全 文 ：Εφφεχτσ οφ τραδιτιοναλ χηινεσε µεδιχινε ∆ρψναρια φορτυνει
σµιτη ον προµ οτινγ τηε προλιφερατιον , διφφερεντιατιον
ανδ χαλχιφιχατιον οφ µ ουσε οστεοβλαστιχ ΜΧvΤv2Εt χελλσ
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kt . ∆επαρτµεντ οφ Στοµατολογψ, τηε Σεχονδ Αφφιλιατεδ Ηοσπιτα Χολλεγε οφ Μεδιχαλ Σχιενχε , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου , vtsssy , Χηινα ;
u . ∆επαρτµεντ οφ Μεδ Μιχροβιδογψ ανδ Παρυσιτολογψ, Χολλεγε οφ Μεδιχαλ Σχιενχε , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtsssy , Χηιναl
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¬¨³¯²µ¨ ·«¨ ©¨©¨¦·¶²© ⁄µ¼±¤µ¬¤©²µ·∏±¨ ¬q≥°¬·«k⁄ƒ≥l ²± ³µ²°²·¬±ª·«¨ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±o§¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²± ¤±§
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≈责任编辑 方文贤 
蓝桉油对脂多糖引起的
大鼠慢性支气管炎及黏蛋白高分泌的影响
吕小琴 3 o唐法娣 o王 砚 o赵 婷 o卞如濂
k浙江大学 医学院 国家食品和药品监督管理局 浙江呼吸药物研究实验室 o浙江 杭州 vtssvtl
≈摘要  目的 }观察蓝桉油对脂多糖引起的大鼠慢性支气管炎及黏蛋白高分泌的影响 ∀方法 }采用一次性气管内
注入 s qu °ª脂多糖复制大鼠慢性支气管炎模型 o观察 v周后的病理学改变 !支气管肺泡灌洗液变化 !免疫组化特点以
及蓝桉油对其的影响 ∀结果 }注入脂多糖后的病理学表现符合慢支的特征 ∀各给药组经不同浓度蓝桉油灌胃后能减
少中性粒细胞及淋巴细胞的浸润 o降低炎症程度 ~尤其是蓝桉油高剂量组kvss °ª#®ªp tl o能明显减少灌洗液中黏蛋白
含量 o使气管和细支气管上皮内黏蛋白 ˜≤x¤¦表达的阳性染色区域和程度明显减轻 o通过图像分析系统测得的吸光
度值和黏蛋白面积 h均明显低于模型组 ∀结论 }蓝桉油对脂多糖引起的大鼠慢性支气管炎具有一定的抗炎作用 o并能
抑制其气道黏蛋白高分泌现象 ∀
≈关键词  蓝桉油 ~脂多糖 ~慢性支气管炎 ~黏蛋白
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsu2sty{2sw
≈收稿日期  ussv2s{2sw
≈基金项目  浙江省科技计划项目kussv¦vvss{l
≈通讯作者  3吕小琴 oר¯ }ksxztl{xxuuts{ o∞2°¤¬¯ }¯√¬¬¤²´ ¬±ªuzu
ƒ ¶²«∏q¦²°
气道黏液高分泌是气道慢性炎症的一个重要病
理特征 o黏液潴留可加重感染和气道阻塞 o并使气体
交换功能障碍 ∀气道黏液的黏滞性 !黏附性和弹性
主要来自黏蛋白 o黏蛋白的高分泌不仅增加了黏液
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第 u|卷第 u期
ussw年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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量 o也使其特性改变 o不易被清除≈t ou  ∀黏蛋白 x¤¦
k˜≤x¤¦l主要由气道表层上皮及黏膜下腺分泌 o是
气道黏液的重要组成成分≈v ow  ∀
蓝桉油为从桃金娘科植物蓝桉叶中提取的挥发
油 o其主要成分为 Α2蒎烯和 t o{2桉油素≈x  ∀目前有
关蓝桉油及其两种成分的药理作用文献报道较少 o
而且是体外研究结果≈y  ∀本室采用脂多糖k°≥l气
管内注入的方法复制了大鼠慢性支气管炎模型 o观
察了蓝桉油在气道炎症及气道黏液的主要成分 ) 黏
蛋白高分泌中的作用 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 实验动物 健康雄性 ≥⁄大鼠 o体重kuss ?
usl ªo由浙江省实验动物中心提供 ∀
1 q1 q2 试剂及仪器 蓝桉精油 o批号 suswtt o本室
提供 o脂多糖k°≥ osuy }…yl购自美国 ≥¬ª°¤公司 o羊
抗大鼠 ˜≤x¤¦多克隆抗体购自美国 ¶¤±·¤2¦µ∏½公
司 o生物素标记兔抗山羊 ŒªŠ免疫组化试剂盒购自
美国 ¼°¨ §公司 ~zut型分光光度计由上海分析仪器
三厂生产 o图像分析系统购自德国 ∞Œ≤„公司 ∀
1 q2 方法
健康雄性 ≥⁄大鼠 xs只 o随机分成正常对照组 !
慢性支气管炎模型组 !蓝桉油高剂量组kvss °ª#
®ªptl !蓝桉油中剂量组ktss °ª#®ªptl和蓝桉油低剂
量组kvs °ª#®ªptl ∀除正常对照组外 o其余大鼠麻
醉后用耳镜插入喉口 o以静脉套管针注入 s qu °ª脂
多糖k用生理盐水配制成 t ª#pt溶液l ~将蓝桉油各
剂量组按不同浓度灌胃给药 o每天 t次 o持续 v周 ∀
v周后 o分离暴露大鼠气管与左右主支气管 o先在近
气管分叉处结扎左主支气管 o再行气管插管 o以生理
盐水 s qsux °#ªpt分两次灌洗 o支气管肺泡灌洗液
k…„ƒl行细胞计数 o其余 …„ƒ以 t xss µ#°¬±pt离
心 ts °¬±o上清液 p zs ε 保存 o测定黏蛋白含量≈z  ~
沉淀物涂片 o白细胞分类 ∀
取灌洗后气管及未经灌洗的左主支气管和左肺
组织以 ts h甲醛固定 o常规脱水 o石蜡包埋 o切片 o行
常规 ‹∞染色 !阿尔辛蓝2过碘酸雪夫氏染色k„…2
°„≥l及免疫组化 ≥°法羊抗大鼠 ˜≤x¤¦多克隆抗
体染色 o图像分析系统测定气管和细支气管上皮阳
性染色的平均吸光度k Αl !黏蛋白面积 h k阳性染色
面积与气管或细支气管上皮面积之比l ∀
1 q3 统计学分析
计量资料数据以 ξ ? σ表示 o采用两组间均数 τ
检验 ~等级资料采用 υ检验 ∀
2 结果
2 q1 蓝桉油对 °≥引起的 …„ƒ中细胞学改变的影
响
模型组 …„ƒ 中细胞总数及中性粒细胞 !淋巴
细胞比例明显增高 o肺泡巨噬细胞比例明显下降 ∀
蓝桉油高剂量组kvss °ª#®ªptl…„ƒ中白细胞总数
及中性粒细胞 !淋巴细胞比例均有明显下降 o而肺泡
巨噬细胞比例升高k表 tl ∀
表 t 蓝桉油对 °≥引起的 …„ƒ中细胞学改变的影响k ξ ? σl
组别 ν
细胞总量
r ≅ ts|#pt
细胞分类r h
巨噬细胞 中性粒细胞 淋巴细胞
正常组 | s qxy ? s qt{ |t q{ ? v qt s q| ? s q{ y qz ? v qw
模型组 ts v qww ? t qxxtl z{ qu ? z qtul y qx ? u quul tx qy ? y qutl
蓝桉油高剂量组 ts t qys ? s qzyvl {y qw ? w qywl w ? u qwvl | qs ? w qtvl
蓝桉油中剂量组 ts t qvt ? s qxyvl zx qw ? x qz y qw ? v qv t{ qu ? y qy
蓝桉油低剂量组 | t qsu ? s qxxwl zw qs ? | qt v qv ? u qtwl us qy ? { qy
注 }与正常组相比 tl Π s qsx o ul Π s qst ~与模型组相比 vl Π s qsx o wl Π s qstk表 u ov ow同l
2 q2 蓝桉油对 °≥引起的 …„ƒ中黏蛋白含量影响
模型组与正常组比较 o…„ƒ中黏蛋白含量明显
增加k Π s qsxl ~蓝桉油高剂量组kvss °ª#®ªptl较
模型组黏蛋白含量有明显降低 o中剂量组ktss °ª#
®ªptl和低剂量组kvs °ª#®ªptl变化不明显k表 ul ∀
2 q3 蓝桉油对 °≥引起的病理组织学改变的影响
模型组大鼠可见不同程度的细支气管慢性炎症
及肺间质炎症 o炎症细胞多以淋巴细胞为主 o并有少
表 u 支气管肺泡灌洗液黏蛋白含量k ξ ? σl
组别 ν 黏蛋白含量rª#pt
正常组 { z q|s ? t qvw
模型组 ts tt quv ? v q{vtl
蓝桉油高剂量组 { z qtt ? u q{tvl
蓝桉油中剂量组 ts | qxu ? v qzt
蓝桉油低剂量组 | { q{y ? u qy{
量浆细胞 !中性粒细胞 !嗜酸性粒细胞浸润 ~蓝桉油
各给药组可见细支气管炎症及肺间质炎症均较模型
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第 u|卷第 u期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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组有明显减轻 o炎症细胞浸润减少 ∀根据炎症 !上皮
脱落程度将炎症分为/ ¢on o6 o7 0w级 ∀ / p 0即未
见明显炎症细胞浸润 ~/ n 0少量炎症细胞浸润 o细支
气管结构完整 ~/ 7 0见大量炎症细胞浸润 o并可出现
管壁破坏及k或l上皮脱落 ~/ 6 0界于/ n 0与/ 7 0之
间 ∀计数肺内细支气管总数k整个切面l o同时计数
有炎症病变的细支气管数 ∀肺间质炎症按肺泡壁及
动脉管壁周围炎症细胞浸润的程度分为/ p on o6 o
7 0w级 ∀模型组与正常组比较细支气管的炎症发生
和严重程度明显增加以及细支气管炎累积数亦增
加 o蓝桉油对细支气管的炎症发生和严重程度有抑
制作用 ∀蓝桉油对 °≥引起的肺间质炎症亦有抑制
作用k表 vl ∀
2 q4 蓝桉油对 °≥引起的气管 !细支气管上皮内黏
表 v 蓝桉油对 °≥引起的病理改变的影响k ξ ? σ, ν € tsl
组别
细支气管炎
7 6 n p υ值
细支气管炎累积数
r h
肺间质炎
7 6 n p υ值
正常组 t s u z x qw| ? | qxz s s v z
模型组 z u t s v qwswl wy qtz ? tx qxzul x v u s v qy|ul
蓝桉油高剂量组 s t { t v qx{wl t| q|v ? ts qyvul t t y u u qyvwl
蓝桉油中剂量组 w t w t t qyz vw qtv ? ts q{|tl s y w s u qsvvl
蓝桉油低剂量组 u u y s u qwwvl xs qsx ? u{ qy| u v x s t qxy
蛋白表达水平的影响
2 q4 q1 光镜观察 正常对照组大鼠气管和细支气
管上皮内 ˜≤x¤¦阳性染色区域较少 o且染色程度也
浅 o为浅棕色和棕黄色 ∀模型组大鼠气管和细支气
管上皮内 ˜≤x¤¦阳性染色区域明显增多 o染色程度
增强 o为深黄色和棕黄色 ~其染色范围主要是气道上
皮和黏膜下腺 o以及管腔内留存的黏液分泌物 ∀蓝
桉油高剂量组kvss °ª#®ªptl与模型组相比 o其染色
区域和程度明显减轻 o与正常组相似 ∀
2 q4 q2 图像分析系统检测黏蛋白表达水平 与正
常组相比 o模型组气管和细支气管上皮内阳性染色
区的吸光度和黏蛋白面积 h明显增高 o蓝桉油高剂
量组kvss °ª#®ªptl则可显著降低气管及细支气管上
皮内黏蛋白表达的水平k表 wl ∀
表 w 蓝桉油对 °≥引起的气管细支气管上皮黏蛋白表达的影响k ξ ? σ, ν € tsl
组别
气管
吸光度 黏蛋白面积r h
细支气管
吸光度 黏蛋白面积r h
正常组 s qtvv ? s qsuv s qtsw ? s qstw s qtvy ? s qsty s qtt{ ? s qsvu
模型组 s qutt ? s qsutul s qvs{ ? s qszsul s qusu ? s qsusul s qvy{ ? s qtsuul
高剂量组 s qtvs ? s qsuswl s quuw ? s qszsvl s qttt ? s qswxwl s qusv ? s qs{{wl
3 讨论
脂多糖是革兰氏阴性菌细胞壁的主要结构成分
之一 o系类脂质 !多糖和蛋白质的复合物 o为内毒素
的主要成分 ∀它可刺激单核细胞 !内皮细胞及中性
粒细胞等合成并释放不同的炎症介质 o介导多种组
织 !细胞的损伤 ∀本实验采用马楠等≈{ 的方法 o大鼠
气管内注入 s qu °ª脂多糖 ov周后其病理学表现符
合慢性支气管炎 o…„ƒ 细胞总量 !中性粒细胞和淋
巴细胞比例明显增高 ~并且 o…„ƒ 中黏蛋白含量和
上皮内黏蛋白阳性染色程度均明显增高 o说明黏蛋
白合成和分泌亢进 ∀黏蛋白主要表达为两种形式 }
膜相关黏蛋白和分泌型黏蛋白 ∀ ˜≤t和 ˜≤w是
气道内主要的膜相关黏蛋白 o主要表达于上皮细胞
表面 o其具体作用尚不清楚 ~˜≤u o˜≤x¤¦o˜≤x¥
是气道内主要的分泌型黏蛋白 o也是形成气道黏液
栓的主要原因 ∀一些炎症介质能促进分泌型黏蛋白
的基因表达 o而且 o˜≤u o˜≤x¤¦o˜≤x¥的过度表
达和人及鼠科动物气道杯状细胞化生有很强的相关
性≈|  ∀
药典所载的桉油来源于桃金娘科植物蓝桉 !樟
科植物樟或上述两科同属其他植物 o有祛风止痛之
功效 o用于皮肤瘙痒 o神经痛 ∀含有桉油的中成药复
方 o如祛痰宁具有祛痰作用 ∀本实验所用的蓝桉油
是蓝桉的纯天然植物提取物 ∀作为原料油k称蓝桉
精油l o含有 Α2蒎烯不少于 us qs h ot o{2桉油素不少
于 xx qs h ∀实验发现 o蓝桉油各剂量组对大鼠肺灌
洗液中细胞总量 !中性粒细胞和淋巴细胞比例均有
明显的降低作用 o在病理切片中可以观察到 o蓝桉油
对 °≥引起的细支气管炎症及肺间质炎均有明显的
抑制作用 o减少气道周围炎症细胞浸润 ~蓝桉油高剂
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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量组kvss °ª#®ªptl能明显减少灌洗液中黏蛋白的含
量 ~免疫组化研究发现 o蓝桉油高剂量组kvss °ª#
®ªptl黏蛋白阳性染色区域和程度明显减轻 o通过图
像分析系统测得的吸光度值和黏蛋白面积 h均明显
下降 o这些实验结果说明 o蓝桉油对脂多糖引起的大
鼠慢性支气管炎具有一定的抗炎作用 o并能抑制其
气道黏蛋白高分泌现象 ∀
≈参考文献 
≈t  …²µ¦«¨µ¶ × o • µ¨·≥ ∞o¨¬®¤∏©Š ⁄q„¦µ²¯ ¬¨±2¬±§∏¦¨§˜≤x¤¦ ¬¨2
³µ¨¶¶¬²±¬±µ¤·¤¬µº¤¼¶q Αµ ϑ Πηψσιολ Λυνγ Χελλ Μολ Πηψσιολot||{ o
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≈u  ≥·µ²∏¶ Š o ⁄¨ ®®¨µq ∏¦¬±2·¼³¨ ª¯¼¦²³µ²·¨¬±¶q Χριτ Ρεϖ Βιοχηεµ
Μολ Βιολot||u ouzkt2ul }xz q
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˜≤u o¬¶¤ ³µ²°¬±¨ ±·°∏¦¬± ¬± µ¨¶³¬µ¤·²µ¼ ¶¨¦µ¨·¬²±¶q Γλψχοχονϕ ϑo
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≈w  • ¬¨§ ≤ o Š²∏¯§ ≥ o ‹¤µµ¬¶ „ q ⁄¨ √¨ ²¯³° ±¨·¤¯ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²© °∏¦¬±
ª¨ ±¨ ¶¬± ·«¨ «∏°¤± µ¨¶³¬µ¤·²µ¼ ·µ¤¦·q Αµ ϑ Ρεσπιρ Χελλ Μολ Βιολo
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¥¯²²§ °²±²¦¼·¨¶ιν ςιτρο q Ευρϑ Μεδ Ρεσot||{ ovkttl }xs{ q
≈z  王庸晋 q现代临床检验学 q北京 }人民军医出版社 ousss quvz q
≈{  马 楠 o崔德健 o梁研杰 o等 q气管内注入脂多糖法建立大鼠
慢性支气管炎模型 q中华结核和呼吸杂志 ot||u ouukyl }vzt q
≈|  ∂²¼±²º  „ q • «¤·§²¨ ¶°∏¦¬± «¤√¨ ·²§² º¬·« ∏¯±ª§¬¶¨¤¶¨ q Παεδιατρ
Ρεσπιρ Ρεϖoussu ovkul }|{ q
Εφφεχτ οφ Ευχαλψπτυσ γλοβυλυσ οιλ ον λιποπολψσαχχηαριδε2ινδυχεδ
χηρονιχ βρονχηιτισ ανδ µ υχιν ηψπερσεχρετιον ιν ρατσ
˜ ÷¬¤²2 ¬´± oׄ‘Š ƒ¤2§¬o • „‘Š ≠¤±o‹„’ ׬±ªo…Œ„‘•∏2¯¬¤±
( Ζηεϕιανγ Ρεσπιρατορψ ∆ρυγσ Ρεσεαρχη Λαβορατορψ οφ Στατε Φοοδ ανδ ∆ρυγσ Αδµινιστρατιον οφ Χηινα ,
Χολλεγε οφ Μεδιχαλ Σχιενχεσ , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssvt , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ©¨©¨¦·²© Ευχαλψπτυσ γλοβυλυσ²¬¯²± ¥µ²±¦«¬²¯¬·¬¶¤±§°∏¦¬± «¼³¨µ¶¨¦µ¨·¬²±¬±¦«µ²±¬¦¥µ²±¦«¬·¬¶¬±2
§∏¦¨§¥¼ ¬¯³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¬±µ¤·¶q Μετηοδ : • ¤·°²§¨¯ º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §¥¼¬±·µ¤·µ¤¦«¨ ¤¯ ¬±¶·¬¯¯¤·¬²± ²© ¬¯³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ s qu °ªq°¤·«²¯²ª¬2
¦¤¯ ¦«¤±ª¨¶o¤¯·¨µ¤·¬²±¬± ¥µ²±¦«²¤¯√ ²¨¯¤µ¯¤√¤ª¨ ©¯∏¬§k…„ƒl ¤±§¬°°∏±²«¬¶·²¦«¨ °¬¶·µ¼¦«¤µ¤¦·¨µ¶º µ¨¨ ¬¨¤°¬±¨ §¤©·¨µv º¨¨ ®¶¤±§·«¨ ©¨©¨¦·
²© Ε . γλοβυλυσ ²¬¯ º¤¶²¥¶¨µ√ §¨q Ρεσυλτ : ≤«¤µ¤¦·¨µ¶²©³¤·«²¯²ª¬¦¤¯ °¤±¬©¨¶·¤·¬²±¶²©¦«µ²±¬¦¥µ²±¦«¬·¬¶º µ¨¨ ©²∏±§¤©·¨µ¬±¶·¬¯¯¤·¬²± ²©°≥ q
Œ±©¯¤°°¤·²µ¼ ¦¨¯¯ ¬±©¬¯·µ¤·¬²± ¤±§¥µ²±¦«¬²¯¬·¬¶¶¨√ µ¨¬·¼ º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ µ¨§∏¦¨§²©·¨µ¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²± ²© Ε . γλοβυλυσ²¬¯q∞¶³¨¦¬¤¯ ¼¯¬± vss °ª
#®ªp t·µ¨¤·¨§µ¤·¶o·«¨µ¨ º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·§¨¦µ¨¤¶¨¶²© °∏¦¬± ¦²±·¨±·¬± …„ƒ ¤±§ ˜≤x¤¦ ¬¨³µ¨¶¶¬²±¬±·µ¤¦«¨¤¤±§¥µ²±¦«¬²¯¨ ³¨¬·«¨ ¬¯∏° q
’³·¬¦¤¯ §¨ ±¶¬·¼ ¤±§°∏¦¬±¶¤µ¨¤h §¨·¨¦·¨§¥¼¬°¤ª¨ ¤±¤¯¼¶¬¶¶¼¶·¨° º µ¨¨ ¤³³¤µ¨±·¯¼ ²¯º µ¨·«¤±·«²¶¨ ¬± °²§¨¯ªµ²∏³qΧονχλυσιον : Ε . γλοβ2
υλυσ ²¬¯ «¤¶·«¨ ¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ©¨©¨¦·²± ¦«µ²±¬¦¥µ²±¦«¬·¬¶¬±§∏¦¨§¥¼ ¬¯³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¬±µ¤·¶¤±§·«¨ ¬±«¬¥¬·¬² ©¨©¨¦·²± «¼³¨µ¶¨¦µ¨·¬²± ²©
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[ Κεψ ωορδσ] Ευχαλψπτυσ γλουλυσ ²¬¯~ ¬¯³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ~¥µ²±¦«¬²¯¬·¬¶~°∏¦¬±¶
≈责任编辑 方文贤 
本刊启事
本刊自 t||x年 t月 t日开始对来稿收取处理费k每篇 xs元l o请作者在寄发稿件的同时将处理费通过邮
局寄汇本刊k请勿在稿件中夹带现金l ∀汇单上请注明论文题目及第一作者姓名 ∀收款地址 }北京市东直门
内南小街 ty号5中国中药杂志6社 o邮编 tsszss ∀
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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