全 文 ：Στυδιεσ ον Χηεµιχαλ Χονστιτυεντσιν Λεαφσ οφ Χλεροδενδρον φραγρανσ
¬2°¬±ªt o • ∞ ÷¬¤²2° ¬¨u o ∞ ≠¤±ª2 ¬´±ªt
kt q≤«¨ °¬¶·µ¼ i ¦«¨ °¬¦¤¯ ∞±ª¬±¨ µ¨¬±ª ≤²¯¯¨ ª¨ o²µ·«º ¶¨·²µ°¤¯ ±¬√ µ¨¶¬·¼ o¤±½«²∏zvsszs o¤±¶∏o≤«¬±¤~
u q ⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²©
¤¶¬¦≤²∏µ¶¨ o¤±¶∏ ªµ¬¦∏¯·∏µ¤¯ ±¬√ µ¨¶¬·¼ o¤±½«²∏zvsszs o¤±¶∏o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨³¤µ¤·¨ ¤±§¬§¨ ±·¬©¼ ·«¨ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶©µ²° ¦¯ µ¨²§¨ ±§µ²± ©µ¤ªµ¤±¶q Μετηοδ : × «¨ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶ º µ¨¨
¬¶²¯¤·¨§¤±§³∏µ¬©¬¨§ º¬·«¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦° ·¨«²§¶o¬§¨ ±·¬©¬¨§¥¼ o ≥ o qΡεσυλτ : Β2¶¬·²¶·¨µ²¯ktl o¦¯ µ¨²¶·¨µ²¯kul o§¤∏¦²¶·¨µ²¯
kvl o¦¤©©¨¬¦¤¦¬§kwl o ®¤¨ °³©¨µ²¯ kxl ox owχ2§¬«¼§µ²¬¼2®¤¨ °³©¨µ²¯2z2 Ο2Β2µ∏·¬±²¶¬§¨ kyl o¤¦·¨²¶¬§¨ kzl ¤±§¯¨ ∏¦²¶¨¦¨³·²¶¬§¨ k{l o
º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§¤±§¬§¨ ±·¬©¬¨§qΧονχλυσιον : ≤²°³²∏±§z ¤±§{ º µ¨¨ ¬§¨ ±·¬©¬¨§©²µ·«¨ ©¬µ¶··¬°¨©µ²° Χλεροδενδρον φραγρανσq
[ Κεψ ωορδσ] χλεροδενδρον φραγρανσ~¤¦·¨²¶¬§¨ ~¯¨ ∏¦²¶¨¦¨³·²¶¬§¨
≈责任编辑 李 禾
醋制延胡索微粉提取条件的研究
张永欣 o张 颖 o张启伟
k中国中医研究院 中药研究所 北京 tsszssl
≈摘要 目的 }对影响醋制延胡索微粉提取的诸因素进行考察 o为醋制延胡索微粉的应用奠定基础 ∀方法 }采
用单因素试验方法 o以活性成分延胡索乙素为指标 o高效液相色谱法测定其含量 ∀ ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{色谱柱 ~流动相乙
腈2三乙胺磷酸盐缓冲溶液k³ z qslkxsΒxsl }检测波长 u{s ±° ∀结果 }实验得出醋制延胡索微粉提取条件为 }温度
为 ys ε o提取时间 vs °¬±o加水量 us倍 ∀结论 }微粉的提取效率比饮片煎煮的要高约 ts h ∀但微粉提取用水量
少 o提取时间短 o温度低 ∀在工业化生产中可以降低能耗 o提高经济效益 ∀
≈关键词 醋制延胡索 ~微粉 ~提取条件 ~延胡索乙素 ~高效液相色谱法
≈中图分类号 u{v qv ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvlts2s|xt2sv
中药延胡索为罂粟科植物延胡索 Χορψδαλισ
ψανηυσυο • q× q• ¤±ª的干燥块茎 ∀其功能为活血 o
利气 o止痛 o主要用于治疗胸肋 !脘腹疼痛 o经闭痛
经 o产后瘀阻 o跌打肿痛≈t ousss年版5中国药典6在
其炮制项下收载了醋制延胡索 ∀醋制延胡索可增强
活血 o利气 o止痛作用≈u ∀
为了便于药材中成分的提取溶出及提高药材利
用率 o采用超微粉碎技术将中药饮片粉碎成微粉 ∀
但微粉的提取受到哪些因素的影响 o尚有待系统研
究 ∀本实验以醋制延胡索为研究对象 o选择其中活
性成分延胡索乙素为指标 o对水的提取温度 !提取时
≈收稿日期 ussv2su2tx
≈通讯作者 张启伟 ר¯ }kstslywstwwtt2u|yy
间 !用水倍数进行了考察 o并与醋制延胡索及其煎剂
进行了比较 o为醋制延胡索微粉的应用提供依据 ∀
1 仪器 !试剂和试样
ª¬¯¨ ±·ttss泵高效液相色谱仪 o包括四元溶剂
泵 o脱气机 o柱温箱 o光电二极管阵列检测器 o自动进
样器及软件k美国l o ≥tt2u型水浴k上海医疗器械
五厂l o⁄w2u型离心机k北京医用离心机厂l o≥¤µ·²2
µ¬∏¶ussw °型天平k德国l ∀
液相色谱流动相所用乙腈k°≤r≥³¨ ¦·µ²o× 2¨
§¬¤l o超纯水 ~无水乙醇 o甲醇 o磷酸 o三乙胺 o乙醚等
均为分析纯 ∀延胡索乙素对照品购于中国药品生物
制品检定所k批号 szuy2||sy o供含量测定用l ∀
醋制延胡索及微粉由同仁堂饮片厂提供 ∀
2 方法学考察
#tx|#
第 u{卷第 ts期
ussv年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ ts
¦·²¥¨µoussv
2 q1 色谱条件 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{色谱柱kw qy °° ≅ uxs
°° ox Λ° o迪马公司l o柱温 vx ε ~流动相乙腈2三
乙胺磷酸缓冲溶液k³ z qslkxsΒxsl o流速 t qs °#
°¬±p t ~检测波长 u{s ±° ∀
三乙胺磷酸缓冲溶液的配制方法 }取 s qst °²¯#
磷酸水溶液 o滴加三乙胺 o调节 ³ 至 z qs ∀
在上述色谱条件下 o延胡索乙素 !醋制延胡索微
粉水提取物色谱图见图 t ∀经光电二极管阵列检测
器软件检查 o样品中延胡索乙素峰纯度符合要求 ∀
2 q2 线性范围的考察 精密称取延胡索乙素对照
品 u qxw °ªo配制成每 t °含 s qtuz °ª的对照品
溶液 o备用 ∀分别精密吸取 u ow oy o{ ots Λ进样 ∀
以峰面积积分值为纵坐标 o进样量kΛªl为横坐标 o计
算回归方程为 Ψ {vw qx Ξ p v qx| o ρ s q||| | ∀
进样量在 s qux ∗ t quz Λª与峰面积呈线性 ∀因截距
很小 o采用外标一点法计算含量 ∀
图 t 延胡索乙素对照品和微粉浸提物液相色谱图谱
q延胡索乙素对照品
q微粉浸提物
t q延胡索乙素
2 q3 精密度试验 取样品溶液 t 份 o连续进样 y
次 o测定峰面积平均值为 ztz qvu o ≥⁄ s quz h ∀
2 q4 稳定性考察 取新鲜制备的样品溶液立即进
样 o并于 t ou ow o{«时进样分析 o计算含量平均值为
s qsxx s h o ≥⁄ t q|{ h ∀
2 q5 重复性试验 用 t批样品 o称取 x份 o按样品
溶液制备方法制备 o进样分析 o计算含量平均值为
s qsxw x h o ≥⁄ s qvw h ∀
2 q6 回收率试验 取已测定含量的样品 y份 o分别
加入对照品一定量ks quzw s °ªl o按样品溶液制备
方法制备 o进样分析 o结果见表 t ∀
表 t 延胡索乙素加样回收试验结果
样品量
rª
含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
≥⁄
r h
s qxss {u s quzu | s qxyy y tsz qu
s qxss zw s quzu | s qxxx v tsv qt
s qxsu ws s quzv { s qxzt t ts{ qx tsx q|
t q||s qxsu ut s quzv z s qxys y tsw qz
s qxsv {| s quzw y s qxyx { tsy qv
s qxsx ux s quzx w s qxyx x tsx q|
3 影响微粉提取诸因素的考察
3 q1 提取温度 固定加水量ktΒusl o浸泡时间kvs
°¬±l等条件 o考察 ws oys o{s otss ε 等不同浸泡温
度 o测定含量 o结果见表 u ∀根据测定结果 o确定最
佳提取温度为 ys ε ∀
表 u 不同温度对微粉中延胡索乙素提取的影响
温度r ε 含量r°ª1ªp t
ws s qvsw
ys s qwyz
{s s qvwx
tss s qvuv
3 q2 提取时间 固定提取温度kys ε l o加水量ktΒ
usl等条件 o考察 x otx ovs oys °¬±等不同提取时间 o
测定含量 ∀结果见表 v ∀根据测定结果 o确定提取
时间为 tx ∗ vs °¬±为宜 ∀
表 v 不同提取时间对微粉中延胡索乙素提取的影响
时间r°¬± 含量r°ª1ªp t
x s qvtz
tx s qwwu
vs s qwwz
ys s qwsy
3 q3 加水量 固定提取温度kys ε l和提取时间
ktx °¬±l等条件 o考察加水量kts ous ows ozs倍l o测
定含量 o结果见表 w ∀根据测定结果 o以选择 us倍加
水量即可 ∀
表 w 不同加水量对微粉中延胡索乙素提取的影响
加水倍数 含量r°ª1ªp t
ts s qszt y
us s qwyw
ws s qwyz
zs s qwwy
4 样品测定
样品溶液的制备 取微粉样品约 u ªo精密称
#ux|#
第 u{卷第 ts期
ussv年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ ts
¦·²¥¨µoussv
定 o置具塞三角瓶中 o准确加入蒸馏水 ws °o称重 o
振摇分散后置 ys ε 水浴中 o浸泡 tx °¬±∀取出放
冷 o称重 o补至原重 ∀摇匀 o离心ku sss µ#°¬±p tlus
°¬±∀精密吸取上清液 ux °o氨水碱化k³ tvl o用
乙醚萃取 v次ktx ots ots °l o合并醚萃取液 o脱水 o
除去乙醚 o残渣用无水乙醇溶解 o转移至 ts °量瓶
中定容 o摇匀 o滤过 o供色谱分析 ∀
测定的 v批样品结果见表 x ∀
表 x 微粉样品测定结果
饮片
编号
δxs
rΛ°
水分
r h
延胡索乙素含量
r h
提取率tl
r h
t z qy{ | qs{ s qsxs t {| qy
u y qyv | qv{ s qsxs z |s qz
v y qvz { qzu s qsw{ w {y qy
注 }tl微粉浸提出的含量除以醋制延胡索饮片中的含量
5 饮片煎液与微粉浸提液色谱指纹图谱的初步比
较
取饮片煎液与微粉浸提液的碱化后乙醚萃取物
甲醇溶液进样 o在上述色谱系统 o以乙腈2三乙胺磷
酸盐k³ z qsl梯度洗脱 o测定了上述 u个样品的指
纹图谱 ∀经比较 o二者存在的色谱峰基本相同 ∀
6 讨论
6 q1 延胡索的有效成分为生物碱 o主要为紫堇碱 !
四氢巴马亭 k其消旋体即为延胡索乙素l !海罂粟
碱 !Α2别隐品碱 !普鲁托品 !四氢黄连碱 !四氢小檗碱
等 ∀延胡索乙素含测方法近年来报道的主要为高效
液相色谱法法≈v ow 和毛细管电泳法≈x oy ∀在参考文
献的基础上建立了本文的高效液相色谱测定方法 ∀
6 q2 本文比较了微粉浸提液碱化后乙醚萃取的次
数 o发现萃取 v次即可 ∀
6 q3 从测定的结果看 }微粉的提取效率比饮片煎煮
的要高约 ts h ∀因为延胡索醋制后生物碱与醋酸
成盐 o易溶于水 o所以饮片煎出率也较高 ∀但微粉提
取用水量少 o提取时间短 o温度低 ∀在工业化生产中
可以降低能耗 o提高经济效益 ∀
≈致谢 微粉粒度测定的结果由本所分析化学室闫寒 !
章军提供 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss qts{
≈u 原思通 q医用中药饮片学 q北京 }人民卫生出版社 ousst qvxx
≈v 龚 青 o周 蒂 o王碧娟 q °≤ 法测定延胡索中延胡索乙素
的含量 q中国现代应用药学 ousss otzktwl }vtx q
≈w 杨天展 q高效液相色谱法测定胃得康散中延胡索乙素含量 q时
珍国医国药 ousss ottktl }vt q
≈x 张 强 o柳全文 o田景振 q高效毛细管区带电泳测定克心疼缓
释片中的延胡索乙素 q药物分析杂志 ousst outktl }xv q
≈y 姜舜尧 o宋景政 o周明昊 o等 q高效毛细管电泳测定宁夏天无药
材中延胡索乙素的含量 q中国药学杂志 ousss ovxkxl }vvy q
Στυδψ ον Εξτραχτιον Χονδιτιονσφορ Μινυτε Ποωδερ
οφ Προχεσσεδ Ρηιζοµε οφ Χορψδαλισ ωιτη ςινεγαρ
≠²±ª2¬¬±o ≠¬±ªo ±¬2º ¬¨
k±¶·¬·∏·¨ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤ §¨¬¦¤o≤«¬±¤ ¦¤§¨ °¼ ²© ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ §¨¬¦¬±¨ o
¨ ¬¬±ª tsszss o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεετιϖε: ײ ¬¨¤°¬±¨ ·«¨ ©¤¦·²µ¶¬± ¬¨·µ¤¦·¬±ª·«¨ °¬±∏·¨ ³²º§¨µ²©³µ²¦¨¶¶¨§µ«¬½²°¨²© ≤²µ¼§¤¯¬¶º¬·«√¬±¨ ª¤µ
©²µ¬·¶¤³³¯¬¦¤·¬²±q Μετηοδ : × «¨ ²±¨ 2º¤¼ √¤µ¬¤·¬²± ¤±¤¯¼¶¬¶º¤¶∏¶¨§©²µ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¤¯ §¨¶¬ª±q × ·¨µ¤«¼§µ²³¤¯ °¤·¬±¨ º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §
º¬·« °≤ ° ·¨«²§q× «¨ ¶¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ ¶¨³¤µ¤·¨§²± ¤⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{ ¦²¯∏°± º¬·« °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ²©¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ p × ∞ ³«²¶³«¤·¨ ¥∏©©¨µ
k³ z qsl kxsΒxsl ¤±§§¨·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·« º¤¶u{s°° q ¶¨∏¯·} ׫¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¦²±§¬·¬²±¶º µ¨¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §¤¶©²¯ ²¯º¶} ¬¨·µ¤¦·¬²±
·¨°³¨µ¤·∏µ¨ ¬¶ys ε oº¤·¨µ2¤§§¨ §¤°²∏±·¬¶us·¬° ¶¨·«¨ º ¬¨ª«·²©·«¨ ³²º§¨µo¤±§ ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬°¨¬¶vs °¬±∏·¨¶qΧονχλυσιον : × «¨
¬¨·µ¤¦·¬²± µ¤·¨ ²©·«¨ ·µ¤«¼§µ²³¤¯ °¤·¬±¨ ¬±·«¨ °¬±∏·¨ ³²º µ¨¬¶¤¥²∏·ts h «¬ª«¨µ·«¤± ·«¤·²©·«¨ ³µ²¦¨¶¶¨§µ«¬½²°¨ º¬·« √¬±¨ ª¤µq
∏·¯ ¶¨¶º¤·¨µ¤°²∏±·o¯¨ ¶¶·¬°¨o¤±§ ²¯º µ¨·¨°³¨µ¤·∏µ¨ º µ¨¨ ±¨ §¨¨ §©²µ ¬¨·µ¤¦·¬²±q × «¨ ¤³³¯¬¦¤·¬²± ²© °¬±∏·¨ ³²º§¨µ¦¤± µ¨§∏¦¨
±¨¨ µª¼ ¦²±¶∏°³·¬²± ¤±§µ¤¬¶¨ ¦¨²±²°¬¦¥¨ ±¨ ©¬·¬±¬±§∏¶·µ¬¤¯ ³µ²§∏¦·¬²± q
[ Κεψ ωορδσ] ³µ²¦¨¶¶¨§µ«¬½²°¨²©¦²µ¼§¤¯¬¶º¬·«√¬±¨ ª¤µ~ °¬±∏·¨ ³²º§¨µ~·¨·µ¤«¼§µ²³¤¯ °¤·¬±¨ ~ °≤
≈责任编辑 李 禾
#vx|#
第 u{卷第 ts期
ussv年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ ts
¦·²¥¨µoussv