张荫麟 o王成福 q灵芝担孢子散发规律的观察 q中药
材 ot|{z okxl }t q
Χορρελατιονσ βετωεεν τηε χηαραχτερσ οφ τηε µψχελιυµ ϖεγετατιϖε γροωτη
ανδ τηεφορµατιον οφ τηεφρυιτινγ βοδψ οφ Γανοδερµα λυχιδερµ
• ≥«∏2©¤±ªo ∞ ÷¬∏2©¨ ±ªo ∞ ∏¬2¬¬¤o °¬±ª
(Ινστιτυτε οφ Ματερια Μεδιχα , Χηινεσε Αχαδεµψ οφ Μεδιχαλ Σχιενχεσ ανδ Πεκινγ Υνιον Μεδιχαλ Σχιενχεσ , Βειϕινγ tsssxs , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶¨¯¨ ¦·¤³µ²³¨µΓανοδερµαλυχιδερµ ¶·µ¤¬±©²µ·«¨ ©µ∏¬·¬±ª¥²§¼ ³µ²§∏¦·¬²±q Μετηοδ : ׫¨ ¶·µ¤¬±¶º µ¨¨ ¦∏¯·¬2
√¤·¨§²±·«¨ ¤ª¤µ° §¨¬¤¤±§¬±·«¨ ¬¯´∏¬§° §¨¬¤oµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼q׫¨ ±·«¨ ¶·µ¤¬±¶º µ¨¨ ¬±²¦∏¯¤·¨§²±·²·«¨ ¶²¯¬§° §¨¬∏° °¤§¨ ©µ²° ¤ªµ¬¦∏¯·∏µ¤¯
³µ²§∏¦·¶k¶∏¦«¤¶º«¨ ¤·¥µ¤±o¦²µ± ³²º§¨µoº²²§° ¤¨¯ o ·¨¦ql ¤±§¦∏¯·∏µ¨§©²µ¤¦¨µ·¤¬± ³¨µ¬²§q Ρεσυλτ : ≥·µ¤¬±¶oº«¬¦«º µ¨¨ ¤¨¶¬¨µ·²³µ²2
§∏¦¨ ³²¯¼³²µ¬¦·¬¶¶∏¨¶¤··«¨ √ ª¨¨·¤·¬√¨ªµ²º·«¶·¤ª¨ o º²∏¯§ ¥¨ °²µ¨ ∏´¬¦®¯¼·²©²µ° ©µ∏¬·¬±ª¥²§¼ º¬·««¬ª« ∏´¤¯¬·¼ ¤±§¼¬¨ §¯²©·«¨ ¶³²µ¨¶q
Χονχλυσιον :³³¨ ¤µ¤±¦¨ ²©·«¨ ³²¯¼³²µ¬¦·¬¶¶∏¨¶¤··«¨ °¼¦¨ ¬¯∏° √ ª¨¨·¤·¬√¨ªµ²º·«¶·¤ª¨ ¦²∏¯§¥¨ ∏¶¨§¤¶¤ °¤µ®¨µ©²µ·«¨ ¶·µ¤¬± ¶¨¯¨ ¦·¬²±©²µ
·«¨ Γ . λυχιδερµ ¶∏¥¶·¬·∏·¨§¦∏¯·¬√¤·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] Γανοδερµαλυχιδερµ ~³²¯¼³²µ¬¦·¬¶¶∏¨¶~©µ∏¬·¬±ª¥²§¼~¦∏¯·¬√¤·¬²± ≈责任编辑 张宁宁
#vu#
第 vt卷第 t期
ussy年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼oussy