全 文 ：正交设计研究杭白菊总提取物及总黄酮提取工艺
殷 红t ou o胡永洲t 3 o杨鑫骥u o田秀兰u o王 真v
kt q浙江大学 药学院 o浙江 杭州 vtssvt ~
u q嘉兴学院 医学院 o浙江 嘉兴 vtwsss ~
v q嘉兴市第二人民医院 o浙江 嘉兴 vtwsssl
≈摘要 目的 }确定杭白菊总提物 !总黄酮的提取工艺条件 ∀方法 }采用正交试验法 o以浸膏得率和总黄酮含
量为考察指标 o对杭白菊的超声提取条件进行优选 ∀结果 }所考察的因素中 o杭白菊的提取工艺影响程度为 }提取
次数 溶剂浓度 超声时间 溶剂量 ∀结论 }超声提取的最佳条件为 }Αu Βv Χv ∆v ∀与常规的提取方法相比 o具有提
取时间短 !简单 !收率稳定 !无需加热等优点 ∀
≈关键词 杭白菊 ~总黄酮 ~超声提取 ~正交试验法
≈中图分类号 u{w qu ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusswls{2szvz2sv
杭白菊是一常用中药 o具有散风清热 !平肝明目
的功效 o用于风热感冒 o头痛眩晕 o目赤肿痛 o眼目昏
花≈t o其药用的有效成分主要是黄酮类和挥发油类 ∀
为探索杭白菊总提物及黄酮提取工艺 o本实验以浸
膏得率和浸膏中总黄酮含量为考察指标 o采用正交
试验等方法对其提取工艺进行了研究 ∀
1 仪器与材料
岛津 ∂ p uwst°≤ 紫外分光光度计 o≥•
xuss
型超声清洗机k上海必能信超声有限公司l o电子天
平 o芦丁对照品k中国药品生物制品检定所 o批号
ss{s2|zsxl o其他试剂均为分析纯 ∀杭白菊采购于
浙江桐乡 o经嘉兴学院医学院生药教研室黄 高级
讲师鉴定为杭白菊 Χηρψσαντηεµυµ µοριφολιυµ ¤2
°¤·q∀
2 方法与结果
2 q1 正交实验设计及结果
2 q1 q1 正交实验设计 选择乙醇浓度 !超声时间 !
溶剂量 !提取次数 w个因素 o进行 |kvwl正交试验
k表 tl ∀以干浸膏得率和总黄酮含量为考察指标进
行考察k表 ul ∀
2 q1 q2 浸膏得率测定 分别称取杭白菊二花
ts .sss ª|份≈u ∀剪碎 o按正交试验表 t选择的条件
≈收稿日期 ussw2su2us
≈通讯作者 3 胡永洲 oר¯ }ksxztl{zutzwtu o∞2°¤¬¯}«∏¼½
½∏¨ ° q½∏¨§∏q¦±
超声提取 o合并提取液 o过滤 o旋转蒸发回收乙醇 o水
浴蒸干 o{s ε 干燥 v «o干燥器中冷 s qx «迅速称重 o
浸膏得率k h l 浸膏重r样品重 ≅ tss h ≈v o结果见
表 u ∀
表 t 因素和水平
水平
Α
乙醇浓度
r h
Β
超声时间
r°¬±
Χ
溶剂量
r倍
∆
提取次数
r次
t |s us ts v
u zx vs tx w
v ys ws us x
2 q1 q3 总黄酮的测定 标准曲线制备 精密称取
tus ε 干燥至恒重的无水芦丁 ux °ªo置 tss °的容
量瓶中 o加 ys h的乙醇至刻度 ∀精密吸取 u ov ow ox o
y oz °o分别放置 ux °的容量瓶中 o加 x h亚硝酸
钠 t qs °o摇匀 o静置 y °¬±o加 t qs h的硝酸铝 t qs
°o摇匀 o静置 y °¬±o加 w h的氢氧化钠 ts qs °o
用 ys h的乙醇释至刻度 o摇匀 o静置 ts °¬±后于 xts
±°处测吸收度 o得回归方程为 }Α s .stu zut Χn
s .ssy {tt , ρ s q||| y ∀线性范围 }s qssx ∗ s qtu °ª#
°pt ∀
浸膏中总黄酮的测定 精密称取干燥恒重的浸
膏 s quss s ªo加 ys h乙醇加热溶解 o定容于 xs °的
容量瓶中 o过滤 o取续滤液 u qss °o按标准曲线制
备项下处理 ∀结果见表 u ∀
#zvz#
第 u|卷第 {期
ussw年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ {
∏ª∏¶·oussw
表 u 正交实验结果
试验号 浸膏得率r h 总黄酮含量r h 公式评分
t vs qzxt | qyts z qw|w
u vx quzx | q||y z qy|t
v wt qxz{ ts q{v{ | qtzy
w wz qx{y ts q{{{ | qz{y
x wv qsu{ | qzs{ { qz{w
y wt qtty ts quw{ { q{xv
z wz q{z { qxsw { qy{{
{ xw qyz{ | qz{u | q|xy
| ww quz | qwv{ { qzz{
2 q1 q4 公式评分 在正交试验结果的总体评价中 o
以总黄酮含量为主k占 zs h l o浸膏得率为辅k占
vs h l ∀再按正交试验直观分析法中多指标分析的
公式法≈w o对结果进行计算得到公式评分值 ∀由表
u 直观分析公式评分 Ρ 值 o最佳提取工艺是
Αu Βv Χv ∆v ∀
2 q1 q5 正交设计实验结果分析 按方差分析理论
得方差分析结果见表 v ∀
表 v 方差分析结果
方差来源 离均差平方和 自由度 均方 Φ Π
Α u qs{u zv u t qswt vy yz qxv s qsx
Β s qttz {v u s qsx{ | v q{us y
Χk误差l s qsvs {w u s qstx wu
∆ v qtzs |z u t qx{x w{ tsu q{u s qsx
表 v表明乙醇浓度 !提取次数有极显著差异 ∀
超声时间没有显著差异 ∀溶剂量影响最小 o当作误
差 ∀
2 q2 方法学考察
2 q2 q1 仪器精密度试验 精密吸取 s .ux °ª#°pt
对照品 x °于 ux °容量瓶中 o按 / 标准曲线制
备0项下处理 o重复测定 x次 o隔日同法再重复测定
x次 o得日内 ≥⁄为 s qut h o日间 ≥⁄为 t qt h ∀
2 q2 q2 重复性试验 取同一批浸膏 o按 /浸膏中总
黄酮的测定0项下处理 o测定结果并计算 ≥⁄为
s qusv h k ν xl ∀
2 q2 q3 稳定性试验 取同一样品按/浸膏中总黄酮
的测定0项下处理 o分别在 s ot ou ov ow ox ouw ozu «进
行测定 o ≥⁄为 t qyu h o说明样品在 zu «内稳定 ∀
2 q2 q4 加样回收率试验 精密称取已知含量的同
一批浸膏 0 qsx ªx份 o分别加 u qx °ª芦丁对照品 o按
/浸膏中总黄酮的测定0项下处理 o测定结果并计算
回收率分别为 tsv qu h o|| qt h o|z qx h otst qw h o
tsw qt h o ≥⁄u qzv h k ν xl ∀
3 讨论
3 q1 通过正交试验最佳因素水平为 Αu Βv Χv ∆v ∀
正交结果分析 }ys h乙醇和 zx h乙醇已相当接近 o
ys h乙醇提取浸膏得率虽高 o但黄酮含量较低 o而且
过滤困难 o说明浸膏中无效成分k如糖 !淀粉l较多 o
而 zx h乙醇提取浸膏黄酮含量高 !杂质少 !操作方
便 ~溶剂量对总黄酮提取影响最小 o超声时间对总黄
酮提取影响也很小 ∀综合考虑提取条件为 }zx h乙
醇 !超声 us °¬±o用 ts倍量的溶剂 o提取 x次 ∀
3 q2 优选条件下的超声提取 }分别称取杭白菊二花
ts qsss ªx份 o剪碎 ∀zx h乙醇 tss °超声 us °¬±
提取 x次 o按/ 标准曲线制备0项下处理 ∀结果见表
w ∀
表 w 超声优选条件提取结果 h
t u v w x ≥⁄
浸膏得率 vw q|s v| qsy v{ qsu vy qss vz qts w qwt
总黄酮含量 tv quy tu qy{ tv qts tv qtw tv qs{ t qyz
表 w可以看出 o超声法提取工艺比较稳定 ∀而
且超声法具有操作简单 !省时 !不用加热等优点 ∀
3 q3 浸膏提取以传统方法为主 o本研究也比较了热
回流溶剂法 ∀选择乙醇浓度 !提取时间 !溶剂量 !提
取次数 w个因素 ∀进行 |kvwl正交试验 ∀结果回流
提取的最佳条件为 Αu Βt Χt ∆vkzx h乙醇 o用 ts倍量
的溶剂 o回流 t «o提取 w次l ∀综合考虑在优选条件
下kzx h 乙醇 o用 ts倍量的溶剂 o回流 t «o提取 v
次l提取 !制备 o样品分析结果为浸膏得率 wu q{t h o
≥⁄ t qvt h o浸膏中总黄酮含量tx q|y h o ≥⁄
y qux h k ν xl ∀虽然浸膏得率和黄酮含量较高 o但
主要指标黄酮含量的 ≥⁄偏高 o稳定性较差 o说明
该工艺不太成熟 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss quxw q
≈u 江苏新医学院 q中药大辞典 q下册 q上海 }上海科技出版社 o
t|zz quss{ q
≈v 丁青龙 o赵静安 q用正交试验探讨金银花煎煮条件对绿原酸含
量的影响 q中国新药杂志 ot||| o{ktsl }y{t q
≈w 周怀悟 o倪永兴 q医药应用慨率统计 q上海 }百家出版社 ot||s q
uxt q
#{vz#
第 u|卷第 {期
ussw年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ {
∏ª∏¶·oussw
Στυδψ ον εξτραχτιον τεχηνολογψφορ εξτραχτ ανδ φλαϖονοιδσ
ιν Χηρψσαντηεµ υµ µοριφολιυµ βψ ορτηογοναλ δεσιγν
≠²±ªtou o ≠²±ª2½«²∏t o ≠ ÷¬±2¬u o×÷¬∏2¯ ¤±u o • «¨ ±v
(t . Χολλεγε οφ Πηαρµαχευτιχαλ Σχιενχεσ , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssvt , Χηινα ;
u . ϑιαξινγ Χολλεγε Μεδιχαλ Σχηοολ, ϑιαξινγ vtwsss , Χηινα ;
v . ϑιαξινγ Σεχονδ Πεοπλε. σ Ηοσπιταλ, ϑιαξινγ vtwsss , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¤¶¦¨µ·¤¬± ¬¨·µ¤¦·¬²± ·¨¦«±²¯²ª¼ ¦²±§¬·¬²± ©²µ ¬¨·µ¤¦·¤±§ ©¯¤√²±²¬§¶©µ²° Χηρψσαντηεµυµ µοριφολιυµ q
Μετηοδ : ׫¨ ²³·¬°¬½¬±ª∏¯·µ¤¶²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¦²±§¬·¬²± ²±·«¨ ¥¤¶¬¶²© ¬¨·µ¤¦·¬√¨¼¬¨ §¯¤±§©¯¤√²±²¬§¶º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ ²µ·«²ª²±¤¯ §¨¶¬ª±q
Ρεσυλτ : ׫¨ ²µ§¨µ²©©¤¦·²µ¶º«¬¦«¤©©¨¦·¨§·«¨ ©¯¤√²±²¬§ ¬¨·µ¤¦·¬²± º¤¶ ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬° ¶¨ ·¨«¤±²¯ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ∏¯·µ¤¶²±¬¦·¬°¨ ¶²¯√ ±¨·
∏´¤±·¬·¼qΧονχλυσιον : ׫¨ ²³·¬°∏° ∏¯·µ¤¶²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²±¶¤µ¨ Αu Βv Χv ∆v q≤²°³¤µ¨§º¬·«·µ¤§¬·¬²±¤¯ ¬¨·µ¤¦·¬²±o∏¯·µ¤¦·¬²± ° ·¨«²§¬¶·¬° ¶¨¤√2
¬±ªo¶¬°³¯¨·²²³¨µ¤·¨o¶·¤¥¯¨¤±§±¨ §¨±²·¥¨ «¨ ¤·¨§q
[ Κεψ ωορδσ] Χηρψσαντηεµυµ µοριφολιυµ ~©¯¤√²±²¬§¶~∏¯·µ¤¶²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²±~²µ·«²ª²±¤¯ ·¨¶·
≈责任编辑 袁桂京
银翘挥发油rΒ2环糊精包合常数的测定研究
马坤芳t o任 勇u 3 o王 宣v o冒 麟v
kt q中国药科大学 新药研究中心 o江苏 南京 utsss| ~
u q南京师范大学 新药研究中心 o江苏 南京 utss|z ~
v q湖北民康药业公司 o湖北 宜昌 wwvssu l
≈摘要 目的 }测定中药多组分rΒ2环糊精的包合常数 ∀方法 }在多波长下探测银翘挥发油包合作用的紫外光
谱特征 o以经验公式处理紫外吸收2浓度关系 o测定其包合常数 ~以相溶解度曲线验证包合比 ~以饱和水溶液法制备
包合物 o差热法进行包合物鉴定 ∀结果 }紫外测定条件下 o银翘挥发油rΒ2环糊精包合反应能够在多波长处显示良好
的线形特征 o包合比为 tΒt ∀结论 }采用多波长法可测定中药多组分表观包合常数 o该方法可作为中药包合物的定
量研究方法之一 ∀
≈关键词 环糊精 ~紫外光谱法 ~包合常数 ~相溶解度曲线 ~差热扫描图谱
≈中图分类号 u{v qy ~ u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusswls{2szv|2sw
随着环糊精k≤⁄l包合技术在药学领域中的应
用 o包合常数k Καl的测定显得尤为重要 ≈t ∀但是 o
目前 ≤⁄在中药方面的研究大多关注于包合物制备
等方面 o关于 Κα值测定的研究仅有中药单体 Κα测
定的报道 ≈u2w ∀由于中药成分复杂 o难以确定各组
≈收稿日期 ussv2sx2us
≈通讯作者 3 任勇 oר¯ }ksuxl{vx|{|u{ o∞2°¤¬¯}ussuµ¨¼²±ª
tyv q¦²°
分及其浓度 o中药多组分的 Κα值测定目前未见文
献报道 ∀为探讨中药多组分包合的定量研究方法 o
作者对银翘挥发油rΒ2≤⁄的 Κα值测定进行了探索 ∀
银翘挥发油为薄荷 !荆芥和连翘 v种药材挥发油的
混合物 o是银翘伤风胶囊 !银翘片等中成药的有效成
分 o目前文献报道约有 uvs多种单体≈x2tt ∀本实验采
用紫外光谱k∂l法在多波长下测定 Κα值 o得出有
意义的结果 o以尝试为中药多组分包合物的研究提
供定量方法和依据 ∀
#|vz#
第 u|卷第 {期
ussw年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ {
∏ª∏¶·oussw